מאמר שיטה

זה בנובמבר יופיטר

8.9K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/4025

⸱

1 בנובמבר 2011

במאמר זה

תקציר

גיליון נובמבר של ה-Journal of Visualized Experiments נפתח בסדרה של ניסויים התנהגותיים למדידת יכולת תפיסה בפרימטים. חוקרים מאוניברסיטת פריבורג (University of Fribourg) מדגימים ארבעה מטלות תפיסה והגעה, שכולן עוקבות אחר שלבים משותפים לריסון נוח של בעל החיים ומיקום נכון של ראשו. מבחן לוח ברינקמן (Brinkman Board) משמש להערכת הגעה לאובייקטים סטטיים, בעוד שלוח ברינקמן מסתובב מציג תנאי שבו בעלי החיים צריכים לחזות את מיקום האובייקט. מבחן תיבת ברינקמן (Brinkman Box) מאפשר לבחון מיומנות תחת תנאים שבהם לקוף יש פחות דרגות חופש לביצוע מטלת התפיסה והוא אינו יכול להשתמש בראייה כדי להנחות את התנועה. בעוד שמבחני לוח ותיבת ברינקמן מסתמכים אך ורק על ניתוח וידאו שהתקבל במהלך הניסויים, כדי להפיק נתונים, למכשיר מטלת ההגעה למגירה יש גלאים המנטרים כוחות אחיזה ועומס וכן את מיקום המגירה, מה שהופך מבחן זה למתאים למדידת חוזק לצד יכולת תפיסה. בשילובם, ארבעה מבחנים אלו מספקים גישה רבת עוצמה להערכת בקרה מוטורית בגפה הקדמית הדיסטלית, וקבוצת פריבורג מציגה נתונים הן ממחקרי נגעים והן מניסויים שנועדו לבחון טיפולים פוטנציאליים לפגיעות בחוט השדרה.

בתחום הרפואה הקלינית והתרגומית (Clinical and Translational Medicine), משתפי פעולה מהחטיבה למחקר כירורגי בבית החולים האוניברסיטאי ציריך ומהמכון למדעי חיות מעבדה באוניברסיטת ציריך עובדים יחד להשתלת מכשיר רדיו-טלמטריה בעכברים, שניתן להשתמש בו לביצוע מדידות פיזיולוגיות בבעלי חיים הנעים בחופשיות. המכשירים מורכבים משני מוליכים, המסוגלים למדוד פעילות ביו-פוטנציאלית (ECG, EEG או EMG) וכן טמפרטורה, ומשדר רדיו קל משקל (רוחב פס של 1-200 Hz) שניתן להשתיל בחלל הבטן. הלחץ הנובע מטיפול בבעלי חיים וכן הרדמה הם גורמים מבלבלים ידועים המשפיעים על מדידות פיזיולוגיות, ולכן מכשירי רדיו-טלמטריה הם דרך נוחה להשגת נתונים פיזיולוגיים מבעלי חיים במצב טבעי שאינו מופרע, וכן לביצוע מדידות של מספר בעלי חיים בו-זמנית.

JoVE מוסיף גם לאוסף פרוטוקולי האלקטרופורציה שלו שיטה להחדרת מקרו-מולקולות למזנכימה קרניו-פציאלית של ראשני *Xenopus laevis* מתפתחים, ממעבדת ליו (Liu Lab) בקינגס קולג' לונדון. ראשני Xenopus מועברים לתא אלקטרופורציה, שם ניתן להזריק להם חומצת גרעין, ולאחר מכן להעביراً אלקטרופורציה, שתספק וקטורי ביטוי או מורפולינוס לרקמה קרניו-פציאלית מתפתחת. הובלה של גנים לתוך סחוס מובחן היא בעייתית מיסודה, ומעבדת ליו מראה כי באמצעות אלקטרופורציה, ניתן להחדיר מורפולינוס לרקמות פרו-סחוסיות וסחוסיות של ראשן ה-Xenopus לאורך מגוון של שלבים התפתחותיים.

בתחום הביו-הנדסה (Bioengineering), קבוצת צקרמן (Zuckerman) מהמעבדה הלאומית לורנס ברקלי מדגימה את שיטתם לסנתזה של פפטואידים (peptoids), מחלקה של מולקולות אורגניות פעילות ביולוגית הדומות לפפטידים, אך שרשראות הצד שלהן קשורות לחנקן של קשר הפפטיד, ולא לפחמן האלפא, מה שהופך אותם לעמידים בפני פרוטאוליזה. קבוצת צקרמן מדגימה סנתזת תת-מונומר, שבה מונומרי פפטיד מתווספים ברצף בתגובות ברומו-אצטילציה והחלפת ברומיד, מה שמאפשר שליטה מדויקת באורך הרצף ובהרכב הפפטואיד. יתרה מכך, העובדה שהסנתזה מתבצעת על שרף עמיד (amide resin), ובשל כך מדובר בסנתזה במוצג (solid phase synthesis), מפשטת מאוד את טיהור הפפטואידים המסנתזים. מחברים אלו מראים גם כיצד ניתן להביא את הפפטואידים המסנתזים להרכבה עצמית למבנים מסודרים מאוד, המכונים ננו-גיליונות (nanosheets), שניתן לדמיין אותם באמצעות פלואורסצנציה ומיקרוסקופיה אלקטרונית סורקת. ננו-גיליונות אלו עשויים לשמש כפלטפורמה פוטנציאלית למחשי פחלבונים וממברנות.

בהמשך החודש, JoVE מציגה בדיקה למדידת פעילות פגוציטית בתאים שנחשפו לדגימות נוגדנים קליניים עבור מדור האימונולוגיה והזיהומים שלנו. משתפי פעולה מבית החולים הכללי של מסצ'וסטס וממכללת דארטמות' מראים שתאי THP-1 יבלעו חרו지를 מצופים באנטיגן קשור לנוגדן במיקרוסקופיית וידאו של צילומי lapsed-time, ומציגים שיטת ציטומטריית זרימה מבוססת פלטה לכימות מידת הפגוציטוזה. מחברינו משתמשים בשיטה זו כדי לקבוע את יכולתם של דגימות נוגדנים שונות להשרות פגוציטוזה, כגון אלו מחולי HIV שקיבלו טיפולים אנטי-רטרו-ויראליים ואלו שלא.

סיכום זה של תכני JoVE בנובמבר מספק סקירה קצרה של נקודות הדגש של JoVE לחודש זה. מאמרים ראויים לציון אחרים כוללים שיטות לדימוי חי של דינמיקת שלד התא בתאי אנדותל, מדידת שטף סידן בקרדיומיוציטים, ואלקטרופיזיולוגיה של פרוסות נוירונים שנולדו בבגרות בבצלול השם.

הדפסות חוזרות והרשאות

גלה מאמרים נוספים

Behavioral ExperimentsPrehension AbilityPrimatesUniversity Of FribourgBrinkman Board TestDexterity AssessmentMotor ControlSpinal Cord InjuryClinical And Translational MedicineRadiotelemetry DevicePhysiological MeasurementsAnimal HandlingElectroporation ProtocolsMacromoleculesXenopus Laevis