פרוטוקול זה מתאר את הבידוד של שומן הנגזר מתאי סטרומה lipoaspirate ויצירת 4 calvarial פגם קריטי בגודל מ"מ להעריך התחדשות שלד.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
תיקון של דגם פגם Calvarial הקריטי בגודל תאי שומן באמצעות נגזרת סטרומה נקטפו מן Lipoaspirate
* These authors contributed equally
במאמר זה
סיכום
תקציר
תיקון השלד Craniofacial והתחדשות מציעים את ההבטחה של יצירת רקמת דה נובו באמצעות גישה סלולרית מבוססת ניצול תאי גזע. תאי סטרומה שומן נגזר-(ASCs) הוכיחו להיות מקור שופע של תאי גזע multipotent מסוגלים לעבור התמיינות osteogenic, chondrogenic, adipogenic, וmyogenic. מחקרים רבים בחנו את פוטנציאל osteogenic של תאים אלה בגוף חי עם השימוש בחומרים ביולוגיים שונים פיגומים למסירה סלולרית. הוכח שעל ידי הניצול (חומצה גליקולית, לקטית-CO) osteoconductive, hydroxyapatite מצופה פולי (HA-PLGA) הפיגום seeded עם ASCs, פגם calvarial קריטי בגודלו, פגם שהוגדר על ידי חוסר היכולת שלה לעבור ספונטני ריפוי במשך החיים של בעלי החיים, יכול להיות יעיל להראות התחדשות גרמית חזקה. זה במודל vivo מדגים את בסיס גישות translational מטרה לחדש את רקמת העצם - הסלולרירכיב ומטריצה ביולוגית. שיטה זו משמשת כמודל ליישום הקליני האולטימטיבי של תא מוליד לקראת תיקון פגם רקמות ספציפית.
פרוטוקול
1. בידוד סלולרי והרחבה
- כל הסכמת המטופל ופרוטוקולי ניסוי נבדקו ואושרו על ידי אוניברסיטת סטנפורד מוסדית מועצה לביקורת (פרוטוקול # 2188 ו# 9999).
- רקמת שומן תת עורי לקבל אדם מנהלי lipoaspiration אלקטיבי תחת הרדמה מקומית / כללית.
- תהיינה שתי שכבות בlipoaspirate (איור 1 א). Supernatant מכיל את הרוב המכריע של החומר התאי המעובד. השכבה התחתונה מוזרקת בעיקר מלוחה. שומן ממקור תאי סטרומה ניתן לקצור משתי השכבות, אבל התשואה היא הר....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
מאז הבידוד של שומן ממקור תאי סטרומה 2 מ lipoaspirate, התאים הללו מובחנים למגוון רחב של שושלות סלולריות. רקמת שומן היא ממקורות mesodermal ולכן, תאי סטרומה שומן המופקים multipotent צפוי להיות יעילים ביותר עם יישום כלפי שושלת mesodermal. היכולת ליצור רקמות שלד היא קריטית במיוחד לנוכח המחסור באתרים תורמים לautograft והמגבלות המובנות של חומר סינטטי כולל זיהום, דחייה, והתפלגות לאורך הזמן 3. תאי סטרומה שומן המופקים מציעים קו פוטנציאל autogenous multipotent תא עם
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
אין ניגודי האינטרסים הכריזו.
תודות
ברצוננו להודות לד"ר ג'ורג' וCommons ד"ר דין Vistnes על התמיכה ושיתוף הפעולה שלהם במחקר שלנו. עבודה זו נתמכת על ידי המכון הלאומי למענקי מחקר דנטלי Craniofacial ו1 R21 DE019274-01, R01EB009689 וRC2 DE020771-02, האלון וקרן Hagey המעבדה לרפואת הרגנרציה ילדים לMTL ד"ר יון נתמך על ידי בית החולים סנט ג'וזף מרסי GME .
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| שם המגיב: | חברה | מספר קטלוגים | תגובות (אופציונלי) |
| Lipoaspirate קציר | |||
| PBS | Gibco | 10010-023 | |
| תמיסת המלח המאוזן של האנק | Cellgro | 21-023-CV | |
| Collagenase | סיגמא | C6885-500 מ"ג | |
| 100 מיקרומטר מסננת התא | BD פלקון | 352360 | |
| 500 מ"ל .22 מסנן Steri העליון מיקרומטר | Millipore | SCGPT05RE | |
| פגם Calvarial | |||
| Z500 Brushless MicromotorsUM50C | NSK | NSKZ500 | |
| סכין עגול 4.0 מ"מ | Xemax כירורגים | CK40 |
מקורות
- Levi, B., James, A. W., Nelson, E. R. Human adipose-derived stromal cells heal critical size mouse calvarial defect. PLoS One. 5, (2010).
- Zuk, P. A., Zhu, M., Ashjia, P. Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells. Mol. Biol. Cell. 13, 42....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
