גיליון מרץ של כתב העת לניסויים חזותיים (JoVE) מתחיל במאמר המתמקד בשלוש בדיקות חשובות מהותית למדידת התנהגות תנועתית של דרוזופילה. באופן ספציפי, בדיקות אלה כוללות את מבחן זחילת הזחלים (לתפקוד מוטורי של הזחל), מבחן RING (לתפקוד מוטורי של מבוגרים) ומבחן החיזור (להערכת קואורדינציה ויכולות חושיות).
בדיקת זחילת הזחלים כוללת איסוף זחלים וחשיפת הזבובים הצעירים לתרופה ניסיונית מעניינת. לאחר מכן מועברים בעלי חיים לצלחת פטרי המונחת על גבי דף נייר גרף, וניתן לחשב את מספר קווי הרשת שנחצים בדקה.
פרוטוקול הגיאוטקסיס השלילי האיטרטיבי המהיר, או RING, כרוך בהנחת זבובים בוגרים בבקבוקונים מיוחדים שבהם הם נאלצים לקרקעית על ידי הקשה עדינה. זבובי פירות באופן אינסטינקטיבי יזחלו כלפי מעלה, נגד כוח הכבידה. באמצעות ניתוח תמונה, ניתן לקבוע את מידת היכולת התנועתית של המבוגרים על ידי מדידת כמה רחוק הזבובים יכולים לטפס כלפי מעלה בפרק זמן קצר.
כדי להעריך התנהגות מורכבת יותר מונחית חושים, נעשה שימוש במבחן החיזור ומתחיל בהצבת זכרים ונקבות תמימים מינית במנגנון מיוחד המכונה גלגל ההזדווגות. במהלך מפגשי הניסוי, החוקרים רושמים את משך הזמן שבו הזבוב הזכר מפגין מספר התנהגויות חיזור אופייניות. באופן מרשים, תוך דקות ספורות, הזבוב הזכר יכוון את עצמו לעבר הנקבה, יטפח על בטנה, יפיק שיר עם כנפו, ילקק את הנקבה ובסופו של דבר יזדווג.
יחד, מבחנים אלה מייצגים סדרה של מבחנים התנהגותיים רבי עוצמה שיכולים לעזור להבהיר את הגורמים הגנטיים והסביבתיים התורמים להתנהגות דרוזופילה.
בהמשך החודש, JoVE מעבירה את המיקוד שלה לפיזיולוגיה של המאמץ, שם חוקרים מאוניברסיטת סאו פאולו מציגים שיטה שנועדה לחשוף את התרומה של מערכות האנרגיה השונות לפעילות גופנית מורכבת, כמו ספורט. כדוגמה, המחברים שלנו בחרו בג'ודו להדגמה שלהם. באמצעות מנתח גז נייד הממוקם בקפידה, ניתן למדוד את צריכת החמצן במהלך אימון ג'ודו בתנאים מבוקרים. על ידי השוואת צריכת החמצן לפני, במהלך ואחרי פעילות גופנית, ניתן לקבוע את תרומת האנרגיה של חילוף חומרים אנאירובי אירובי ואלקטי . איסוף דם לפני ואחרי פעילות גופנית, ואחריו ניתוח אלקטרוכימי משמש לקביעת תרומת האנרגיה של חילוף החומרים האנאירובי החלבי לספורט הג'ודו. בשילוב, ניתן להשתמש בנתוני צריכת החמצן וריכוז הלקטט בפלזמה כדי לקבוע את התרומה היחסית של מערכות האנרגיה השונות להיבטים ספציפיים של פעילות גופנית מורכבת, כמו זריקת הג'ודו האהובה עליכם.
כמו כן, במרץ, JoVE מתכננת לפרסם מחקר התפתחותי הכולל חשיפה לאלכוהול בדגי זברה. ברגע שהעוברים מתפתחים לנקודת הזמן הרצויה, ניתן להעריך את ההשפעות של חשיפה לאלכוהול על ביטוי גנים על ידי טיהור mRNA וביצוע qPCR ועל ידי הכלאה שלמה באתר. באמצעות מיקרוסקופ אור ניתן להעריך גם שינויים מורפולוגיים כגון צורת סומיט. אם נצפה גן מעניין יורד או גדל על ידי חשיפה לאתנול, ניתן להזריק mRNA או מורפולינו מכוסה לעובר, איפשהו בסביבות שלב שני התאים, על מנת להציל את הפנוטיפ המושרה על ידי אלכוהול. המחברים שלנו מראים כי חשיפה לאלכוהול בדג הזברה המתפתח מביאה לפנוטיפים מורפולוגיים ופרופילי ביטוי גנים דומים לאלה שנצפו ביונקים, והם גם מדגימים כי הזרקת mRNA יכולה להפוך את השפעות האלכוהול על הפרעות התפתחותיות.
באימונולוגיה וזיהום, JoVE מציג ניסוי בפרזיטולוגיה של צמחים, מאוניברסיטת קליפורניה בריברסייד. בפרט, המחברים שלנו מתעניינים בנמטודת קשר השורש - טפיל צמחי מחייב הנע בחופשיות באדמה רטובה כדי להדביק את שורשי הצמחים, ולהאכיל. ראשית, מתוארות שיטות לעיבוד צמחים נגועים ואיסוף נמטודות קשרי שורש. ברגע שתולעים צעירות מתפתחות לשלב עם יכולת הדבקה גבוהה, ניתן לחסן את האדמה. מאוחר יותר, ניתן לצבוע שורשים ולהעריך את נוכחותם של קשרי השורש האופייניים שנוצרו על ידי טפילים אלה. בנוסף לניסויים בעציצים, המחברים שלנו מראים כיצד ניתן לבצע בדיקות קשרי שורשים עם צמחים הגדלים בשקיות שקופות, מה שמאפשר צפייה קלה בשורשים, ומקל על סינון תפוקה גבוהה לנוכחות זיהום הרסני זה המהווה 5% מאובדן היבול העולמי, מדי שנה.
סיכום זה של התוכן של JoVE לחודש מרץ מדגיש ארבעה מתוך למעלה מחמישים ערכים המתוכננים לצאת בחודש. ניסויים בולטים אחרים כוללים שיטות להדמיית תגובות מעוררות ריח באנטנה של זבובי פירות, שימוש באף אלקטרוני לניתוח התרכובות הנדיפות מהפרי, ושימוש מחדש בציוד משרדי רגיל להעברת מקרומולקולות לתאים חיים.