סרטן הערמונית (PrCa) והיפרפלזיה שפירה של הערמונית (BPH) הן מעמסה בריאותית משמעותית. PrCa הוא הסרטן השני הנפוץ ביותר מוצק האיבר אצל גברים וגורם מוביל לסרטן הקשורים למוות 1. BPH הוא גם נפוץ מאוד בקרב גברים מבוגרים, והערכה הוא כי הביטוי הקליני של BPH, תסמינים בדרכי שתן תחתון (LUTS), ישפיע 50-90% מהגברים 2. בעוד אנדרוגנים ואסטרוגנים ידועים להיות חשוב בPrCa וBPH, ההבנה של מנגנונים הורמונליים העומדים בבסיס היווצרות סרטן וצמיחה שלנו נשארה שלמה 3,4. מודלים של בעלי חיים פשוטים וגנטי צייתנים לחזק את המחקרים שיעסקו בסדרי עדיפויות אלה במחקר ערמונית. במחלות הורמון מגיבות כמו PrCa וBPH, השימוש בתת עור, כדורי הורמון שחרור איטיים, בבידוד או בשילוב עם xenografting הקפסולה הכליות (ההעברה של תאים, רקמות או איברים ממין אחד למשנו) לimmunocompמארח עכבר romised, מספק שיטה פשוטה לשחזור ללימוד רגולציה הורמונלית של צמיחה והיווצרות סרטן.
השתלת גלולה הורמון תת עורי היא טכניקה פשוטה ולשעתק ללמוד ויסות הורמונלי של סרטן וגידול שפיר בערמונית 5. השתלה תת עורית של עכברי זכרים מבוגרים עם 25 טסטוסטרון מ"ג (T) ו17β-אסטרדיול 2.5 מ"ג (ה 2), גורמת לעלייה בסרום E 2 וירידה הדרגתית בT, יצירה מחדש של הסביבה ההורמונלית הדינמית של גברים מזדקנים 5,6. בנוסף, מודל זה משחזר רבים של המאפיינים הקליניים של 5,7 BPH-LUTS. שיטות חלופיות של ממשל הורמון כוללות אוראלי / gavage או זריקת intraperitoneal, אשר גורם למצוקה למכרסמים, הם פחות עקביים באספקת אותה הכמות של תרופה לאורך זמן, ויותר עתיר עבודה מאשר השתלה כירורגית חד פעמית. מצבים תת עורית אחרים לשעותormone ו / או אספקת סמים כוללות כמוסות Silastic 8. אמנם יש לנו גם ניסיון עם שימוש בכמוסות Silastic, כדורים דחוסים הם העדיפו עבור קלות שימוש שלהם ושחזור. יתר על כן, שיעורי שחרורו של כדורי הורמון דחוסים יותר טובים לחקות את היחסים הדינמיים מין סטרואידי ההורמון נצפו בגברים מזדקנים 5,7.
מאז הפיתוח של עכברים גנטי חיסון, in vivo מערכות מודל רבים המשלבות טכניקות xenografting פותחו עבור המחקר של מגוון רחב של רקמות בריאות וחולות. ישנן מספר קטגוריות בסיסיות של xenografting. xenografts הרקמה מורכבת של פיסה קטנה של רקמה שלמה, אשר יכול להיות מבנה נורמלי, גידול ממאיר, או גידול שפיר. Szot et al. (2007) לאחרונה מואר xenografting הקפסולה כליות של איי לבלב 9. Aamdal et al. (1985) תאר xenografting הקפסולה כליות של 27 שורות תאי סרטן אנושיים בimעכבר munocompromised מארח 10. יכולים גם להיות מורכבים תלים של שורה אחת הנציחה תא (סרטנית או שאינה סרטנית), או יכולים להיות מורכב משורת תאים הונצחו בשילוב עם תאים מבודדים מmesenchyme (שתל רקומביננטי תא).
אנו דוגלים xenografting של recombinants תא כדי לבחון את תפקידיהם של stroma והאפיתל בפיתוח PrCa וBPH. Cunha et al. (1980) היה הראשון לדווח כי כאשר אפיתל שלפוחית העכברי מבוגר בשילוב עם mesenchyme עוברי ואברי המין סינוס (UGM) וxenografted תחת הקפסולה הכליות של מארחים עכברי זכרים, הרקמה מתפתחת למבנים הדומים acini ערמונית 11. נורמן et al. (1986) הראה כי אפיתל עכבר הבוגר של הערמונית ductal וUGM, כאשר הוא משולב בrecombinants רקמות, עוברים צמיחת ductal והסתעפות המורפוגנזה 12. הייוורד et al. (1988) הראה כי אפיתל ערמונית אדם מגיב לאינדוקטיביים מ 'עובריesenchyme באופן דומה 13. מודל ההורמונלית של הסרטן בערמונית, על ידי שילוב של שורת תאי אפיתל הונצח ערמונית אדם BPH-1 עם UGM, דווח לראשונה על ידי וואנג et al. 14 (2001) ונעשה שימוש נרחב במעבדה שלנו 15. מודל זה גם מתאים להבנת התקדמות PrCa כי אפיתל השפיר של הערמונית הופך למחלה גרורתית, דוגמנות PrCa המתקדמת בבני האדם 5. מכיוון שניתן להשפיע על רכיבים ספציפיים גנטי, השתלת רקומביננטי תא שימושית במיוחד כגישה להעריך אינטראקציות סטרומה-אפיתל.
אתרים אחרים המתאימים לxenografting הם intradermal, תת עורית ובמקומות orthotopic 16. בהתאם לתהליך הרקמות ומחלות של עניין, אלה עשויים להיות גישות חלופיות מתאימות. לצורך המחקר של סרטן ערמונית הורמונליים ורגולציה גידול שפירה, אנו בוחרים את הקפסולה הכליותאתר לxenografting בשל השתל גבוה יותר שלה לקחת שיעור, אספקת דם בשפע, ויכולת להשתיל מספר רב יותר של xenografts לאתר מוגבל אחד 16. יתר על כן, מניפולציה הורמונלית של עכבר המארח כי תוצאות בניוון של הערמונית מגבילה את השימוש בהשתלת orthotopic ערמונית 16.
פרוטוקול זה מתאר טכניקות של ייצור הורמון דחוס / סמים גלולה והשתלה כירורגית, כמו גם xenografting הקפסולה כליות של שתלי תא ערמונית אנושי ורקמות. יחד, טכניקות אלה מספקים assay רגיש כדי לקבוע אם עכבר מהונדס גנטי הוא רגיש יותר לPrCa ו / או ייזום BPH מאשר זני שליטה. Xenografting הוא טכניקה רבת עוצמה עבור in vivo הערכה של הפוטנציאל של תאים ניסיוניים כדי לפתח היסטולוגית ותכונות מולקולריות של ממאירות, כמו גם assay לאסטרטגיות טיפול חדשניים במגוון רחב של מחלות שפירים וממאירים.