מאמר זה מספק פרוטוקול להערכת אקו בגודל חדר ממני ויתר לחץ דם ריאתי בעכברים. יישומים כוללים קביעת הפנוטיפ והערכה סידורי במהונדס ומודלי עכבר מושרה רעל של קרדיומיופתיה ומחלת כלי דם ריאתי.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר זה מספק פרוטוקול להערכת אקו בגודל חדר ממני ויתר לחץ דם ריאתי בעכברים. יישומים כוללים קביעת הפנוטיפ והערכה סידורי במהונדס ומודלי עכבר מושרה רעל של קרדיומיופתיה ומחלת כלי דם ריאתי.
מהונדס ומודלים רעילים של יתר לחץ דם ריאתי עורקים (PAH) נמצאים בשימוש נרחב כדי לחקור את הפתופיזיולוגיה של PAH ולחקור טיפולים פוטנציאליים. בהתחשב בהוצאות והזמן הכרוכים ביצירת מודלים של בעלי חיים למחלות, זה קריטי, כי יש לחוקרים כלים כדי להעריך ביטוי פנוטיפי של מחלה באופן מדויק. תפקוד לקוי של חדר ממני הוא הביטוי העיקרי של יתר לחץ דם ריאתי. אקו הוא עמוד התווך של ההערכה לא פולשנית של תפקוד חדר ממני במודלים של מכרסמים ויש את היתרון של תרגום ברור לבני אדם בהם נעשה שימוש באותו הכלי. פרוטוקולי אקו פורסם במודלים עכבריים של PAH חסרים.
במאמר זה, אנו מתארים פרוטוקול להערכת RV ותפקוד כלי דם ריאתי במודל של עכברים של PAH עם מוטציה BMPRII שלילית דומיננטית, עם זאת, פרוטוקול זה הוא ישים לכל מחלות המשפיעות על כלי דם ריאתי או לב ימני. אנחנולספק תיאור מפורט של הכנת בעלי חיים, רכישת תמונה וחישוב המודינמית של נפח פעימה, תפוקת לב והערכה של לחץ בעורק ריאה.
לחץ ריאתי מוגבר ועל שמאל חדרית חוסר תפקוד (RV) הם סימני ההיכר של מחלת כלי דם ריאתי במודלים של בעלי חיים ובני אדם חולים עם יתר לחץ דם ריאתי עורקים (PAH). מהונדס ומודלים רעילים (למשל monocrotaline או היפוקסיה) של PAH נמצאים בשימוש נרחב כדי לחקור את הפתופיזיולוגיה של PAH ולחקור טיפולים פוטנציאליים. בהתחשב בהוצאות והזמן הכרוכים ביצירת מודלים של בעלי חיים למחלות, זה קריטי, כי יש לחוקרים כלים כדי להעריך ביטוי פנוטיפי של מחלה באופן מדויק.
אקו הוא עמוד התווך של ההערכה לא פולשנית של תפקוד חדר במודלים של מכרסמים 1,2. יש אקו היתרון של תרגום ברור לבני אדם בהם נעשה שימוש באותו הכלי. בנוסף, בחלק מהדגמים גנטיים תערוכת חדירנות לא מושלמת 3; היכולת לזהות noninvasively חיות מושפעות חוסכת זמן יקר ומשאבים. הערכה לא פולשנית של diseaחומרת se מבלי להקריב בעלי חיים גם מאפשרת לחוקרים ללמוד סדרתי את ההשפעות של טיפולי חקירה. זה חשוב במיוחד לאור המהירות שבה טיפולי translational יכולים להתקדם לניסויים בבני אדם 4,5.
בבני אדם, הערכת אקו בגודל קרוואנים ויתר לחץ דם ריאתי היא מאתגרת במיוחד בשל מיקום retrosternal וצורה לא סדירה של קרוואנים 6. יש מודלים של מכרסמים אתגרים נוספים של גודל קטן ושיעורים מהירים מאוד לב (300-700 פעימה / min). ההתקדמות שחלה באחרונה, כולל מסגרת חליפין גבוהות יותר, זרם קטן יותר שיפרה את איכות תמונה והדמיה מודעת אף אפשרה בכמה פרוטוקולי ניסוי, למרות שרוב ההדמיה מכרסמים נעשית תחת ההרדמה 7,8. פרוטוקולי ניסוי מצוינים של אקו במודלים של עכברים של PAH תוארו ותוקפים נגד שני MRI ופרמטרים המודינמיים פולשנית 1,9. עם זאת אקו שפורסם,פרוטוקולים במודלים עכבריים של PAH חסרים.
במאמר זה, אנו מתארים פרוטוקול להערכת RV ותפקוד כלי דם ריאתי במודל של עכברים של PAH עם מוטציה דומיננטית שלילית BMPRII ומודל של afterload קרוואנים הבודד לאחר פסי עורק ריאה, עם זאת, פרוטוקול זה הוא ישים לכל מחלות המשפיעים על כלי דם ריאתי או לב ימני. נתאר הכנת בעלי חיים והערכה מפורטת של גודל RV ותפקוד, כמו גם עורק ריאה ראשי גודל (הרשות הפלסטינית). אנחנו גם מדגימים את הטכניקות וחישובים דרושים כדי להעריך נפח פעימה ותפוקת לב. מגבלות טכניות מונעות הערכות דופלר מדויקות של לחץ ריאתי, אבל יש לנו ליישם פונדקאית תוקף היטב אדם, זמן האצת עורק ריאה, להעריך לחץ הרשות הפלסטינית.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
1. הכנת ציוד
2. העכבר preparatיון כולל הרדמה, הסרת שיער, ומיקום
3. רכישת תמונות: הדמיה בParasternal ארוכה ציר צפה
. 4 רכישת תמונות: הדמיה בParasternal קצרה ציר צפה
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
המטרות העיקריות של פרוטוקול זה הן לכמת גודל RV ותפקוד, וכדי להבין את המידה שבה כלי דם ריאתי הוא חולה. ההיערכות מתאימה של ציוד הן את העכבר ואקו היא חיונית לקבלת תוצאות מדויקות ושחזור. עכברים צריכים להיות מקולף החזה שלהם וגפיים מאובטחים לפלטפורמת ההדמיה עם קלטת. הרדמה, במקרה isoflurane הזה, הוא מנוהלת באמצעות חרטומו. המתמר צריך להיבדק לפגמים, בעיקר בועות אוויר, אשר יכול לפגוע באיכות תמונה. קבלת עמדות 4 קאמריות באיכות טובה של הלב היא די קשה בעכברים ולכן פרוטוקול זה מתמקד בהערכת RV בא...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
מודלים של עכברים של מחלה, או מהונדס או הקשורים להרעל, דורשים אימות פנוטיפי כי המודל בעצם מסכם את המחלות של בני האדם הוא נועד לחקות. אימות זה לעתים קרובות ניתן להשיג על ידי הנוכחות או היעדר של תכונה מסוימת, לדוגמא פיתוח של גידול. עם זאת, מודלים שיגרמו למומים המודינמית כגון מודלים התכווצות אב העורקים של היפרטרופיה של חדר השמאלי או הדגם המהונדס שלנו של PAH קשים יותר כדי לאמת. מודלים אלה דורשים גם מדידה סופית של פרמטרים המודינמיים או כלים למדוד noninvasively פרמטרים המודינמיים וליקויי...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
יש המחברים אין לחשוף.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| Vevo 770 מערכת מיקרו-אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה | Visualsonics Inc. | קבל מידע נוסף בכתובת | |
| www.visualsonics.com/products RMV (Real-Time MicroVisualization) 704B 40 mH Scanhead עם מתמר מכוסה | Visualsonics Inc. | קבל מידע נוסף בכתובת | |
| www.visualsonics.com/products Vevo Integrated Rail System כולל מערכת הניטור הפיזיולוגית | Visualsonics Inc. | קבל מידע נוסף ב | |
| צג מחשב www.visualsonics.com/products המוגדר לשימוש עם Vevo770 | DELL או עכבר מחשב אחר של ספק | ||
| שהוגדר לשימוש עם Vevo770 | General | ||
| Vevo770 Cardiac Package Software | Visualsonics Inc. | קבל מידע נוסף ב www.visualsonics.com/products | |
| VetEquip מכונת הרדמה שולחנית ניידת עם וופורייזר איזופלורן | VetEquip | קבל מידע נוסף בכתובת vetequip.com | |
| מיכלי גז פסולת פחם פעיל | VetEquip/Vaporguard | 931401 | קבל מידע נוסף בכתובת vetequip.com |
| Puralube Eye Ointment | Henry Schein | קבל מידע נוסף בכתובת henryschein.com | |
| Ecogel 100 ג'ל אולטרסאונד | EcoMed Pharmaceuticals | 30GB | קבל מידע נוסף בכתובת ecomed.com |
| 3M Transpore Tape | Fisher Scientific | 1527-0 | קבל מידע נוסף ב fishersci.com |
| מברג קטן שטוח | ספק | ||
| סטרילי H2O | DDI H2O מהברז ולאחר מכן חיטוי | ||
| 6 בכותנה אפליקטורים טיפים | פישר סיינטיפיק | קבל מידע נוסף ב | |
| fishersci.com נאיר (קרם אפילציה) | ספק | ||
| 2 ב x 2 בספוגי גזה | פישר סיינטיפיק | קבל מידע נוסף ב fishersci.com |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.