הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

במדידת רחם של קצב לב בעכבר על ידי אקו M-המצב פולשנית

11.2K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/50994

⸱

22 בנובמבר 2013

 ,  , 

במאמר זה

סיכום

אולטרסאונד בתדירות גבוה במיוחד הוא כלי הדמיה חיה רב עוצמה כדי לבחון מומים לב בבעלי חיים קטנים. noninvasiveness שלו מאפשר שמירה על המצב הפיזיולוגי של עוברים. בזאת, אנו מציגים את השימוש באולטרסאונד M-mode כדי למדוד את קצב הלב של עוברים בE18.5 ברחם.

תקציר

מחלת לב מולדת (CHD) היא הגורם המידבק השכיח ביותר למוות בלידה. השכיחות של מחלת לב כלילית נעה 4-50 / 1, 000 לידות (מחלות ואומדני פגיעה אזוריים, ארגון בריאות עולמי, 2004). ניתוחים שלעתים קרובות להתפשר על איכות החיים נדרשים לתיקון מומי לב, מזכירים לנו את החשיבות של מציאת הגורמים למחלת לב כלילית. מודלים עכבר שעברו מוטציה וטכנולוגיה הדמיה לחיות הפכו לכלי חיוני ללמוד אטיולוגיה של מחלה זו. למרות שיטות מתקדמות מאפשרות הדמיה חיה של לב חריג בעוברים, המדינות הפיזיולוגיות והמודינמית של זה האחרון לעתים קרובות נפגעים כתוצאה מניתוחים ו / או ארוכים. אולטרסאונד הדמיה לא פולשנית, לעומת זאת, ניתן להשתמש ללא ניתוח חושף את העוברים, ובכך שמירה על הפיסיולוגיה שלהם. בזאת, אנו משתמשים באולטרסאונד M-מצב פשוט כדי להעריך את קצב לב של עוברים בE18.5 ברחם. זיהוי של קצב לב לא תקין הוא אכן אינדיקה טובהטור של חוסר תפקוד של לב ובכך מהווה שלב ראשון בזיהוי של ליקויים התפתחותיים שעלולות להוביל לאי ספיקת לב.

מבוא

מחלת לב כלילית הוא הגורם המידבק השכיח ביותר למוות בלידה 1. ניתוחים רבים לעתים קרובות יש צורך לתקן את הליקויים המבניים בנושאי איכות החיים, שעשוי להישאר בסכנה 1. ילדים עם מחלת לב כלילית בתדירות גבוהה לפתח הפרעות נוירולוגיות גם אם הם לא עברו ניתוח, מה שמעיד חשוב בהשלכות רחם על 2,3 פיתוח. גורמים גנטיים והן סביבתיים, כגון חשיפה לוירוסים או חומרים כימיים (אלכוהול) במהלך הריון, מחלת לב כלילית גורם. לומדים תורמים הגנטיים הוא עדיין בשלב המוקדם שלה, אבל גדל במהירות. לזהות התורמים האלה ולהבין את תפקידם בהתפתחות לב, Phenotyping עכברים שעברו מוטציה עם כלי פשוט ורב עוצמה יהיה מאוד מועיל.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל הנהלים שמוצגים בפרוטוקול זה אושרו על ידי ועדת הטיפול בבעלי חיים IRCM.

1. אולטראסאונד מערכת ותחנת הכנה

  1. הפעל את מערכת ההדמיה אולטרסאונד ולהתחבר scanhead כמו גם את יחידת הבקר פיזיולוגיה על פי הוראות היצרן (איור 1). בחר לב תכנית המדידה וscanhead שמתאים למתמר 30 MHz.
  2. מלא מזנקים של scanhead עם מים deionized. למנוע בועות אוויר כמו שהם מפריעים להדמיה ברזולוציה. הנח את scanhead עם צד הידית עד למחזיק בה בסמוך לפ....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

השיטה הנ"ל הייתה בשימוש כדי להעריך את ההשפעה של הנוכחות או עדר של furin פרוטאז סרין בתאי האנדותל בקצב לב של עוברי עכברים בE18.5 ברחם. Furin שייך למשפחה של convertases proprotein (מחשבים) שמבשרי החלבון ידבקו אחרי שאריות בסיסיות. Furin והמצעים שלה הם חלבוני הפרשה ומחשוף יכול להתרחש במנגנון Golgi, endosomes או על פני התא. מצעי מפתח של furin כוללים TGFb, וגורמים כמו TGFb, כגון חלבוני morphogenetic העצם (BMPs) שמשחקים תפקיד חשוב בהתפתחות לב. חברים אחרים במשפחת המחשב יכולי.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

אקו M-המצב הוא שיטה יעילה ופשוטה למדידה בקצב לב ברחם של עוברי עכברים. מתמרים זמין מסחרי לספק רזולוציה מספיקה כדי להמחיש את לב פועם קטן. לפיכך, הם מאפשרים מדידת קצב לב מאוד מדויקת, בהשוואה לשיטות אחרות כגון מדידת דופק, ויכולים להוות תחליף מיקרוסקופיה וידאו ברזולוציה גבוהה. עם זאת, כלים הנוכחיים אינם מאפשרים ניתוח סימולטני של כל העוברים, רומזים הליך מייגע לדמיין כל אחד מהעוברים. בנוסף, השדה הצר היחסי של תצוגה והיעדר עומק שדה (2D-תמונה) דורשים התאמה ידנית תושג רק על.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

אין ניגוד האינטרסים הכריז.

תודות

אנו מודים מנון Laprise לאימונים באקו ואן Chamberland על שהקדשת מהתמונות שמוצגת באיורים 1 ו -2. עבודה זו נתמכה על ידי מכון קנדי ​​לחקר בריאות MOP מענק 44363 וקנדה יו"ר 950-216,684.

....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
IsofluranePharmaceutical Partners of Canada Inc.CP0406v21-כלורו-2,2,2-טריפלואורואתיל דיפלואורומתיל אתר
אולטרסאונד ג'למעבדות פרקר בע"מAquasonic
מעבדות פרקר בע"מספקטרה 360
ג'ל עינייםנוברטיסקרם דמעות ג'ל
להסרת שיערצ'רץ' דווייט ושות', בע"מNair
קוצץ
גזה / החלפת כותנהQ-tips
טוש
ברזולוציה גבוהה In vivo מערכת הדמיית אולטרסאונדVisual SonicsVevo770
30 MHz מתמרVisual Sonicsפלטפורמת
ו יחידת בקר פיזיולוגיהVisual Sonics
Cyprane North America Inc.
מנורת
ג'ל אלקטרודות שקוף שיערקבוע הדמיה RMV707B מערכת הרדמה 312462 חימום אינפרא אדום

מקורות

  1. Hoffman, J. I., Kaplan, S. The incidence of congenital heart disease. J. Am. Coll. Cardiol. 39, 1890-1900 (2002).
  2. Miller, S. P., et al. Abnormal brain development in newborns with congenital heart disease. N. Engl. J. Med. 357, 1928-1938 (2007).
  3. Bru....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

גלה מאמרים נוספים

קצב לב בעוברדימיג של עובר עכבראולטרסאונד לא פולשנימחלות לב מולדותקצב לב עוברימדידה לבביתג'ל אולטרסאונדגנוטיפיקציה של עובריםפיזיולוגיה של עובר עכבר