תגובות שתן בשלפוחית ​​השתן ההתנפחות העוררת Visceromotor כמודל לשלפוחית ​​שתן כאב בעכברים

סיכום

כ 3-8,000,000 אנשים בארצות הברית סובלים מתסמונת כאב ביניים דלקת שלפוחית ​​השתן / שלפוחית ​​השתן (IC / BPS), מצב של חולשה מתאפיינת בחלקו על ידי כאבים באגן. על מנת ללמוד תרומות מערכת עצבים למצב, מודל פיסיולוגי של כאב שלפוחית ​​שתן נמצא בשימוש בעכברים וחולדות.

תקציר

כ 3-8,000,000 אנשים בארצות הברית סובלים מתסמונת דלקת שלפוחית ​​השתן / כאבים בשלפוחית ​​השתן interstitial (IC / BPS), מצב של חולשה מתאפיינת בדחיפות מוגברת ותדירות מתן שתן, כמו גם נוקטוריה וכאבי אגן בכלל, ובפרט על מילוי או בשלפוחית ​​השתן הרקה. למרות שנים של מחקר, את סיבת IC / BPS נותרת חמקמקה ואסטרטגיות טיפול אינן מסוגלות לספק הקלה מוחלטת לחולים. על מנת ללמוד תרומות מערכת עצבים למצב, מודלים של בעלי חיים רבים פותחו על מנת לחקות את הכאב וסימפטומים הקשורים IC / BPS. מודל עכברי אחד כזה הוא התנפחות שלפוחית ​​שתן (UBD). במודל זה, אוויר דחוס בלחץ מסוים מועבר לשלפוחית ​​השתן של חיה מורדמת בקלילות על פני תקופת זמן מוגדרת. לאורך כל ההליך, חוטים בשרירי הבטן אלכסוניים מעולים להקליט פעילות חשמלית של השריר. פעילות זו מכונית תגובת visceromotor (VMR) ואניsa מדד אמין לשחזור של nociception. כאן, אנו מתארים את הצעדים הדרושים כדי לבצע את הטכניקה הזו בעכברים כוללים מניפולציות כירורגית, הקלטה פיזיולוגית, וניתוח נתונים. עם השימוש במודל זה, ניתן נפרם התיאום בין הנוירונים העיקריים חושיים, afferents המשנית בעמוד השדרה, ובאזורים במערכת העצבים המרכזיות גבוהים יותר כרוכים בכאב בשלפוחית ​​השתן. ידע מדעי בסיסי אז זה יכול להיות מתורגם קליני לטיפול בחולים הסובלים מIC / BPS.

מבוא

כאב כרוני מוגדר באופן רשמי ככאב שנמשך כשלושה חודשים, או למשך זמן ארוך יותר מאשר זמן ריפוי רקמה הנורמלי ^1. סוג זה של כאב הוא אחת הסיבות העיקריות שאנשים מונעים על לפנות לטיפול רפואי ² ויכול לעלות עד $ 635,000,000,000 דולרים בשנה ^3. אסטרטגיות כאב כרוני התמודדות נוכחית נחשבות ארכאיות; לאחר עשרות שנים של התקדמות רפואית, NSAIDs (תרופות נוגדות דלקת לא סטרואידיות) ואופיואידים עדיין הטיפולים הראשוניים נקבעו על ידי רופאים. עם זאת טיפולים אלה למקד את כל הסוגים השונים של כאב באותו אופן, ומספקים השפעות משכך כאבים בכל הגוף, בניגוד למתמקד במיוחד על סיבת שאירוע כאב מדויק. על מנת לסייע טוב יותר לאלה הסובלים מכאב כרוני, תשומת לב מחקר צריכה להיות מוזז כלפי אטיולוגיה וטיפולי כאב ספציפי אפשריים הקשורים גורמים השכיחים ביותר לכאב כרוני. המטרה של manuscri זהpt הוא לתאר מודל המשמש כדי להבין מצב המכונה דלקת שלפוחית ​​השתן ביניים / כואב שלפוחית ​​השתן תסמונת (IC / BPS) טוב יותר.

IC / BPS הוא מצב מתישה המשפיע על מיליוני אנשים, בעיקר נשים מעל גיל 40 ^4. הסיבות של IC / BPS המדויקות אינן ידועות, אולם השכיחות נקשרה לגנטיקה ^5, דיאטות מסוימות, ורמות לחץ גבוה ⁶ . תסמינים של IC / BPS כוללים אך לא מוגבלים ל: דחיפות מוגברת במתן שתן, בתדירות מוגברת של הטלת שתן, כואבת, נוקב, או צריבת כאב במהלך מילוי שלפוחית ​​ורקה, ונוקטוריה ^7. יש חולים חווים תנאים אלה רמות לחץ גבוהות יותר, והם חרדים יותר ^8. זה הגביר תוצאות מתח בכאב מוגבר, אשר מרחיב את רמות הלחץ המקוריות. מחקרים הראו כי רמות דיכאון והחרדה להקטין טיפולים הבאים שלהקל על כאב במתן שתן, ובכך למעשה לשבור את מעגל משוב החיובי הזה ^{9. אחד האתגרים בגילוי טיפולים חדשים עבור IC / BPS היה מיעוט הבנת מדע בסיסית של כאבים בשלפוחית ​​השתן.}

על מנת ללמוד תרומות מערכת עצבים למצב, מודלים של בעלי חיים רבים פותחו על מנת לחקות את הכאב וסימפטומים הקשורים IC / BPS. באופן מסורתי, דלקת שלפוחית ​​השתן שוחזר בבעלי חיים עם ההקדמה של כימיקלים שונים, כגון שמן חרדל, אצטון, lipopolysaccharide, חומצת מלח, וציקלופוספמיד לתוך שלפוחית ​​השתן. עם זאת לא סוכנים זרים נמצאים בשתן סטרילי של חולי IC / BPS, ובכך לערער על תקפותם של מודלים אלה. עוד מודל עכברי של כאב אורולוגית הוא נפיחות בשתן בשלפוחית ​​השתן (UBD) ^10. במודל זה, אוויר דחוס בלחץ מסוים מועבר לשלפוחית ​​השתן של בעל חיים ער או בהרדמה קלה על פני תקופת זמן מוגדרת. לאורך כל ההליך, חוטים בActiv מעולה שרירי בטן האלכסוני השיא החשמליity מהשריר (עם electromyogram (EMG)). פעילות זו מכונית תגובת visceromotor (VMR), והוא מדד אמין, לשחזור של nociception ^10. התנפחות דומה חלולה איבר (למשל שלפוחית ​​השתן, פי הטבעת) במתנדבים אנושיים בריאים מייצרת תחושות של אי נוחות ועליות משמעותיות בכאב דיווח ^11,12, תכונות המשמשות לעתים קרובות כדי לאבחן IC / BPS. וכך, בשילוב עם שיטות חשמליות, תרופתיים, וoptogenetic של גירוי או עיכוב, UBD הוא מודל שימושי ותקף להבנת שני מרכיבי מערכת עצבים ההיקפיים ומרכזיים של nociception שלפוחית ​​השתן וכאב.

כאן, אנו מתארים את ההליך לUBD כמשמש כיום במעבדה שלנו בחברים נשיים של זן העכבר הנפוץ, C57BL/6J. בשל קשיים בתהליך הצנתור של זכרים, הליך זה מבוצע בעיקר בעכברים ממין נקבה. פרוטוקול זה הותאם שמפותח על ידי נס et al. ¹⁰ ושפורסם בעבר מהמעבדה שלנו ^13. הפרוטוקול הבא מתאר ארבעה מרכיבים עיקריים של מודל זה בחיות הרדים: (1) קטטר בשלפוחית ​​השתן וניתוח האלקטרודה הקלטה (2) אינדוקציה הרדמה חלקית (3) התנפחות שלפוחית ​​השתן והקלטת VMR, ו (4) ניתוח נתונים של עקבות VMR / EMG גלם . הבדלים דקים בהליך UBD-VMR בשל בחירה של האורגניזם, עומק הרדמה ואינדוקציה, וטמפרטורת גוף הם דנו בהמשך.

פרוטוקול

הפרוטוקול הבא כבר אושר על ידי הוועדה המוסדית טיפול בבעלי חיים ושימוש באוניברסיטת Duquesne ועולה בקנה אחד עם הנחיות מהמכון הלאומי לבריאות.

1. השתלה כירורגית של חוט אלקטרודות ושתן בשלפוחית ​​השתן צנתר באמצעות טכניקות ועיקור (זמן כולל דקות 5-10)

1. צריכים להיות מוכנים הפריטים הבאים לפני הניתוח מתחיל:
   1. פעיל לנטר ולהתאים את טמפרטורת גוף ל37.5 ± 0.5 מעלות צלזיוס באמצעות מערכת ניטור טמפרטורה עם כרית חימום הפועל על סוללות ובדיקת טמפרטורת גוף של בעלי חיים (חומרי רשימה) חבר מערכת אוטומטית למנורת חום בהספק נמוך לבקרה נוספת של טמפרטורת גוף.
   2. הציוד הדרוש להרדמת isoflurane כולל אוויר דחוס מערכת פליטה (100% O לדוגמא _2), מאדה isoflurane, isoflurane, חדר האינדוקציה isoflurane (למציאה ראשונית), חרטום, ו.
   3. להרכיב הדואר מכשירים ראויים כירורגית, קטטר IV, ואלקטרודות (חומרי רשימה)
2. לגרום למדינת הרדמה בחדר אינדוקציה בisoflurane 2-3%. הסר את העכבר מחדר כאשר רפלקס ליישר הולך לאיבוד (0-1 דק ').
3. מקם את עכבר בחרטום עם isoflurane 2-2.5%. קמצוץ הבוהן כדי לבדוק עבור הרדמה מלאה. לא צריך להיות שום תגובה מבעלי החיים. התחל טיימר.
4. הנח 1 טיפה של משחת עיניים בכל עין של עכבר.
5. הפעל עכבר מעל כל כך בצד הגבי פונה כלפי מטה.
6. הכנס קטטר דרך שופכה ולתוך שלפוחית ​​השתן.
7. טובלים קטטר בסיכה כירורגית כדי לשמן קטטר.
   1. צמד בעדינות את פתח שופכה עם מלקחיים מחודדים בניצב לגופו של בעל החיים. מחזיק קטטר עם סט 2 ^nd של מלקחיים, בעדינות להכניס סוף קטטר לתוך שופכה בזווית המאונכת לגופו של בעל החיים.
   2. כאשר צנתר הושקע שופכה ~ 1-2 מ"מ, בעדינות להתאים קטטר כך שהוא עכשיו במקביל לגוףמכוון לכיוון הראש. תנועה זו היא הכרחית כדי למנוע את עצם הערווה.
   3. דחף בעדינות קטטר לכיוון גופו של העכבר. קטטר צריך להחליק אל תוך חלל הגוף בצורה חלקה וללא התנגדות. אל תכריח את הקטטר. אם הצנתר לא נכנס בצורה חלקה, לחזור למצב קטטר בניצב ולהתחיל שוב.
   4. עם קטטר מוכנס באופן מלא בשלפוחית ​​השתן, בעדינות לדחוף למטה על הבטן של העכבר כדי לגרש את תכולת שלפוחית ​​השתן. הסר את כל השתן מצנתר על ידי דחיפת חתיכה קטנה של נייר מגבת לפתיחת קטטר. כאשר מגבת נייר ספוגה בשתן, להחליף. הסר את השתן ברציפות לאורך הפרוטוקול שנותר ביניהם במהלך ניסויי התנפחות שלפוחית ​​השתן (ראה פרוטוקול 3 להלן).
8. הכנס את שני חוטי כסף לשרירי בטן על ימין ועל חוט כסף אחד לחזה (כקרקע.)
   1. ישתמש באלכוהול או יוד לחיטוי לרוחב שטח מהימין לקטטר (בצד השמאל של החיה של גוף.)
   2. לחשוף את השרירים בטן שמאלי.
      1. החזק את העור ליד שרירים בטן נשארים עם מלקחיים. לעשות חתך 1-2 סנטימטר קטן עם מספריים כירורגיות בינוניים.
      2. הכנס קצה של מספריים לתוך חתך וחתך בעדינות להרחיב עד 2 סנטימטר.
      3. שימוש במלקחיים להעביר fascia שמעליה לחשוף את השרירים בטן אלכסוניים מעולים. היזהר שלא לחתוך / לקרוע כל של כלי דם הגדולים הנמצאים באזור זה.
   3. כופפו את שלושה חוטי כסף במחצית. השתמש במחט 21 G חד לקחת ביס קטן של השריר. ואז, לדחוף את המחט דרך שריר. בעת הכנסה בשריר להיזהר לא לנקב כל איברים פנימיים או לגרום נזק מיותר לשריר.
   4. היצמד קצה חופשי של חוט כסף אחד לפתיחת 21 מחט G. משוך בעדינות מחט בחזרה דרך השריר לצייר חוט הכסף באמצעות עקיצת השריר. כאשר המחט היא ללא שרירים, משוך בעדינות חוט כסף דרך שרירים עד ללולאה בחוט היא מיושר עםביס שריר.
   5. חזור על שלבים 1.7.3-1.7.4 לחוט שריר שני. חוט זה צריך להיות ממוקם ~ 0.5 סנטימטר מחוט השריר הראשון. חשוב ששני חוטים לא לגעת לאחר כניסה.
   6. הכנס את החוט השלישי הכסף (קרקע) בחזהו הנחותה ללב.
      1. השתמש במחט 21 G חד לקחת ביס קטן של עור (אין צורך לעשות חתך או לגלח את העור) ולדחוף את המחט דרך העור.
      2. הכנס חוט כסף כפי שתואר לעיל ולמשוך דרך עור.
9. מניחים כמות קטנה של שמן מינרלי 37.5 סטרילי ° C מעל השרירים החשופים כדי לשמור עליהם לחים ולמשוך את העור מעל שרירים כנחשפו עד כמה שניתן.
10. הזרק 0.5 מיליליטר תמיסת מלח תת עורי כדי לעזור לשמור על רמות נוזלים במהלך השלבים הבאים.
11. בעדינות מגלגל את בעלי חיים על צד כך שאפשר לקיים בקלות בטמפרטורת גוף.

2. נוהל שלב למטה הרדמה החלקית (טוטהזמן l ~ 75 דקות)

פרוטוקול ההרדמה הבאה כבר אושר על ידי הוועדה המוסדית טיפול בבעלי חיים ושימוש באוניברסיטת Duquesne ועולה בקנה אחד עם הנחיות מהמכון הלאומי לבריאות.

1. מייד לאחר החלק הראשון (למעלה) הוא מוחלט, isoflurane הנמוך ל1.5%. החזק ברמה זו במשך 15 דקות.
2. isoflurane נמוך יותר כך שבעלי החיים הוא מורדמים באופן חלקי.
   1. isoflurane נמוך יותר על ידי 0.125% כל 15 דקות עד תערוכות בעלי חיים תגובת כיפוף לקמצוץ הבוהן אבל לא להשמיע או אחר לזוז.
   2. בדרך כלל, ברמה של isoflurane .8-1.0% היא אופטימלית, עם זאת רמות יכולות להשתנות בשל הבדלים בהגדרות הרדמה. ניקוד ו / או ניידות הם אירועים נדירים ביותר, כאשר הרדמה היא ברמה הנאותה.

. 3 electromyogram הקלטה (EMG) בשלפוחית ​​שתן נפוח עם לחצים מדורגים (15-75 מ"מ כספית) (זמן כולל - משתנים בהתאם לניסוי)

1. הגדרת הפריטים הבאים עבור הקלטת EMG והתנפחות שלפוחית ​​השתן:
   1. התקנת מגבר, digitizer, ותוכנת צריבה. בהגדרה זו, יש digitizer קלט אחד למגבר ושתי כניסות לוסת לחץ (בלחץ ותשומות סמן גירוי, ראה להלן סעיף 3.1.2). התקנת חומרה ותוכנה מדויקת להתאמה אישית (ראה חומרי רשימה להוראות ספציפיות).
   2. התקנת מערכת כדי לספק פרצים מסוימים של לחץ אוויר לבעלי חיים. מערכת זו מכונות "וסת לחץ מתוזמן" בפרוטוקול הבא. היא מאפשרת משלוח לחץ אוטומטי כוללים דיגיטציה של לחץ אוויר, שליטה על אורך משפט, אוטומציה מרווח בין משפט, שליטה של מספר משפט, וגירוי אותות דיגיטליים תחילת (ראה Anderson et al. ¹⁴ לסכמטי של וסת לחץ מתוזמן).
2. לחבר את כל החוטים להוביל מעכבר (2 חוטי בטן + חוט קרקע 1) למגבר וdigitizer ולהתחיל אות EMG הקלטה בתוכנת digitizer. שים לב באיזו שעה "כתיבה" נבחר בתוכנת digitizer.
3. הסר את מגבת נייר מצנתר בשלפוחית ​​השתן. חבר קטטר לצינור אוויר (מוסת לחץ מתוזמן.)
4. לספק משפט 20 שניות בודדות בלחץ התנפחות mmHg 60.
   1. הגדר את זרימת הרגולטור 60 מ"מ כספית (בדיקת לחץ באמצעות מד לחץ דם אנלוגי.)
   2. הגדר את וסת לחץ מתוזמן כדי לספק מרווח prepressure 20 שניות (זה יהיה אות גירוי 2V נרשמה בתוכנת digitizer) ואחריו דופק התנפחות לחץ 20 שניות.
   3. להתחיל את הניסוי (מרווח prepressure + משפט התנפחות לחץ). כאשר ניסוי הלחץ הממשי מתחיל, בדוק את הלחץ באמצעות 3 sphygmomanometers מחובר למערכת.
   4. במהלך משפט התנפחות לחץ, איתות חזקה EMG (> 0.5 V) יש לשים לב במהלך ואולי אחרי התנפחות שניות 20. בעלי החיים עשויים להפגין abdomiתנועת nal אבל החיה לא צריכה להשמיע או אחרת לזוז. אמנם נדיר, אם תנועות או קולות חריגים הם נצפו, להעלות את רמת isoflurane.
5. אם התנפחות mmHg 1 ^st 60 מייצרת אות מתאימה EMG, חזור על שלב 3.4 עוד פעמיים עם מרווח של 1-2 intertrial דקות.
6. עם קבלת אותות חזקים משלושת 60 mmHg הניסויים, לבצע distentions הניסיוני.
   1. מחקרים רבים משתמשים התמתחויות מדורגות מתחילים בלחץ נמוך (10-15 מ"מ כספית) ועובדים עד לחצים רעילים (75-80 מ"מ כספית) במרווחים של 10-15 מ"מ כספית. ראה תוצאות נציג מתחת לעקבות דוגמא בלחצים שונים.
   2. ניסויים אופייניים כוללים מרווח 20 prepressure שניות, משפט התנפחות לחץ 20 שניות, ומרווח intertrial 1-2 דקות.
   3. בצע שלוש distentions בכל לחץ ולאחר מכן בממוצע על פני שלושה הניסויים (להשיג תגובת visceromotor בודדת עבור כל לחץ). בשיטה חלופית, עמ 'erform חמש התמתחויות בכל לחץ, לבטל את הניסויים גבוהים ונמוכים, ולאחר מכן בממוצע שלוש התגובות שנותרו.
7. התמתחויות ברגע שניסוי הושלמו, לעצור את ההקלטה, שמור את קובץ הניסוי, ולהקריב בעלי חיים תוך שימוש בשיטות שאושרו.

4. ניתוח של עקבות הגלם EMG

1. ניתוח של תגובות visceromotor (כלומר הקלטות EMG) בקלות לעשות זאת באמצעות תוכנת digitizer ב-Board או באמצעות תכנית של צד שלישי (חומרי רשימה) ההוראות הבאות הן הוראות כלליות שיכול לשמש לניתוח נתונים זה באמצעות מספר רב של תוכניות או באמצעות ניתוח ידני .
2. כדי לייצא EMG, לחץ, ונתונים אות גירוי מתוכנה digitizer בצעו את הפעולות הבאות:
   1. פתח את קובץ ניסיוני.
   2. לחץ על "קובץ", "יצוא כ".
   3. לשנות את סוג הקובץ ל" טקסט גיליון אלקטרוני (. Txt), "שם הקובץ ולחץ על" שמור ".
   4. בפוחלון p-up, לשנות את קצב דגימת פלט "1000," לשנות את שעת ההתחלה לאיסוף נתונים הרגע החל ולשנות את שעת הסיום ל" MaxTime (). "בחר בתיבת סימון" פלט שינוי בזמן כל כך השורה הראשונה היא 0.0 שניות ", ולחץ על" אישור ".
   5. נתוני החברה לייצא כקובץ טקסט שניתן לפתוח במגוון רחב של תוכניות. הקובץ צריך להכיל ארבעה עמודים (טיימר, VMR (EMG), לחץ, Stimulus).
3. לכל חיה ניסיונית נבדקה, לבצע הפעולות מתמטיות הבאות.
   1. לתקן אות EMG לנתונים כל שנקבעו על ידי חישוב הערך המוחלט של כל נקודת זמן.
   2. לקבוע את תגובת EMG הממוצעת בסעיף הרקע של הניסוי.
   3. לחסר תגובה זו ממוצעת רקע EMG מכל נקודת נתונים לתקן בניסוי כדי להשיג את סט הנתונים המתוקן רקע.
   4. קבע את השטח מתחת לעקומה (AUC) עבור כל מראש 20 שניותמרווח לחץ בערכת נתונים המתוקן הרקע.
   5. לקבוע את AUC עבור כל ניסוי התנפחות לחץ 20 שניות בערכת נתונים מתוקנות הרקע.
   6. מחלקים כל AUC נפיחות בלחץ המשפט (שהושג בשלב 4.3.5) על ידי מרווח prepressure הנמוך ביותר AUC מהניסוי כולו (שהושג בשלב 4.3.4.). זהו AUC תיקן המנורמל ורקע לכל ניסוי התנפחות לחץ מלא.
4. לכל חיה ניסיונית, ניסויים מנורמלים מספר ממוצע מלחץ יחיד להשיג VMR המנורמל בוולט * שניות (Vsec).
5. בצע את הסטטיסטיקה המתאימה על הנתונים בהתאם לעיצוב ניסיוני.

תוצאות

איור של התקנת UBD-VMR הכולל שניתן לראות באיור 1 א. צעדי לחץ גובר לגרום לעלייה בVMR הגלם (כלומר EMG) (איור 1). VMR הגלם, לחץ, ואות סמן גירוי שיש לשים לב במהלך ההקלטה באמצעות תוכנת digitizer ניתן לראות באיור 2. הערוץ העליון ראה ב איור 2 הוא עקבות EMG (בV). אות הרקע של עקבות EMG צריכה להיות יציבה ומשרעת נמוכים (<0.2 V). אם הרקע הוא גבוה או מכיל קוצים גדולים ספורדי (> 0.5 V) החוטים והגדרות מגבר אולי צרי...

דיון

בבני אדם, תסמונת כאב דלקת שלפוחית ​​השתן / שלפוחית ​​השתן interstitial (IC / BPS) מהווה בעיה קלינית משמעותית, כי חולי כאב מתישים כי היא לעתים קרובות אינו מגיב לטיפול בכאב רגיל ^15. אחד האתגרים המרכזיים בהבנה ובסופו של דבר טיפול בכאב כרוני בשלפוחית ​​השתן הוא להבין את התהליכים עצביים הרגילים שמעורבים בתגובה להתנפחות שלפוחית ​​השתן רעיל. על מנת להתגבר על האתגר הזה, מודל חיה של כאבים בשלפוחית ​​השתן הוא הכרחי. מודל זה צריך להיות לשחזור, יציב, בקלות ובנמדד. למרבה המזל, נס וע...

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
שמיכת חימום אינפרא אדום ומערכת ניטור	Kent Scientific	Right-Temp System	מערכת זו מוגדרת לניטור שתי טמפרטורות נפרדות. זה צריך לכלול את החיה ואת שמיכת החימום.  בנוסף, המערכת יכולה להתאים אוטומטית את הטמפרטורה כדי לשמור על טמפ' מוגדרת. עם זאת, פונקציה אוטומטית זו מייצרת הפרעות חשמליות במהלך הקלטת EMG ויש לכבות אותה. קנט יכול לספק מארז סוללות לכרית החימום לשימוש במהלך חלק הקלטת ה-riEMG של הניסוי.
וופורייזר איזופלורן	Draeger	Vapor 19.1	כל מכשיר אידוי איזופלורן יעבוד, אבל כדאי שיהיה אחד שיש לו מספר חריצים בין 0-2% איזופלורן.
איזופלורן	מקורות מרובים	n/a
100% מיכל אוויר חמצן	מקורות מרובים	n/a	לאוורור של בעלי חיים
אוויר בדרגת נשימה	מקורות מרובים	n/a	להתרחבות שלפוחית השתן
24 גרם 0.56 בצנתר IV	BD Biosciences	381411	לצנתור שלפוחית השתן
Surgilube (סטרילי)	Savage Laboratories	0281-0205-02	כל סיכה בדרגה כירורגית תעבוד מצוין.
שמן מינרלי (סטרילי)	מקורות מרובים	n/a
מי מלח (סטריליים)	מקורות מרובים	n/a
חוט כסף AG8W, 2 מ', 0.20 מ"מ (0.008 אינץ') D, L, ללא בידוד	וורנר אינסטרומנטס	W4 64-1318	כל חוט כסף עם מפרט זה יעבוד.  חוט לא צריך להיות "כלור"."
משחת עיניים	מקורות מרובים	n/a
מספריים כירורגיים קטנים	מקורות מרובים	n/a
מלקחיים חדים	מקורות מרובים	n/a
21 G מחט	מקורות מרובים	n/a
מגבר דשא P511 עם כבל כניסה 3 עופרת	מכשירי דשא	P511 ( F-P5IC3/REV1)	זהו ה"מגבר" המשמש בפרוטוקול.  מגבר עם ההגדרות הבאות: כיול = 1 mV; תדירות נמוכה = 300 הרץ; הגברה = 20; תדר היי = 10 קילו-הרץ; מסנן קו = in.
קיימברידג' עיצוב אלקטרוני (CED) 1401 פלוס (או שווה ערך)	קיימברידג' עיצוב אלקטרוני	1401 פלוס	זהו ה"דיגיטייזר" המשמש בפרוטוקול.  מערכות דיגיטייזר אחרות של WINDAQ או חברות אחרות יעבדו מצוין; זקוק לכניסות עבור אות לחץ, EMG ואות גירוי.
תוכנת CED Spike2	Cambridge Electronic Design	Spike 2	זוהי "תוכנת הדיגיטייזר" המשמשת בפרוטוקול. צריך להיות מאותו יצרן כמו digitizer.  יש להגדיר את התוכנית עם 3 ערוצים ללחץ (סולם 0-100 מ"מ כספית), אות EMG (בדרך כלל טווח -5 עד +5 וולט) וטווח סמן גירוי (0-2 וולט).
תרשים זרימה ממיכל אוויר לצנתר שלפוחית השתן	n/a	n/a	רצף חיבורים ממיכל אוויר בלחץ לשלפוחית השתן של בעלי חיים:  מיכל אוויר ל-1/4 בצינורות למד זרימה של גילמונט למחבר y.  ענף 1 של מחבר y למד לחץ דם.  הסתעפות 2 לכניסה בודדת על שסתום הכנופיה 4 כיווני לפלט שסתום 4 כיווני לווסת הלחץ המתוזמן לצינורות 3/32 מווסת לחץ מתוזמן למחבר y 2 (ענף 1 למד לחץ דם) עם צינורות ענף 2 עד 3/32   למחבר Y שלישי.  ענף 1 של y מחבר למד לחץ דם שלישי וענף 2 לצנתר שלפוחית השתן של בעלי חיים.
מד זרימה של גילמונט	Gilmont	GF8321-1401	מספר מותגים של מדי זרימה יעבדו.  עבור אוויר התרחבות שלפוחית השתן, מד הזרימה אמור להיות מסוגל להתמודד עם לחצים גבוהים (כגון מד גילמונט זה).  לנשימת אוויר, קצב הזרימה צריך להיות מתכוונן עד 100 מ"ל/דקה (קצב העכבר הטיפוסי הוא 500-1,000 מ"ל/דקה).
שסתום כנופיה 4 כיווני	עלית		זהו ציוד ספציפי.  שסתום כנופיית עלית מיועד למיכלי דגים בלחץ אוויר נמוך.  במערך התרחבות שלפוחית השתן, שסתום זה משמש כשסתומי בטיחות למקרה שהלחץ יעלה. לחץ גבוה מדי במהלך ההפעלה הראשונית של המיכל יהרוס את מתמר הלחץ בווסת הלחץ המתוזמן ו/או את מדי לחץ הלחץ בנוסף, על ידי מתן כמות קטנה של דליפה במערכת, שסתום זה מקל על התאמת הלחץ בין 10-80 מ"מ כספית.
1/4 בצינורות	מקורות מרובים	n/a
3/32 אינץ' צינורות	מקורות מרובים	n/a
" מחברים (1/4 ו-3/32 אינץ')	מקורות מרובים	n/a
מד לחץ דם	CVS		כל מד לחץ דם אנלוגי מבית מרקחת יעבוד עבור יישום זה.
ווסת לחץ מתוזמן	מותאם אישית		זוהי מכונה שנבנתה בהתאמה אישית (חנות מכונות של אוניברסיטת וושינגטון בסנט לואיס) המאפשרת אספקת לחץ אוטומטית כולל דיגיטציה של לחץ אוויר, בקרה על אורך הניסוי, אוטומציה של מרווחים בין ניסויים, שליטה במספר הניסיון ואות דיגיטלי של תחילת גירוי. עם זאת, ניתן לשלוט ברכיבים הבסיסיים של המערכת (לחץ הפעלה וכיבוי לתקופת ניסיון נתונה) באמצעות מתג הפעלה/כיבוי פשוט ברשת.   בקרה אנלוגית כזו של ניסוי תחייב פרמטרי ניתוח נוספים (ראה פרוטוקול 4). בנוסף, יהיה צורך להקצות ידנית את הלחץ על סמך מד לחץ הדם האנלוגי במהלך ניתוח הנתונים.
IGOR Pro	Wavemetrics	n/a	לניתוח אות EMG. ניתן להשתמש בסוגים רבים ושונים של תוכנות לניתוח נתונים בניסויים אלה.