למרות שמודל ידוע, שפן הניסיונות כיום מייצגים נישה במדעי בעלי חיים ניסיוניים ונתונים מוגבלים נגיש בביצוע של רוב ההליכים. כאן אנו מציגים ארבע גישות שונות למי שאינו מסוף בטכניקות דגימת דם vivo באו חזירי ים מודעים או מורדם.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
במאמר זה
סיכום
תקציר
גינאה חזירים יש כמה קווי דמיון ביולוגיים לבני אדם והן תוקפים מודלים של בעלי חיים ניסיוניים 1-3. עם זאת, השימוש בחזירי ים מהווה כיום אזור צר יחסי של נתוני מחקר ותיאורים על מתודולוגיה מסוימת היא בהתאמה נדירה. התכונות האנטומי של שרקנים שונות מעט ממודלים של מכרסמים אחרים, ומכאן אפנון של טכניקות דגימה כדי להתאים להבדלי מינים ספציפיים, למשל., בהשוואה לעכברים וחולדות, נחוצים כדי להשיג דגימות באיכות מספקות וגבוהות. כשני לטווח הארוך וקצר במחקרי vivo לעתים קרובות דורש חוזר ונשנה דם דגימת הבחירה של טכניקה יש לשקול היטב על מנת להפחית את הלחץ ואי נוחות בבעלי החיים, אלא גם כדי להבטיח את הישרדות, כמו גם עמידה בדרישות של גודל מדגם ונגישות. ניתן להשיג דגימות דם ורידים במספר האתרים בשרקנים למשל., saphenous וצווארורידים, כל טכניקה המכילה את שני יתרונות וחסרונות 4,5. כאן, אנו מציגים ארבע טכניקות דגימת דם שונות לאו חזירי ים מודעים או מורדם. הנהלים כל הנהלים שאינם המסוף ובלבד שכרכי המדגם ומספר הדגימות לא יעלו על הנחיות לאיסוף דם בחיות מעבדה 6. כל השיטות שתוארו נבדקו ביסודיות והגישו בקשה לחזרו בדגימת דם vivo במחקרים בתוך מתקן המחקר שלנו.
מבוא
שפן הניסיונות הוא מודל חיה ניסיוני יקר ומאומתים בשל מספר קווי דמיון ביולוגי לבני אדם כגון דרישה לאספקה תזונתית של ויטמין C, ליפופרוטאין פלזמה הדומה חילוף חומרים של אנזימים ופרופילי ליפופרוטאין, כמו גם קווי דמיון משותפים עם placentation ואנושי פיתוח טרום לידתי 1-3,7,8. זה הופך את חזיר ים מודל אטרקטיבי ומתאים ללימוד השפעות של מחלות הקשורות דיאטה כגון מחלת שאינה אלכוהוליים כבד שומני, מחלות לב וכלי דם והשפעות המשוערות של מחסור בויטמין C, אלא גם את ההשפעה של לדוגמא., התערבות תזונתית אימהית על הפיתוח צאצאים.
דגימת דם חוזרת נדרשה לעתים קרובות בש....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
הנהלים מוצגים בוצעו על פי פרוטוקולים שאושרו על ידי הדני לניסויים בבע"ח הפקוח תחת משרד המזון, החקלאות והדיג.
.1 דגימת דם מsaphenous לרוחב או Tarsal הווריד
- לבצע הליך זה ללא הרדמה ואת עזרתו של חוקר אחד, אחד טיפול שפן הניסיונות, ואחד איסוף הדגימה.
- לגלח את אזור הקרסול של הרגל האחורית עם מכונת גילוח חשמלי עד שהוורידים גלויים. ודא האזור הוא גדול מספיק כדי להימנע מפרווה מפריעה לאתר לנקב.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
ארבע גישות שונות בטכניקות דגימת דם שאינו מסוף vivo באו חזירי ים מודעים או מורדם הוצגו. איור 1 מדגים את מהלך saphenous לרוחב ווריד קרסול בפן הניסיונות והאתרים לנקב אפשריים. ורידי אוזן גלויים על פני השטח הגבי של אוזן חזיר ים הם באיור 2 ורידים אלה יכולים לשמש לדגימת דם כאשר נדרש רק נפח קטן מאוד. עמדתו של פן הניסיונות לדגימת דם הצוואר היא מופע באיור 3. במהלך וריד הצוואר בא לידי ביטוי בחיצים עם החץ מצביע העליון באתר ל.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
בהשוואה לעכברים וחולדות, חזירי ים חוששים ידי הטבע ויש לגשת בשלווה ולטפל בו כראוי על מנת להפחית את הלחץ. מנקודת מבט של רווחת בעלי חיים, הפועלות בזהירות הוא באופן טבעי בראש סדר עדיפויות; עם זאת, זה יהיה גם להפחית את הסיכון לתופעות הקשורים חרדה בלמשל הנתונים שנאסף., רמות דם מוגברות של סטרואידים וגלוקוז 12. כמו כן, טיפול יומי יהיה להרגיל את החיות לנהלים רגילים ויכול לשמש כדי להפחית את הלחץ עוד יותר. מומחיות מעשית בטכניקת דגימת דם מסוימת צריכה להיות שנרכש על ידי ההת.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
יש לי המחברים אין לחשוף. כל ההליכים אושרו על ידי הניסויים בבעלי חי החוק של דנמרק, אשר הנו בהתאם למועצת אירופה אמנת ETS 123.
תודות
אנו מכירים בסיוע המיומן של אנני ב 'Kristensen, אליזבת V. אנדרסן, לינדה ב' Bringtoft ומטפלים בבעלי החיים במחלקה לרפואה ניסויית, קמפוס פרדריקסברג, הפקולטה לבריאות ומדעי רפואה, אוניברסיטת קופנהגן, דנמרק. יעקב Lønholdt הוא הודה לקבלת הסיוע הטכני מצוין שלו בצילומי הנהלים. מחקר זה נתמך בחלקו על ידי מרכז LIFEPHARM לin vivo פרמקולוגיה ואוניברסיטת קופנהגן.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| מכונת גילוח חשמלית | Wella (קונטורה), דנמרק | 273207 | ניתן להשתמש במוצר חלופי. מזרקים מרובי ספקים |
| B.Braun-Omnifix-F, גרמניה | 9161406V | ניתן להשתמש במוצר חלופי. מספר ספקים | |
| מחטים | BD Microlance, ספרד | 301156 | ניתן להשתמש במוצר חלופי. ספקים מרובים |
| צינור איסוף Microvette | Sarstedt, D-51588Nü mbrecht, גרמניה | 201,288,100 | ניתן להשתמש במוצר חלופי. מספר ספקים |
| מנתח Accu-Check | Roche A/S Diagnostics, דנמרק | ניתן להשתמש במוצר חלופי. ניתן להשתמש במספר ספקים | |
| Heparin 5000 IE/ml | LEO Pharma, דנמרק | ניתן להשתמש במוצר חלופי. מספר ספקים | |
| הרדמה | Zoletil 50, Chemvet, דנמרק | ניתן להשתמש במוצר חלופי. ספקים מרובים | |
| הרדמה | נרקוקסיל וטרינר 20 מ"ג / מ"ל, Intervet, דנמרק | ניתן להשתמש במוצר חלופי. ספקים מרובים | |
| הרדמה | טורבוגסיק וטרינר 10 מ"ג / מ"ל, Scanvet, דנמרק | ניתן להשתמש במוצר חלופי. מספר ספקים | |
| עיניים ניטרלית | ניתן להשתמש במוצר חלופי. ספקים מרובים | ||
| גזה או צמר גפן | ניתן להשתמש במוצר חלופי. מספר ספקים | ||
| חומר חיטוי (70% אלכוהול) | ניתן להשתמש במוצר חלופי. ספקים מרובים |
מקורות
- DeOgburn, R., et al. Effects of increased dietary cholesterol with carbohydrate restriction on hepatic lipid metabolism in Guinea pigs. Comp.Med. 62 (2), 109-115 (2012).
- Fernandez, M., Volek, J. S.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
