הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

כלי דם בלון פגיעה וIntraluminal מנהל בעורקי תרדמת העכברוש

16.5K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/52045

⸱

23 בדצמבר 2014

 , 
1Nanobioscience, State University of New York College of Nanoscale Science and Engineering (SUNY CNSE)

במאמר זה

סיכום

פרוטוקול זה משתמש קטטר בלון כדי לגרום לפציעה intraluminal על העורק הראשי חולדה ולהלן לעורר hyperplasia neointimal. זהו מודל מבוסס היטב לחקר המנגנונים של שיפוץ של כלי דם בתגובה לפציעה. כמו כן הוא משמש באופן נרחב כדי לקבוע את תוקפו של גישות טיפוליות פוטנציאליות.

תקציר

מודל פציעת בלון העורק הראשי בחולדות כבר מבוסס היטב במשך למעלה משני עשורים. הוא נשאר שיטה חשובה ללמוד את המנגנונים המולקולריים ותאיים מעורבים בdedifferentiation כלי דם שרירים חלק, היווצרות neointima ושיפוץ של כלי דם. Sprague-Dawley חולדות זכרי חיות המועסקות בתדירות הגבוהה ביותר עבור דגם זה. חולדות נקבות לא העדיפו כהורמונים נשיים הם מגן מפני מחלות כלי דם ובכך להציג את וריאציה להליך זה. התרדמה עזבה נפגעה בדרך כלל עם התרדמה תקין המשרתת כביקורת שלילית. פציעת הצוואר עזב נגרמת על ידי הבלון המנופח שdenudes האנדותל ולהתנפח של קיר הכלי. בעקבות פציעה, ניתן להעריך אסטרטגיות טיפוליות פוטנציאליות כגון שימוש בתרכובות תרופתיות ובין אם גן או העברת shRNA. בדרך כלל לגן או העברת shRNA, הסעיף נפצע בלומן הכלי הוא transduced מקומי למשך 30 דקות עם vחלקיקי iral קידוד או חלבון או shRNA למסירה וביטוי בדפנות כלי הדם שנפגעו. עיבוי Neointimal מייצג תאי שריר שגשוג של כלי דם חלקים בדרך כלל מגיע לשיא בשבועות 2 לאחר פציעה. כלי בעיקר נקצרים בנקודת זמן לניתוח תאי ומולקולרי של מסלולי איתות תא, כמו גם ביטוי גנים וחלבונים זה. יכולים גם להיות שנקטפו כלי בנקודות זמן קודמים על מנת לקבוע את התחלתה של ביטוי ו / או הפעלה של חלבון או מסלול ספציפי, בהתאם למטרות הניסיוניות נועדו. ניתן לאפיין כלים והוערכו באמצעות צביעה היסטולוגית, אימונוהיסטוכימיה, מבחני החלבון / mRNA, ומבחני פעילות. עורק התרדמה הימני שלם מאותו בעל החיים הוא בקרה פנימית אידיאלית. מושרה פציעת שינויים בפרמטרים מולקולריים ותאיים יכולים להיות מוערכים על ידי השוואת העורק נפצע בעורק השליטה תקין הפנימי. כמו כן, ניתן להעריך שיטות טיפוליות על ידי השוואה פוצעתעורק ד והתייחס לשליטה נפצע עורק בלבד.

מבוא

צנתרים בלון הם מכשירים רפואיים, המשמשים בהליך של צנתור, במטרה להרחיב את האתר חסום (ים) של טרשת או פקיק בכלי דם. לומן הכלי הצטמצם נאלץ לפתוח על ידי הבלון המנופח ואספקת דם תוחזר ברצף כדי להקל על תסמיני איסכמיה במורד הזרם, כגון אנגינה, אוטם שריר לב, וכאבי רגליים. עם זאת, ההצלחה הגדולה של אנגיופלסטיקה כבר פחתה בסיבוכים שלאחר ניתוח, כגון תוצאות מכוח גורמות בארוטראומה כלי דם (פגיעת בלון), כלומר קיר כלי שיפוץ ובמקרים רבים מחדש היצרות של לומן הכלי (היצרות) 1.

מספר המודלים של בעלי החיים פותחו מחקה את הליך הצנתור כדי לסייע לחוקרים להבין את המנגנונים העומדים בבסיס קיר שיפוץ כלי שיט הקשורים לבלון פציעה 2. בין כל המינים של בעלי החיים המשמשים לדוגמנות, עכברוש הוא אחד נפוץ ביותר בשימוש. Compared לארנבים, כלבים וחזירים, היתרונות של חולדות הם עלותם הנמוכה, הקלות היחסית שלהם שימוש והידע הנוכחי של פיזיולוגיה חולדה. למרות שיש לי עכברי יתרון נוסף במגוון רחב של זני מניפולציות גנטיים, כלי העכברים קטנים מדי כדי להכניס צנתר בלון. במהלך שלושת העשורים האחרונים, חולדות ניסוי אפשרו לחוקרים להגיע להבנה טובה יותר של המנגנונים המולקולריים ותאיים בבסיס היווצרות neointima וכלי דם שיפוץ 3-6. מעבר לפגיעה בבלון, שיפוץ כלי דם גם מעורב ברוב המחלות של כלי דם גדולים, כגון טרשת עורקים 7,8, יתר לחץ דם 9, ופרצת 10. כך, ידע שנרכש באמצעות מודל פציעת בלון הוא באופן כללי מועיל למחקרי קיר מחלת כלי דם הכוללים.

המטרה הכללית של מודל פציעת בלון העכברוש היא לא רק להבין נוסף מחלות כלי דם, אלא גם כדי לבדוק את העוצמה של סוכנים חדשים לבקרת מחלות 11,12. טיפול תרופתי קליני נוכחי להיצרות מוחל על ידי סטנטים משחררי תרופה הונחו באמצעות לומן הכלי מייד לאחר אנגיופלסטיקה. במודלים של בעלי חיים, יעיל עדיין חסכוני יותר בדרך לבדיקת סוכן חדשה היא שיטת זלוף intraluminal מפותחת מקומית. סוכני מועמד שנבדקו באמצעות שיטה זו כוללים תרופות מולקולה קטנות 13,14, ציטוקינים או צמיחת גורמי 15,16, סוכני גן מניפולציה (שיבוטים cDNA, siRNA, וכו ') 17-20, ופורמולציות תרופות רומן 21,22.

עד כה, מודל פציעת בלון העכברוש נשאר אחד המודלים השימושיים ביותר ללימוד מחלות / הפרעות של כלי דם. זהו הצעד המהותי מספסל לצד המיטה, בדרך כלל כצעד הראשון עובר במבחנה לin vivo, אבל זה לא צריך להיות אחרון. התוצאה של ניסויים בעכברים צריכה להיות נדונה ועוד מאופיין לפני התרגום לאדםשימוש קליני, בשל ההבדל במיטות כלי דם וכלי האנטומיה כמו גם הבדלים המהותיים בין מינים אנושיים והעכברוש 23-26. עם זאת, הוא עדיין כלי חיוני במחקר רפואי translational. בעוד מחקר כזה היה אמור להיות מוגבל על ידי חוסר חולדות מהונדסים גנטי, שהוא כבר לא היה בעיה שכן גישות הגנומי רומן כגון אבץ-אצבע nucleases 27, TALENs 28 וCRISPR-קאש 29 עשו חולדות נוקאאוט נגישות בקלות.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

הערה: השימוש בבעלי החיים לניסויים הבאים נבדקה ואושרה על ידי הוועדה המוסדית הטיפול בבעלי חיים והשימוש (IACUC).

1. נהלים לפני ניתוח

  1. לעקר מכשירי ניתוח לפני השימוש.
    1. החיטוי כל מכשירי הניתוח 24 שעות או פחות לפני הניתוח. אם ניתוחים מרובים מבוצעים באותו היום, לעקר את המכשירים על ידי מעקר את חרוז יבש בין ניתוחים.
  2. סנן לעקר את תמיסת מלח לפני השימוש.
  3. לשקול את העכברוש ולחשב את המינון של תרופות הרדמה (קטמין 80 מ"ג / קילוגרם ו -7 מ"ג / קילוגרם xylazine).
  4. לנהל את תרופות הרדמה תוך-peritoneally (IP).
    1. ודא הלימות הרגעה על ידי קמצוץ הבוהן ב5-10 דקות. לנהל מנה קטנה נוספת של תרופות (קטמין 7 מ"ג / קילוגרם ו -0.6 מ"ג / קילוגרם xylazine) אם ההרגעה אינה שלמה.
    2. ודא שהמחט היא עמוקה מספיק לסמים משלוח תוך-לitoneally בגלל כישלון כדי לספק את פתרון סמים כל לתוך חלל הצפק יגרום הרגעה לקויה.
      הערה: כיבים ונשירת שיער בעור במקום ההזרקה יהיו כמה ימים נראים לעין לאחר ניתוח, עקב הזרקה תת עורית פתרון תרופתי (sc) שלא במתכוון.
  5. הזרק 3 מיליליטר תת עורי מלח סטרילית פתרון (sc). באמצעות מקלון צמר גפן סטרילי, למרוח כמות קטנה של משחה עיניים לשני העיניים כדי למנוע את הקרניות מהתייבשות.
  6. הכן את ציוד החימום. רפידות חום טרום חמות על ידי מיקרוגל או אמבט מים.
  7. שים את החיה supinely על הפלטפורמה כירורגית.
    1. להסיר את השיער באזור צוואר הגחון. החל מסיר השיער עם מקלון צמר גפן, לחכות 30 שניות ולנגב לחלוטין עם גזה.
    2. ספוגית הצוואר עם לשפשף Povidone-יוד ו -70% אתנול.
  8. לשים על ציוד מגן אישי, כוללים שמלה, כיסוי שיער, מסכת מנתחים, ומשקפיים. לשים על sterאיל כפפות מנתחים בסוף לפני הטיפול במכשירי ניתוח סטרילי והאספקה.
  9. לעטוף את העכברוש בסדין ניתוח סטרילי עם רק אזור הצוואר החשוף.

2. ניתוחים

  1. במהלך ההליך הכירורגי, לבדוק לעומק הרגעה של בעלי חיים על ידי קמצוץ הבוהן בכל 15 דקות. אם בעל חיים מגיבים לקמצוץ הבוהן, להוסיף מנה קטנה נוספת (10% מהמינון הראשוני) של קטמין וxylazine.
  2. לנתח עורק התרדמה משותף שמאל (CCA)
    1. השתמש באזמל כדי לעשות חתך אורכי ישר באמצע הצוואר. האורך המשוער של חתך בעור הוא 1.5-2 סנטימטר, במטרה לבודד חלק 1.5-2 סנטימטר של עורק. האורך עשוי להשתנות תלוי במטרת המחקר.
    2. בבוטות לנתח את רקמת חיבור של העור. שמור את הטיפים מלקחיים ולוודא שלא לנקב את העור או הרקמה הבסיסית.
    3. לנתח שכבות שרירים longitudinally אלוןז בצד השמאל של קנה הנשימה.
    4. כאשר פותח את שכבת השריר, לדמיין את המרכז לאמנות עכשווית עזב עם העצב התועה המצורף מקרוב. בבוטות לנתח צד עורק התרדמה השמאלי בזהירות רבה כדי להפריד את העצב התועה עם המתיחה מינימאלית.
    5. לנתח CCA distally עד הסתעפות. זהירות לנתח הסתעפות ושני סניפים - עורק התרדמה פנימי (רשפ"ת) ועורק התרדמה חיצוני (ECA).
    6. שמור לנתח סביב המרכז לאמנות העכשווית, עד כ חלק של 1.5-2 סנטימטר של העורק מבודד מהרקמות הסובבות.
  3. פציעת בלון
    1. באופן קבוע לעשות מייתר על ECA בכ 5 מ"מ מהסתעפות. באופן קבוע ולקשור סניף העורפי של ECA המקורב להסתעפות של ECA וICA. כמו כן באופן קבוע ולקשור ענפים אחרים, אם בכלל, איתור בין הסתעפות ומייתר ECA - למשל, הסניף של בלוטת התריס מעולה. תפר שמשמש לכל חיבורי האותיות הוא 4-0 שחורמשי. קליפ על הקצה הפרוקסימלי של המרכז לאמנות עכשווית, ואת הקצה הדיסטלי של ICA.
      הערה: עכשיו, זרימת דם הופסקה באופן קבוע באמצעות קשירה (על ECA) או באופן זמני באמצעות מסיכה (במרכז לאמנות עכשווי ויק"א). תוכן Luminal באזור הסתעפות היה מבודד מהמחזור המערכתי.
    2. עושה חתך arteriotomy על ECA ידי מספריים קטנים-מיקרו. ודא שהחתך קרוב לקשר תפר דיסטלי. דם נקי עם צמר והכותנה מלוח.
    3. הכנס את צנתר בלון 2F תפח לתוך לום ECA. לקדם את צנתר בלון proximally ללום CCA. שמור קידום קטטר proximally עד קצהו מגיע בי קליפ נשאר.
    4. חבר את מכשיר ניפוח בלון למנעול luer נקבה על ברזלים 3-בדרך ולהתחבר מנעול luer הגברי של ברזלים 3-בדרך לקטטר הבלון.
    5. לאט לנפח את הבלון עם כ -1.5 לחץ כספומט, כדי להתנפח העורק הראשי לפי 1.5 מהקוטר.
    6. משוך בעדינות את הבלון rotationally חזרה להסתעפות.
    7. להוציא את האוויר מהבלון ולקדם אותו בחזרה לקצה הפרוקסימלי. לנפח את זה שוב ולחזור על משיכת-גב ההליך עוד פעמיים.
    8. למשוך את צנתר הבלון מלומן העורק.
  4. ממשל Intraluminal של חומרים כימיים (לדוגמא, siRNA, סמים)
    הערה: כאן, מגיב בשימוש הייתה תמיסה המכילה חלקיקי lentiviral קידוד או shRNA מיקוד מולקולת סטרומה אינטראקציה 1 (STIM1) או שליטה ללא מיקוד shRNA. STIM1 הוא חלבון endoplasmic הטרנסממברני יחיד רשתית (ER) שהוא חיישן ER Ca 2 + שליטה ההפעלה של קרום הפלזמה Ca 2 + ערוצים ומוסדרים במהלך dedifferentiation שריר חלק בכלי הדם לפנוטיפ נודד שגשוג 12,30-33.
    1. צרף קטטר מעל למחט תוך-כדי מזרק (24 G, 1.6 סנטימטרים). פתרון 30 μl לשאוב של reag הבדיקותמציג. הכנס את קטטר לתוך אותו החתך בECA.
    2. לקדם את קצה הצנתר לתוך המרכז לאמנות העכשווית ולקשור פיסת התפר עם קשר אחד בECA כדי לתקן את הצנתר ולסגור את החתך באופן זמני.
    3. להזריק את הפתרון מגיב בדיקות ללומן של המרכז לאמנות עכשווית. שמור את הפתרון בלומן הכלי למשך 30 דקות. לשמור על הרקמה החשופה לחים עם מי מלח ולכסות אותו עם פיסת הגזה רטובה.
    4. לאחר דגירה, לשאוב את הפתרון שנותר. שחרר שקשר יחיד ולמשוך את הקטטר.
    5. לקשור את ECA עם פיסת התפר proximally לחתך arteriotomy. הפוך את הקשר הקרוב ככל האפשר להסתעפות.
  5. סגור את הפצע.
    1. מאז פציעת הבלון והכנסת קטטר עלולה לגרום לדליפה או ניקוב כלי הדם, להסיר את הסרטון על ICA ולבדוק אם יש דליפה כלשהי. אם דימום הוא ציין, חל פיסת הגזה ולהפעיל לחץ עדין כדי לעצור את הדימום.
    2. הסרקליפ האחר במרכז לאמנות עכשווי.
    3. ודא שאין סימנים של דימום, ולאחר מכן להסיר את כל המהדקים ומכשירי ניתוח אחרים. חותך את התפרים עודפים.
    4. תפרים לסגור פצע באמצעות עור (4-0 משי שחור). ספוגית על כל הצדדים של הפצע הסגור עם Povidon-יוד או אנטי-ספטי / חיידקים / סוכן virucide אחר. הזרק 3 מיליליטר של תמיסת מלח סטרילית sc

3. נהלים לאחר ניתוח

  1. שמור חולדה על משטח חום לאחר ניתוח. לנהל מנה אחת של 0.05 מ"ג / קילוגרם עצירות באמצעות זריקה תוך שרירית (IM) לחולדה. במהלך הליך ההתאוששות, לשמור את העיניים והפה של בעלי החיים לחים. לפקח על בעלי החיים עד שהוא ער ומהלך.
  2. מניחים את החיה בכלוב נקי ללא כל מצעים עד שהוא התאושש לחלוטין. לאחר התאוששות, בעלי החיים יוחזרו לחדר בעלי החיים ושוכנו בנפרד.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

שבועיים לאחר פציעה, עורקי הראש נקצרים, מחולקים ונתונים לניתוח מורפולוגי. עורקים הם בחתך רוחב ומוכתם עם H & E (איורים 1, 2 ב ', ג' ו -3). קיר עורק התרדמה עכברוש מכיל ארבע שכבות של lamina אלסטי, המופיעות כקווים ורודים. השטח שבין lamina החיצוני ביותר, lamina אלסטי החיצוני (הצלופח) וlamina הפנימי ביותר, lamina הפנימי אלסטי (IEL) הוא שריר השכבה החלקה התקשורת (איור 1). האזור הפנימי של IEL הוא אינטימה, monolayer של תאי האנדותל בכלי ללא פגע; או היפרפל...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

פציעת בלון התרדמה העכברוש תוארה היטב על ידי Tulis בשנת 2007 34. זה כבר נדון באופן מקיף את כל הפרטים של הליך זה על ידי ד"ר Tulis. הקוראים המעוניינים בביצוע הליך זה מומלצים מאוד לקרוא הפרוטוקול 'Tulis. עם זאת, יש דבר אחד שאנחנו לא מסכימים עם ד"ר Tulis: במקום ניפוח הבלון עם מי מלח או כל סוג של נוזל, שהצענו כדי לנפח אותו עם אוויר. על פי הניסיון האישי שלנו, ניפוח עם נוזל בקושי יכול למנוע בועות אוויר. בנוסף, קשה יותר בגמישות כדי להתאים את הלחץ במהלך הליך פציעה ועלול לגרום ללחץ ופגיע...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים פיננסיים מתחרים.

תודות

אנו אסירי תודה לד"ר קלוז על שפיתח ותיאר לראשונה שיטה זו. אנו מודים גם לד"ר טוליס על הפרוטוקול המפורט שלו שעזר באופן מהותי לעבודתנו הקודמת, הנוכחית והעתידית. עבודה זו נתמכה על ידי מענקים R01HL097111 ו-R01HL123364 מה-NIH ל-M.T., ועל ידי מענק 14GRNT18880008 של איגוד הלב האמריקאי ל-M.T.

ברצוננו להודות לרייצ'ל ניוטון על התמיכה הטכנית המקצועית שלה ועל עזרתה רבת הערך בתהליך הצילומים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
קטטרים לכריתת בלון פוגארטי, 2 צרפתיים Edwards Lifesciences, גרמניה  לוח הפעלה 120602F
Deltaphase - כולל 2 רפידות ו-2 מבודדיםBraintree Scientific, Inc.39OP
פישר סיינטיפיק12-563-501 
מלקחיים יתושים של הרטמן 4 אינץ' מכוורת רפואית מעוקלת, בע"מ סן דייגו, קליפורניהgS 22.1670
מפסק קריל 4 אינץ' כפולמכוורת רפואית, בע"מgS 34.1934
מכשירים כירורגיים אחריםRoboz Surgical Instrument Company, Inc., Gaithersburg, MD
היקפי תוך ורידי (IV) קנולה, 24 גרםBD381312
קטמין הידרוכלוריד, 100 מ"ג/מ"ל, 10 מ"לקטסט- פטרסון וטרינר07-803-6637 
קסילזין (AnaSed), 20 מ"ג/מ"ל, 20 מ"לקטסט- פטרסון וטרינר07-808-1947
בופרנקס, 0.3 מ"ג/1 מ"ל (5 אמפולות/קופסה)קטסט- פטרסון וטרינר07-850-2280
תחליב להסרת שיער שמן תינוקות Nair - 9 אונקיותאמזון/וולמארט/CVSN/A
DemaxMedicalDID30
D300 תלת כיווני StopcockB.Braun Medical בע"מ
משחת דמעות מלאכותיות מעבדות רוגבי, דולות', ג'ורג'יהN/A
מקור אור לד מכשיר ניפוח 4599543

מקורות

  1. Landzberg, B. R., Frishman, W. H., Lerrick, K. Pathophysiology and pharmacological approaches for prevention of coronary artery restenosis following coronary artery balloon angioplasty and related procedures. Progress in Cardiovascular Diseases. 39, 361-398 (1997).
  2. Muller, D. W., Ellis, S. G., Topol, E. J. Experimental models of coronary artery restenosis. J. Am. Coll. Cardiol. 19, 418-432 (1992).
  3. Clowes, A. W., Reidy, M. A., Clowes, M. M. Kinetics of cellular proliferation after arterial injury. I. Smooth muscle growth in the absence of endothelium. Laboratory Investigation: A Journal of Technical Methods and Pathology. 49, 327-333 (1983).
  4. Clowes, A. W., Reidy, M. A., Clowes, M. M. Mechanisms of stenosis after arterial injury. Laboratory Investigation: A Journal of Technical Methods and Pathology. 49, 208-215 (1983).
  5. Clowes, A. W., Clowes, M. M. Kinetics of cellular proliferation after arterial injury. IV. Heparin inhibits rat smooth muscle mitogenesis and migration. Circulation Research. 58, 839-845 (1986).
  6. Li, G., Chen, S. J., Oparil, S., Chen, Y. F., Thompson, J. A. Direct in vivo evidence demonstrating neointimal migration of adventitial fibroblasts after balloon injury of rat carotid arteries. Circulation. 101, 1362-1365 (2000).
  7. Kiechl, S., Willeit, J. The natural course of atherosclerosis. Part II: vascular remodeling. Bruneck Study Group. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 19, 1491-1498 (1999).
  8. Yamamoto, S., et al. Derivation of rat embryonic stem cells and generation of protease-activated receptor-2 knockout rats. Transgenic Research. 21, 743-755 (2012).
  9. Intengan, H. D., Schiffrin, E. L. Vascular remodeling in hypertension: roles of apoptosis, inflammation, and fibrosis. Hypertension. 38, 581-587 (2001).
  10. Meng, H., et al. Complex hemodynamics at the apex of an arterial bifurcation induces vascular remodeling resembling cerebral aneurysm initiation. Stroke. 38, 1924-1931 (2007).
  11. Sun, C. K., Shao, P. L., Wang, C. J., Yip, H. K. Study of vascular injuries using endothelial denudation model and the therapeutic application of shock wave: a review. American Journal of Rranslational Research. 3, 259-268 (2011).
  12. Zhang, W., et al. Orai1-mediated I (CRAC) is essential for neointima formation after vascular injury. Circulation Research. 109, 534-542 (2011).
  13. Ollinger, R., et al. Bilirubin: a natural inhibitor of vascular smooth muscle cell proliferation. Circulation. 112, 1030-1039 (2005).
  14. Levitzki, A. PDGF receptor kinase inhibitors for the treatment of restenosis. Cardiovascular Research. 65, 581-586 (2005).
  15. Asahara, T., et al. Local delivery of vascular endothelial growth factor accelerates reendothelialization and attenuates intimal hyperplasia in balloon-injured rat carotid artery. Circulation. 91, 2793-2801 (1995).
  16. Lee, K. M., et al. Alpha-lipoic acid inhibits fractalkine expression and prevents neointimal hyperplasia after balloon injury in rat carotid artery. Atherosclerosis. 189, 106-114 (2006).
  17. Ji, R., et al. MicroRNA expression signature and antisense-mediated depletion reveal an essential role of MicroRNA in vascular neointimal lesion formation. Circulation Research. 100, 1579-1588 (2007).
  18. Merlet, E., et al. miR-424/322 regulates vascular smooth muscle cell phenotype and neointimal formation in the rat. Cardiovascular Research. 98, 458-468 (2013).
  19. Huang, J., Niu, X. L., Pippen, A. M., Annex, B. H., Kontos, C. D. Adenovirus-mediated intraarterial delivery of PTEN inhibits neointimal hyperplasia. Arteriosclerosis, Thrombosis, And Vascular Biology. 25, 354-358 (2005).
  20. Gonzalez-Cobos, J. C., et al. Store-independent Orai1/3 channels activated by intracrine leukotriene C4: role in neointimal hyperplasia. Circulation Research. 112, 1013-1025 (2013).
  21. Guzman, L. A., et al. Local intraluminal infusion of biodegradable polymeric nanoparticles. A novel approach for prolonged drug delivery after balloon angioplasty. Circulation. 94, 1441-1448 (1996).
  22. Lipke, E. A., West, J. L. Localized delivery of nitric oxide from hydrogels inhibits neointima formation in a rat carotid balloon injury model. Acta Biomaterialia. 1, 597-606 (2005).
  23. Osterrieder, W., et al. Role of angiotensin II in injury-induced neointima formation in rats. Hypertension. 18, II60-II64 (1991).
  24. Powell, J. S., et al. Inhibitors of angiotensin-converting enzyme prevent myointimal proliferation after vascular injury. Science. 245, 186-188 (1989).
  25. Does the new angiotensin converting enzyme inhibitor cilazapril prevent restenosis after percutaneous transluminal coronary angioplasty? Results of the MERCATOR study: a multicenter, randomized, double-blind placebo-controlled trial. Multicenter European Research Trial with Cilazapril after Angioplasty to Prevent Transluminal Coronary Obstruction and Restenosis (MERCATOR) Study Group. Circulation. 86, 100-110 (1992).
  26. Faxon, D. P. Effect of high dose angiotensin-converting enzyme inhibition on restenosis: final results of the MARCATOR Study, a multicenter, double-blind, placebo-controlled trial of cilazapril. The Multicenter American Research Trial With Cilazapril After Angioplasty to Prevent Transluminal Coronary Obstruction and Restenosis (MARCATOR) Study Group. J Am Coll Cardiol. 25, 362-369 (1995).
  27. Geurts, A. M., et al. Knockout rats via embryo microinjection of zinc-finger nucleases. Science. 325, 433(2009).
  28. Tesson, L., et al. Knockout rats generated by embryo microinjection of TALENs. Nature Biotechnology. 29, 695-696 (2011).
  29. Li, D., et al. Heritable gene targeting in the mouse and rat using a CRISPR-Cas system. Nature Biotechnology. 31, 681-683 (2013).
  30. Potier, M., et al. Evidence for STIM1- and Orai1-dependent store-operated calcium influx through ICRAC in vascular smooth muscle cells: role in proliferation and migration. FASEB Journal : Official Publication Of The Federation Of American Societies For Experimental Biology. 23, 2425-2437 (2009).
  31. Aubart, F. C., et al. RNA interference targeting STIM1 suppresses vascular smooth muscle cell proliferation and neointima formation in the rat. Molecular Therapy. The Journal Of The American Society Of Gene Therapy. 17, 455-462 (2009).
  32. Berra-Romani, R., Mazzocco-Spezzia, A., Pulina, M. V., Golovina, V. A. Ca2+ handling is altered when arterial myocytes progress from a contractile to a proliferative phenotype in culture. American journal of physiology. Cell Physiology. 295, C779-C790 (2008).
  33. Bisaillon, J. M., et al. Essential role for STIM1/Orai1-mediated calcium influx in PDGF-induced smooth muscle migration. American journal of physiology. Cell Physiology. 298, C993-C1005 (2010).
  34. Tulis, D. A. Rat carotid artery balloon injury model. Methods In Molecular Medicine. 139, 1-30 (2007).
  35. Zhang, W., Trebak, M. Balloon Injury in Rats as a Model for Studying TRP Channel Contribution to Vascular Smooth Muscle Remodeling. T TRP Channels in Drug DiscoveryMethods in Pharmacology and Toxicology. Szallasi, A., Bíró, T. , Humana Press. 101-111 (2012).
  36. Tulis, D. A. Histological and morphometric analyses for rat carotid balloon injury model). Methods In Molecular Medicine. 139, 31-66 (2007).
  37. Advanced Sterilization Products. How to use Cidex OPA solution. , Available at: http://www.hopkinsmedicine.org/hse/forms/cidexopa/OPAHowToUse.pdf (2014).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

מודל חולדהקטטר בלוןהיווצרות נאו-אינטימהעיצוב מחדש של כלי דםעיצוב מחדש של שריר חלקצביעה היסטולוגיתאימונוהיסטוכימיהבקרת פנימית
כלי דם בלון פגיעה וIntraluminal מנהל בעורקי תרדמת העכברוש
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.