הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

עכברוש Heterotopic בטן לב / השתלת ריאה בודדת בתצורה טעונה נפח

8K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/52418

⸱

29 במאי 2015

במאמר זה

סיכום

אנו מתארים טכניקה חדשה להשתלת לב-ריאה בטנית הטרוטופית (HAHLT) בחולדות. תצורת ההשתלה מביאה לזרימת שתל טעונה חלקית, המאפשרת הערכה תפקודית ישירה. מודל זה עשוי לשמש למחקרים חריפים או כרוניים של תפקוד ומצב חיסוני של השתל המושתל.

תקציר

כאן, אנו מתארים טכניקה חדשה להשתלת לב-ריאה בטן הטרוטופי (HAHLT) בחולדות. תצורת השתל המושתל כוללת אנסטומוזה של הווריד הנבוב התחתון של התורם (IVC) ל-IVC המקבל, ואבי העורקים העולה של התורם (Ao) ל-Ao הבטני המקבל. אונות הריאה הימנית העליונה והאמצעית נשמרות ומתפקדות כצינורות לזרימת דם מהלב הימני ללב השמאלי.

ישנם מספר יתרונות לשימוש בטכניקה זו, והיא מתאימה למגוון רחב של יישומים. מכיוון שהשתל מושתל בתצורה המאפשרת העמסת נפח דיאמית, ניתן להעריך ישירות את תפקוד הלב in vivo. השימוש בצנתרי מוליכות לחץ-נפח מאפשר אפיון של פרמטרים המודינמיים תלויי עומס ובלתי תלויים בעומס. ניתן להמיר את השתל לתצורה טעונה על ידי החלת מהדק על IVC תת-כבדי של המקבל. אנו מתארים טכניקות כירורגיות מותאמות לניתוחים של תורם ומקבל, ואסטרטגיית הגנה אידיאלית על שריר הלב. בהתאם למטרת הניסוי, מודל זה עשוי להיות מותאם לשימוש במחקרים אקוטיים וכרוניים של תפקוד השתל, מצב חיסוני ומצבי עומס חדרים משתנים. דרכי הנשימה המוליכות לריאה המושתלת נשמרות, ומאפשרות אוורור ריאות חריף. זה מקל על ניתוח ההשפעות של הדם הוורידי והעורקי המעורב המספק זלוף כלילי לשתל.

מגבלה של מודל זה היא המורכבות הטכנית שלו. יש עקומת למידה משמעותית עבור מפעילים חדשים, שבאופן אידיאלי צריכים לקבל הדרכה בטכניקה. רקע הכשרה כירורגית הוא יתרון למי שרוצה ליישם מודל זה. למרות מורכבותו, אנו שואפים להציג את המודל בפורמט ברור וקל ליישום. בגלל הדמיון הפיזיולוגי של מודל זה להשתלה אורתוטופית, והמגוון הרחב של יישומי המחקר שלו, המאמץ המושקע בלימוד הטכניקה עשוי להיות כדאי.

מבוא

מודל המכרסמים הראשון של השתלת לב בטן הטרוטופית (HAHT) תואר על ידי אבוט ועמיתיו בשנת 19641. טכניקה זו, והשינויים הבאים יושמו באופן נרחב כדי לאפיין את תפקוד השתל ואת המצב החיסוני. רוב טכניקות ה-HAHT המתוארות כוללות לב שאינו טעון נפח2,3. תוארו מודלים של HAHT הכוללים חדרים עמוסים בנפח, אך לעתים קרובות הם מוגבלים מבחינה אחת או יותר.

השתלת לב-ריאה בטנית הטרוטופית (HAHLT) עם חדר שמאלי טעון נפח (LV) תוארה בעבר. חן ועמיתיו4, ולאחר מכן איברהים ועמיתיו5 תיארו HAHLT עם אנסטומוזיס יחיד של אבי העורקים (התורם עולה לאבי העורקים הבטני המקבל). עומס הנפח היחיד המוצג לחדר במחזור זה הוא החזרת הוורידים הכליליים. אספור ועמיתיו תיארו טכניקת HAHT שבה מעגל הריאות בוטל על ידי אנסטומוזה של עורק הריאה התורם (PA) לאטריום השמאלי של התורם (LA)6. במחזור זה, זרימה ורידית לחדר הימני (RV) מתרחשת דרך SVC תורם לאנסטומוזיס IVC המקבל, ועומס ה-LV שלאחר מכן נפלט לתוך האנסטומוזיס של אבי העורקים. תפקוד הלב הוערך חלקית in vivo, וגם במבחנה באמצעות מתקן לנגנדורף. פיגיירדו ועמיתיו תיארו מודל HAHLT דומהל-7 שלנו, אך בעכברים. זרימה ורידית ל-RV מתרחשת דרך SVC התורם לאנסטומוזיס IVC המקבל. לאחר מכן הדם עובר דרך מחזור הריאה הבודד ועומס LV נפלט לתוך האנסטומוזיס של אבי העורקים. תפקוד הלב במחקר שלהם הוערך על ידי הדמיית תהודה מגנטית (MRI). וון ועמיתיו תיארו טכניקת HAHT ייחודית שבה ה-LV נטען באמצעות אבי העורקים המקבל לתורם אנסטומוזהLA 8. ה-LV, אם כן, מתמלא בלחצים מערכתיים. תפקוד הלב, והאם נפח שבץ LV נפלט מראש במודל שלהם לא הוערך.

רבות מהטכניקות שהוזכרו לעיל כרוכות בתנאי העמסת LV לא פיזיולוגיים, כולל הטכניקות שעומס ה-LV החלקי שלהן מיוצג רק על ידי החזרה ורידית כלילית. מצד שני, טכניקות רבות אכן ניגשות להעמסת LV פיזיולוגית. רוב הטכניקות הללו, כמו בטכניקה של עספור ועמיתיו, משמיטות את זרימת הדם הריאתית ומשתמשות ב-PA תורם לתרום אנסטומוזה של LA6,9. מחזור הדם שתוארה על ידי גלינאנס ועמיתיו10 משתמש בקאווה נמענת ישירות לתורם אנסטומוזיס LA, תוך השמטת זרימת הדם הריאתית והלב הימני. יוקויאמה ועמיתיו משיגים את אותו אפקט על ידי קשירת הרשות הפלסטינית של התורם ויצירת תקשורת בין-פרוזדורית בלב התורם (השמטת ריאות התורם ומחזור הלב הימני)11. המחזור של מרויאמה ועמיתיו12 כרוך באנסטומוזה בין התורם השמאלי PA לבין המקבל Ao, המאפשר מילוי LV דרך מחזור הדם הריאתי כצינור, אך למעשה מוציא את הלב הימני.

במקרים בהם התקיימו תנאי העמסה כמעט פיזיולוגיים, אנו מקדמים את הטכניקה של HAHLT בשני היבטים עיקריים. ראשית, למיטב ידיעתנו, התצורה המדויקת שאנו מדווחים עליה לא תוארה בחולדות. זהו אולי המחזור המגוון ביותר עבור חוקרים המעוניינים לחקור את הפיזיולוגיה, המבנה והאימונולוגיה של שתל הלב-ריאה המושתל. שנית, אנו מתארים כיצד ניתן לאפיין ישירות את תפקוד השתל in vivo. עבור יישום זה, ניתן להכניס צנתרים מוליכות לחץ-נפח ישירות לקודקוד ה-LV של שתל ההשתלה, המאפשר אפיון תפקודי לב מלא.

ניתן ליישם את הטכניקה המתוארת כאן במחקרים אקוטיים וכרוניים של תפקוד השתלת השתלה, בעוד שההערכה התפקודית עשויה להתבצע in vivo או in vitro. אנו מציגים מודל שבו תנאי ההעמסה יכולים להיות קרובים לפיזיולוגיים, אולם ניתן לתמרן את מידת העומס החדרי הן באופן חריף והן באופן כרוני על ידי הסטת החזרה הוורידית לכיוון השתל או הרחק ממנו. ניתן גם לתפעל את תנאי העומס לאחר העומס. מכיוון שהריאה ודרכי הנשימה שלה נשמרות בתצורת השתלה זו, החוקרים יכולים לאוורר מחדש את הריאה התורמת באופן חריף. באופן ייחודי, אוורור מחדש של הריאות משנה את הרכב הדםבאמצעות העורקים הכליליים המושתלים. בתנאים שאינם מאווררים, הדם הנפלט מאבי העורקים התורם אינו מחומצן, ומתערבב עם דם מחומצן באבי העורקים המקבל. בתנאים של אוורור חריף, הדם שנפלט הופך למחומצן. לפיכך, ניתן להשוות את תפקוד השתל בתנאים מאווררים ולא מאווררים, וגם בתנאים טעונים משתנים.

הפרוטוקול שלהלן מתאר שינויים חשובים בפעולות התורם והמקבל של HAHLT שתוארו קודם לכן. הוא גם מתאר טכניקה אופטימלית להגנה על השתל המושתל לאורך תקופת האיסכמיה (הזמן בין השתל של התורם לשתל המקבל). היתרונות של טכניקה זו כוללים מצבים פיזיולוגיים שעלולים להתקרב לאלה של שתל מושתל אורתוטופי, ומגוון רחב של יישומי חקירה. מגבלה חשובה היא המורכבות הטכנית שלו. עם הדרכה ותרגול נאותים, סביר להניח שהיתרונות של טכניקה זו יעלו על האתגרים באימוץ שלה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל בעלי החיים שוכנו וטיפלו בהתאם הלאומי והנחיות מוסדיים לטיפול ושימוש בחיות מעבדה. אישור אתיקה לפרוטוקול זה הוענק על ידי האוניברסיטה של ​​ועדת הטיפול בבעלי חיים של קולומביה הבריטית. , חולדות זכרי Sprague-Dawley משקל בין 300-450 גר שמשו לפרוטוקול זה.

מבצע 1. התורם

  1. יש כ 100 מיליליטר של cardioplegia (RT) בבקבוק גלילי מחובר ל( IV) צינורות צנתר לוריד ארוכים על ידי ברזלים 3-דרך. השתמש עמדה לרומם את הבקבוק לכ 80 סנטימטרים מעל פני השטח האופרטיביים, המאפשר משלוח cardioplegia על ידי כוח הכבידה.
  2. כדי להמחיש את המבנים כראוי, להשתמש גם זוג loupes כירורגית או מיקרוסקופ לנתח.
    הערה: בשלב זה אנו משתמשים במיקרוסקופ הפעלה משקפת 3.4 - הגדלת 21.3X.
  3. מניחים את התורם בתא הרדמה ולגרום להרדמה עם 4 - 5% isoflurane.
  4. העבר את העכבר לפלטפורמת הפעלה ולשמור על הרדמה על ידי האף-קונוס עם 1 - 2% isoflurane. החל משחה וטרינר לעיניו של בעל החיים למניעת יובש. לנהל midazolam (2 מ"ג / קילוגרם) תוך peritoneally עם מחט 25 G.
  5. באמצעות קוצץ כירורגית, לגלח את התורם מxiphisternum ללסת תחתונה. לגלח אזור קטן של המפשעה השמאלית (לגישה הרביעית שלאחר מכן). החל סוכן depilating למשטחים האופרטיביים, לחכות כ 5 דקות, ולהסיר את השיער עם פיסת הגזה.
  6. הכן את האתרים כירורגית עם פתרון המבוסס על chlorexidine povidone- יוד או (אנו משתמשים רק chlorhexidine). לחדור אתרי incisional עם 0.1 - 0.5% מתחת לעור לידוקאין.
  7. Secure forelimbs וhindlimb שמאל לפלטפורמת ההפעלה עם דבק, עוזב את hindlimb תקין חינם לניטור של עומק הרדמה וסימנים חיוניים.
  8. לאחר הבטחת עומק הרדמה מתאימה ידי קמצוץ דוושה, עושה חתך בקפל המפשעה השמאלי באמצעותאזמל 22-להב. על ידי נתיחה בוטה, לחשוף את וריד הירך הנפוץ עזב ולקבל גישה הרביעית כדלקמן:
    1. בעדינות לחזור בי הרקמה המכסה את וריד הירך, וcannulate את הווריד עם IV 24 G. חבר את IV לאורך קצר של צינורות IV מלוחים מלא, ולאבטח את הצינור במקום עם נייר דבק.
      הערה: הליך cannulation ורידי הירך בחולדות מתואר במקומות אחרים על ידי Jespersen ועמיתים 14.
    2. חבר מזרק 10 מיליליטר מלוח מלאות לצינורות IV, ולשאוב בעדינות דם כדי להבטיח מיקום נכון של IV.
    3. הזרק 300-500 IU של הפרין unfractionated דרך צינורות IV, ולאחר מכן לשטוף את צינורות עם 3-5 מיליליטר של תמיסת מלח.
  9. בשלב הבא, tracheotomize התורם כדלקמן:
    1. לעשות חתך קו האמצע ברקמות הרכות בין החריץ והלסת התחתון הצוואר באמצעות אזמל 22-להב. לחדור את הקפסולה של בלוטת התריס בקו האמצע באמצעות Metzenמספריים באום, ואונותיה נפרדות באמצעות נתיחה בוטה.
    2. באמצעות נתיחה בוטה, להפריד את שרירי רצועת הצוואר בקו האמצע כדי לחשוף את פני השטח הקדמי של קנה הנשימה.
    3. השתמש מלקחיים מעוקלים לנתח בצורה בוטה מטוס היקפי סביב קנה הנשימה. להקיף את קנה הנשימה עם עניבת משי 4-0.
    4. בעזרת המספריים איריס, לעשות חתך רוחבי בקנה הנשימה הקדמית, כ 5 מ"מ נחותים סחוס התריס. בעדינות להכניס הצינורית לקנה הנשימה (14 G IV) ולאבטח אותו במקום באמצעות עניבת משי 4-0.
    5. חבר את הצינורית לקנה הנשימה להנשמה מכאנית. הפניה זרימת החמצן וisoflurane דרך מעגל ההנשמה, ולאוורר את התורם בשיעור ונפח של גאות ושפל חזה לפי משקלה 13.
  10. עושה חתך בקו האמצע של החזה (באמצעות אזמל 22-להב), הארכת החתך בצוואר החריץ מתחת xipisternum.
  11. להישאר בקו האמצע, בצע sternotomy חציון באמצעות חותך עצם. לחזור הקצוות של עצם החזה עם מפשק שמירה עצמית. הזן את קרום הלב והחללים pleural.
  12. בצע thymectomy. זה הכי קל לחלק ראשון בבוטות התימוס בקו האמצע, ואז להפריד אותו ממבנים הסמוכים באמצעות שילוב של נתיחה בוטה וחדה.
    הערה: מקורו של העורקים החזי הפנימיים עלולה להיפצע כאשר לנתח התימוס מהקצוות sternal מעולים. כדי למנוע דימום, קליפים עוצר דמום ניתן להחיל לפני הסרת בלוטת התימוס בנקודות אלה.
  13. בעזרת המספריים מצנבאום ו / או לאואר חד, לנתח פרי caval שומן מנחות הווריד הנבוב (IVC). ודא שIVC הוא חופשי יחסית של שומן ורקמת חיבור מצומת Cavo-פרוזדורי superiorly, לסרעפת inferiorly.
  14. שימוש באואר חד, הווריד הנבוב מעולה circumferentially חופשי (SVC) ולהקיף אותו עם עניבת משי 4-0.
  15. בשלב הבא, לנתח אתהשאיר וריד נבוב חופשי ממבנים סמוכים, ולקשור אותו proximally ו distally עם 4-0 עניבות משי. לכרות החלק להתערב קאווה לחשוף את העורק התת-השמאל.
  16. Circumferentially בחינם כלי קשת אב העורקים באמצעות אואר חד. החל קליפים כירורגית הפרוקסימלי ודיסטלי לעורק innominate, ולחלק אותו בין קטעים. השאר את עורק תרדמה משותף שמאל ו- מקוטע האו"ם עורק subclavian השמאל.
  17. בשלב הבא, cannulate SVC עם קטטר 24 G IV. Secure את הקטטר עם עניבת המשי הוצב בעבר 4-0.
  18. היכונו לקציר שתל מועיל, אבל עדין.
  19. בעזרת מספריים חדים, לחלק את IVC רק מעולה למשטח סרעפתית. מחלקים את SVC מעולה לאתר cannulation, על מנת להבטיח שמבנים סמוכים בדרכי נשימה לא נפגעו.
  20. כבה את מכשיר ההנשמה ונתק את הצינורית לקנה הנשימה. Transect קנה הנשימה proximally.
  21. לתפוס את קנה הנשימה transected עם מלקחיים, ולהסיר את הלבוריאות en-גוש. זה ידרוש מתיחה עדינה עם נתיחה חדה כמו שתל לב-הריאה הוסר. הפרד את קנה הנשימה מהוושט הבסיסי. להימנע מפגיעה באב העורקים היורדים, כך שחלק ממנה ארוך נותר בשלמותה לאחר קציר.

2. הכנה של הלב-הריאה השתל

הערה: בעת השלמת חלק זה של ההליך, עוזר צריך להיות הרדמה המכרסם הנמען והכנה להשתלת שתל.

  1. מניחים את שתל לב-ריאה בגזה כירורגית עם המשטח הקדמי של הלב כלפי מטה. באמצעות נתיחה חדה, להסיר כל וושט שייר, הימנעות מפגיעה בדרכי הנשימה האחורית.
  2. אתר את אב העורקים החזי יורדים ולהכניס צינורית קהה שקצה 16 G. אבטח את הצינורית במקום עם עניבת משי 4-0.
  3. אתר את כלי קשת אב העורקים, ולהחיל קליפ כירורגית לעורק subclavian שמאל. השאר את העורק הראשי עזב בלתי מקוטעת למשנהדה-שידור שלאחר מכן.
  4. לנהל את המנה הראשונה של cardioplegia על ידי חיבור צינורות cardioplegia לצינורית אב העורקים 16 G. העורק הראשי חייבים להיות occluded באופן זמני עם מלקחיים כדי להבטיח אספקה ​​נאותה של cardioplegia.
    הערה: יתרון לבעל צינורית אב העורקים המצורף היא שcardioplegia עשוי להינתן ברציפות ו / או לסירוגין כרצוי. למינון לסירוגין, אנחנו בדרך כלל להעביר cardioplegia כל 10 - 15 דקות ב 5 מיליליטר בולוס על 30 - 45 שניות.
  5. בעזרת המספריים מצנבאום ו / או לאואר חד, לנתח שומן פרי-אב העורקים מאב העורקים. ודא שאב העורקים הוא חופשי יחסית של שומן ורקמת חיבור מהעורק השמאלי subclavian (קשת דיסטלי) לאתר cannulation.
  6. בשלב הבא, לחשוף את סימפונות mainstem עזבו באמצעות אואר חד, ולקשור אותו proximally עם עניבת משי 4-0. Transect דיסטלי סימפונות השמאל לקשירה באמצעות מספריים איריס. בצע ריאה הותירה ligating הריאה השמאליתעורק לוריד עם 4-0 עניבות משי. Transect דיסטלי למייתר ולהסיר את הריאה השמאלית.
  7. כאמור לעיל, להסיר את כל אונות הריאה האחרות למעט האונות העליונות ואמצעיות הנכונות. למנוע פציעת IVC בתהליך של ביצוע lobectomies.
  8. חבר את צינורות cardioplegia לצינורית אב העורקים ולנהל cardioplegia הרציף תוך הנמען הוא להיות מוכן. מניחים את שתל לב-ריאה במכל סטרילי (למשל, כוס).

3. נמען מבצע

  1. להרדים את הנמען כלפעולת תורם, לעיל. השתמש משחה וטרינר כדי להגן על עיניו של בעל החיים מיובש. לאשר הרדמה לעתים קרובות על ידי קמצוץ דוושה.
  2. מקם את החיה כמו לכל הפעולה התורמת, זה זמן לעזוב את forelimb תקין החופשי כדי לפקח על סימנים חיוניים ועומק הרדמה.
  3. לגלח את הבטן מxiphisternum לפין. לגלח אזור קטן של המפשעה השמאלית (לגישה הרביעית שלאחר מכן). החלdepilating סוכן למשטחים האופרטיביים, לחכות כ 5 דקות, ולהסיר את השיער עם פיסת הגזה.
  4. הכן את האתרים כירורגית עם povidone- יוד או פתרון מבוסס chlorexidine. לחדור אתרי incisional עם 0.1 - 0.5% מתחת לעור לידוקאין.
  5. Tracheotomize ולאוורר את הנמען כמכוון לעיל. לחלופין, לשמור על הנמען בהרדמה האף-קונוס.
  6. להציג את צנתר לוריד הירך כפי שתואר לעיל. הזרק 300-500 IU של הפרין unfractionated דרך צינורות IV, ולאחר מכן לשטוף את צינורות עם 3-5 מיליליטר של תמיסת מלח.
  7. בצע laparotomy על ידי ביצוע חתך בבטן קו האמצע עם אזמל 22-להב מxiphisternum לפין. לחזור דופן הבטן באמצעות מפשק שמירה עצמית. בשלב הבא, לחזור בו מהמעיים superiorly ולצד השמאלי של החולדה. לעטוף אותם בגזה חמה, ספוג מלוחה.
  8. לחשוף את אב העורקים IVC ובטן על ידי חדות לנתח באמצעות שמעליה מחדששומן tro הצפק.
  9. יש מהדק כלי מעוקל זמין ומוכן.
  10. Circumferentially לשחרר את IVC ואב עורקי proximally ו distally ולהקיף אותם עם 4-0 עניבות משי. לא צריך להיות כ 2 - 3 סנטימטר של שטח בין אתרים אלה.
  11. להחיל בזהירות את מהדק הכלי המעוקל, להבטיח כי חלק מספק של שני IVC ואב עורקים חשופים מעל הלסתות של המהדק.
  12. עושה חתך בקיר הקדמי של IVC עם מחט 25 G מחוברת למזרק 1 מיליליטר מלוח מלא. להאריך את החתך עם מספריים פוטס כדי להתאים את אורכו של פתח IVC תורם.
  13. הסר את שתל לב-ריאה מיכל שלו ונתק אותו מcardioplegia. מניחים את השתל בבטן של הנמען במיקום אופטימלי לביצוע ההשקה הוורידים.
    הערה: שתל לב-הריאה סופו של דבר להיות מכוון מעט באלכסון, עם ההצבעה השיא לקראת הבטן של רביע שמאלי תחתון.
  14. אבטח את העקבובוהן מסתיימת בהשקה עם 9-0 תפר ניילון. לקשור קשר מאובטח בכל קצה, והשאיר את המחט מחוברת לזרוע של תפר ארוך, וקצה קצר של תפר להיות קשורה למאוחר יותר. לנהל מינון של cardioplegia.
  15. בריצה אופנה, מחצית מקו התפר והעניבה לזרוע תפר הקצרה המנוגדות מלאה. לנהל מינון של cardioplegia.
  16. השלם את המחצית השנייה של קו התפר ולקשור אותו. ההשקה הוורידים היא מלאה. לנהל מינון של cardioplegia
  17. אוריינט שתל לב-ריאה עם הלב של הצבעה שיא לכיוון הבטן של רביע השמאלי תחתון. ודא שהשקת הוורידים אינה מפותלת או מעוות.
  18. להעריך את אורכו של אב העורקים תורם שיידרש כדי להגיע לאב עורקי הנמען, שמירה על שני IVC וanastomoses אב העורקים בתצורות-מתח חופשי ובלתי מפותל.
  19. מחלקים את אב העורקים היורדים (דיסטלי לעורק subclavian שמאל) עם איריס מספריים.
  20. הפוך incision בקיר הקדמי של אב העורקים נמען עם מחט 25 G מחובר למזרק 1 מיליליטר מלוח מלא. להאריך את החתך עם מספריים פוטס כדי להתאים את אורכו של פתח אב העורקים תורם.
  21. לעגן את הבוהן (היבט מעולה) של אב העורקים התורם למקבל אב העורקים באמצעות תפר 9-0 ניילון. לאחר מכן, להעביר את המחט להיבט המדיאלי של אב העורקים ולהשלים מחצית מההשקה בניהול אופנה.
  22. בעקב של ההשקה אב העורקים, להפוך את הכיוון של קו התפר (מעבר בכיוון של תפרים), ולהשלים את מחצית הרוחב של ההשקה בניהול אופנה.
  23. לאט לאט להסיר את הצנתר הרביעי בSVC, ולקשור SVC עם קליפ כירורגית.
  24. דה-אוויר אב העורקים על ידי איתור עורק התרדמה משותפת-מקוטע של האו"ם עזב. החזק את העורק פתוח, בתנוחה זקופה שתאפשר אוויר להתפנות באופן חופשי.
  25. בקצרה לפתוח את הלסתות של מהדק הכלי המעוגל ולאפשר את העורק הראשי לדמם (דדואר אוויר) 2 - 3 שניות. להחיל מחדש את מהדק הכלי.
  26. החל קליפ כירורגית לעורק הראשי. הסר את מהדק הכלי המעוקל.
  27. בדוק דימום בקווי התפר. אם הווה, להחיל דחיסה עדינה עם גזה או תיקון ניתוחי באורך של תפר 9-0 ניילון (בהתאם לחומרה של דימום).
  28. לב התורם צריך לחדש את המכות בתוך דקות.
  29. לשים לב לסימנים החיוניים של הנמען, עומק ההרדמה, ולנהל החייאת נפח בהתאם לצורך.
  30. בהתאם לנקודתי הקצה הניסיוניים, או לסגור את הבטן של החיה ותן לזה להתאושש מהרדמה, או להכין את החיה להערכת לב וכלי דם.
    הערה: דוגמאות להערכת שתל כוללות באמצעים vivo של פרמטרים המודינמיים עומס תלוי ועומס-עצמאי, צעדים במבחנה של פונקציה בLangendorff ומצבי לב עובדים, ואקו (בניתוח הישרדות) או חקירות MRI.
  31. בסוף ניסויי מסוף חריפים, בעלי חיים מומתים על ידי exsanguination.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

טכניקת HAHLT שתוארה לעיל היא טכנית מאוד ודורשת תשומת לב לפרטים. טבלת 1 מדגיש חלק מהגורמים המרכזיים הקשורים להצלחה לעומת נהלים כושלים, ויכול לשמש כמדריך לפתרון בעיות בקשיים טכניים.

אחרי אב העורקים נמען unclamped, יש לראות עורקים הכליליים השתל למלא עם דם מחומצן. בהתאם לכך, שריר הלב צריך להיות ורוד וperfused היטב. בניסויים מוצלחים מבחינה טכנית, הלב מתחיל לפעום זמן קצר לאחר reperfusion השתל. השתל יש ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

הצלחה עם הטכניקה שתוארה כאן תהיה מבוססת על מספר גורמים. מפתח ביניהם יהיה הבטחת יציבות של שני חיות התורם והמקבל, אימוץ טכניקה ניתוחית קפדנית, כי הוא בטוח וקשור עם איבוד דם מינימאלי, על מנת להבטיח מעצר מלא cardioplegic עם קירור שתל אחיד, צמצום זמן איסכמי כולל, ושתל השידור-דה כראוי. כהודה לעיל, המורכבות הטכנית של הטכניקה היא המגבלה העיקרית שלה.

יש לנו מתקדם טכניקות HAHLT קודמות בכמה מובנים. השינויים שתוארו בפעילות ת...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

יש המחברים אין לחשוף.

תודות

מארק ג 'קירנס מקבל תמיכה מתכנית UBC המטפל החוקר (זכתה בקולג' המלכותי לרופאים ולמנתחים של קנדה), וUBC 4YF הדוקטורט.

ג'ון ה ויד הוא לאומי סנטוריום האגודה ומייקל סמית קרן לבריאות מחקר אמת. גיוס באמצעות CIHR. המחברים מבקשים להודות לד"ר מ 'אלארד וריצ'רד Wamboldt לסיוע שלהם עם התקנה ותחזוקה של ציוד זלוף.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
Celsior Cardioplegic SoutionGenzymeהתמיסה נשמרת על קרח לאורך כל ההליך. אנו מכינים פיתרון משלנו, עם שינויים קלים.
מאוורר מכרסמיםמכשיר הרווארדדגם 683
מוניטור סימנים חיונייםדגם Noninדגם 9847Vמציג SpO2 וקצב לב.
IV צינוריתJelco306324 - 26 גרם x 3/4 אינץ'.
צינורות IVCareFusionMP9259-Cצינורות מחבר באורך קצר (18 ס"מ).
קליפים כירורגייםTeleflex Medical001204Horizon טיטניום קשירת קליפסים.
תפריםאתיקון, שרפוינטLA54G, AK-0107סליל משי 3-0 ותפר פרולן 9-0 (חד זרוע, מחט DR5).
מכשירים כירורגייםלא ישימיםלא ישיםהמכשירים המשמשים הם גנריים, וניתן לרכוש אותם מכל חברת אספקה כירורגית.

מקורות

  1. Abbott, C. P., Lindsey, E. S. A technique for heart transplantation in the rat. Arch Surg. 89 (1964), 649-652 (1964).
  2. Ma, Y., Wang, G. Comparison of 2 heterotopic heart transplant techniques in rats: cervical and abdominal heart. Exp Clin Transplant. 9 (2), 128-133 (2011).
  3. Wiedemann, D., Boesch, F., Schneeberger, S., Kocher, A., Laufer, G., Semsroth, S. Graft function after heterotopic rat heart transplant with an isolated reperfused working heart: a methodic consideration. Exp Clin Transplant. 10 (2), 154-157 (2012).
  4. Chen, Z. H., Xia, S. S. The technique of heterotopic heart-lung transplantation in the rat. J Tongji Med Univ. 6 (2), 67-70 (1986).
  5. Ibrahim, M., Navaratnarajah, M., et al. Heterotopic abdominal heart transplantation in rats for functional studies of ventricular unloading. J Surg Res. 179 (1), e31-e39 (2013).
  6. Asfour, B., Hare, J. M., et al. A simple new model of physiologically working heterotopic rat heart transplantation provides hemodynamic performance equivalent to that of an orthotopic heart. J Heart Lung Transplant. 18 (10), 927-936 (1999).
  7. Figueiredo, J. -L., Nahrendorf, M., Sosnovik, D. E., Weissleder, R. MRI of a novel murine working heart transplant model. Circ Heart Fail. 2 (3), 272-274 (2009).
  8. Wen, P., Wang, X., et al. A simple technique for a new working heterotopic heart transplantation model in rats. Transplant Proc. 45 (6), 2522-2526 (2013).
  9. Didié, M., Biermann, D., et al. Preservation of left ventricular function and morphology in volume-loaded versus volume-unloaded heterotopic heart transplants. A.Am J Physiol Heart Circ Physiol. 305 (4), H533-H541 (2013).
  10. Galiñanes, M., Zhai, X., Hearse, D. J. The effect of load on atrophy, myosin isoform shifts and contractile function: studies in a novel rat heart transplant preparation. J Mol Cell Cardiol. 27 (1), 407-417 (1995).
  11. Yokoyama, H., Ohmi, M., Murata, S., Nakame, T., Tabayashi, K., Mohri, H. Proposal of a working left heart model with a heterotopic transplantation technique in rats. J Heart Lung Transplant. 14 (4), 706-712 (1995).
  12. Maruyama, T., Swartz, M. T., McBride, L. R., Pennington, D. G. Working heart model of heterotopic heart-lung transplantation in rats. J Thorac Cardiovasc Surg. 107 (1), 210-215 (1994).
  13. Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P., Bátkai, S., Kass, D. A. Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats. Nat Protoc. 3 (9), 1422-1434 (2008).
  14. Jespersen, B., Knupp, L., Northcott, C. A. Femoral arterial and venous catheterization for blood sampling, drug administration and conscious blood pressure and heart rate measurements. J Vis Exp. (59), 3496-3410 (2012).
  15. Habertheuer, A., Kocher, A., et al. Innovative, simplified orthotopic lung transplantation in rats). J Surg Res. 185 (1), 419-425 (2013).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

השתלת לב וריאה בטןית הטרוטופיתשתל לב וריאה של חולדהקונפיגורציית טעינת נפחאנסטומוזיס של הווריד הנבוב התחתוןאנסטומוזיס של האורטה העולהקטטר למדידת מוליכות לחץ-נפחאסטרטגיה להגנה על השריר הלבביאוורור מחדש של הריאה בשלב חריףהערכה דינמית של טעינת נפחדרישות להכשרה כירורגית