הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

הפגנת מעבדה לפיזיולוגיה: גלומרולרי סינון שיעור בחולדה

17K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/52425

⸱

26 ביולי 2015

 ,  , 
1Tactical Combat Casualty Care Research, U.S. Army Institute of Surgical Research, 2Department of Pharmacology and Toxicology, Michigan State University, 3Southwest National Primate Research Center, Texas Biomedical Research Institute

במאמר זה

סיכום

מטרת פרוטוקול זה היא להדגים את העקרונות והטכניקות למדידה וחישוב קצב הסינון הגלומרולרי, קצב זרימת השתן והפרשת נתרן ואשלגן בחולדה. ניתן להשתמש בהדגמה זו כדי לספק לתלמידים הבנה מושגית כוללת כיצד למדוד תפקוד כליות.

תקציר

מדידות של קצב הסינון הגלומרולרי (GFR), וההפרשה החלקית של נתרן (Na) ואשלגן (K) הן קריטיות להערכת תפקוד הכליות בבריאות ובמחלות. GFR נמדד כפינוי כלייתי במצב יציב של אינולין המסונן בגלומרולוס, אך אינו מופרש או נספג מחדש לאורך הנפרון. ניתן לקבוע את ההפרשה החלקית של Na ו- K מריכוז Na ו- K בפלזמה ובשתן. ניתן להדגים את הפינוי הכלייתי של אינולין בחיה מורדמת שיש לה צנתרים בעורק הירך, בווריד הירך ובשלפוחית השתן. הציוד והאספקה המשמשים להליך זה הם אלה הזמינים בדרך כלל במתקן ליבת מחקר, ובכך הופכים הליך זה לאמצעי מעשי למדידת תפקוד הכליות. מטרת סרטון זה היא להדגים את ההליכים הנדרשים לביצוע הדגמת מעבדה בה מעריכים את תפקוד הכליות לפני ואחרי תרופה משתן. ניתן להשתמש בטכניקה המוצגת כדי להעריך את תפקוד הכליות במודלים של חולדות של מחלת כליות.

מבוא

התפקיד החשוב ביותר של הכליה הוא ויסות הומאוסטטי של תכולת המים והאלקטרוליטים החוץ-תאיים. הכליות מווסתות מקרוב מים חוץ-תאיים, נתרן (Na) ואשלגן (K) כדי לשמור על רמות פיזיולוגיות תקינות. הפרעות בתפקוד הכליות עלולות לגרום להפרעות מטבוליות חמורות שעלולות להיות קטלניות. התהליך הכלייתי הבסיסי מתרחש בנפרון ומתחיל בסינון פלזמה בגלומרולוס ומסתיים בהפרשת שתן. תהליכים נוספים הקובעים את הריכוז הסופי של מים, Na ו- K בשתן הם הפרשה וספיגה חוזרת בתוך הנפרון. מדידות של קצב סינון גלומרולרי (GFR) והפרשה חלקית של Na ו-K הן קריטיות להערכת תפקוד הכליות בבריאות ובמחלות. הקורא מופנה למאמרי סקירה וספרי לימוד שפורסמו בעבר לדיון מעמיק יותר בתפקוד הכליות1-4.

ניתן למדוד

GFR כפינוי כלייתי במצב יציב של אינולין המסונן בגלומרולוס, אך אינו מופרש או נספג מחדש לאורך הנפרון5. בעוד שטכניקה זו דורשת הרדמה, הכנה כירורגית וניסוי סופי, היא נחשבת לתקן הזהב של מדידת GFR. באמצעות אינולין המתויג עם פלואורסצאין-איזותיוציאנט (FITC), ניתן למדוד בקלות את ריכוז הפלזמה והשתן של FITC-אינולין בנפחים קטנים ולהשתמש בו לחישוב GFR במהלך נקודות זמן מרובות של ניסוי. ניתן לקבוע את ההפרשה החלקית של Na ו- K מריכוז Na ו- K בפלזמה ובשתן.

ניתן להדגים בקלות את ההבנה המושגית כיצד למדוד תפקוד כלייתי במעבדה קצרה שנועדה לאפשר לתלמידים להשתתף באופן פעיל בהיבטים מסוימים של הניסוי. סרטון זה מתאר את ההכנה לפני המעבדה, הדגמת תפקוד הכליות והערכת התוצאות לאחר המעבדה. הטכניקות הכירורגיות הדרושות לביצוע מדידות של GFR מודגמות בחולדה מורדמת. בנוסף, חישובים לדוגמה עבור GFR, והפרשה חלקית של Na ו- K מוצגים לפני ואחרי מתן תרופה משתן.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

לפני כל הליך בעלי חיים, טיפול בבעלי החיים הוועדה המוסדית ושימוש (IACUC) חייבת לאשר את הפרוטוקול. פרוטוקול זה אושר על ידי IACUC אוניברסיטת מדינת מישיגן.

1. הכנת מעבדה-טרום של פתרון FITC-אינולין

  1. 20 מיליליטר של תמיסת מלח חם עד 70 מעלות צלזיוס ולאט לאט מוסיפים של FITC-אינולין (5 מ"ג / מיליליטר FITC-אינולין) 100 מ"ג עד שכל אינולין נמס.
  2. פתרון מגניב RT ולהוסיף 800 מ"ג של אלבומין בסרום השור (40 מ"ג / מיליליטר BSA, אבקת lyophilized, בעצם גלובולין רעלן פנימי ללא תשלום, נמוך, טוהר ≥98% על ידי ג'ל אלקטרופורזה agarose).
  3. סנן את פתרון אינולין-BSA עם נייר סינון (כיתה 1). מניחים את הפתרון המסונן במזרק 20 מיליליטר עם מסנן מזרק-קצה (0.2 מיקרומטר) ומכסה בנייר כסף כדי להגן מפני אור.

2. הרדמה וניתוח

  1. מניחים את החולדה בתא אינדוקציה מלא isoflurane 5% כדי לגרום להרדמה. שיא דירקטוריוןמשקל y (250-350 ז) ומניח את החולדה על פלטפורמת ניתוח מחוממת נועדה לשמור על 37 מעלות צלזיוס טמפרטורת גוף לאורך כל הניסוי. בעדינות לאבטח את החולדה לפלטפורמה עם קלטת מעבדה על כפות. לשמור על הרדמה עם isoflurane 1-2% עם הכיתה רפואית O 100% 2 בקצב זרימת אוויר של .8-1.0 L / min.
  2. הכנס קטטר מחודד (OD תוך-הקצה, 2.7F) לתוך עורק הירך ללחץ דם וניטור קצב לב, ודגימת דם.
  3. הכנס קטטר (PE-50) לוריד הירך לעירוי אינולין. אבטח את הצנתר לרקמות עם תפר כירורגי משי קלוע 5-O 6.
  4. צרף את צנתר העורקים למתמר לחץ מד לחץ. לחץ שיא דם וקצב לב באמצעות תוכנת רכישת נתונים ותצוגה על מסך מחשב בזמן אמת. טכניקה זו באה לידי ביטוי בפירוט על וידאו 6.
  5. לחשוף את שלפוחית ​​השתן דרך חתך suprapubic. חותך קטןחור בקצה של שלפוחית ​​השתן ולהכניס צינורית (PE-190) עם חום התלקח קצה בתוך שלפוחית ​​השתן לאיסוף שתן. אבטח את הצינורית לשלפוחית ​​השתן עם תפרים טבעתיים.

3. תנו ודם אוסף

  1. מניחים את המזרק של FITC-אינולין במשאבת מזרק עם שיעור זרימת סט של 1 מיליליטר / שעה למשקל גוף 100 גרם (3 מיליליטר / שעה לעכברוש במשקל 300 גרם). צרף את המזרק לקטטר וריד הירך. התחל עירוי אינולין ולאפשר תקופת איזון 1-2 שעות. שמור מזרק מכוסה בנייר כסף כדי להגן מפני אור.
  2. לקבוע אם זרימת שתן השיעור יציב ומתאים לניתוח מדגם (20 μl / min) על ידי איסוף דגימת שתן בבקבוקון אוסף-שקל מראש לתקופה של 10 דקות. לקבוע נפח שתן gravimetrically עם סולם דיגיטלי. נפח שתן נאות לתקופה אוסף 10 דקות הוא 0.2 מיליליטר. תמשיך לאסוף דגימות שתן עד שני אוספים רצופים מצביעים זרימת שתן שיעור של 20 μl / מ 'באו יותר.
  3. דוגמאות טרום תרופות
    1. לאסוף דגימת שתן במהלך תקופה של 20 דקות. לאסוף דגימת דם (0.5 מיליליטר) מצנתר העורקים בנקודת האמצע של תקופת האיסוף שתן. היזהר ברור לחלוטין צנתר העורקים של תמיסת מלח לפני איסוף דגימת דם בבקבוקון המכיל אוסף 1 הפרין U. השתמש בקבוקוני אוסף עם סימוני נפח כדי להקל על האוסף של 0.5 מיליליטר של דם עורקים.
    2. רוקן את הקטטר עורקים עם הפרין-מלוח (20 U / ml) כדי לנקות את הקטטר של דם (כ. 0.1 מיליליטר). אורכו של צנתר העורקים צריך להיות קצר ככל האפשר כדי להגביל את הנפח של הפרין-מלוח הדרוש כדי לשטוף.
      הערה: דגימות דם מדולל לייצר חישובים מדויקים של GFR והפרשה חלקית של Na וק
    3. חכה 10 דקות, וחזור על האוסף של שתן טרום תרופה שנייה ודגימת דם.
  4. בעקבות האוסף של שתי דגימות טרום תרופה, לנהל DRU משתן g, פורוסמיד (10 מ"ג / קילוגרם), דרך צנתר העורקים. רוקן את הקטטר עורקים עם מלוחים heparinized כדי לנקות את הקטטר של תרופה. לטפל כדי למנוע את הזריקה של אוויר דרך צנתר העורקים. רשום את הזמן של הזרקת פורוסמיד.
  5. דוגמאות פוסט-סמים: בכל אחת מנקודות הזמן 3 להלן, לאסוף דגימת שתן בתקופה אוסף 10 דקות, ודגימת דם (0.5 מיליליטר) בנקודת האמצע של תקופת האיסוף שתן.
    1. לדוגמא הודעה בסמים 1 - לאסוף חמש דקות לאחר פורוסמיד.
    2. על הודעה בסמים לדוגמא 2 - לאסוף עשר דקות לאחר פורוסמיד.
    3. על הודעה בסמים לדוגמא 3 - לאסוף חמישה עשר דקות לאחר פורוסמיד.
  6. לאחר כל הדגימות נאספו, להרדים את העכברוש בהתאם לנהלים מוסדיים על ידי פתיחת בית החזה וההסרה של הלב. הסר את שני הכליות. Decapsulate (להסיר את הקרום המקיף) ולמחוק את הכליות כדי להסיר דם עודף. לשקול את הכליות.

התחת = "jove_title"> 4. ניתוח מדגם

  1. למדוד את כל כרכי דגימת שתן gravimetrically עם סולם דיגיטלי, ומשקלי שיא.
  2. דגימות דם כל צנטריפוגה עם צנטריפוגה בטבלה העליונה (1,800 XG) להפריד פלזמה. העבר את דגימות פלזמה לבקבוקונים קטנים שכותרתו.
  3. לנתח ריכוזי Na ו- K בדגימות שתן ופלזמה עם מנתח נתרן / אשלגן.
  4. מדידה של FITC-אינולין בפלזמה ובשתן
    1. לדלל את שתן מראש סמים (מ1: 200 עד 1: 400), ושתנו לאחר סמים (01:10) עם חיץ HEPES (500 מ"מ, pH 7.4).
    2. הוסף 40 μl של μl הסטנדרטי או מדגם ו -60 של חיץ HEPES בצלחת גם 96 (מדגם אחד לכל היטב) ולאפשר לערבב למשך 10 דקות בזמן מכוסה ברדיד אלומיניום.
    3. ליצור עקומה סטנדרטית עבור FITC-אינולין לריכוזים של 6.25, 12.5, 25, 50, 100, 200, 400 מיקרוגרם / מיליליטר (איור 1). לקבוע הקרינה FITC-אינולין בדגימות וסטנדרטים באמצעות קורא microplate עם האקסאורכי גל ציטוט ופליטה של ​​485 ו538 ננומטר, בהתאמה.
    4. התאם את ערכי ניאון לסטנדרטים לניתוח רגרסיה פונקציה לוגיסטית 4 paramter. הפרמטרים פונקצית רגרסיה משמשים לחישוב ריכוז FITC-אינולין בדגימות פלזמה ובשתן (טבלה 1).

ניתוח מעבדה ההודעה 5. תוצאות: חישובים

  1. לחשב את שיעור זרימת שתן (UV; מיליליטר / דקה): [נפח השתן שנאסף (מיליליטר)] ÷ [זמן של אוסף (דקות)]
  2. לחשב גלומרולרי סינון שיעור (GFR; מיליליטר / דקה): [ריכוז שתן אינולין (מיקרוגרם / מיליליטר) x UV (מיליליטר / דקה)] ÷ [קונצרט כלשהו אינולין פלזמה. (מיקרוגרם / מיליליטר)]
  3. לחשב טען נתרן מסונן (μmol / min): ריכוז נתרן פלזמה GFR (μmol / מיליליטר) x (מיליליטר / דקה)
  4. לחשב נתרן הפרשה שיעור (U Na V; μmol / min): ריכוז נתרן שתן (μmol / מיליליטר) x UV (מיליליטר / דקה)
  5. לחשב שברי הפרשה של נתרן (Na FE;%): [U Na V (μmol / min)] ÷ [טען נתרן מסונן (μmol / min)] x 100
  6. לחשב טען מסונן אשלגן (μmol / min): ריכוז אשלגן פלזמה (μmol / מיליליטר) x GFR (מיליליטר / דקה)
  7. לחשב אשלגן הפרשה שיעור (U K V; μmol / min): ריכוז אשלגן שתן (μmol / מיליליטר) x UV (מיליליטר / דקה)
  8. לחשב שברי הפרשה של אשלגן (FE K;%): [U K V (μmol / min)] ÷ [טען אשלגן מסונן (μmol / min)] x 100

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

משתן משמש בהפגנת המעבדה היה פורוסמיד אשר מעכב את הספיגה של של Na ו- K המסוננת על ידי הכליות וכתוצאה מכך גדל Na, K, והפרשת מים בתוך דקות של מתן תרופה מהר מאוד. על ידי המנגנון העיקרי שלה, פורוסמיד צריך להיות השפעות מינימליות על GFR והעומס המסונן של Na ו- K, אבל יגביר את זרימת שתן, והפרשה חלקית של Na וק

תוצאות הנציג בטבלה 3 מראות כי בעכברוש הרדים, הממוצע של הערכים מראש התרופה לGFR היה 3.2 מיליליטר /...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

סמן מתאים למדידת GFR לעמוד בארבעה קריטריונים: להיות מסונן באופן חופשי בglomerulus, להיות מאוגד לחלבוני פלזמה, ולא ייקלט ולא מופרש בנפרון. אינולין הוא פולימר פרוקטוז אשר עונה על קריטריונים אלה. כתוצאה מכך, הפינוי כלייתי של אינולין נחשב תקן הזהב למדידת GFR 7. הטכניקה הפגינה מייצגת את הגישה המסורתית של קביעת הפינוי כלייתי של אינולין באמצעות אוספי שתן מתוזמן במהלך עירוי קבוע של אינולין 8,9. מדידות אינולין מסורתיות נעשו שימוש בשיטת anthrone לייצר נחישות colorimetr...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים כלכליים מתחרים. הדעות או הטענות הכלולות במסמך זה הן את הדעות פרטיות של המחבר ואינם להתפרש רשמי או כמשקפים את הדעות של המחלקה לצבא או משרד ביטחון.

תודות

מקור המימון להפגנת המעבדה היה מענק NIGMS: GM077119. אנו מודים לד"ר יוסף ר 'הייווד וד"ר פיטר קובט על תמיכתם של couse הקצר באינטגרטיבית ואיברי מערכות פרמקולוגיה. כמו כן, אנו מודים לגב 'חנה Garver לתמיכה הטכנית שלה הפגנת המעבדה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
5-0 תפר כירורגי משי קלועהתמחויות כירורגיות CorpSP1033
צלחת בדיקה, 96 בארותCostar 3922
בקר סרום אלבומיןסיגמא כימיקל ושותA2934-25G
צנטריפוגהבקמן קולטרמיקרופוגה 18, 357160
צינורות דגימה חרוטייםDot Scientific Inc. #711-FTG
אפליקטורים עם קצה כותנהSolon Manufacturing Co56200
תוכנה לרכישת נתוניםADInstrumentsLabChart Pro 7.0
משקל דיגיטלי Denver InstrumentAPX-4001
FITC-InulinSigma Chemical CoF3272-1G
ספוגי גזהCovidien2146
מיטה כירורגית מחוממתEZ-AnesthesiaEZ-212
HeparinSagnetNDC 25021-402-10
HEPESSigma Chemical CoH3375
IsofluraneAbbott Animal HealthIsoFlo, 5260-04-05
וופורייזר איזופלורןEZ-הרדמהEZ-190F
מיקרו מלקחיים לניתוח מלקחייםביו-רפואיים מכשירי מחקר בע"מ70-1020
Microplate Reader - FluoroskanThermoScientificAscent FL, 5210460
NOVA 5+ מנתח נתרן/אשלגןNOVA BioMedical14156
מחזיקי מחט Olsen-Hegar עם מספרייםFine Science Tools12002-12
PE-190 (לצנתר שלפוחית השתן)BD מתמרלחץ 427435
נ.ב.פ;ADInstrumentsMLT1199
צינורות תרבות פיירקסקורנינג בע"מ99445-12
צנתר עורקי ירך עכברוש יישומיםאסטרטגיים בע"מRFA-01
Salix Furosemide 5%Intervet#34-478
מספריים פזילהכלים מדעיים עדינים14075-11
מספריים כירורגיים לסטודנטיםכלים מדעיים עדינים91402-12
כפפות כירורגיותקימברלי-קלארקסטרלינג כפפות
משאבת מזרקRazel ScientificR99-E
מלקחיים לרקמותכלים מדעיים עדינים91121-12
מספריים לרקמותג'ורג' טימן  Co105-420

5-0 תפר כירורגי משי קלוע התמחויות כירורגיות Corp SP1033 צלחת בדיקה, 96 בארות Costar  3922 סרום בקר אלבומין סיגמא כימיקל ושות 'A2934-25G צנטריפוגה בקמן קולטר מיקרופוג 18, 357160 צינורות דגימה חרוטיים נקודה מדעית בע"מ  #711-FTG אפליקטורים עם קצה כותנה Solon Manufacturing Co 56200 תוכנת רכישת נתונים ADInstruments LabChart Pro 7.0 דיגיטלי קנה מידה  Denver Instrument APX-4001 FITC-Inulin Sigma Chemical Co F3272-1G ספוגי גזה Covidien 2146 מיטת ניתוח מחוממת EZ-הרדמה EZ-212 Heparin Sagnet NDC 25021-402-10 HEPES Sigma Chemical Co H3375 Isoflurane Abbott Animal Health IsoFlo, 5260-04-05 וופורייזר איזופלורן EZ-הרדמה EZ-190F מיקרו מלקחיים לניתוח מכשירי מחקר ביו-רפואיים בע"מ 70-1020 קורא מיקרו-פלטות - Fluoroskan ThermoScientific Ascent FL, 5210460 NOVA 5+ מנתח נתרן/אשלגן NOVA BioMedical 14156 Olsen-Hegar מחזיקי מחטים עם מספריים Fine Science Tools 12002-12 PE-190 (לצנתר שלפוחית השתן) BD Medical 427435 מתמר לחץ  ADInstruments MLT1199 צינורות תרבית פיירקס קורנינג בע"מ 99445-12 קטטר עורק מחודד עכברוש יישומים אסטרטגיים בע"מ RFA-01 Salix Furosemide 5% Intervet #34-478 מספריים פזילה כלים מדעיים עדינים 14075-11 מספריים כירורגיים לסטודנטים כלי מדע עדינים 91402-12 כפפות כירורגיות קימברלי-קלארק סטרלינג כפפות ניטריל משאבת מזרק Razel Scientific R99-E מלקחיים לרקמות כלים מדעיים עדינים 91121-12 מספריים לרקמות ג'ורג' טימן  CO 105-420< לעמ>

' רפואי BD&ניטריל

מקורות

  1. Silverthorn, D. U. Human Physiology: An integrated approach. , Pearson. (2012).
  2. Hall, J. E. Guyton and Hall Textbook of Medical Physiology. , 303-344 (2011).
  3. Levey, A. S. Measurement of renal function in chronic renal disease. Kidney International. 38 (1), 167-184 (1990).
  4. Thurau, K., Valtin, H., Schnermann, J. Kidney. Annual Review of Physiology. 30, 441-524 (1968).
  5. Shannon, J. A., Smith, H. W. The excretion of inulin, xylose, and urea by normal and phoriziniaed man. Journal of Clinical Investigation. 14, 393-401 (1935).
  6. Jespersen, B., Knupp, L., Northcott, C. A. Femoral arterial and venous catheterization for blood sampling, drug administration and conscious blood pressure and heart rate measurements. Journal of Visualized Experiments. (59), (2012).
  7. Sterner, G., et al. Determining 'true' glomerular filtration rate in healthy adults using infusion of inulin and comparing it with values obtained using other clearance techniques or predictive equations. Scandinavian Journal of Urology and Nephrology. 42, 278-285 (2008).
  8. Toto, R. D. Conventional measurement of renal function utilizing serum creatinine, creatinine clearance, inulin and para-aminohippuric acid clearance. Current Opinion in Nephrology and Hypertension. 4 (6), 505-509 (1995).
  9. Matavelli, L. C., Kadowitz, P. J., Navar, L. G., Majid, D. S. Renal hemodynamic and excretory responses to intra-arterial infusion of peroxynitrite in anesthetized rats. Americam Journal of Physiology. 296, F170-F176 (2009).
  10. Davidson, W. D., Sackner, M. A. Simplification of the anthrone method for the determination of inulin in clearance studies. Journal of Laboratory, & Clinical Medicine. 62, 351-356 (1963).
  11. Symes, A. L., Gault, M. H. Assay of inulin in tissues using anthrone. Clinical Biochemistry. 8 (1), 67-70 (1975).
  12. Shalmi, M., Lunau, H. E., Petersen, J. S., Bak, M., Christensen, S. Suitability of tritiated inulin for determination of glomerular filtration rate. Americam Journal of Physiology. 260 (2 Pt 2), F283-F289 (1991).
  13. Denton, K. M., Anderson, W. P. Glomerular untrafiltration in rabbits with superficial glomeruli. EUropean Journal of Physiology. 419 (3-4), 235-242 (1991).
  14. Jobin, J., Bonjour, J. -P. Measurement of glomerular filtration rate in conscious unrestrained rats with inulin infused by implanted osmotic pumps. Americam Journal of Physiology. 248 (5 Pt 2), F734-F738 (1985).
  15. Lorenz, J. N., Gruenstein, E. A simple, nonradioactive method for evaluating single-nephron filtration rate using FITC-inulin. Americam Journal of Physiology. 276 (1 Pt 2), F172-F177 (1999).
  16. Qi, Z., et al. Serial determination of glomerular filtration rate in conscious mice using FITC-inulin clearance. Americam Journal of Physiology. 286 (3), F590-F596 (2004).
  17. Bivona, B. J., Park, S., Harrison-Bernard, L. M. Glomerular filtration rate determinations in conscious type II diabetic mice. Americam Journal of Physiology. 300 (3), F618-F625 (2011).
  18. Rosen, S. M. Effects of anaesthesia and surgery on renal hemodynamics. British Journal of Anesthesiology. 44, 252-258 (1972).
  19. Cousins, M. J. Anesthesia and the kidney. Anaesthesia and intensive care. 11 (4), 292-320 (1983).
  20. Walter, S. J., Zewde, T., Shirley, D. G. The effect of anaesthesia and standard clearance procedures on renal function in the rat. Quarterly Journal of Experimental Physiology. 74, 805-812 (1989).
  21. Rieg, T. A. A high-throughput method for measurement of glomerular filtration rate in conscious mice. Journal of Visualized Experiments. (75), (2013).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

הפגנת מעבדה לפיזיולוגיה: גלומרולרי סינון שיעור בחולדה
צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.