הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

TH17 דגם דלקת של לוע תחתון פטרת בעכברים immunodeficient

9.2K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/52538

⸱

18 בפברואר 2015

 ,  , 
1Department of Biological Sciences, School of Dental Medicine, Case Western Reserve University

במאמר זה

סיכום

למרות שמודלים של זיהום קנדידה זמינים לחקר עמידות חיסונית של מארחים, מודל לחקר אימונופתולוגיה מתווכת של תאי T בהקשר של זיהום קנדידה נעדר. כאן אנו מתארים שיטה לביסוס אימונופתולוגיה של Th17 הקשורה לזיהום קנדידה דרך הפה בעכברים חסרי חיסון.

תקציר

מחלת קנדידה אורו-לוע (OPC) נגרמת לא רק בשל היעדר עמידות חיסונית למארח, אלא גם בהיעדר רגולציה מתאימה של אימונופתולוגיה הנגרמת על ידי זיהום. למרות שתאי Th17 מעורבים בהגנה אנטי-פטרייתית, תפקידם באימונופתולוגיה אינו ברור. מחקר זה מציג שיטה לביסוס אימונופתולוגיה של Th17 דרך הפה הקשורה לזיהום קנדידלי דרך הפה בעכברים חסרי חיסון. השיטה מבוססת על בנייה מחדש של עכברים לימפופנים עם תאי Th17 בתרבית מבחנה, ולאחר מכן זיהום אוראלי בקנדידה אלביקנס (C. albicans). התוצאות מראות שתאי Th17 לא מרוסנים גורמים לדלקת ופתולוגיה, וקשורים למספר קריאות מדידות כולל ירידה במשקל, ייצור ציטוקינים פרו-דלקתיים, היסטופתולוגיה של הלשון ותמותה, מה שמראה שמודל זה עשוי להיות בעל ערך בחקר אימונופתולוגיה של OPC. העברה מאמצת של תאים רגולטוריים (Tregs) שולטת ומפחיתה את התגובה הדלקתית, מה שמראה שניתן להשתמש במודל זה כדי לבחון אסטרטגיות חדשות לנטרול דלקת בפה. מודל זה עשוי להיות ישים גם בחקר אימונופתולוגיה של Th17 דרך הפה באופן כללי בהקשר של מחלות פה אחרות.

מבוא

זיהומים ודלקות בפה נקשרו לסרטן ולמחלות לב וכלי דם, ויש להם השפעה דרמטית על בריאות האדם הכללית2,3. זיהומים אופורטוניסטיים ודלקת הנגרמים על ידי C. albicans קשורים לחסרים חיסוניים ראשוניים (PID)4,5, הפרעות דלקתיות כגון דלקת חניכיים 6,7, תסמונת סיוגרן ומחלת בלוטות הרוק8,9, כמו גם קרצינומה של תאי קשקש בפה 10-12. C. albicans היא פטרייה קומנסלית דימורפית המיישבת את פיהם של 60% מבני האדם הבריאים ללא תסמינים, אך היא הפתוגן הפטרייתי הנפוץ ביותר הגורם לזיהומים כאשר ההגנה של המארח נחלשת13-15. הוא גורם לזיהומים חוזרים וכרוניים ודלקות בחולים עם איידס ו-PID, וגם אצל אנשים מדוכאי חיסון אחרים. כקומנסל, עומס הקולוניזציה שלו קשור לשינוי במגוון המיקרוביום האוראלי הכולל16. כפתוגן הוא גורם למספר צורות של קנדידה אורו-לוע כגון פסאודומברני חריף, אטרופי חריף, אטרופי כרוני, היפרטרופי כרוני/היפרפלסטי ודלקת זוויתית.

הגנה מפני C. albicans נקבעת לא רק על ידי עמידות חיסונית של המארח, אלא גם על ידי היכולת לשלוט כראוי באימונופתולוגיה הנגרמת על ידי קנדידה. למרות שקומנסלים כגון C. albicans תורמים לאפנון והחמרה של מצבים דלקתיים אחרים בפה, המנגנונים שבאמצעותם מתרחשת דיסביוזה במהלך זיהומים אופורטוניסטיים אינם ברורים. מלבד התפקיד הידוע של תאי Th17 אדפטיביים בתגובת הזיכרון ל-C. albicans17, תפקידם בהתחלה והנצחה של פתולוגיה דלקתית במהלך זיהומים כרוניים נותר לא ברור. יתר על כן, מחלות דלקתיות בפה כגון תסמונת סיוגרן ודלקת חניכיים קשורות לפתולוגיה מתווכת Th17. מעניין שמחלות אלה קשורות מאוד גם ל-OPC תכוף. עם זאת, האינטראקציות בין תאי Th17, אימונופתולוגיה אוראלית של OPC ומחלות דלקתיות אחרות בפה אינן נחקרות.

למרות שקיימים מודלים עכבריים של זיהום ראשוני ומשני של קנדידה דרך הפה, מודל עכבר לחקר זיהום קנדידה הקשור לדלקת Th17, במיוחד בהקשר של כשל חיסוני אינו זמין. מחקר זה מציג שיטה לביסוס דלקת Th17 דרך הפה הקשורה לזיהום קנדידה דרך הפה בעכברים. זיהום קנדידה בעכברים מאופיין בנגעים פטרייתיים, דלקת בלשון, ירידה בצריכת מזון, ירידה במשקל ובסופו של דבר מצב גוסס. פתולוגיה אוראלית דומה לנגעים כרוניים של זיהום קנדידלי, כמו גם דיספלזיה אפיתל במודלים של סרטן הפה בעכברים12,18.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

הערה: הניסויים באמצעות עכברים בוצעו בהתאם לועדת רווחת בעלי החיים המוסדיים (IACUC) הנחיות.

1. לשחזר את סמרטוט-1 - / - העכברים עם תאים אני n חוץ הגופייה בתרבית TH17 (שלושה ימים לפני זיהום)

  1. להקמת תאי TH17, תרבות תאי T מסוג CD4 + הנאיבי CD44low CD62Lhigh CD25- (3 x 104) ב 96 צלחות U-תחתונה גם לבד, או שיתוף תרבותם יחד עם 3 x 104 CD4 + CD25 + Foxp3 + Tregs בנוכחות מסיסה α-CD3, α-CD28 (2 מיקרוגרם / מיליליטר) נוגדנים ותאי הצגת אנטיגן, בתנאי TH17 (מקוטב באמצעות IL-6 (25 ng / ml), β TGF- (2 ng / ml) (1 מיקרוגרם / מיליליטר) , Α-IFN-γ (2 מיקרוגרם / מיליליטר) ו-IL-4 α (2 מיקרוגרם / מיליליטר)) לשלוש עד ארבעה ימים.
    הערה: תאים נאיביים ובתקנות T מוינו באמצעות תא קרינה המופעל מיון (FACS)ד נהלי בידוד תא מגנטי ותרבותי כפי שתואר לעיל 19-22.
  2. ביום 4, לאחר resuspending תאי TH17 באמצעות פיפטה, לאסוף אותם מתרבויות, וצנטריפוגות בתנאים סטריליים.
    1. קח aliquot קטן של תאים אלה לבחינת הכדאיות שלהם ועבור phenotyping. Resuspend אותם 500 μl של מדיום RPMI, להוסיף יודיד propidium (200 ng / ml) ולהעריך את הכדאיות שלהם באופן מיידי על ידי cytometry זרימה. בצע phenotyping ידי cytometry זרימת ההערכה של ייצור IL-17 א לאחר restimulation (ראה סעיף 6.3).
  3. צנטריפוגה ולשטוף את הנפח העיקרי של התאים בPBS סטרילי ב 480 XG במשך 6 דקות ב 4 ° C בכל השלבים, אלא אם כן צוין אחרת.
  4. להשתמש בתאים אלה להעברת מאמצת לCD45.2 Rag1 6-8 שבוע ישן - / - עכברי immunodeficient.
    1. Resuspend התאים בצפיפות תאי 1 x 10 7 תאים / מיליליטר באמצעות PBS סטרילי הקר.
    2. הזרק של התאים 100 μl ידי intrapהזרקת eritoneal, באמצעות 25 מחטים G על 1 מיליליטר מזרקים טוברקולין, כך שעכבר אחד מקבל 1 x 10 6 תאים. עכברים מסוימים יקבלו תאי PBS או TH17 בלבד, ועכברים אחרים יקבלו תאי TH17 שהיו שיתוף תרבותי עם תאי Treg.
      הערה: בצע את כל שלבי סביבה נקיה מחיידקים.

2. גידול C. אלביקנס לזיהום (יום אחד לפני זיהום)

  1. לפני החיסון, לפזר חמש מושבות של ג CAF2-1 זן אלביקנס מעבדה בהשעית PBS סטרילי 100 μl, ומוסיף את ההשעיה למרק סטרילי.
  2. לחסן 5 מושבות של ג אלביקנס ב 50 מיליליטר של בסיס חנקן שמרים (YNB ללא חומצות אמינו) / Peptone / בינוני דקסטרוז מרק ודגירה בחממה שייקר ב 30 מעלות צלזיוס למשך 15-18 שעות ב 130 סל"ד.
  3. לפקח על המרק לעננות, כפי שהיא אינדיקציה לצמיחה של הפטרייה.

3. קנדידהקציר וסדר ספירה (ביום של זיהום)

  1. לאסוף 10 מיליליטר של מרק קנדידה ב 15 מיליליטר צינורות. לנפחים גדולים יותר, לאסוף קנדידה בצינורות 50 מיליליטר.
  2. צנטריפוגה blastospores ב1,900 XG במשך 5 דקות בRT בכל השלבים, אלא אם כן צוין אחרת. גלולה blastospores ידי צנטריפוגה, ואחריו הסרת supernatant.
  3. אם יש צינור אחד או יותר, בריכת blastospores קנדידה מצינורות מרובים, הוספת PBS סטרילי לכדורים וresuspend אותם 10 מיליליטר של PBS לספירה.
  4. קח 20 μl של blastospores בצינורות 1.5 מיליליטר microcentrifuge, להוסיף 20 μl של paraformaldehyde 2X ולדגור על RT במשך 15-20 דקות. רוזן blastospores הקבוע באמצעות hemocytometer מתחת למיקרוסקופ.
    הערה: Paraformaldehyde הוא מסרטנת. פתח את הפתרון חי רק במנדף.
  5. בינתיים, לחזור על שטיפת blastospores לפחות פעמיים, על ידי צנטריפוגה tמכפלת בPBS, וpelleting blastospores. שמור את כדורים ב 15 מיליליטר צינורות ב RT, בשכונה ABSL1, מוכן לזיהום.
  6. להשאיר כמה PBS סטרילי בRT לresuspending blastospores לזיהום.
  7. לאחר ספירה, להוסיף PBS סטרילי לגלולת blastospore להתאים את מספרי תא השמרים blastospore עד 2 x10 8 תאים / מיליליטר שמרים. זה ההשעיה blastospore שישמש להדביק עכברים.
    הערה: בצע את כל שלבי סביבה נקיה מחיידקים.

4. זיהום עכברים (3-5 ימים לאחר העברת Cell)

הערה: הליך הזיהום הבסיסי מבוצע כפי שתואר לעיל 19,23-25.

  1. לשקול את סמרטוט-1 - / - העכברים שקיבלו PBS או תאי שלושה ימים קודם לכן.
  2. לחשב את המינון של חומרי הרדמה באמצעות משקל גופם. להרדים את העכברים על ידי מתן קטמין / תערובת xylazine (16.1 מ"ג / מיליליטר ו -1.6 מ"ג / מיליליטר), באמצעות 25 מחטים G על 1 מיליליטר מזרקים טוברקולין, על ידי מילת קריאההזרקת aperitoneal.
    1. לנהל 50 μl לכל 10 גרם של משקל גוף. (כלומר, 0.8 מ"ג של קטמין ו0.08 מ"ג של xylazine / 10 גרם של משקל גוף או 80 מ"ג של קטמין ו -8 מ"ג xylazine לכל קילוגרם של משקל גוף בהתאמה). שים לב לתגובת קמצוץ הבוהן כל 15 דקות לאחר הרדמה.
      הערה: מינון זה יגרום 60-90 דקות של הרדמה, וזה מספיק להליך הזיהום.
    2. החל המשחה הסיכה עיניים בעיניים של העכברים כדי למנוע את הקרניות מהתייבשות. כחומר הסיכה העין עלולה להתייבש, לחזור על שימון עיניים כל 45 דקות.
  3. הזרק 1 מיליליטר של תמיסת מלח (0.9% NaCl) תת עורי בגב הצמוד לforelimb, כדי לסייע להחזרת נוזלים של העכברים במהלך הרדמה.
  4. להשיג כלוב חדש, נקי. בצע את עכבר הליך אחד זיהום בזמן, הצבת כל עכבר לכלוב החדש הנגוע פעם. בצע את PBS / זיהום הדמה ראשון, ולאחר מכן להמשיך לGro זיהום קנדידהעליות.
  5. להרים את העכבר הרדים ולפתוח את הפה הרחב כדי לחשוף את בסיס הלשון.
    1. הנח כותנה קוטר כדור 3 מ"מ רווי עם 50 μl של PBS או blastospore השעיה, sublingually בחלל הפה למשך 90 דקות. הפוך את העכברים כל חזית 15 דקות וחזרתי למניעת גודש ריאה, על מנת להבטיח שכדורי צמר גפן לא זזו.
  6. הגדרת טיימר לכל עכבר כדי להבטיח 90 דקות של חיסון שאם או קנדידה בחלל הפה.
  7. שמור אותם בכלוב תחת מנורת החום (4 מטרים), וכל עכבר על כריות ג'ל חום.
  8. ודא כי הלשון תבוטל בתוך ומחוץ לשיניים, כדי למנוע את השיניים ופצעו את הלשון.
  9. בתום 90 דקות, להסיר את כדור צמר גפן מפיו של העכבר. Watch עבור כל עכבר שעשוי להתאושש מהרדמה מוקדם מ -75 דקות. במקרה כזה, להרדים אותם שוב עם קטמין (40 מ"ג / קילוגרם) בלבד.

5. ההודעה Procedurדואר ניטור (בהרדמת 90 דקות)

  1. השתמש ברפידות ג'ל החום במהלך ההרדמה 90 דקות.
    1. כדי לשמור על טמפרטורת הגוף ולמנוע חנק, אל תאפשר עכברים להתאושש על מצעי עכבר התירס של הרגילים.
  2. לאחר ההתאוששות מהרדמה, לנהל 1 מיליליטר נוסף של 0.9% מתחת לעור NaCl סטרילי בשני מקומות על הגב.
  3. שמור עד חמש PBS (דמה) עכברים מחוסן בכל כלוב. בית עכברים נגועים רק 1-2 בכל כלוב.
  4. מלא את כרטיס ההליך בראשי תיבות בכל יום לאחר ההליך כדי לרשום את השינויים במשקל הגוף, טיפוח הרגלים ועל בריאות כללית.

6. הערכת הדלקת

משקל 6.1) הפסד

  1. לשקול את העכברים בכל יום במהלך הזיהום, החל מהיום לפני הליך זיהום.
    הערה: בדרך כלל, עכברי immunodeficient הוזרקו תאי TH17 וללא את תקנות T להיכנע עד 2030% ירידה במשקל עקב העלייה פטרייתי נטל 19 והחריפה את דלקת.

6.2) ניקוד היסטולוגיה של הלשון

  1. להקריב את העכברים על ידי CO 2 מחנק ואחריו נקע בצוואר הרחם.
  2. פתח את הלסתות ולנתח את הלשון עם מספריים ומלקחיים. שימוש במלקחיים בוטים להחזיק את הלשון, ובאמצעות המספריים להגיע לחלק האחורי של הפה כדי לחתוך את הקצה האחורי של הלשון.
  3. לhematoxylin immunocytochemical וeosin מכתים (H & E) של רקמות הלשון, לשטוף את רקמות לשון עם קרח הקר PBS. הוסף 5 מיליליטר של פורמלין 10% במשך 2-3 לשונות ולתקן אותם O / N ב 15 מיליליטר צינורות.
    1. למחרת, להסיר את פורמלין ולטבול את הרקמות ב 5 מיליליטר של אתנול 70% כדי למנוע היפר-קיבעון. שלח אותם לשירות מסחרי להמשיך עם הטבעת פרפין, חתך וצביעת חלקי פרפין.
      הערה: שירות היסטולוגיה מסחרי משמשת כדי לבצע שלבים אלה.
  4. ברגע השקופיות חזרו משירות היסטולוגיה המסחרי, הכיתה הדלקת על ידי התבוננות בסעיפי הרקמות תחת מיקרוסקופ אור.
    1. ציון 0-5, עם 0 להיות לא דלקת, ו -5 להיות הדלקת החמורה ביותר. ציון הדלקת באמצעות טבלה 1.

6.3) ייצור ציטוקינים על ידי תאי TH17

הערה: ייצור TNF-α מופרז היא אחד מהקריאות לimmunopathology מוגזם. כאשר עכברים מועברים adoptively עם תאי TH17 רק, זה גורם immunopathology המשויך לייצור TNF-α מוגזם בתאי TH17.

  1. לאסוף השעיה תא בודדת מטחול, בלוטות לימפה בצוואר הרחם, lymphnodes בבית השחי, ולשון, תוך שימוש בשיטות שתוארו קודם לכן 19.26.
  2. Restimulate התאים עם אצטט myristate phorbol (PMA) (50 ng / ml) וionomycin (500 ng / ml) במשך שעה 4 עם Brefeldin (10 מיקרוגרם / מיליליטר) הוסיף בlAST שעה 2. לשטוף את התאים עם PBS ולתקן אותם באמצעות ערכת הקיבוע / permeabilization מסחרית בהתאם להוראות יצרן.
  3. לבצע מכתים ציטוקינים סלולריים תוך שימוש באנטי TNF-α fluorochrome מצומדות, אנטי-IL-17 א ונוגדני ROR-γt כפי שתואר לעיל 19.
  4. בקצרה, resuspend תאי חיץ permeabilization 1X עם הקוקטייל של אנטי TNF-α, אנטי-IL-17 א ונוגדני ROR-γt, כל נוגדן ל 2 - 3 מיקרוגרם / מיליליטר ריכוז סופי.
  5. דגירה התאים עבור שעה 1 ב RT.
  6. לאחר הדגירה, לשטוף את התאים עם חיץ permeabilization 1X.
  7. Resuspend התא גלולה ב 500 μl של PBS עם 0.5% אלבומין בסרום שור לניתוח cytometry זרימה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

במודל זה, שני עכברי קנדידה -infected ועכברים נגוע בסמרטוט-1 - / - רקע immunodeficient הועבר adoptively עם תאי TH17 3-5 ימים לפני הזיהום. בסך הכל 10-12 עכברים שימש לניסויים, עם 2 עכברים בכל קבוצות שאם נגוע, ו4-5 בכל אחת מהקבוצות נגועות קנדידה. תאים נאיביים נגזרו מעכברי Thy1.1 או CD45.1 congenic, כך שתאי TH17 הזריקו אותרו in vivo באמצעות Thy1.1 או CD45.1 צביעת בהתאמה (איור 1 א). את תקנות T-הועבר Co נגזרו מעכברי CD45.2...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

מודל זה מבוסס על גרימת ג האוראלי זיהום אלביקנס דלקת TH17 תלויה. בגלל העדר את תקנות T, דלקת תא TH17 המושרית היא חסרת מעצורים ומובילה לimmunopathology גרוע נפתר. במבחנה נגזרת תאי CD4 נאיביים מקוטבים כמו תאי TH17 שמשו להעברת המאמצת. 40 - 50% מCD4 + תאים בתרבית להראות ביטוי לגילוי IL-17 א סביב יום 3 (תאי TH17), ולכן שמשו להזרקה בעכברים. היתרון העיקרי של המודל הוא שתאי TH17 לגרום immunopathology ספציפי זיהום שיכול להשתפר ביעילות עם הזרקת reg

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים פיננסיים מתחרים.

תודות

אנו מודים לד"ר הלן ברנשטיין על שסיפקה לנו גישה לציטומטר הזרימה שלה. אנו מודים גם למתקן ציטומטריית הזרימה CFAR על שירותי ציטומטריית הזרימה. פרויקט זה נתמך בחלקו על ידי מימון ניצול הליבה של CTSC ומענק תאגיד STERIS/בתי חולים אוניברסיטאיים-המחלקה למחלות זיהומיות ל-PP.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
CAF-2אוניברסיטת פיטסבורג (שרה גפן)-תרבית קנדידה
U-bottom 96 צלחות באר פישר055588משמש לתרבית תאים
a-CD3 eBiosciences16-0031-85קיטוב תאים לתנאי Th17
a-CD28 eBiosciences16-0281-85קיטוב תאים לתנאי Th17
m-IL-6Bio BasicRC232קיטוב תאים לתנאי Th17
h-TGF-b מו"פ D240-Bקיטוב של תאים לתנאי Th17
a-IFN-g eBiosciences16-7311-85קיטוב תאים לתנאי Th17
a-IL-4 eBiosciences16-7041-85קיטוב תאים לתנאי Th17
alpha;-IL17A ef660eBiosciences50-7177-82משמש לתרבית תאים - 1:50
α-TNFa-PE-Cy7eBiosciences25-7423-41משמש לתרבית תאים - 1:100
α-RORgt PE eBiosciences12-6981-82משמש לתרבית תאים - 1:50
YNB ללא חומצות אמינו)/פפטון/דקסטרוז מדיום ציר ביו בייסיקS507. SIZEמדייום לגידול קנדידה
חממת שייקר ניו ברונסוויק ScientificInnova 4300גידול דגירה לקנדידה
15 מ"ל צינורותBio BasicBT888-SYמשמש לתרבית תאים וגידול קנדידה
צינורות 50 מ"לBio BasicCT 788-YSמשמש לתרבית תאים וגידול קנדידה
צנטריפוגה שולחניתVWR International LLC82017-654לכדורי קנדידה -900 גרם
צנטריפוגהאלגרהתרבית תאים 392302 בקמן קולטר- 480 גרם
1.5 מ"ל שפופרות אפנדורףביו בייסיקBT620-NSהכנת ריכוז סופי של קנדידה
2x פרפורמלדהידמיקרוסקופיה אלקטרונית מדעי15710קיבוע קנדידה לספירת
המוציטומטרVWR International LLC15170-172ספירת תאים
PBS - פוספט מאגר מלחביו בייסיקPD8117הכנת בופרי
קטמין/קסילזין אוניברסיטת קייס ווסטרן ריזרב - מרכז משאבי בעלי חיים-מתקבל מפרוטוקול מאושר על ידי ARC להרדמה
משחת סיכה עיניים  משחת Allergan-Eyeלבעלי חיים למניעת יובש
תמיסת מלח (0.9% NaCl)G Biosciences786-561ניתנת לבעלי חיים למניעת התייבשות
כדור צמר גפן בקוטר 3 מ"מ VWR International LLCBP7603כדורי 3 מ"מ לזיהום בקנדידה
רפידות ג'ל חוםאוניברסיטת קייס ווסטרן ריזרב - מרכז משאבי בעלי חיים-לשמירה על טמפרטורת הגוף והחלמה מהירה
המטוקסילין ואיוזין צביעתHistoserv - MDהיסטולוגיה של רקמות
10% פורמלין מדעי מיקרוסקופיה אלקטרוניתJC1111/MCהיסטולוגיה של רקמות
70% אתנול VWR International LLC97064-490מטרת עיקור
PMA - Phorbol 12-myristate 13-acetateSigma-AldrichP1585-1MGגירוי מחדש של תאים
IonomycinLife Technologies124222 1mgRestimulation of Cells
ערכת חדירות קיבועeBiosciencesE16913-106קיבוע תאים
למזרקי טוברקוליןBD Biosciences309659הזרקת עכברים
25 גרם x 3/8 מחטיםBD Biosciences309626הזרקת עכברים
Rag1 -/- עכברימעבדות ג'קסוןמס' מלאי: 002216עכברים מושתלים
CD45.1 עכברים קונגנייםמעבדות ג'קסוןמס' מלאי:002014 תאי Th17 תורמים
עכברי CB17-SCIDמעבדות ג'קסוןמס' מלאי: 001303עכברי נמען
עכברי Balb/cמעבדות ג'קסוןמס' מלאי: 000651תאי תורם Th17
& -

מקורות

  1. Allam, J. P., et al. IL-23-producing CD68(+) macrophage-like cells predominate within an IL-17-polarized infiltrate in chronic periodontitis lesions. Journal of Clinical Periodontology. 38 (10), 879-886 (2011).
  2. Loesche, W. J. Periodontal disease: link to cardiovascular disease. Compendium Of Continuing Education In Dentistry. 21 (6), 463-466 (2000).
  3. Sfyroeras, G. S., Roussas, N., Saleptsis, V. G., Argyriou, C., Giannoukas, A. D. Association between periodontal disease and stroke. Journal Of Vascular Surgery. 55 (4), 1178-1184 (2012).
  4. Huppler, A. R., Bishu, S., Gaffen, S. L. Mucocutaneous candidiasis: the IL-17 pathway and implications for targeted immunotherapy. Arthritis Research & Therapy. 14 (4), 217(2012).
  5. Sitheeque, M. A., Samaranayake, L. P. Chronic hyperplastic candidosis/candidiasis (candidal leukoplakia). Critical Reviews In. Oral Biology And Medicine : An Official Publication Of The American Association Of Oral Biologists. 14 (4), 253-267 (2003).
  6. Canabarro, A., et al. Association of subgingival colonization of Candida albicans and other yeasts with severity of chronic periodontitis. Journal Of Periodontal Research. 48 (4), 428-432 (2013).
  7. Urzua, B., et al. Yeast diversity in the oral microbiota of subjects with periodontitis: Candida albicans and Candida dubliniensis colonize the periodontal pockets. Medical Mycology. 46 (8), 783-793 (2008).
  8. Ergun, S., et al. Oral status and Candida colonization in patients with Sjogren's Syndrome. Medicina Oral, Patologia Oral Y Cirugia Bucal. 15 (2), e310-e315 (2010).
  9. Hernandez, Y. L., Daniels, T. E. Oral candidiasis in Sjogren's syndrome: prevalence, clinical correlations, and treatment. Oral Surgery, Oral Medicine, And Oral Pathology. 68 (3), 324-329 (1989).
  10. Gall, F., et al. Candida spp. in oral cancer and oral precancerous lesions. The New Microbiologica. 36 (3), 283-288 (2013).
  11. Grady, J. F., Reade, P. C. Candida albicans as a promoter of oral mucosal neoplasia. Carcinogenesis. 13 (5), 783-786 (1992).
  12. Dwivedi, P. P., Mallya, S., Dongari-Bagtzoglou, A. A novel immunocompetent murine model for Candida albicans-promoted oral epithelial dysplasia. Medical Mycology. 47 (2), 157-167 (2009).
  13. Cheng, S. C., Joosten, L. A., Kullberg, B. J., Netea, M. G. Interplay between Candida albicans and the mammalian innate host defense. Infection and Immunity. 80 (4), 1304-1313 (2012).
  14. Marodi, L., Johnston, R. B. Invasive Candida species disease in infants and children: occurrence, risk factors, management, and innate host defense mechanisms. Current Opinion In Pediatrics. 19 (6), 693-697 (2007).
  15. Kumamoto, C. A. Inflammation and gastrointestinal Candida colonization. Current Opinion In. Microbiology. 14 (4), 386-391 (2011).
  16. Kraneveld, E. A., et al. The relation between oral Candida load and bacterial microbiome profiles in Dutch older adults. PloS One. 7 (8), e42770(2012).
  17. Hernandez-Santos, N., et al. Th17 cells confer long-term adaptive immunity to oral mucosal Candida albicans infections. Mucosal Immunology. 6 (5), 900-910 (2013).
  18. Hasina, R., et al. ABT-510 is an effective chemopreventive agent in the mouse 4-nitroquinoline 1-oxide model of oral carcinogenesis. Cancer Prevention Research. 2 (4), 385-393 (2009).
  19. Pandiyan, P., et al. CD4(+)CD25(+)Foxp3(+) regulatory T cells promote Th17 cells in vitro and enhance host resistance in mouse Candida albicans Th17 cell infection model. Immunity. 34 (3), 422-434 (2011).
  20. Pandiyan, P., et al. The role of IL-15 in activating STAT5 and fine-tuning IL-17A production in CD4 T lymphocytes. J Immunol. 189 (9), 4237-4246 (2012).
  21. Pandiyan, P., Lenardo, M. J. The control of CD4+CD25+Foxp3+ regulatory T cell survival. Biology Direct. 3 (6), (2008).
  22. Pandiyan, P., Zheng, L., Ishihara, S., Reed, J., Lenardo, M. J. CD4(+)CD25(+)Foxp3(+) regulatory T cells induce cytokine deprivation-mediated apoptosis of effector CD4(+) T cells. Nat Immunol. 8 (12), 1353-1362 (2007).
  23. Conti, H. R., Huppler, A. R., Whibley, N., Gaffen, S. L., et al. Animal models for candidiasis. Current Protocols In Immunology. Coligan, J. E., et al. 105, 11-19 (2014).
  24. Conti, H. R., et al. Th17 cells and IL-17 receptor signaling are essential for mucosal host defense against oral candidiasis. J Exp Med. 206 (2), 299-311 (2009).
  25. Kamai, Y., et al. New model of oropharyngeal candidiasis in mice. Antimicrobial Agents And Chemotherapy. 45 (11), 3195-3197 (2001).
  26. Pandiyan, P., Bhaskaran, N., Zhang, Y., Weinberg, A. Isolation of T cells from mouse oral tissues. Biological Procedures Online. 16 (1), 4(2014).
  27. Gladiator, A., Wangler, N., Trautwein-Weidner, K., LeibundGut-Landmann, S. Cutting edge: IL-17-secreting innate lymphoid cells are essential for host defense against fungal infection. J Immunol. 190 (2), 521-525 (2013).
  28. Leppkes, M., Roulis, M., Neurath, M. F., Kollias, G., Becker, C. Pleiotropic functions of TNF-alpha in the regulation of the intestinal epithelial response to inflammation. International Immunology. 26 (9), 509-515 (2014).
  29. Bishu, S., et al. The adaptor CARD9 is required for adaptive but not innate immunity to oral mucosal Candida albicans infections. Infection and Immunity. 82 (3), 1173-1180 (2014).
  30. Quintin, J., et al. Differential role of NK cells against Candida albicans infection in immunocompetent or immunocompromised mice. Eur J Immunol. 44 (8), 2405-2414 (2014).
  31. Ramirez-Garcia, A., et al. Candida albicans and cancer: Can this yeast induce cancer development or progression. Critical Reviews In Microbiology. , 1-13 (2014).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

TCandida albicansTreg
TH17 דגם דלקת של לוע תחתון פטרת בעכברים immunodeficient
צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.