דה-מיאלינציה מוקדית מושרה בעצב הראייה באמצעות מיקרו-הזרקת ליזולציטין. פוטנציאלים מעוררים חזותיים נרשמים באמצעות אלקטרודות גולגולת המושתלות מעל קליפת המוח הראייתית כדי לבחון את הולכת האות לאורך מסלול הראייה in vivo. פרוטוקול זה מפרט את ההליכים הכירורגיים העומדים בבסיס השתלת אלקטרודות ומיקרו-הזרקת עצב הראייה.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
הקלטת פוטנציאל עוררה חזותית במודל עכברוש של demyelination עצב אופטי הניסויי
במאמר זה
סיכום
תקציר
הקלטת הפוטנציאל המעורר החזותי (VEP) נמצאת בשימוש נרחב בפרקטיקה הקלינית כדי להעריך את חומרת דלקת עצב הראייה בשלב החריף שלה, ולניטור מהלך המחלה בתקופת המעקב. שינויים בפרמטרים של VEP נמצאים בקורלציה הדוקה עם נזק פתולוגי בעצב הראייה. פרוטוקול זה מספק תיאור מפורט על מודל המכרסמים של מיקרו-הזרקה של עצב הראייה, שבו נוצר נגע דמיאלינציה חלקי בעצב הראייה. טכניקות הקלטת VEP נדונות גם כן. באמצעות אלקטרודות מושתלות בגולגולת, אנו מסוגלים לרכוש עקבות VEP הניתנים לשחזור תוך ובין מפגשים. ניתן לרשום VEPs על בעלי חיים בודדים לאורך תקופה כדי להעריך את השינויים התפקודיים בעצב הראייה לאורך. מודל הדמיאלינציה של עצב הראייה, בשילוב עם פרוטוקול ההקלטה של VEP, מספק כלי לחקירת תהליכי המחלה הקשורים לדמיאלינציה ורמיאלינציה, וניתן להשתמש בו כדי להעריך את ההשפעות של תרופות רמיאלינציה חדשות או טיפולים נוירו-פרוטקטיביים.
מבוא
דלקת עצב הראייה היא אחת הצורות הנפוצות ביותר של נוירופתיה אופטית, הגורמת לאובדן ראייה מלא או חלקי1. מבחינה היסטולוגית, הוא מתאפיין בדמיאלינציה דלקתית, אובדן אקסונלי של תאי גנגליון ברשתית ודרגות שונות של רמיאלינציה בעצב הראייה2. דלקת עצב הראייה היא בדרך כלל ההופעה הגלויה של טרשת נפוצה. הפוטנציאל המעורר הוויזואלי (VEP) הוא כלי לא פולשני לחקירת תפקוד מערכת הראייה. הוא משקף את התפקוד הפוסט-רשתית מהרשתית לקליפת הראייה הראשונית ומושפע במצבים רבים של מחלת עצב הראייה3. ה-VEP שימש בעיקר בחולי דלקת עצב הראייה כדי להעריך את תקינות מסלול הראייה4.
ההשהיה של VEP, המשקפת את מהירות הולכת האות לאורך מסלול הראייה,....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
הצהרת אתיקה: כל הנהלים הקשורים בעלי חיים נערכו בהתאם לקוד האוסטרלי עיסוק לטיפול והשימוש בבעלי חיים למטרות מדעיות וההנחיות של הצהרת ארוו לשימוש בבעלי חיים ברפואת עיניים ומחקר חזון, ואושרו על ידי ועדת האתיקה של בעלי חיים מאוניברסיטת Macquarie.
1. VEP אלקטרודה השרשה
- להרדים את החיה עם זריקת intraperitoneal של קטמין (75 מ"ג / קילוגרם) וmedetomidine (0.5 מ"ג / קילוגרם).
שים לב: בעקבות אינדוקציה של הרדמה, להתבונן רפלקסים נסיגה (מבחן קמצוץ, רפלקס מצמוץ וpalpebral, וכו ....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
עקבות VEP התוך sessional שחזור מוצגות באיור 1 ועיכוב משמעותי בהשהית N1 ניתן לראות לאחר הזרקת עצב הראייה. נגעי עצב ראייה חלקיים של demyelination ניתן לצפות בקטעים היסטולוגית באמצעות מכתים הכחול מהיר Luxol 5. איור 2 מראה קטע נציג עם נגע demyelinated מוקדי קטן במרכז של עצב הראייה. שים לב שהחתך אינו מייצג נפח כולל של נגע. אזור demyelinated ניתן למדוד בכל חתך ברציפות של העצב להסיק באמצעות שחזור תלת ממדי נפח הנגעים. אנחנו הוכחנו מתאם חזק בין .......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
עצב הראייה רגיש מאוד לנזק מכני. פגיעה בריסוק עצב הראייה במשך 1 שניות יכולה להוביל לאובדן של כ-75% של RGC במשך תקופה של שבועיים10. לכן, נדרשת זהירות רבה בעת ביצוע ההליכים הכירורגיים. על פי ניסיונם של המחברים, עדיף בהרבה לאמץ גישת דיסקציה קהה כדי לחשוף ולפנות דרך הרקמות סביב עצב הראייה לאורך כיוון העצב, מאשר לחדור בכיוון מאונך לעצב הראייה. כמו כן, יש לפרוש את הדורה והארכנואיד לאורך כדי למנוע נזק דמוי אקסוטומיה לאקסוני ה-RGC. הכחול של אוון משמש בדרך כלל כדי להקל על המיקרו-הזרקה, מכיוון שנוכחות הצבע הופכת את העצב .......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
לאף אחד מהכותבים אין אינטרסים מתחרים או אינטרסים מנוגדים.
תודות
מחקר זה נתמך על ידי רפואת עיניים מכון המחקר של אוסטרליה (אוריה). אנו מודים לפרופ 'Algis Vingrys וד"ר המפץ וי, אוניברסיטת מלבורן, בתחילה עוזר לנו לפתח את טכניקת הקלטת VEP.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| קטמין 100 מ"ג/מ"ל (קטמיל) | Troy Laboratories | AC 116 | |
| Medetomidine 1 מ"ג/מ"ל (Domitor) | פייזר | sc-204073 | |
| טרופיקמיד 1.0% (Mydriacyl) | Alcon | sc-202371 | |
| מערכת שמיכה הומו-תרמית | הרווארד מכשיר | NC9203819 | |
| מד עכבה | דשא | F-EZM5 | |
| אלקטרודות בורג | מיקרו מחברים | M1.0&; חריץ Csk 3 מ"מ M/T 304 S/S | |
| אלקטרודות מחט תת-עוריות | דשא | F-E3M-72 | |
| תיקון מהיר | DeguDent GmbH | ||
| דיודה פולטת אור | Nichia | NSPG300A | |
| Bioamplifier | CWE, Inc. | מערכת BMA-400 | |
| CED | קיימברידג' עיצוב אלקטרוני, בע"מ | מזרק Power1401 | |
| המילטון | המילטון | 87930 | |
| ליזולציטין | סיגמא | L4129 | |
| אוון s כחול | סיגמא | E2129 |
מקורות
- Balcer, L. J. Clinical practice. Optic neuritis. N Engl J Med. 354 (12), 1273-1280 (2006).
- Lassmann, H. Multiple sclerosis as a neuronal disease. Waxman, S. G. , Elsevier. 153-164 (2005).
- Fahle, M., Bach, M.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
