פיגומי מתכת ביו-אקטיביים ואמינים מכנית יוצרו בשיטה המורכבת משני תהליכים, יציקת הקפאה דינמית לייצור Ti נקבובי, וציפוי וצפיפות של פיגומי Ti. תהליך הצפיפות הוא פשוט, יעיל וישים לייצור פיגומים מדורגים פונקציונלית.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
פיגומי מתכת ביו-אקטיביים ואמינים מכנית יוצרו בשיטה המורכבת משני תהליכים, יציקת הקפאה דינמית לייצור Ti נקבובי, וציפוי וצפיפות של פיגומי Ti. תהליך הצפיפות הוא פשוט, יעיל וישים לייצור פיגומים מדורגים פונקציונלית.
מערכות ביו-מתכת היו בשימוש נרחב ליישומים ביו-רפואיים, בפרט, כחומרים נושאי עומס. עם זאת, האתגרים העיקריים הם קשיחות גבוהה ופעילות ביולוגית נמוכה של מתכות. במחקר זה, פיתחנו שיטה חדשה לייצור סוג חדש של פיגומי מתכת נקבוביים נקבוביים צפופים ביו-אקטיביים ואמינים מכנית. השיטה מורכבת משני תהליכי ייצור, 1) ייצור פיגומי Ti נקבוביים על ידי יציקת הקפאה דינמית, ו-2) ציפוי וצפיפות של הפיגומים הנקבוביים. שיטת יציקת ההקפאה הדינמית לייצור פיגומי Ti נקבוביים אפשרה צפיפות של פיגומים נקבוביים על ידי מזעור הזיהום הכימי והפגמים המבניים. תהליך הצפיפות ייחודי משלוש סיבות. ראשית, תהליך הצפיפות הוא פשוט, מכיוון שהוא דורש שליטה בפרמטר אחד בלבד (מידת הצפיפות). שנית, הוא יעיל, מכיוון שהוא משיג שיפור מכני ושחרור בר-קיימא של ביומולקולות מפיגומים נקבוביים. שלישית, יש לו יישומים רחבים, מכיוון שהוא ישים גם לייצור פיגומים נקבוביים מדורגים פונקציונלית על ידי מתח משתנה מרחבית במהלך הצפיפות.
בעוד בביו-חומרים מתכתיים היה בשימוש נרחב כשתלי עומס נושאות והתקני קיבוע פנימיים בגלל כוחם המעולה המכני והעמידות, 1-3 הם כרוכים שני אתגרים קריטיים: 1) חוסר התאמה מכאנית כי מתכות הן הרבה יותר נוקשה מאשר רקמות ביולוגיות, גרימת נזקים בלתי רצויים לרקמות הסובבות ו- 2) הפעילות הביולוגית נמוכה שלעתים קרובות תוצאות ממשק עני עם רקמות ביולוגיות, לעתים קרובות עוררו תגובות גוף זר (למשל, דלקת או פקקת). 4-6 פיגומי מתכת נקבוביים הוצעו לקדם ingrowth עצם במבנים, שיפור . קשר עצם שתל תוך השפעות מגן מתח מדוכאות בגלל הקשיחות מופחתת שלהם 7-9 יתר על כן, שינויי משטח שונים יושמו כדי לשפר את הפעילות הביולוגית של שתלים מתכתיים; שינויים כאלה כוללים ציפוי משטח המתכת עם מולקולות ביו (למשל, FAC הצמיחהtors) או תרופות (למשל, vancomycin, טטרציקלין). 10-12 עם זאת, בעיות כגון תכונות מכאניות מופחתות של פיגומי מתכת נקבוביים, ירידה בנוקשות והשחרור המהיר של שכבות הציפוי ביו נותרו לא פתורות. 13-16
סגסוגות בפרט, טיטניום (TI) וטי הן אחת ממערכות biometal הפופולריות ביותר בגלל תכונותיהם מכאניות מעולות, היציבות כימית, והתאמה ביולוגית טובה. 13,17-19 גם היישומים בצורת קצפם משכו עניין גוברת מפני 3D רשתות נקבוביות לקדם ingrowth עצם בנוסף לתכונות מכאניות כמו עצם. 20-22 נעשו מאמצים כדי לשפר את התכונות מכאניות על ידי פיתוח שיטות ייצור חדשים, כוללים שכפול של ספוג פולימרים, sintering של חלקיקי מתכת, אב טיפוס ודגמי שיטה (RP), ו שיטת בעל שטח על מנת לשלוט בתכונות השונות של הנקבוביות (למשל, חלק נקבובית,צורה, גודל, הפצה, וקישוריות) וחומר נכסים (למשל, שלב וטומאה מתכתיים). 23-25 לאחרונה, ליהוק ההקפאה של תרחיף מתכת על בסיס מים זכו לתשומת לב רבה כדי לייצר צורות Ti משופרות מכאני עם נקבוביות מיושרות היטב מבנים על ידי ניצול צמיחת דנדריט קרח חד כיווני במהלך התמצקות; עם זאת, זיהום חמצן נגרמים על ידי מגע של אבקות מתכת עם מים דורש טיפול מיוחד כדי למזער embrittlement של פיגומי Ti. 14,15
לכן, פיתחנו גישה חדשה לבודת פיגומי Ti נקבוביים ביו ומכאני מתכונן. תחילה יש 25 הפיגומים מבנים נקבוביים עם נקבוביות של יותר מ -50%. הפיגומים נקבוביים המפוברק היו מצופים במולקולות ביו ולאחר מכן דחוס באמצעות עיתונות מכאנית שבמהלכו הנקבוביות הסופי, תכונות מכאניות ושחרור תרופת התנהגות היו בשליטת appliזן ed. שתלי Ti נקבוביים densified הראו נקבוביות נמוך עם כוח טוב למרות הקשיחות הנמוכה דומה לזה של עצם (3-20 GPA). 2 בגלל שכבת הציפוי, הפעילות הביולוגית של Ti הנקבובי densified השתפרה באופן משמעותי. יתר על כן, בגלל המבנים הנקבוביות שטוחים הייחודיים הנגרמים על ידי תהליך הציפוף, המולקולות ביו המצופה נראו להשתחרר בהדרגה מהפיגום, שמירה על יעילותם לתקופה ממושכת.
במחקר זה, הצגנו שיטה הוקמה לפברק פיגומי Ti נקבוביים densified לשימוש פוטנציאלי ביישומים ביו-רפואיים. הפרוטוקול כולל ליהוק הקפאה דינמי עם slurries מתכת וציפוף של פיגומים נקבוביים. ראשית, לפברק פיגומי Ti נקבוביים עם משיכות טובות שיטת יציקת הקפאה הדינמית הוצגה כפי שמוצגת באיור 1 א. אבקת Ti פוזרה בcamphene הנוזלי; לאחר מכן, על ידי הפחתת הטמפרטורה,השלב הנוזלי היה הקרושה, וכתוצאה מכך ההפרדה בין שלב רשת אבקת טי וגבישי camphene מוצקים. בהמשך לכך, הגוף הירוק טי-camphene התגבש היה sintered בי אבקות Ti היו מרוכזים עם תמוכות Ti רציפות, ושלב camphene הוסר לחלוטין כדי להשיג מבנה נקבובי. הציפוי ותהליך הציפוף עם הפיגומים נקבוביים הושגו הועסקו, משתנים מידת הציפוף ונקבובי ראשוניים. שכבת הציפוי ו התנהגות השחרור היו דמיינו ולכמת באמצעות החלבון פלואורסצנטי הירוק (GFP) -coated Ti הנקבובי עם ובלי ציפוף לעומת Ti הצפוף מצופה GFP. לבסוף, פיגומי Ti מדורגים פונקציונלי שיש שני מבנים נקבוביים שונים הוצעו והפגינו על ידי שינוי מידת הציפוף של החלקים הפנימיים וחיצוניים של הפיגומים נקבוביים.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
1. ייצור של פיגומים מתכת נקבוביות
2. טובלים ציפוי של פיגומים עם סוכנים ביו
3. ציפוף של פיגומים נקבוביים
מבחן שחרור 4. פיגומים מצופים GFP
5. המצאה של מדורגים פיגומים Ti נקבוביים
6. הנקבוביasurement של פיגומים Ti

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תהליך הייצור המשמש לייצור פיגומי Ti נקבוביים מתואר באיור 1 א. אבקת TI היא המשיכה מפוזרת בצורה הומוגנית בcamphene ידי סיבוב מתמשך של המכל על 44 מעלות צלזיוס במשך שעה 12 ו, בעוד camphene הנוזל התגבש באופן מלא, ניתן למזער כל משקעים של אבקת Ti כבדה יחסית. כתוצאה מכך, הגוף הירוק טי-camphene הומוגנית הופק באמצעות תהליך ליהוק הקפאה הדינמי כפי שמוצג באיור 1, שבו 3-ממדי נקבוביות camphene גדול קשור מוקפים שלב אבקת Ti (איור 1 ג). עם זאת, הסי...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
בעוד מערכות biometal היו בשימוש נרחב עבור יישומים ביו-רפואיים, במיוחד, כחומרי נושאות עומס, קשיחות גבוהה ופעילות ביולוגית נמוכה של מתכות כבר נחשב לאתגרים גדולים. במחקר זה, הקמנו את שיטת הייצור של מערכת מתכת חדשה, פיגום מתכת נקבובי densified שבו יש תכונות מכאניות biomimetic כמו גם משטח ביו עם בר קיימא התנהגות שחרור. היתרונות העיקריים של שיטת הייצור שלנו כוללים 1) לא חלה שינוי בשיטת יציקת ההקפאה דינמית הקודמת שבו אנו כבר פיתחנו, 28 2) שליטה על פרמטר מעלות אחד מציפוף-מנת לה...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים פיננסיים מתחרים.
מחקר זה נתמך על ידי תוכנית החדשנות הטכנולוגית (מענק חוזה מס' 0037915, WPM Biomedical Materials-Implant Materials) והתוכנית לפיתוח טכנולוגיה אסטרטגית תעשייתית (מענק חוזה מס' 10045329, פיתוח שתל מותאם אישית עם מבנה נקבובי להחלפת עצם), במימון משרד המסחר, התעשייה והאנרגיה (MI, קוריאה), וחטיבת חומרי BK21 PLUS SNU לחינוך מנהיגים גלובליים יצירתיים (מענק חוזה מס. 21A20131912052).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| אבקת טיטניום | אלפא Aesar | # 42624-325 | רשת, 99.5% (על בסיס מתכות) |
| Camphene | SigmaAldrich | # 456055 | 95%, C10< / sub>H16< / sub> |
| KD-4 | Croda | | היפרמר, חומר פיזור פולימרי |
| תמיסת חיץ פוספט (PBS) | Welgene | ML 008-01 | |
| חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP) | Genoss Co. | - | >98% טוהר, 1 מ"ג/מ"ל |
| תנור טחנת כדורים | SAMHENUG ENERGY | SH-BDO150 | |
| מייבש הקפאה | Ilshin Lab. | PVTFD50A | וביישן; |
| מכונת לחיצה איזוסטטית קרה (CIP) | SONGWON SYSTEMS | CIP 42260 | |
| תנור ואקום | JEONG MIN INDUSTRIAL | JM-HP20 | |
| מכונת צ'אג' חשמלית | FANUC robocut | 0iB | שימוש חיצוני |
| מכונת עיתונות | CG& S | AJP-200 | וביישן; |
| ספקטרוסקופיה של סריקת לייזר קונפוקלית (CLSM) | Olympus | FluoView FV1000 | שימוש חיצוני |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.