מדידת לולאות נפח לחץ העכבר

סיכום

כתב יד זה מתאר פרוטוקול מפורט לאיסוף נתונים לחץ-נפח מהעכבר.

תקציר

הבנת הגורמים וההתקדמות של מחלת לב מהווה אתגר משמעותי לקהילה ביו. הגמישות הגנטית של העכבר מספקת פוטנציאל גדול כדי לחקור תפקוד לב ברמה המולקולרית. גודלו הקטן של העכבר עושה להציג כמה אתגרים בכל הקשור בביצוע phenotyping הלב מפורט. מזעור פיתוחים אחרים טכנולוגיה הפכו שיטות רבות של הערכה לבבית אפשרית העכבר. מבין אלה, אוסף סימולטני של נתונים בלחץ ונפח מספק תמונה מפורטת של תפקוד לב שאינו זמינה דרך כל אפנות אחרות. הנה נוהל מפורט לאיסוף נתוני לולאה לחץ-נפח מתואר. כולל דיון של העקרונות שבבסיס המדידים ואת המקורות הפוטנציאליים של שגיאה. ניהול הרדמה וגישות כירורגית נדונים בפירוט רב כפי שהם שניהם קריטי מדידה המודינמי באיכות גבוהה בהשגהים. עקרונות של פיתוח פרוטוקול המודינמי ואת ההיבטים הרלוונטיים של ניתוח נתונים גם מופנים.

מבוא

מחלות לב וכלי דם ממשיכה להיות גורם משמעותי לתמותה ותחלואה בעולם ^1. מחלות של הלב להציב אתגרים קשים במיוחד בפיתוח טיפולים חדשים. התקדמות בגנטיקה לספק לאפשרות לזהות מספר רב של תורמים גנטיים פוטנציאל להתפתחות של מחלות לב. האופי האינטגרטיבי של מערכת הלב וכלי הדם מחייב המטרות הגנטיות הללו להיות מאומתים במודלים של בעלי חיים ללא פגע. הגמישות הגנטית והעלויות נמוכים דיור של העכבר הביאו אותו לקדמה עבור הערכת התפקיד הפיזיולוגי של גן מסוים. גודלו הקטן של העכבר מציבה מספר אתגרים ייחודיים להערכת תפקוד הלב. ישנן שיטות שיכולות לספק מידע לגבי תפקוד הלב, אבל רק מדידה בו זמנית של הלחץ חדרית ונפח מאפשר בנפח הלחץ (PV) ניתוח הלולאה של פונקציה חדרית. PV לולאות כלתפקוד לב ow להיות מנותח עצמאי של הקשר בינו לבין כלי הדם; גורם חשוב בקביעת התפקיד הפונקציונלי של מרכיב גנטי מסוים.

הערכת לולאות לחצו-נפח נעשתה שימוש הוא בניסוי קליני במשך שנים רבות ספרות ענפה שקיימת לגבי הניתוח של נתונים אלה קובע ^2,3. התאמת טכנולוגית לולאת PV העכבר כבר התקדמות חשובה להבנת פיזיולוגית murine לב ^4-6. טכנולוגיות PV לולאת צנתר מבוסס זוג מתמר לחץ והשימוש מוליך להעריך נפח חדרית. היקף חדרית נקבע על ידי בחינת שינויי שדה חשמלי שנוצר על ידי קטטר. מודלי שיטה זו החדר כמו גליל, הגובה אשר מוגדר על ידי המרחק בין האלקטרודות על הקטטר ואת הרדיוס מחושבים הולכה של שדה חשמלי דרך הדםהחדר ^7-9. אות מוליכות נמדדת הקטטר יש שני מרכיבים. הראשונה היא ההולכה דרך הדם; זה משתנה עם הנפח של החדר ומהווה האות העיקרית המשמשת לקביעת נפח חדרית. המרכיב השני נובע הולכה דרך ולאורך הקיר של החדר. זה נקרא מוליכות במקביל וצריך להסיר על מנת לקבוע את עוצמת קול חדרית המוחלטת. ישנן שתי מערכות זמינות מסחרית לאיסוף נתונים לחצו-נפח ששמש למחקר במעבדה לבין השיטה הנהוגה לחישוב ולהסיר מוליכות המקבילי ההבדל העיקרי ביניהם ^6,10,11. צנתרים מוליכים דרש הזרקת סליין היפרטוני לחישוב מוליכות במקביל. הזרקה זה זמני משנה את המוליכות של דם החדר, בעוד המוליכות של הקיר נשארה קבועות. מנתונים אלה ניתן לקבוע אתרכיב של אות מוליכות שמקורה בדם ומה מגיע מקיר חדרית. גישה זו מניחה כי מוליכות במקביל אינן משתנות במהלך מחזור הלב. שיטת הקבלה מסתמכת על שינויים בשלב בתחום החשמל כדי להעריך את התרומה של קיר החדר לאות ההיקף הכולל. שיטה זו מסתמכת על מגוון של קבועים מראש עבור המוליכות של הדם לשריר הלב כדי לקבוע את עוצמת הקול הסופי, אבל עושה צעדים רציפים של מוליכות במקביל במהלך מחזור הלב. שתי מערכות אלה לספק הערכה טובה של נפח חדר השמאלי ואת ההבדלים ביניהם הם לא עשויים להיות משמעותיים מבחינה פיזיולוגית. המודל הגלילי של החדר והנחות אחרות העושה גישות אלה מבוססות קטטר לא מדויקות ככל שיטות אחרות, אך נתונים אלה הניתנים על בסיס פעימה אחרת פעימה כי הוא חיוני להערכת צעדים עצמאיים עומס של תפקוד לב.

ההליך המתואר כאן משמש במעבדה שלי ספק נתונים עבור מספר רב של מחקרים הבוחנים את מנגנוני pathophysiological הבסיסיים של קרדיומיופתיה דיסטרופי ^12-18. ההליך המתואר להלן הוא אחד משני שניתן להשתמש בהם כדי לקבל נתונים לולאה PV. בעוד רבים מן העקרונות חלים גם גישה, פרוטוקול זה יתמקד בגישת פסגה פתוח חזה; פרוטוקול החזה סגור כבר מפורט במקומות אחרים ^19,20. בעוד הליך יתוארו בפירוט, עקרונות העל חשובים כדי לחשוף את הלב עם נזק מינימלי או ללב או לריאות. לאורך כל הפרוטוקול זה חשוב לזכור כי מדובר בהליך בלתי-הישרדות כי לאחר חשיפה טובה של הלב יש חשיבות קריטית עבור המיקום הנכון של הקטטר.

פרוטוקול

לפני ביצוע כל ההליכים המתוארים בפרוטוקול זה, לקבל אישור על ידי ועדת טיפול בבעלי החיים ושימוש המקומית המוסדית.

1. הגדרת הריג הניסיון

הערה: הליך זה מבוצע על חיות הרדימו ואת איכות הנתונים היא יחסית לאיכות תמיכת ההרדמה הציעה החיה. החלק הראשון זה יהיה פירוט הציוד ההליכים הדרושים כדי לספק הרדמה העכבר בעת ביצוע בפרוטוקול זה.

1. בחר פרוטוקול הרדמה. יש הרדמה נשימתית רבות תכונות מועילות לביצוע ניתוח PV-לולאה, למרות שחלקם פרוטוקולים בזריקות שמשו גם כן. ראה דיון למידע נוסף על בחירת משטר הרדמה.
2. Secure בלוני חמצן דחוס לשולחן או קיר כירורגית סמוך לאתר כירורגית.
3. אם באמצעות הרדמה נשימתית, השתמש מאדה לבטחמינון נכון. כיול מכשירי אידוי בשנה על מנת להבטיח שהם מספקים את המינון המתאים של גז הרדמה. חבר מאדים כדי מד זרימה המאפשר שליטה על הקצב שבו הגז נכנס מעגל ההרדמה. גדר על - 0.5 1.0 ליטר / דקה.
4. השתמש סעפת לאפשר מכוונת הזרמת גז הרדמה ל -1) בחדר אינדוקציה, 2) מסכה, ו -3) ההנשמה. הדחת גז הרדמה היא חשובה ביותר וצריכה להתבצע על ידי מערכה פעילה כי גם פתחי אל במנדף (או תשתיות מבנה דומות אחרות) או באמצעות בלון שנועד להסיר לגזי הרדמה.
   הערה: בדוק עם פקידי בריאות תעסוקתית מקומיים כדי להבטיח תאימות עם כל התקנות המקומיות.
5. לשמור על טמפרטורת גוף ליבה באמצעות כריות חימום ו / או מנורות התחממות. לפקח באופן רציף את טמפרטורת הגוף עם מדחום רקטלי. זה יאפשר עליות יזומות או ירידות חימום כדי להבטיח טמפרטורת גוף פיזיולוגית (ͭ6; 37 ° C) במהלך איסוף הנתונים המודינמי.
6. לספק תמיכה נוזלת כדי לנטרל איבוד דם ועל איבוד מסה אדיש.
   1. כן פתרון 10% אלבומין 0.9% NaCl ידי לקיחת 1 מיליליטר של 25% אלבומין והוסיף 1.5 מיליליטר של 0.9% NaCl בתוך מזרק.
   2. כן צנתר תוך-שיורית בנפח נמוך.
      1. השתמש צבת לרסק את רכזת הפלסטיק של מחט 0.5 אינץ '30 מד. שימוש מחזיקי מחט, לתפוס את המחט ולהסיר את הרכזת. גרדו דבק הנותרים מהמחט באמצעות hemostat. הכנס את הקצה הקהה של המחט לתוך באורך של צינורות microbore. השתמש בפחות מ -20 סנטימטרים של אורך עבור הצינורות.
   3. השתמש משאבת מזרק כדי לאפשר כרכים מדויקים כדי להיות מועברים.
7. להבטיח אוורור נאות לאיסוף נתוני PV באיכות גבוהה. יש מגוון של מאווררי עכבר זמינים לרכישה. מאוורר שבשליטת לחץ לספק את הסביבה הסגורה נדרש נשימתיתגזי nesthetic ולספק שליטה טובה יותר של האוורור במהלך ההליך.
   1. ודא כי הלחצים inspiratory מוגבלים <15 ס"מ H ₂ O כדי למנוע בארוטראומה. הגדר את הנשמה כדי לספק את דופק השאיפה במהלך 35% של מחזור הנשימה. השימוש בלחץ סוף-הנשיפה חיובית (PEEP) ברמה של 4 - 5 ס"מ H ₂ O יהיה מאוד לשפר את האוורור של העכבר, על ידי מניעת תמט הריאות של הריאה ותמיכה חילוף הגזים.
   2. הגבל את דיסטלי שטח מת אל-משותף Y במעגל נשימתית. זה קריטי כי נפח הגאות של העכבר הוא קטן מאוד וכל שטח מת גורע מן המסירה של אוויר השראה טרי.
   3. צור endotracheal עכבר בגודל (ET) צינור על ידי חיתוך קצה הנחה של קטטר תוך-שכינה 20 מד. זה מספק נקודת קונים ל להחדרה קלה יותר. מניח את הקצה החתוך לתוך משותף Y של מעגל ההרדמה.
   4. השתמש צינורות גמישים הנשימהמעגל חשמלי. כל זיכרון מבני בצינור ייצור כוחות חיצוניים בעלי הפוטנציאל למשוך את הטובוס מתוך של דרך נשימת העכבר.
   5. בואו העכבר לקבוע את קצב הנשימה באמצעות השיעור הנמוך ביותר זה מדכא את כונן נשימת אנדוגני. התחל בקצב נשימה איטי יחסית של כ -60 נשימות לדקה.
      הערה: עם אוורור מתאים העכבר צריך לעשות מעט מאוד מאמץ לנשום. עם זאת, אם האוורור אינו מספק, ההצטברות של _CO2 בדם תיזום מאמץ נשימתי על ידי העכבר. אם זה הוא ציין, גברת קצב הנשימה היא דרך ישר קדימה כדי להגדיל אוורור המכתשית. זה לעתים קרובות יש צורך להגדיל את קצב נשימה בתגובת גבהים בעומס עבודת לב הקשורים גירוי הקולטן בטא-אדרנרגיים.
   6. לאחר מעגל הנשימה מוכן, לחץ לבדוק את המערכת על ידי חיבור קצה endotracheal (ET) צינורעם אצבע. להבטיח לחץ אוויר של ≈10 CMH ₂ O. בדיקה זו צריכה להתבצע לפני כל הליך.

2. גישה ניתוחית

1. שימוש במלקחיים קטנים מספריות וציוד אחר מטבלת 1. כל המכשירים הם די קטנים כדי לאפשר שימוש קל בתחום כירורגית המוגדל. השתמש stereomicroscope כירורגי כדי לספק גדלה נאותה במשך כמה היבטים של ההליך הכירורגי.
2. השתמש כויה כדי למקסם המוסטאסיס במהלך ההליך.
   הערה: ישנם כמה סוגים מקיפים של כווייה. Thermocautery מחממת אלמנט מתכת דק כי יקצץ דרך רקמת שריר לעצור את הדימום. מערכות אלו הן בתחילה זולות יחסית; עם זאת חשוב לציין כי טיפי החוט הם שברירים ויקרים יחסית. מערכות electrocautery הן יקרות יותר לרכוש בתחילה, אבל והטיפים מועילים חסונים מאוד ולא יהיה צורך להחליףד.
3. הכנה ואימון כירורגי
   1. השג את משקל הגוף של העכבר.
   2. מניחים את העכבר לתוך תא אינדוקציה כי הוא מלא isoflurane 5%.
      הערה: העכבר לא יכול לשרוד יותר מכמה דקות בסביבה זו. רק 45 - 60 שניות נדרשות עבור העכבר לאבד רפלקס ליישר שלה (במאמצים להתהפך כאשר הניח על גבה או על צידו).
   3. לאחר רפלקס ליישר הולך לאיבוד, להפחית את ריכוז isoflurane עד 2% ולפתוח את גז הרדמה כדי להסוות.
   4. העבר במהירות את העכבר על שולחן הניתוחים ולמקם אותו שכיבה על הגב עם האף שלו בתוך המסכה.
   5. אם באמצעות electrocautery, להשתמש גזה מלוחה ספוגה לזוג חשמלי בעכבר כדי לרפד את ההארקה של מערכת electrocautery.
   6. אבטח את הגפיים בעזרת פלסטר. סרט זה מספק תכונות דבקות גם כאשר רטוב.
   7. הכנס thermoprobe רקטלי עבור גוף ליבת ניטורטֶמפֶּרָטוּרָה. מאובטח עם קלטת.
   8. למרוח מקריח עד הצוואר והחזה של העכבר. חכה 2 - 3 דקות עבור המקריח לעבוד, ולאחר מכן להסיר את פרוות מאזורים אלה באמצעות מטוש שקצותיהם כותנה ו / או מגבוני מעבדה.
      הערה: כורכת של השדה כירורגי אינה נדרשת, כפי מדובר בהליך בלתי-הישרדות, אך הוא עשוי להיות רצוי כדי להגביל את החשיפה של המנתח לרפד הארקת הכווייה, אם משתמש בו.
   9. לאחר העכבר הוא הכין עבור הניתוח, להעריך את המטוס כירורגית של העכבר על ידי ביצוע קמצוץ הבוהן. לאחר הבטיח של עומק הרדמה מתאים העכבר מוכן לקראת החתך הראשון.
4. השג שליטה על דרכי הנשימה באמצעות אינטובציה או הקנה אוראלי. קנה הוא גישה נוחה כי היא יחסית פשוטה לביצוע.
   הערה: לכל אורך תיאור דיונים זה לכל כיווני האוריינטציות יהיו יחסי המנתח.
   1. עושים חתך בחלק level של חריץ sternal המשתרע ≈ 5 מ"מ תקין של קו- אמצע ≈ 5 מ"מ השמאלי של קו האמצע.
   2. ביצוע חתך שני המשתרע לאורך הקצה הימני של החתך הראשון, הרחבת rostrally לרמה ≈ 2 זנב מ"מ עד הסוף של הלסת התחתונה.
   3. ביצוע חתך שלישי משתרע הסוף המקורי של החתך השני אל ≈ 5 מ"מ שנשאר אונליין באמצע. לחזור בו דש העור וכתוצאה מכך שמאלה כדי לחשוף את הרקמות שמתחת לפני השטח.
   4. הפרד את בלוטות הרוק הפרוטיד ו submandibular על קו האמצע על ידי דיסקציה קהה. זה יחשוף את השרירים הבסיסיים שמעל קנה הנשימה.
   5. בבוטות להפריד את הזכות ושרירי sternohyoideus השמאליים כדי לחשוף את קנה הנשימה.
   6. לעבור חתיכת ≈10 ס"מ של תפר משי 3-0 תחת קנה הנשימה, נזהרת שלא לכלול את הוושט.
   7. לזהות את המיקום עבור הקנה: רק זנב אל הגרון קיים פער לפני הצלצול קנה הנשימה הראשונה, זה רעיוןl מיקום לבצע את הקנה.
   8. התאם את הסעפת לספק גז הרדמה כדי ההנשמה ולהדליק את ההנשמה.
   9. בדוק דליפות ידי חיבור קצה הטובוס (ET) באצבע. להבטיח לחץ אוויר של ≈10 cmH2O.
   10. באמצעות מחט 20 מד כמו אזמל, לחתוך את קנה הנשימה. הפוך את החתך רחב יחסית, כמו צינור ET ימלא הרבה של לומן קנה הנשימה.
   11. נעו במהירות, להסיר את המסכה להכניס את צינור ET בזהירות לתוך קנה הנשימה. אל תכריח אותו כמו הרקמות הן שבירות מאוד לפרוץ את הקיר של קנה הנשימה יכולות לגרום pneumothorax.
       הערה: מייד עם כניסה, טיולי חזה צריכים להיות ברורים.
   12. אבטח את המעגל נשימתית עם קלטת כדי למנוע את צינורית ET מלהיות שלף.
   13. לקשור קשר בוהן אחת תפר 3-0 כדי ליצור חותם סביב הצינור ET.
       הערה: בשעה excursi החזה בנקודה זותוספות צריך להיות ניכר בהם היטב. אם לא זה בדרך כלל את המיקום של הצינור ET בתוך קנה הנשימה כי הוא הבעיה. משוך את צינור ET בחזרה ולנסות למקם אותה מחדש, תוך התמקדות הכיוון של קנה הנשימה כמדריך.
5. הכנת אתר וריד הצוואר
   1. לחזור בו בלוטות הרוק עזבו מקורי-רוחבי חשיפת וריד הצוואר החיצוני.
   2. לחצות את השריר הרזה (sternomastoideus) שחל על הווריד עם דיסקציה קהה. זה יחשוף את המשטח החיצוני של וריד הצוואר.
   3. בזהירות לנקות את חתיכות גדולות בכל רקמות, למרות זהירות חייבת לשמש קירות הווריד הם דקים מאוד. לאחר משימה זו תושלם, לכסות את וריד הצוואר עם בלוטות הרוק לשמרו עבור cannulation מאוחר יותר.
6. פתיחת בית החזה; כניסה למקום פלאורלי מבלי לפגוע בלב או ריאות
   1. הסר הרבה של העור המכסה את החזה הארכת לקצה הימני שלחתך בעור מקורי עד לרמה של תהליך xiphoid, ואחר כך חציית קו האמצע כדי ≈ 1.5 סנטימטר השמאלי של קו האמצע.
      הערה: יש לנקוט משנה זהירות בעת חיתוך דרך כלי החלב חיצוני, אשר יכול להיות מקור משמעותי של דימום. צריבת הכלים האלה לפני חיתוכם בעיקר תמנע דימום זה.
   2. באמצעות דיסקציה קהה, לחזור בו דש העור רוחבי כדי לחשוף שרירים בסיסיים.
   3. לבודד את ההחדרה של הגדולים pectoralis בצד ימין ליד ההיבט הזנב של עצם החזה באמצעות מלקחיים מתרחבים כלי הדם. לצרוב וחותכים את השריר.
   4. חותכים דרך מרכזי pectoralis יחד התקשרותו אל עצם החזה. לצרוב את הקצוות לחתוך כדי להבטיח hemostasis.
   5. הבא לערער את dorsi latissimus באותו צד, אשר הוא יריעה גדולה של שרירים מכסה את ההיבט לרוחב של העכבר. לצרוב וחותכים השריר ולאחר מכן לחזור לסוף חתך cranially. זה עלול לדרוש קצת בוטהלנתיחה.
      הערה: הצלעות נמצאות כעת בבירור ואת הלב עשוי גם להיות גלוי זני עכבר כמה. ברוב העכברים, הזנת החזה במחצית הזנב של מרחב צלעי הרביעי תספק גישה טובה בלב. חלל צלעי הרביעי הוא החלל השני הזנב ביותר.
   6. כדי להזין את החזה, להשתמש זוג מלקחיים חדים לנתח בזהירות דרך שכבות שריר צלעי.
   7. לאחר בחלל פלאורלי נפתח, בזהירות להכניס את מרחיבי כלי שקצו הבוטים. באמצעות המרחיבים כלי לספק כוח כלפי מעלה עדין על דופן בית החזה, השתמש במספריים באביב בקצה הקהה כדי לחתוך את השארית בזהירות של שרירי צלעי.
   8. First Cut רוחבי, נזהרת שלא לחתוך את אונת הריאה מתחת. בואו להרחיב את החתך מדיאלית, אבל להישאר 3 - 4 מ"מ לרוחב של קו האמצע, כדי למנוע את עורק החלב הפנימי.
      הערה: כלי החלב הפנימיים רצים במקביל עצם החזהוהוא יכול לגרום לאובדן דם משמעותי אם לחתוך בטעות.
   9. בזהירות לצרוב את קצה החתך של השרירים צלעי, באמצעות מוליך כותנה שקצו קטן לגלגל את הרקמה כלפי מעלה כדי לאפשר קשר כויה עם רקמה לחתוך בלי לבוא במגע עם הריאות או הלב.
   10. מניח כותנה קטנה ספוג מלוחה הטתה מוליך דרך החתך מצביע לכיוון קו האמצע. ספק כוח משיכה כלפי מעלה בעדינות למשוך את דופן בית החזה הרחק מבני התשתית. בגין צריבה החזה בקצה המדיאלי של החתך וכלה לרוחב ס"מ ≈ 1 של קו האמצע בצד שמאל.
   11. לקדם את המוליך שמאלה כך שזה ברציפות תחת קצה הכווייה.
   12. לאחר הרקמה צרובה היטב, להשתמש במספריים לחתוך בזהירות דרך עצם החזה. הקודקוד של הלב צריך להיות לעין בשלב זה.
   13. באמצעות דיסקציה בוטה, לשבש את קרום הלב ולזהות את הווריד הנבוב הזנב.
   14. לבדוק אם יש הוכחות של דימום ולליבון זה עכשיו. לאחר כל דימום טופל, להסיר בזהירות כל כורכת, כרית הארקת כווייה, ואת הגזה ספוגה המלוחה.
7. הצבת צנתר וריד הצוואר
   1. חבר את הקטטר עשה צעד 1.6.2 אל המזרק המכיל אלבומין 10% על ידי מחליק את הצינורות בקפידה על מחט 30 מד.
   2. בגין יציקת אלבומין דרך קטטר.
   3. אוריינט קטטר כך המחט נעוצה על וריד הצוואר בכוחות עצמו, עם המחט שפוע עד. במידת הצורך, להשתמש בעל מחט כדי לסובב את המחט בצינור כדי להזיז את ההטיה אל הכיוון הנכון.
   4. כאשר הקטטר סמוק לחלוטין להפסיק את העירוי.
   5. תפוס את המחט קטטר עם מלקחיים. עם מצד שני, יש להשתמש במלקחיים רקמות לחזור בלוטת הרוק כדי לאפשר ויזואליזציה של וריד הצוואר. החל מתיחה עדינה לרקמות סביב הצוואר דיסטליוריד יצירת מתח על קיר הכלי. שימוש בזווית שטוחה של גישה, בזהירות להכניס את המחט לווריד. לקדם את קצה המחט 3 - מ"מ 4 לתוך הכלי.
   6. לפני שחרור המחט קטטר לאבטח את הצינורות קטטר עם חתיכת הסרט, זה יגביל כל תנועה של המחט פעם שוחררה.
   7. שחרר את המחט ולמשוך בעדינות בחזרה על הבוכנה במזרק כדי לאשר את הקטטר נמצא לומן של כלי השיט, על ידי הדמית דם הקו.
   8. לאחר מיקומו לאבטח את הקטטר כראוי עם דבק כירורגי לצרף את המחט אל בלוטות רוק הבסיסיות.
   9. חשב את הנפח הכולל להיות חדורים. אם לא היה אובדן דם משמעותי בהיקף של 5 μl / g משקל הגוף יהיה מספיק. אם היה אובדן דם משמעותי יציקת 6 - 6.5 μl / g ייתכן שיידרש. הגדר את קצב הזרימה כך העירוי כולו יושלם תוך 10 - 15 דקות.
8. מיקום צנתר PV בהחדר השמאלי
   1. במהלך ההליך הכירורגי שתואר לעיל, למקם את הקטטר PV בתוך מזרק המכיל תמיסת מלח כדי לאפשר לו לאזן.
   2. זמן קצר לפני ההשמה, להזיז את המזרק קטטר ליד העכבר. עם קצה הצנתר בערך באותו גובה כמו הלב, אפס בנתוני לחץ.
   3. שימוש כותנה קטנה ספוג מלוח הטה מוליך, לתמרן את הלב כדי לאפשר ויזואליזציה של הקודקוד.
   4. באמצעות מחט 25 מד, לעשות חתך דקירה קרוב למרכז הקודקוד ככל האפשר.
   5. בעקבות הסרת המחט, הכנס את קטטר במהירות דרך החתך. זה לא לוקח הרבה כוח כדי להכניס את הקטטר, כך להבליג כאשר לקידום קטטר לתוך החדר. לפעמים יש צורך לבצע חתך דקירה נוסף. אם הדבר דרוש, נסה לבצע את החתך לאחר מכן ליד המיקום הראשוני כדי למזער את הנזק ללב.
      לֹאדואר: לאחר קטטר היא מתקדמת לתוך החדר את המיקום הסופי הוא בעל חשיבות מכרעת. העקיבה לחץ חדרית יהיה ברור על ידי הלחץ הדיאסטולי נמוך (<10 מ"מ כספית) ו בלחץ הסיסטולי גבוה (> 80 מ"מ כספית בשלב זה). באופן אידיאלי, קטטר יהיה מרוכז בתוך החדר עם האלקטרודות החיצוני רק בתוך החדר. התאמות יפות עמדת קטטר יכולות להתבצע על ידי התבוננות נתוני לולאת PV, מחפשת מעקב דמוי קופסא עם 90 ≈ ° זוויות בין הצדדים.

3. פרטים פרוצדורלי

הערה: לאחר קטטר נמצא במקום תקופת ייצוב קצרה (10 - 15 דקות) יש צורך לאפשר החיה להתאושש קצת את הלחץ כירורגית החריף כדי לאפשר זמן העירוי של נוזלים. לאחר תקופת התייצבות זו בפרוטוקול בפועל יכול להתחיל.

1. לאחר קטטר PV מושם ו מניפולציה כירורגית חדל,להנמיך את isoflurane ל ≈ 1% כפי צורך מטוס כירורגית עמוק של הרדמה הוא פחת.
   1. במהלך תקופה זו, בזהירות לפקח על העכבר כדי להבטיח רמה נאותה של הרדמה נשמרת. בזהירות להעריך כל תנועה; תנועה של שרירי הנשימה מצביעה על רמת hypoventilation ו ניתן לטפל על ידי גברת קצב הנשימה של ההנשמה. תנועה של גפיים או פרכוס של שפם סימנים כי העכבר הוא מקבל אור מדי ודורש יותר הרדמה.
      הערה: יש מגוון רחב של פרמוטציות של טיפולים שיכולים לשמש בשילוב עם פרוטוקול זה. רבים של טיפולים אלה יחייבו עירוי של תרופות. זה חיוני כדי לנהל את נפח החלל מת ביעילות. מתגים פתרון ניתן להשיג על ידי החלקת צינורות קטטר מהמחט של משאבת מזרק אחד למשנהו. פעולה זו זמן קצר לפני תום העירוי מוקדם מאפשר את הקטטר הצינורות להיות טעונהעם התרופה הבאה. יש צורך לדעת את הנפח בתוך צינורות קטטר כדי לקבוע את העיתוי של בורר הפתרון. המבוא של בועות אוויר קטנות בשורה מאפשר התזמון המדויק של בורר העירוי שייקבע; הבועה הזאת החדירה לתוך מחזור הדם הורד נסבלת היטב.
2. לשנות את תנאי הטעינה של הלב על ידי הורדת preload והגדלת afterload.
   1. מנמיכים preload ידי חסימת התשואה ורידי ללב. בהכנה זו, לחזות לחסום את הווריד הנבוב הזנב כשהוא עובר מן הסרעפת אל הלב. בצע חסימה זו בצורה חלקה יחסית מהר, שנמשך לא יותר מ 2 - 3 שניות. גדל afterload חדר השמאלי זמני על ידי ביצוע דחיסת בטן עדינה שנמשכת 1 - 2 שניות.
   2. במהלך שינויים אלו הטעינה של הלב, להשהות נשימות לחסל כל חפץ הציג ידי ההנשמה.
3. כייל את האות עוצמת הקול באמצעות הצנתרי המוליכות דואר. נהלים אלה אינם נחוצים עם צנתרים באמצעות טכנולוגיית קבלה.
   1. לאחר פרוטוקול הניסוי להזריק 5 - 10 μl של תמיסת מלח היפרטוני (20% NaCl) כדי לחשב את המוליכות במקביל.
   2. איסוף דם על ידי הסרת הקטטר עד זוב דם מן החדר השמאלי לתוך מזרק heparinized. מניחים את הדם הזה לתוך cuvettes של נפח ידוע ולהשתמש קטטר כדי למדוד את המוליכות.
   3. השתמש באמצעי המוליכות קובט כדי להמיר את אות המוליכות אל נפח המוליכות במקביל יש צורך להגדיר את הנפח המוחלט נמדד על ידי קטטר.
4. לאחר הפרוטוקול יושלם, להרדים את העכבר על ידי הסרה בלב הבאה חיתוך רוחב של הווריד הנבוב וקבצים המצורפים אב עורקים.

תוצאות

לפי אמנה, נפח הוא זמם על ציר ה- X ואת הלחץ על ציר Y כמו באיור 1. הלולאות לחצו-הנפח כתוצאה מלחץ התוויית נגד נפח צריך להיות דומה מלבן, את הקצוות האנכיים המייצגים שינויי isovolumic בלחץ (כלומר, כאשר הן המיטרלי שסתומי עורקים סגורים). האופקי התחתון מייצג חדרית מילוי דרך שסתום צניפי ואת החלק האופקי העליון מייצג חדרית ריקון דרך שסתום אבי העורקים. בתוך לחצים חדרית סוג הבר בריא עכבר שמאלי של 90 - 110 מ"מ כספית צפויים עם מקסימאלי DP...

דיון

ישנם שלושה שלבים קריטיים בהליך זה: 1) את המיקום של הטובוס ואוורור המתאים, 2) המיקום של קטטר IV הצוואר, ו -3) את המיקום הנכון של הקטטר PV בחדר השמאלי. קביעת קצב הנשימה המתאימה היא חלק חשוב של מתן תמיכה נשימתית. עכברים מודעים בדרך כלל לשמור על אוורור המכתשית עם נשימות שטחיות מהירות. באופן כללי, עכברים מאווררים יהיו הרבה כרכים גאות גדולים. לפיכך קצב נשימה איטי נדרש. זה חשוב כמו אוורור מעט מדי יגרום חמצת נשימתית מדי אוורור יוביל בַּסֶסֶת נשימה, שני התנאים אשר לשנות את תפקוד לב. דרך פש...

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
Dumont 5/45 (2)	Fine Science Tools	11251-33
מלקחיים מרחיבי כלי	דם Fine Science Tools	18153-11
Castroviejo Micro Dissecting Spring Scissor	Roboz Instruments	RS-5668
מלקחיים מתומנים - משוננים/מעוקלים	כלי מדע עדינים	11041-08
מלקחיים מתומנים - משוננים/ישרים	Science Tools	11040-08
מספריים לדיסקטור- להב כבד	כלי מדע עדינים	14082-09
סרט כירורגי טרנספור	3M	1527-1
3-0 תפר משי	כלי מדע עדינים	18020-30
TOPO מאוורר	קנט מדעי מדעי	TOPO
מרטין ME 102 יחידה אלקטרוכירורגית	מכשיר	הרווארדPY2 72-2484
משאבת מזרק	Lucca Technologies	GenieTouch
סטריאומיקרוסקופ עם מעמד בום	Nikon	SMZ-800N
מדחום צמד תרמי	Cole Parmer	EW-91100-40
T/Pump מחזור מים חמים	קנט סיינטיפיק	TP-700
ADVantage מערכת לחץ-נפח	טרנסונית	ADV500
רכישת נתונים וניתוח DSI		Ponemah ACQ-16