הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

דגם Murine של פגיעת המעיים איסכמיה reperfusion

20.1K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/53881

⸱

11 במאי 2016

 ,  ,  ,  , 
1Trudeau Institute, 2Engelhardt Institute of Molecular Biology, 3Departments of Medicine and Infectious Diseases and Pathology, University of Florida

במאמר זה

סיכום

כאן אנו מתארים את ההליך המפורט של reperfusion איסכמיה מעיים בעכברים שתוצאתה הפגיעה לשחזור ללא תמותה לעודד סטנדרטיזציה של טכניקה זו על פני השדה. מודל זה של פגיעת איסכמיה-רה-פרפוזיה במעי יכול להיות מנוצל כדי לחקור את המנגנונים התאיים ומולקולריים של פציעה והתחדשות.

תקציר

איסכמיה מעיים הוא מצב מסכן חיים הקשורים מגוון רחב של מצבים רפואיים, כולל טרשת עורקים, פקקת, תת לחץ דם, דלקת מעי נמקית, השתלת מעי, טראומה ודלקת כרונית. פציעה איסכמיה-רה-פרפוזיה מעיים (IR) היא תוצאה של איסכמיה mesenteric חריפה, הנגרמת על ידי זרימת דם מספקת דרך כלי mesenteric, וגרמו נזק מעיים. Reperfusion איסכמיה הבאים יכולים להחמיר נזק של המעי. המנגנונים של פגיעת IR הם מורכבים לא ידועים ולא מובנים. לכן, במודלים של בעלי חיים קטנים ניסיוניים הם קריטיים להבנת הפתופיזיולוגיה של פציעת IR לבין ההתפתחות של טיפולים חדשניים.

כאן אנו מתארים במודל עכבר של פגיעה IR חריפה במעי המספק פגיעה לשחזור של המעי הדק ללא תמותה. זו מושגת על ידי איסכמיה התרמה באזור של מעי דיסטלי ידי זמנית occluding ענפים בטחונות הפריפריה הטרמינל של עורק mesenteric המעולה במשך 60 דקות באמצעות קטעי כלי דם. Reperfusion עבור שעה 1, או 2 שעות לאחר תוצאות פגיעות פגיע לשחזור של המעי נבדק על ידי ניתוח היסטולוגית. עמדה הנכונה של קליפים כלי הדם היא קריטית עבור ההליך. לכן את הסרטון ממחיש באופן חזותי מפורט צעד אחר צעד תיאור של הטכניקה הזו. מודל זה של פציעת IR במעי יכול להיות מנוצל כדי לחקור את המנגנונים התאיים ומולקולריים של פציעה והתחדשות.

מבוא

המעי רגיש מאוד הפרעה של זרימת הדם הגורמת לנזק איסכמיה ו אפיתל. Reperfusion לאחר איסכמיה מספק מחדש חמצון של רקמות, והוא יכול לקדם פתולוגיה. לכן, פגיעה איסכמיה ו reperfusion מעיים מזוהה עם מגוון רחב של פתולוגיות, כולל דלקת מעי נמקית, דחייה של השתל בהשתלות מעי דק, סיבוכי ניתוח מפרצת אבי העורקים בבטן, מכונת לב-ריאה, ו 1,2 מחלת מעי דלקתית. פגיעה במעיים IR, במיוחד איסכמיה mesenteric חריפה, הוא מצב מסכן חיים וכתוצאה מכך תחלואה ותמותה 3.

למרות לא ידוע ולא מובן,-reperfusion איסכמיה של המעי (IR) פציעה הוא חשב להיות קשורה לשינויים החיידקים במעיים כמו גם את הייצור של מינים החמצן מגיב וציטוקינים דלקתיים וכמוקינים 1,4-6. זה מוביל הפעלה של שניהםנייט ומנגנוני החיסון אדפטיבית אשר לקדם 1,7,8 פגיעה דלקת רקמות.

במודלים של בעלי חיים הם קריטיים להבנת המנגנונים של פגיעה IR, מאחר שהם מאפשרים gain- קל ניסויים גנטיים הפסד של פונקציה. במודלים של בעלי חיים כמה IR פותחו הכוללים חסימה של כלי דם מלא, איסכמיה זרימה נמוכה, ו מפולח חסימה של כלי דם (שהעיקריים בם פורטו סקירה מקיפה אחרונה 9). איסכמיה מעיים הנגרמת על ידי חסימה של כלי דם מלא של עורק mesenteric המעולה (SMA) היא מודל קל נפוץ של IR בחיות גדולות ומכרסמים 9-11. עם זאת, באזורים שונים של המעי יש רגישות שונה על פשע. בנוסף, המגוון הרחב של חומרי הרדמה, משככי כאבים, טכניקות חסימה בעורק, כמו גם חוסר עקביות משך פגיעת איסכמית תוצאת התאוששות מעלות משתנות של פציעת בלבול הבנתנו את הביולוגיה של IR ברחבי studie המרובהים. טבלה 1 מדגים סתירות אלה במחקרים IR בעכברים. החסרון הגדול ביותר מהשימוש פעמים איסכמי קצרות (30-45 דקות) הוא מיקוד החלון של התאוששות שעליו הבדלים להבחין בין מקרים ובקרות ניתן לצפות. פציעה קלה עד האפיתל עשויה להיפתר שעה לאחר רה-פרפוזיה, ולכן התמחתה מדדי פתולוגיים שיידרשו כדי למצוא הבדלי שבת אפיתל. לעומת זאת, נזק מוגזם, כפי שניתן לראות על ידי 100 דקות של פגיעה איסכמית עלול לגרום denudement שלם של האפיתל, שם השבת כבר אי אפשר, להגדיל את שיעור התמותה, וזמן ההתאוששות. לכן, כאן אנו מתארים את ההליך המפורט של IR מעיים בעכברים שתוצאתה הפגיעה לשחזור ללא תמותה לעודד סטנדרטיזציה של טכניקה זו על פני השדה שלנו. מודל זה של פציעת IR במעי יכול להיות מנוצל כדי לחקור את המנגנונים התאיים ומולקולריים של פציעה והתחדשות.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

מחקרים בבעלי חיים בוצעו בהתאם המכון הלאומי הנחיות בריאות אושרו על ידי טיפול בבעלי חיים מוסדיים ועדת שימוש של המכון טרודו. 8-12 בן שבוע C57BL / 6 עכברים שימשו במחקר.

1. הכנה לקראת ניתוח

  1. הכן לעקר מכשירי ניתוח.
  2. כן מערכת הרדמה מבוסס isoflurane עם חרטומו, ואת משטח לוהט. ודא משטח מחומם לא יתר על המידה (<39 ºC).
  3. ודא כי מכל הדחת גז isoflurane ממוקם כראוי על מנת להבטיח את יציאות פליטה בתחתית המכל אינם חסומים או מאפיל בכל דרך. לשקול מיכל הדחה גז לפני הליך ומשקל מסמך על המכל. בטל מכל כאשר משקל מכל עולה על 50 גרם של משקל שנצבר (~ 12 שעות).

2. הרדמה

  1. להרדים עכבר עם 3% isoflurane בתא אינדוקציה (1 ליטר / דקהO 2).
    1. הערכת עומק ההרדמה על ידי חוסר יכולת להישאר זקוף, אובדן תנועה רצונית תכליתית, אובדן רפלקס מצמוץ, הרפיית שרירים, ואובדן בתגובה רפלקס גירוי (הבוהן או קמצוץ הזנב עם לחץ חזק).
    2. הערכת קצב הנשימה ואת דפוס ידי התבוננות דופן בית החזה ותנועות בטן. בהרדמה אופטימלית, קצב הנשימה צריך להיות ~ 55-65 נשימות לדקה.
    3. סר עכבר מאולם האינדוקציה ובמהירות לגלח את אזור הבטן של העכבר.
  2. כדי למנוע התייבשות קרנית, למקם משחת עיניים תפל בעיני.
  3. יש לשים את הסמן על המשטח הלוהט ולחבר אותו באמצעות חרטומו למערכת הרדמה. הפוך קרום חרטומו לטקס בטוח מתאים בחוזקה על הראש של העכבר ואין דליפה של isoflurane.
  4. מקטינים את שיעור isoflurane ל -1.5%, ולהזריק עצירות (0.1 מ"ג / ק"ג) ו קטמין (10 מ"ג / ק"ג) תת עורי כדי למנוע את הרוח של מפל-כאב.
  5. נגב העור דואר של אזור הפעולה עם מקלון צמר גפן סטרילי ספוג פתרון כירורגי בבטאדין ואחריו אתנול 70%.

3. כירורגיה

  1. הפוך פיום בטן סנטימטר באמצע קו 3-5 במספרי הפעלה. כסה את איזור פעולה עם הכרית לא חסיד סטרילי טבול מלוח. לבודד cecum ואת המעי ולחשוף את עורק mesenteric המעולה שימוש צמר גפן טבולה מלוח.
  2. כדי להקל קליפ החלים, לבצע חתכים קטנים לפדר סביב עורק mesenteric המעולה שימוש איריס בסדר scissors.To לעשות זאת, בעדינות להרים את המעי עם מלקחי הלבשה וחותך לפדר משני צידי עורק mesenteric המעולה במיקום קליפ הרצוי (איור 1A). לאחר מכן, להוסיף כמה טיפות של תמיסת מלח סטרילית לאזור על מצב קליפ רצוי לפני היישום קליפים.
    הערה: כדי לבצע את ניתוח הדמה, בצע את הליך כירורגי עד שלב 3.2. אין ליישם קליפים. במקום זאת, לשמור על רקמות לחות על ידי ים חמים הוסיףאלין כמתואר 3.6 עבור שעה 1. לאחר מכן, המשך לשלב 4.1,
  3. לחסום את סניפי ממדרגה ראשונה של העורק mesenteric מעולה עם קליפים כלי הדם (כוח 70 גרם) באמצעות applier קליפ כדי ליצור אזור ס"מ 5-7 של מעי איסכמי סמוך cecum (איור 1B). למרות המיקום של הכלי הוא שמרני, ייתכן שיש שינויים קלים בין עכברים (ראה דוגמאות על איור 1). לכן, 2 או 3 קליפים בדרך כלל נדרשים (לראות את המיקום של קליפים על איור 1 א, ד, ה, חיצים שחורים).
    הערה: השתמש קליפים כלי באיכות גבוהה. קליפים לחץ גבוה יכול לפגוע בכלי ולמנוע התחדשות ואילו קליפים בלחץ נמוך (<30 גרם) לא יכול לחסום את זרימת הדם לחלוטין.
  4. חסום זרימת דם בטחונות דרך המעי באמצעות שני קליפים כלי דם על פני כלי (40 כוח ג'י), demarking באזור מעי איסכמי (איור 1). ספיגה של כלי בטחונות נדרשהלמנוע אספקת דם מכלי דם סמוכים (לראות את המיקום של קליפים על איור 1 א, ד, ה, חצים ירוקים).
  5. אופציונלי: הוסף פתרון הפרין (6 יחידות USP / מ"ל), כדי למנוע קרישת דם. Dropwise להוסיף 0.5 מיליליטר של תמיסת הפרין אל המעי המבודד.
  6. סטרילי כרית לא חסיד לחים עדינים עם מי מלח מחומם מראש ל 37 מעלות צלזיוס, החלימו על תחום כירורגים. ודא כי מגבונים נשארים רטובים במהלך ההליך כולו.
  7. לשמור על איסכמיה במשך 60 דקות באמצעות 1-1.5% הרדמה isoflurane לאורך כל הדרך. אם הליך איסכמיה מבוצע כהלכה, באזור איסכמי ישתנה לאדום יין בצבע ב כ 30 דקות. שים לב כלי דם דיסטלי לתפקיד קליפ מוגדל במהלך איסכמיה (איור 1, לוחות מימין) המציין חסימה מוצלחת.
  8. לעקוב מקרוב אחר העכבר בשלב איסכמיה. תמשיך לחול תמיסת מלח כדי לרפד לא חסיד המכסה את אתר הניתוח.
  9. סימן את הקצוות של האזור איסכמי ידי pipetting 20 μl של hematoxylin Gill`s 3 על הרקמה כדי להקל קצירת רקמה איסכמית רקמה בריאה סמוכים מאותו עכבר להשוואה (איור 1E, פאנל מימין).

4. שלב reperfusion

  1. בסוף של איסכמיה להוסיף כמה טיפות של תמיסת מלח על האזור קליפ בעדינות להסיר קליפים כלי הדם עם applier קליפ. ואז, בעדינות לדחוף את המעי חזרה אל חלל הבטן באמצעות עצות צמר גפן טבולה מלוחות. הסר כרית לא חסיד ולסגור את דופן הבטן ואת העור באמצעות קליפים הפצע נירוסטה 9 מ"מ. אם reperfusion מבוצע יותר מ -3 שעות, השתמש תפר vicryl נספגים לסגור את דופן הבטן לפני יישום קליפים פצע על העור.
  2. לשמור על עכברים בכלוב נקי מחומם עבור פרק הזמן הרצוי (30 דק ', 60 דק', 120 דק ', או 180 דקות) עבור השלב reperfusion.
  3. בדוק חיות לפחות כל 30 דקות כדי להבטיח יציבות.

class = "jove_title"> 5. Necropsy והקציר של המעי הדק

  1. להרדים עכברים על ידי ה- CO 2 ממנת יתר ואחריו נקע בצוואר הרחם בזמן הרצוי הבאים reperfusion.
  2. פתח חלל הבטן לאסוף את רקמת המעי איסכמי לניתוח נוסף. קציר נורמלי בריאות רקמות סמוכות הרקמות הפגועות בקרתי פנימי לחשבון לכל תגובה מערכתית בכל נוגע לפגיעה.
    הערה: בקרה זה מתאימה יותר מאשר אחיזת העיניים המופעלות עכברים שליטים כי עכברי דמה מופעל אינם עוברים תגובה מערכתית בכל הנוגע לפגיעה נגרמת IR.
  3. יש לשטוף היטב את תוכן המעי באמצעות מזרק 30 מ"ל עם מחט gavage מצורף מלא מלוחים ואז לחתוך את המעי longitudinally. אם מדגם של מעי נדרש עבור ניתוח ביטוי גנים, לחתוך שבר 1.5 מ"מ אורכים, ולהשתמש חתיכת נותרים לניתוח היסטולוגית.
  4. לניתוח היסטולוגית, להכין רולדה בעזרת זוג מלקחיים כדי לגלגל את intestine.
  5. כדי לשמור על הצורה התגלגלה, למקם את החלקים של מעי בין כריות קצף ביופסית קלטות רקמה (איור 2). מניח את הקלטות בפורמלין 10% שנאגרה.
  6. תקן רקמה בפורמלין hr 24 לפחות. חלף פורמלין עם אתנול 70% עבור 24 שעות נוספות. רקמות חנות באתנול 70% ללא הגבלת זמן בטמפרטורת החדר.
  7. להטביע פרפין, לחתוך 5 סעיפים מיקרומטר ואת הכתם עם באמצעות hematoxylin ו eosin פרוטוקול סטנדרטי (איור 3).

6. ניקוד

  1. ציון הפגיעה בעכברים איסכמיה-רה-פרפוזיה כפי שמסוכם בטבלה 2. בחר שיטת הניקוד המתאים.
  2. אופציונלי: מחלקים את שדה הראייה לארבעה חלקים מאז חומרת הפגיעה משתנה לאורך כל הקטע.
  3. חשב את ממוצע הציונים של כל קטע מתוך דפי תווים שהושגו בצורה עיוורת.
  4. השווה את הכיתה של הרקמה הפגועה בין מקרים ובקרה וכן thדואר ללא פגע רקמות באמצעות מבחן Kruskal-Wallis, ואחריו מבחן ההשוואות המרובה של דאן.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

אנחנו מותאמים פרוטוקול הניסוי של ניתוח IR להשיג פגיעה לשחזור IR מושרה של המעי בעכברים. נציג תוצאות מודגמות בסעיף זה.

איור 1 מציג דוגמאות של עמדת קליפים כלי דם כדי לגרום איסכמיה של המעי העקום. חיצים שחורים להראות עמדת קליפים העיקרי הגורם לחסימה סניפים ממדרגה ראשונה של העורק mesenteric מעולה. חצים ירוקים להציג את המיקום של קליפים נוס...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

פיתוח מודלים העכבר של פציעה IR מעיים השתפרו מאוד להבנת המנגנונים של פגיעה ברקמות וסייע בפיתוח אסטרטגיות טיפוליות פוטנציאל למזער נזק לרקמות 7,9,11,34. השלבים הקריטיים של פרוטוקול זה הם מיצוב נכון של קליפים כלי הדם, עיתוי נכון של הערכה היסטולוגית איסכמיה והתקינה של פציעת IR.

משך איסכמיה הוא קריטי עבור ניזק אפיתל שלאחר מכן. השעה טיפוסי נדרש כדי לגרום פגיעה IR לשחזור ללא תחלואה ותמותה של עכברי הניסוי הוא ד...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים שאין ניגוד עניינים

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדע רוסי, להעניק אין. 14-50-00060 ו LLC RUSCHEMBIO. עבודה זו נתמכה גם על ידי Crohn`s ו קוליטיס קרן של אמריקה להעניק 294,083 (כדי AVT), ועל ידי NIH מענק RO1 DK47700 (כדי CJ).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
כרית מחוממתSunbeamE12107-819אלטרנטיבה: Braintree Scientific כרית מחוממת
מכונת הרדמה למחקר שולחניVascoUCAP 0001-0000171אלטרנטיבה: Parkland Scientific, חרוט אף
V3000PS Parkland ScientificARES500
מיכל נבלות ומחסנית חלופיתParkland Scientific80000, 80120
ניתוח תא אינדוקציהV711802
IsofluranePiramal HealthcareNDC 66794-013-10חומר מבוקר, צור קשר עם
קוצץ בעלי חיים IACUC אוסטר אוסטר גולדן A5 078005-050-003
משחת עינייםוובסטר8804604
בופרנורפיןמק'קסון562766חומר מבוקר, צור קשר עם IACUC
Ketaset (קטמין הידרוכלוריד)פייזרNADA 45-290חומר מבוקר, צור קשר עם IACUC
טיפים לכותנהמוצרים רפואיים פוריטניים806-WCחיטוי לפני השימוש
Betadine Purdue Products67618-150-1710% פובידון-יוד
אספן46066-807-60התאם לטמפרטורת החדר לפני השימוש
מדחום מכרסמים IRBIOSEBBIO-IRB153
קליפסים מיקרו וסקולריים, 70 גרםRoboz Surgical אלטרנטיבה RS5424, RS5435: WPI 14121, לחסימת SMA
קליפסים מיקרו וסקולריים, 40 גרםRoboz Surgical RS6472חלופה: WPI 14120, לחסימת כלי דם צדדיים
קליפ המריח מלקחייםWorld Precision Instruments14189חלופה: Roboz #RS-5410 או  #RS-5440
Gill's 3 hematoxylinThermo Scientific14-390-17
סיכות כירורגיות, רפלקס 9 מ"מCell Point Scientific201-1000
אפליקציית AutoclipBeckton Dickinson427630
כרית קצף ByopsySimportM476-1
קלטת רקמותFisher Healthcare15182701Aמכסה משולב Histosette II ובסיס
10% פורמלין חוצץ FisherScientific245-684
מספריים לקשתית כירורגיתWorld Precision Instruments501263-G SCאלטרנטיבה: Roboz RS6816
מספריים הפעלהמכשירי דיוק עולמיים501219-Gאלטרנטיבה: Roboz RS6814
מלקחיים חבישהRoboz כירורגי RS-5228, RS-8122אלטרנטיבה: World Precision Instruments 1519-G
Heparin, ללא אנדוטוקסין, 300 יחידות USP / בקבוקון, 50 מ"גSigma2106
קליפ פצע רפלקס להסרת מלקחייםRoboz Surgical אלטרנטיבה RS-9263: מכשירי דיוק עולמיים: עכברי 500347
C57BL/6J Jackson LaboratoryStock No 0664
Telfa חבישות לא דביקות, 3 x 4, סטריליותCoviden1050
פישרברנד העברת פישרסיינטיפיק13-711-5AMהשתמש בצנרת כדי להוסיף מי מלח
תמיסת מלח סטרילית

מקורות

  1. Eltzschig, H. K., Eckle, T. Ischemia and reperfusion--from mechanism to translation. Nat Med. 17, 1391-1401 (2011).
  2. Lenaerts, K., et al. New insights in intestinal ischemia-reperfusion injury: implications for intestinal transplantation. Curr Opin Organ Transplant. 18, 298-303 (2013).
  3. Yasuhara, H. Acute mesenteric ischemia: the challenge of gastroenterology. Surg Today. 35, 185-195 (2005).
  4. Perez-Chanona, E., Muhlbauer, M., Jobin, C. The microbiota protects against ischemia/reperfusion-induced intestinal injury through nucleotide-binding oligomerization domain-containing protein 2 (NOD2) signaling. Am J Pathol. 184, 2965-2975 (2014).
  5. Lee, H., et al. Delineating the relationships among the formation of reactive oxygen species, cell membrane instability and innate autoimmunity in intestinal reperfusion injury. Mol Immunol. 58, 151-159 (2014).
  6. Yoshiya, K., et al. Depletion of gut commensal bacteria attenuates intestinal ischemia/reperfusion injury. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 301, G1020-G1030 (2011).
  7. Wu, M. C., et al. The receptor for complement component C3a mediates protection from intestinal ischemia-reperfusion injuries by inhibiting neutrophil mobilization. Proc Natl Acad Sci U S A. 110, 9439-9444 (2013).
  8. Muhlbauer, M., Perez-Chanona, E., Jobin, C. Epithelial cell-specific MyD88 signaling mediates ischemia/reperfusion-induced intestinal injury independent of microbial status. Inflamm Bowel Dis. 19, 2857-2866 (2013).
  9. Gonzalez, L. M., Moeser, A. J., Blikslager, A. T. Animal models of ischemia-reperfusion-induced intestinal injury: progress and promise for translational research. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 308, G63-G75 (2015).
  10. Megison, S. M., Horton, J. W., Chao, H., Walker, P. B. A new model for intestinal ischemia in the rat. J Surg Res. 49, 168-173 (1990).
  11. Goldsmith, J. R., et al. Intestinal epithelial cell-derived mu-opioid signaling protects against ischemia reperfusion injury through PI3K signaling. Am J Pathol. 182, 776-785 (2013).
  12. Cuzzocrea, S., et al. Glycogen synthase kinase-3beta inhibition attenuates the development of ischaemia/reperfusion injury of the gut. Intensive Care Med. 33, 880-893 (2007).
  13. Farber, A., et al. A specific inhibitor of apoptosis decreases tissue injury after intestinal ischemia-reperfusion in mice. J Vasc Surg. 30, 752-760 (1999).
  14. Ben, D. F., et al. TLR4 mediates lung injury and inflammation in intestinal ischemia-reperfusion. J Surg Res. 174, 326-333 (2012).
  15. Watson, M. J., et al. Intestinal ischemia/reperfusion injury triggers activation of innate toll-like receptor 4 and adaptive chemokine programs. Transplant Proc. 40, 3339-3341 (2008).
  16. Watanabe, T., et al. Activation of the MyD88 signaling pathway inhibits ischemia-reperfusion injury in the small intestine. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 303, G324-G334 (2012).
  17. Murayama, T., et al. JNK (c-Jun NH2 terminal kinase) and p38 during ischemia reperfusion injury in the small intestine. Transplantation. 81, 1325-1330 (2006).
  18. Park, P. O., Haglund, U., Bulkley, G. B., Falt, K. The sequence of development of intestinal tissue injury after strangulation ischemia and reperfusion. Surgery. 107, 574-580 (1990).
  19. Jilling, T., Lu, J., Jackson, M., Caplan, M. S. Intestinal epithelial apoptosis initiates gross bowel necrosis in an experimental rat model of neonatal necrotizing enterocolitis. Pediatr Res. 55, 622-629 (2004).
  20. Aprahamian, C. J., Lorenz, R. G., Harmon, C. M., Dimmit, R. A. Toll-like receptor 2 is protective of ischemia-reperfusion-mediated small-bowel injury in a murine model. Pediatr Crit Care Med. 9, 105-109 (2008).
  21. Tatum, P. M., Harmon, C. M., Lorenz, R. G., Dimmitt, R. A. Toll-like receptor 4 is protective against neonatal murine ischemia-reperfusion intestinal injury. J Pediatr Surg. 45, 1246-1255 (2010).
  22. Fleming, S. D., et al. Anti-phospholipid antibodies restore mesenteric ischemia/reperfusion-induced injury in complement receptor 2/complement receptor 1-deficient mice. J. Immunol. 173, 7055-7061 (2004).
  23. Fleming, S. D., et al. Mice deficient in complement receptors 1 and 2 lack a tissue injury-inducing subset of the natural antibody repertoire. J. Immunol. 169, 2126-2133 (2002).
  24. Lapchak, P. H., et al. Platelets orchestrate remote tissue damage after mesenteric ischemia-reperfusion. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 302, G888-G897 (2012).
  25. Rehrig, S., et al. Complement inhibitor, complement receptor 1-related gene/protein y-Ig attenuates intestinal damage after the onset of mesenteric ischemia/reperfusion injury in mice. J. Immunol. 167, 5921-5927 (2001).
  26. Hoffman, S. M., Wang, H., Pope, M. R., Fleming, S. D. Helicobacter infection alters MyD88 and Trif signalling in response to intestinal ischaemia-reperfusion. Exp Physiol. 96, 104-113 (2011).
  27. Moses, T., Wagner, L., Fleming, S. D. TLR4-mediated Cox-2 expression increases intestinal ischemia/reperfusion-induced damage. J Leukoc Biol. 86, 971-980 (2009).
  28. Feinman, R., et al. HIF-1 mediates pathogenic inflammatory responses to intestinal ischemia-reperfusion injury. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 299, G833-G843 (2010).
  29. Lapchak, P. H., et al. The role of platelet factor 4 in local and remote tissue damage in a mouse model of mesenteric ischemia/reperfusion injury. PloS one. 7, e39934(2012).
  30. Wen, S. H., et al. Ischemic postconditioning during reperfusion attenuates intestinal injury and mucosal cell apoptosis by inhibiting JAK/STAT signaling activation. Shock. 38, 411-419 (2012).
  31. Wang, F., et al. Temporal variations of the ileal microbiota in intestinal ischemia and reperfusion. Shock. 39, 96-103 (2013).
  32. Zou, L., Attuwaybi, B., Kone, B. C. Effects of NF-kappa B inhibition on mesenteric ischemia-reperfusion injury. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 284, G713-G721 (2003).
  33. Hassoun, H. T., et al. Alpha-melanocyte-stimulating hormone protects against mesenteric ischemia-reperfusion injury. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 282, G1059-G1068 (2002).
  34. Stallion, A., et al. Ischemia/reperfusion: a clinically relevant model of intestinal injury yielding systemic inflammation. J Pediatr Surg. 40, 470-477 (2005).
  35. Blikslager, A. T., Roberts, M. C., Rhoads, J. M., Argenzio, R. A. Is reperfusion injury an important cause of mucosal damage after porcine intestinal ischemia? Surgery. 121, 526-534 (1997).
  36. Barker, N., et al. Identification of stem cells in small intestine and colon by marker gene Lgr5. Nature. 449, 1003-1007 (2007).
  37. Victoni, T., et al. Local and remote tissue injury upon intestinal ischemia and reperfusion depends on the TLR/MyD88 signaling pathway. Med Microbiol Immunol. 199, 35-42 (2010).
  38. Watanabe, T., et al. Toll-like receptor 2 mediates ischemia-reperfusion injury of the small intestine in adult mice. PloS one. 9, e110441(2014).
  39. Pope, M. R., Fleming, S. D. TLR2 modulates antibodies required for intestinal ischemia/reperfusion-induced damage and inflammation. J. Immunol. 194, 1190-1198 (2015).
  40. Leung, F. W., Su, K. C., Passaro, E. Jr, Guth, P. H. Regional differences in gut blood flow and mucosal damage in response to ischemia and reperfusion. Am J Physiol. 263, G301-G305 (1992).
  41. Chiu, C. J., McArdle, A. H., Brown, R., Scott, H. J., Gurd, F. N. Intestinal mucosal lesion in low-flow states. I. A morphological, hemodynamic, and metabolic reappraisal. Arch Surg. 101, 478-483 (1970).
  42. Quaedackers, J. S., et al. An evaluation of methods for grading histologic injury following ischemia/reperfusion of the small bowel. Transplant Proc. 32, 1307-1310 (2000).
  43. Bianciardi, P., Scorza, R., Ghilardi, G., Samaja, M. Xanthine oxido-reductase activity in ischemic human and rat intestine. Free Radic Res. 38, 919-925 (2004).
  44. Yandza, T., et al. The pig as a preclinical model for intestinal ischemia-reperfusion and transplantation studies. J Surg Res. 178, 807-819 (2012).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

גלה מאמרים נוספים

עורק מזנטרי עליוןתלישי מיקרו-כלי דםניתוח היסטולוגיצביעת המטוקסילין-אוסיןטכניקת גלילה (Swiss Roll)ביטוי TNF AlphaIL-1 BetaIL-6כימוקין Cxcl2
דגם Murine של פגיעת המעיים איסכמיה reperfusion
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.