מטרת הפרוטוקול היא להראות שיטה יעילה לחילוץ האוטוליטים מפגרי חדקן.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
במאמר זה
סיכום
תקציר
חילוץ otoliths (עצמות אוזן) מדגים כי יש גולגולות עבות מאוד יכול להיות זמן רב קשה מאוד. המנהג הנפוץ של ביצוע חתך אנכי רוחבי על החלק העליון של הגולגולת עם יד או במסור חשמלי עלול לגרום נזק אֶבֶן הַאוֹזֶן אם לא מבוצע כהלכה. דגי (Acipenseridae) הם משפחה אחת בפרט שיש גולגולת מאוד גדול ועבה. שיטת מעבדה חדשה הנכנסת חלל המוח מצד הגחון של הדג על מנת לחשוף את otoliths הייתה קלה יותר מאשר שיטות חילוץ אֶבֶן הַאוֹזֶן אחרות למצוא בספרות. שיטות ביקורת בספרות מיועדות בתחום והם יעילים יותר עיבוד כמויות גדולות של דגים מהר. עם זאת, טכניקה חדשה זו נועדה להיות יותר מתאים במעבדת הגדרה כאשר הזמן אינו לחיצת חילוץ מוצלח מכל דגימה הוא קריטי. ההצלחה של מציאה והסרת otoliths באמצעות טכניקה זו היא מאוד גבוהה לא להתפשר על היםtructure בכל דרך. טכניקה חלופית זו ישימה מיני דגים דומים אחרים לחילוץ otoliths.
מבוא
חדקן (Acipenseridae) אוכלוסיות ברחבי העולם כבר בירידה במשך יותר ממאה שנה בשל ההשפעות כולל אובדן בית הגידול, קיטוע האוכלוסייה, ואת overfishing כך אוכלוסיות רבות מוגנים על ידי חוקי המדינה הפדרלי 1,2. סוכנויות ניהול ברחבי ארה"ב והעולם זיהו חדקן כמין יעד לשיקום והתאוששות 1. מאפייני האוכלוסייה (צמיחה, גיוס, דיאטה) של אוכלוסיות חדקן ביותר נחקרו כדי להבין את ההיסטוריה הביולוגיה הבסיסית לחיים טובים יותר מאפיינים 1. בשל מעמדם המוגן של רוב אוכלוסיות חידקן, הערכת גיל קשה באוכלוסיות קטנות מאוימות שבו אף קרבה או ניזק ליחידים היא מוצדקת.
הפקת מבנים גרמיים לצורך הערכת גיל וניתוח צמיחה הייתה שימוש טכניקה נפוצה 3 .the סעיפי ray סנפיר כדי לקבוע גיל sturgeעל הפכה שיטה קטלנית מעשית, אך אימות של הטכניקה הוגבלה וגיל יכול להיות מאוד קשה לפענח אצל אנשים מבוגרים (> 15 שנים) 4. החוקרים להעריך את השימוש במבנים הגרמיים מרובים חדקן לשימושם אימות גיל המפרץ חדקן (desoti חדקן oxyrinchus) 5, אטלנטיק חדקן (א o. Oxyrinchus) 6, לבן חדקן (transmontanus א) 7, ואגם חדקן (א fluvescens) 8 למסקנה כי ray סנפיר החזה השולי הראשון ספק את הגיל המדויק ביותר, אך מדענים קובע הליך פולשני זה להיות מזיקות פרטים גדולים יותר. נכון לעכשיו, קיימת ההתפתחות של שימוש במטריצות צורת אֶבֶן הַאוֹזֶן להבחין בין מיני חדקן בצפון אמריקה עם שיעור גבוה מאוד של הצלחה 9. פרטים על תהליך ההסרה של אֶבֶן הַאוֹזֶן עם חתך רוחבי מגבה בבסיס הגולגולת הוא אֶבֶן הַאוֹזֶן נפוץ נוסףשיטת ction עיון בספרות העלה ופירט בבירור אל Secor et. (1991) 10. עם זאת, שיטה זו היא קשה ליישם על חדקן שיש גולגולות עבות מאוד עם otoliths כי הם קטנים ועדינים היו נשברים ומפרקים. סקירה נוספת של הספרות מראה שום מתודולוגיה מפורטת שנייה של תהליך הסרת אֶבֶן הַאוֹזֶן עבור חדקן. מטרת נייר זה הייתה לפרט שיטה חלופית של לחילוץ otoliths מ חדקן ידי הזנת חלל המוח מצד הגחון.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
הערה חשובה: בשל מעמדם המוגן של כל המינים של חידקן בארצות הברית, מאפשרת לרכוש ולטפל דגים התקבלו לפני הליך מעבדה. כל הדגימות נרכשו ממקורות מדגרה לפרסם מורטם בשל סיבות טבעיות ועל מסולק בהתאם לנוהל השגרתי.
1. הכנת הדגימה
- לפני חתכים בכל שכבת פגר חדקן על צידו באמצעות סרט מדידה כדי למדוד אורך כולל של החוטם אל קצה הזנב עד המ"מ 1 הקרוב. (איור 1 א)
- לשקול פגר חדקן בסולם tared אל הגרם 1 הקרוב. הערכת פגר לכל תגיות או סימנים ולהקליט חיצוניים.
2. אֶבֶן הַאוֹזֶן הפקה
- ביצוע חתך אנכי עם סכין פילה גדול בין בסיס הגולגולת ואת scute הגבה הראשונה דרך הגוף להפריד את הראש מהגוף (האיור 1B). לאחר הסרת הראש, turn הראש כך הפה הוא פונה כלפי מעלה (איור 1 ג).
- הסר הרקמות הרכות של הפה הזימים באמצעות סכין פילה לחתוך לאורך הצד הגחוני של הגולגולת (איור 1D). עושים חתך עם מסור חשמלי עצם מקצה החוטם לבסיס הגולגולת כדי לחצות את הראש לחלוטין (איור 1E). הפרד את שני חצי ביד כדי לחשוף את חלל המוח (איור 2 א).
- סר וזורק משנה המוח (תיבת האדום משמאל) עם מלקחיים כדי להציג תעלות בצורה חצי עיגול (תיבת האדום מימין) בתוך חלל המוח (איור 2 ב).
- הסר סחוס תעלה חצי עגול מ חלל המוח עם מלקחיים (איור 2 ג). בזהירות לנקב סחוס תעלה חצי עגול עם קצה מלקחיים ולהסיר אֶבֶן הַאוֹזֶן (איור 2 ד). הסר את אֶבֶן הַאוֹזֶן (מבנה גרמי קשה בתוך סחוס) עם מלקחיים מן הסחוס תעלה חצי עגול (איור 2E) .
- חזור על שלבים 2.3 - 2.4 ל להסיר אֶבֶן הַאוֹזֶן מן החצי השני של הגולגולת.
- טובל את otoliths באתנול 92% במשך 5 שניות כדי להסיר כל סחוס. otoliths מקום ב בקבוקון הנצנץ 25 מ"ל פתוח להתייבש במשך 24 שעות.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
הגודל הבוגר חדקן ברחבי העולם משתנה מאוד אבל המיקום של otoliths עולה בקנה אחד. שימוש סכין פילה חד נמצא להסיר את הרקמות הרכות של הפה לראות בקלות באיור 1D. מסור עצם חשמלי הוא הכלי המועדף עבור החתך לרוחב כדי לחשוף את חלל המוח באיור 1E. עם זאת, תשומת לב שחצה את קו האמצע של הגולגולת מתבקש ביתר שאת אחרת otoliths ניתן לכתוש במהלך תהליך זה. אם תהליך זה מבוצע כהלכה ואז חלל המוח ייחשפו באופן שווה ללא נזק otoliths כפי שמוצג
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
הסקירה של שיטה חלופית של לחילוץ otoliths מגוויות חדקן כבר מפורטת. חשוב לציין כי תשומת לב מיוחדת צריכה את המיקום חתך לרוחב על קו האמצע של הגולגולת כדי לחצות את הגולגולת שווה כדי לוודא שלא ניזוק אל otoliths במהלך לנתיחה. אם החתך הוא לא עמוק מספיק כדי לחצות את הגולגולת לגמרי זה יהיה מאוד קשה לחשוף את חלל המוח בו נמצא היישוב של otoliths נראה בבירור. עם ניסיון, את הטכניקה הכללית היא יחסית פשוטה ומובילה אחוז גבוה של otoliths שנמצא ללא פגע. שיטה חדשה זו נותנת מחקרים דרך חלופית כדי לחלץ o...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
כל שימוש בשמות מסחר, מוצרים או חברות הוא למטרות תיאוריות בלבד ואינו מרמז על תמיכה של ממשלת ארה"ב.
תודות
תודה מיוחדת ממחלקת הסביבה St. Regis מוהוק, מדגרת דגים Welaka הלאומי, דגים בארה"ב יחידת המחקר שירות בטבע, באוניברסיטת דרום אילינוי, דגים בארה"ב מרכז הדיג Northeast שירות בטבע, סטרלינג קוויאר, אוניברסיטת קליפורניה-דיוויס, גאריסון סכר לאומי דגים מדגרה, מדגרת הדגים הלאומית Bluff דובים, וארה"ב דגים וחיות בר שירות פנמה סיטי דיג משאבי משרד עזרו באספקת חדקן עבור פרויקט זה. מאמר זה הוא תרומה 2013 במרכז מדע האגמים הגדול USGS.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| לוח | מקל מטר מטרי עדיף | ||
| משקל | |||
| סכין | |||
| פילה אזמל | |||
| מלקחיים | |||
| בקבוקונים לדוגמא בקבוקוני | נצנוץ 25 מ"ל עובדים היטב |
מקורות
- Auer, N. A. Conservation. Sturgeons and Paddlefish of North America. LeBreton, G. T. O., Beamish, F. W. H., McKinley, R. S. 27, Kluwer Academic Publishers. 252-276 (2004).
- Sturgeon Specialists Group, sturgeon conservation. IUCN (International Union for the Conservation of Nature). , Source: www.iucn.org (2008).
- Campana, S. E. Accuracy, precision and quality control in age determination, including a review of the use and abuse of age validation methods). Journal of Fish Biology. 59, 197-242 (2001).
- Bruch, R. M., Campana, S. E., Davis-Foust, S. L., Hansen, M. J., Janssen, J. Lake Sturgeon age validation using bomb radiocarbon and known-age fish. Transactions of the American Fisheries Society. 138, 361-372 (2009).
- Baremore, I. E., Rosati, J. D. A validated, minimally deleterious method for ageing sturgeon. Fishery Bulletin. 112, 274-282 (2014).
- Stevensen, J. T., Secor, D. H. Age determination and growth of Hudson River Atlantic sturgeon, Acipenser oxyrhynchus. Fishery Bulletin. 97, 153-166 (1999).
- Brennan, J. S., Cailliet, G. M. Comparative age-determination techniques for white sturgeon in California. Transactions of the American Fishery Society. 118, 296-310 (1989).
- Rossiter, A., Noakes, D. L. G., Beamish, F. W. H. Validation of age estimation for the lake sturgeon. Transactions of the American Fisheries Society. 124, 777-781 (1995).
- Chalupnicki, M. A., Dittman, D. E. North American Sturgeon Otolith Morphology. Copeia. , 260-266 (2016).
- Secor, D. H., Dean, J. M., Laban, E. H. Manual for otolith removal and preparation for microstructural examination. , Barach Press. Columbia, South Carolina. (1991).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
תגיות
