מאמר שיטה

וריד ביון דגם: מודל מתאים ללמוד patency מעקף

DOI:

10.3791/54839

⸱

15 בינואר 2017

 ,  ,  ,  ,  , 
1Transplant and Stem Cell Immunobiology Lab, University Heart Center Hamburg, 2Department of Surgery, Transplant and Stem Cell Immunobiology Lab, University of California San Francisco (UCSF), 3Cardiovascular Research Center (CVRC) and DZHK German Center for Cardiovascular Research), partner site Hamburg/Kiel/Luebeck, 4Cardiovascular Surgery, University Heart Center Hamburg

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

סרטון זה מדגים מודל לחקר התפתחות היפרפלזיה מיואינטימלית לאחר ניתוח אינטרפוזיציה ורידית בחולדות.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

השתלת מעקפים היא שיטת טיפול מבוססת למחלת עורקים כליליים. סבלנות השתל ממשיכה להיות עקב אכילס של השתלות ורידים ספניים. מודלים מחקריים לכישלון שתל מעקף חיוניים להבנה טובה יותר של תהליכים פתוביולוגיים ופתופיזיולוגיים במהלך אובדן סבלנות השתל. מודלים של בעלי חיים גדולים, כמו חזירים או כבשים, דומים למבנים אנטומיים אנושיים אך דורשים מתקנים וציוד מיוחדים. סרטון זה מתאר מודל התערבות ורידים של חולדה כדי לחקור אובדן סבלנות של השתלת ורידים. חולדות הן זולות וקלות לטיפול. בהשוואה לדגמי עכברים, הגודל הנוח של החולדות מאפשר יכולת פעולה טובה יותר ומאפשר להשיג כמות מספקת של חומר לניתוח מגוון נוסף. בקצרה, הווריד האפיגסטרי התחתון של חולדה תורמת נקצר ומשמש להחלפת קטע מעורק הירך. אנסטומוזה מתבצעת באמצעות תפרים בודדים ואטומה בדבק פיברין. ניתן לנטר את סבלנות השתל באופן לא פולשני באמצעות סונוגרפיה דופלקסית. היפרפלזיה מיואינטימלית, שהיא הגורם העיקרי לאובדן סבלנות השתל, מתפתחת בהדרגה עם הזמן וניתן לחשב אותה מחתכים היסטולוגיים.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מחלת לב כלילית והסיבוכים שלהם הם בין הגורמים המובילים למוות ברחבי העולם. אסטרטגיות טיפוליות נוכחי להתמקד לבסס מחדש את זרימת הדם, בין אם על ידי מתרחבים כלי הצטמצמו או על ידי יצירת מעקף. השתלת מעקפים (CABG) באמצעות autografts וריד תוארה לראשונה בשנת 1968 שוכללה במרוצת השנים. מלבד וסקולריזציה של הקדמי השמאלי היורד לב כלילית, תעלות וריד saphenous הם נפוצות ביותר 1. עם זאת, patency השתל נותר העקב אכילס של שתלי וריד saphenous (SVG). שנה לאחר הניתוח, patency השתל הוא 85%, יורד ל -61% לאחר עשר שנים 2,3. חשיפת המנגנונים והגורמים pathophysiological של אובדן patency SVG לכן משימה חשובה.

וידאו זה מדגים מודל ביון וריד עכברוש לחקור אובדן שתל הווריד. מטרות העל של שיטה זו הן לחקור את pathobiological שבבסיסותהליכי -physiological במהלך התקדמות מחלה ואת לפתח מודל מתאים תרופה או בדיקת אופציה טיפולית. על ידי השתלת הווריד ברום הבטן השטחית לתוך מערכת העורקים, מודל זה יחקה את ההגדרה הקלינית של השתלת מעקפים. טראומה ניתוחית, איסכמיה, ומתח קיר הם גורמים חשובים של שינויים בכלי דם הפתולוגיים מחקות במודל המתואר.

דגמים ומינים שונים זמינים לחקור אובדן patency וריד שתל. במודלים של בעלי חיים גדולים, כגון חזירים 4, כבשים 5, כלבים 6, וקופי 7, להידמות כלי אנושי מבנים אנטומיים ובכך לאפשר אסטרטגיות טיפוליות מורכבות, כגון סטנט מעקפים או טכניקות ניתוחיות חדשות, להיבדק 8. עם זאת, דיור מיוחד, ציוד, וצוות נדרש. בנוסף, מחיר גבוה והן בשל צורך מרדים נוסף במהלך הניתוח לעכב היישום הרחב יותר שלהם. Smהחיות כל, כוללים חולדות, קלות לטפל, אינו דורש דיור מיוחד, ויש להם עלויות לניהול. לעומת דגמי עכבר 9,10, במודלים של עכברים יש את היתרון של אפשרות לשוב ולבצע טוב יותר ולכן השתנות פחות בתוצאה. חולדות הן מבחינה פיזיולוגית וגנטית יותר דומים לבני אדם מאשר עכברים 11,12. בנוסף, עכברי-בר ביותר רק לפתח myointima המוגבל 13, ההופך במודלים של עכברים נוטים שגיאות מסוג ב'. היסטולוגיה של ורידי העכבר העיקריים, כגון נחות הווריד הנבוב, מורכב רק של כמה שכבות תא הופכת 13 קשה הערכה המוקדמת. חסרון נוסף הוא הכמות הקטנה של רקמה זמינה לניתוח שלאחר מכן לאחר החלמת שתל.

המודל המתואר בסרט הזה ניתן לשחזור, זול, וקל לביצוע, והוא ניתן להקים במהירות ובאופן אמין. זה מתאים במיוחד בהערכת סוכנים טיפוליים ניסיוני יקרים, כגון וקטורים ויראלייםעבור ריפוי גנטי, באופן חסכוני.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

בעלי החיים קבלו טיפול הומאני באמות מורה העקרונות בחיות מעבדה, שהוכן על ידי מכון משאבים בחיות מעבדה ופורסם על ידי ה- National Institutes of Health. כל הפרוטוקולים החיים אושרו על ידי הרשות המקומית האחראית ( "für Amt Gesundheit und Verbraucherschutz, Hansestadt (משרד בריאות הגנת הצרכן) המבורג").

1. טיפול בבעלי חיים

  1. השג חולדות לואיס (Lew / CRL) חולדות וחולדות מהונדסות ROSA / בלוציפראז- Lew במשקל 300-350 גרם מהמכון בחיות מעבדה.
  2. שמור על החולדות בתנאים קונבנציונליים בארונות מאווררים ולהאכיל אותם צ'או עכברוש סטנדרטי כרצונך מי autoclaved.
  3. בצע השתלת שתל באמצעות החולדות המהונדסות ROSA / Lew-בלוציפראז תורמי חולדות Lew / CRL syngenic כמו הנמענים.

2. הכנת העכברוש התורם

  1. השתמש ולהכשרהתא יון לטשטש עכברוש עם isoflurane (2.5-3%).
  2. מניחים את החולדה על הגב שלה ולשמור על הרדמה עם facemask כיסוי הפה והאף. בדוק עומק מספיק של הרדמה על ידי צובט את הרגליים האחוריות ואימות בהעדר רפלקסים. החל משח וטרינר על העיניים כדי למנוע יובש לאחר הרדמה.
  3. מורחים את הרגליים האחוריות ולתקן את עמדתם באמצעות קלטת.
  4. לגלח את השיער מפשעתי עם גוזם שיער ולחטא את האזור כולו באמצעות יוד povidone ואחריו 80% אתנול. חזור על שלב החיטוי פעמים.
    הערה: אזור הניתוח, גזה, ומכשירי ניתוח צריכה להיות מעוקרות. יש לשמור על שדה סטרילי לאורך כל ההליך וללבוש-ליחד, כפפות כירורגי סטרילי, מסכות, וכובעים.
  5. תחת מיקרוסקופ, לבצע חתך אנכי לאורך inguinalis המנחה. השתמש בשני מלקחיים כדי להפריד את הרקמות התת עורית בעדינות ולחשוף את הווריד ברום הבטן השטחי מן האורים שלוג'ין על וריד הירך. בזהירות לבודד את הווריד ברום הבטן השטחי מן הרקמות הסובבות.
  6. תפסיק את זרימת דם בווריד ברום הבטן השטחי באמצעות שני מלחציים מיקרו.
  7. קציר פלח 0.5 עד 1 ס"מ כ הווריד ידי הרמת וריד מבודד בזהירות עם מלקחיים חיתוך דרך כלי עם microscissors. השאירו את מהדק מיקרו על גדם כלי כדי למנוע אובדן דם. מניחים את פיסת הסיר של וריד על גזה סטרילי. בזהירות במקום מחט 30 G בתוך קצה אחד של הווריד שנקטף ולשטוף את הכלי עם הפרין (50 יחידות / מיליליטר).
    הערה: ידית הווריד בזהירות ולהימנע נזק במהלך הרמת, חיתוך, ו הסמקה. הקפד לשטוף את השתל עם הכמות הנכונה של הפרין.
  8. שמור במגזר כלי ב לידוקאין 1% על הקרח עד להשתלה לתוך עכברוש הנמען למנוע התכווצות כלי.
  9. להרדים את העכברוש התורם על ידי הגדלת ההרדמה עד 5% isoflurane. לאחר 2-3 דקות, open הבטן לאורך alba Linea, לחתוך דרך הסרעפת, ולהסיר את הלב לעצור את זרימת הדם.

3. הכנת עכברוש הנמען

  1. להרדים ולתקן החולדה הנמען באותה צורה כמו עכברוש התורם.
  2. לגלח את הצד המדיאלי של הרגליים עם גוזם שיער ולחטא שלוש פעמים באמצעות יוד povidone ו -80% אתנול.
  3. צג את עומק ההרדמה ולהבטיח שזה מספיק ידי אימות בהעדר רפלקסים כאשר צובט את הרגליים האחוריות.
  4. בצע חתך הירך החציוני מהברך אל חיק מפשעתי. תחת מיקרוסקופ, השתמש 2 מלקחיים כדי להפריד את עורק הירך מסביבתה.
  5. השתמש מלחציים מיקרו לעצור את זרימת הדם. מניחים את מהדק הפרוקסימלית הראשון, ואחריו מהדק דיסטלי.
  6. לגזור קטע קצר של עורק הירך הדק עם microscissors וזורק אותו. לקצר את גדם עורקי נותרים עם microscissors, יצירת פער זה1-2 מ"מ גדול יותר שתל הווריד. שטוף את הגדם עורקי עם הפרין באמצעות מחט 30 G.
    הערה: אם adventitia שבולט מעט מעבר גדם הכלי, להשתמש במלקחיים כדי למשוך אותו מעט מעל הקצה של הכלי ולהסיר חלק.
  7. מניח את הווריד שנקטף מן הצעד 2.8 בין גדמי העורקים ולהתאים את האורך כך שהוא נכנס כראוי לתוך הפער. הערה לכיוון הווריד.
  8. בצע השקת הפרוקסימלי הראשון באמצעות תפר 10-0 prolene. לנהל תפרים יחידים לפי הסדר המוצג (1D איור). התחל עם תפר בכל צד לרוחב לפני הוספת שלושה תפרים יותר בצד הגחון. לאחר מכן, למקם שלושה תפרים בצד הגבי של הכלי להשלמת ההשקה.
  9. חבר את כלי דיסטלי עם שתל תוך שימוש באותה טכניקה כמו השקה הפרוקסימלי כמתואר בשלב 3.8. שוב, להתחיל עם תפר בכל צד לרוחב, ולאחר מכן למקם שלושה תפרים על sid הגחוןדואר ואת הצד הגבה.
  10. טען שני מזרקים 1 מ"ל עם רכיב דבק הפיברין 1 ו -2 הרם בזהירות את השתל עם מלקחיים ושחרר כ 100 μl של רכיב דבק הפיברין 1 תחת השתל, ואחריו רכיב 2.
    הערה: ודא כי רכיבים 1 ו -2 מיושמים ביחס של 1: 1.
  11. מניחים את השתל ן למקומו ושחרר 100 μl נוסף של רכיבים 1 ו -2 על גבי השתל. הקפד כי הדבק מכסה גם את השתל ואת השקה כדי למנוע אי ספיקה anastomotic ושוב-התנפחות של השתל הווריד.
  12. בזהירות לפתוח את מהדק דיסטלי, ואחריו הפרוקסימלי.
  13. אשר ניתוח מוצלח על ידי בדיקת דופק גלוי בווריד המושתל ועורקים הדיסטלי של השתל.
  14. הסר דבק מופרז, אשר מעכבת סגירת עור. שימוש במלקחיים כדי להרים את הדבק לרפא ולהסיר את העודפים עם microscissors. סגור את שכבות העור עם 5-0 תפרים prolene.
  15. להזריק 4-5 מ 'g / ק"ג Carprofen תת עורי לפני המאפשר החולדה להתעורר. אין להשאיר את החיה ללא השגחה עד שהוא שב להכרתו מספיק כדי לשמור שכיבה sternal. שמור את החיה בכלוב אחד עד שהוא התאושש לחלוטין.
  16. להוסיף דיפירון למי השתייה (50 מ"ג דיפירון ל -100 מ"ל) כמו משככי כאבים במשך 3 הימים הבאים ולפקח החיה יומי.

4. דופלקס sonography

הערה: sonography השתמש duxplex לדמיין את זרימת הדם הלא פולשני בחולדות 14.

  1. לטשטש חולדה בתא אינדוקציה (2% isoflurane). מניחים את החולדה על הגב שלה ולשמור הרדמה עם facemask המכסה את האף.
  2. השתמש קוצץ שיער הסרת שיער קרם להסרת שיער סביב האזור של הירך.
  3. החל ג'ל אולטרסאונד לירך. ודא שאין בועות אוויר. לרכוש תמונות sonography דופלקס באמצעות מתמר 400 MS (התדר המרכזי: 30 Mרץ) עם קצב פריימים של 230-400 מסגרות / sec.

5. Histopathology

הערה: קציר להכתים את הכלי עם trichrome המכתים של מסון לניתוח morphometric 15.

  1. תקן את כלי שנקטפו 4% paraformaldehyde לילה ליבש אותו ריכוז גדל והולך של אתנול. שבץ מדגם פרפין ופצע אותו לתוך 5 מיקרומטר פרוסות עבות באמצעות microtome.
    הערה: Paraformaldehyde רעיל צריך להיות מטופלים עם טיפול מיוחד.
  2. Deparaffinize השקופיות לפני השארתם trichrome פתרון מכתים. מייבשים את השקופיות מוכתמים, לנקות אותם עם קסילן, ולעגן אותם הרכבה בינונית. לאחר ייבוש שקופיות, להציג את הדוגמאות עם מיקרוסקופ.

6. הדמיה פליטת אור (BLI)

הערה: שתל לאחר הניתוח הייתה במעקב לאורך זמן in vivo על ידי מדידת אות bioluminescent 16.

  1. ממיסים 1 גרם של מלח אשלגן D-Luciferin ב 22 מ"ל של PBS ו להזריק אותו intraperitoneally לתוך חולדה (375 מ"ג / ק"ג משקל גוף). חכה 15 דקות עבור luciferin להסתובב החיה.
  2. מניח את החולדה לתוך מערכת כימות bioluminescent בזמן אמת ולגשת אות פליטת האור.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המודל ביון עכברוש וריד מתאים ללמוד את הפיתוח של היפרפלזיה myointima ו לכישלון השתל הווריד. בעלי חיים לשחזר היטב מהניתוח ולהראות אחרי הניתוח בכושר גופני מצוין. איור 1 מציג את השלבים כירורגית המפתח. לאחר החתך בעור לאורך Linea inguinalis, וריד שטחי ברום הבטן ואת עורק הירך מזוהים (איור 1 א). קציר של השתל צריך להתבצע בזהירות, מבלי לפגוע השתל (איור 1B), כמו זה יכול להוביל לכישלון השתל מוקדם ואובדן patency. לאחר הצבת השתל בתוך החיה הנמען...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

וידאו זה מדגים מודל ביון וריד עכברוש לחקור אובדן שתל וריד כדי לאפשר חקירה של תהליכים פתולוגיים הבסיס לבין בדיקות של תרופות חדשות או אופציות טיפוליות.

הרדמה היא היבט חיוני של הליכים כירורגיים. מערכת ההרדמה inhalative רציפה מומלצת, שכן פעולה זו מהווה שיטה בטוחה וקלה, במיוחד במהלך פעילות ממושכת. זה יכול להיות בעל חשיבות רבה במהלך שלב ההכשרה, בתום המבצע לוקח יותר מ 1 hr.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מודים כריסטיאן Pahrmann לקבלת הסיוע הטכני שלה. מחקר זה מומן על ידי דויטשה Stiftung fuer Herzforschung (F / 28/14). DW נתמכה על ידי בפרס הנסיעות מן האגודה הבינלאומית לב והשתלות ריאה. TD קיבל מלגת הצטיינות קרונה אחר מן Else-קרונה-Fresenius-Stiftung (2012_EKES.04). SS קיבלו מענקי מחקר מן (DFG; DE2133 / 2-1, TD ו SCHR992 / 3- 1, SCHR992 / 4-1, ש.ש).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
עכברוש LEW/Crlצ'ארלס ריברמספר מלאי 004
חולדה LEW-Tg(Gt(ROSA)26Sor- 1
luc)11Jmsk		המכון לחיות מעבדה, אוניברסיטת קיוטו, יפןמספר חולדה NBPR 0299http://www.anim.med.kyoto-u.ac.jp/NBR/
PFA 4%מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית#157135S20%
קוצץ שיערWAHL8786-451A ARCO SE
ForeneAbbViePZN 10182054 Art.Nr.: B506מהדק מיקרוכירורגי איזופלורן
Fine ScienceTools 18055-04Micro-Serrefine -
מוליך מהדקFine Science Tools18056-14
קרם להסרת שיערRufin קוסמטי27618
Povidone-IodineBetadine Purdue PharmaNDC:67618-152
10-0 תפר אתילון Ethicon2814G
5-0 תפר פרולןEthiconEH7229H
רימאדילפייזר400684.00.00קרפרופן
NovaminsulfonRatiopharmPZN 03530402Metamizole
HeparinRotexmedicaPZN: 386234025.000 כלומר / מ"ל
Xylocain 1%AstraZenecaPZN: 1137907Lidocain
EVICELJ& J Med.Ethicon BiosurPZN 7349697 Art. Nr.:EVK01DEדבק פיברין
NaCl 0.9%B.BraunPZN 06063042 Art. מס': 3570160
Vevo 770 ברזולוציה גבוהה in vivo מערכת מיקרו-הדמיהVisualSonicsסונוגרפיה דופלקס
Ecogel 100 ג'ל אולטרסאונדEco-med30GB
D-Luciferin Firefly, מלח אשלגןBiosynthL-8220
PBS pH 7.4Gibco10010023
Xenogen Ivis 200Perkin Elmerbioluminescence הדמיה
ערכת המטוקסילין ברזל Weigerts Merck1.15973.0002צביעת טריכרום
Resorcine-Fuchsine WeigertWaldeck2.00E-30טריכרום מכתים
חומצה פוקסיןסיגמא-אולדריץ'F8129-25Gמכתים טריכרום
תמיסת Ponceau S ServaElectrophoresis33427טריכרום מכתים
אזופלקסיןוולדק1B-103טריכרום מכתים
חומצה מוליבדטופוספורית הידראטMerck1.00532.0100טריכרום מכתים
כתום GWaldeck1B-221טריכרום מכתים
ירוק בהיר SFWaldeck1B-211Trichrome צביעה
Vitro-CludLangenbrinck04-0001
חומצה אצטית קרחוניתSigma-Aldrich537020
37% HClSigma-AldrichH1758
XyleneTh. Geyer3410
ParaffinLeica biosystemsREF 39602004
אתנול אבסולוטTh. Geyer2246
אתנול 96%Th. Geyer2295
אתנול 70%Th. Geyer2270
מתלה שקופיותTed Pella21057
צלחת מכתיםטד פלה21075
Bepanthen משחת עינייםואף Bayer1578675משחת עיניים
4 מ"מ

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Sabik, J. F., 3rd, Understanding saphenous vein graft patency. Circulation. 124, 273-275 (2011).
  2. Goldman, S., et al. Long-term patency of saphenous vein and left internal mammary artery grafts after coronary artery bypass surgery: results from a Department of Veterans Affairs Cooperative Study. J Am Coll Cardiol. 44, 2149-2156 (2004).
  3. Fitzgibbon, G. M., et al. Coronary bypass graft fate and patient outcome: angiographic follow-up of 5,065 grafts related to survival and reoperation in 1,388 patients during 25 years. J Am Coll Cardiol. 28, 616-626 (1996).
  4. O'Brien, J. E., et al. Wound healing around and within saphenous vein bypass grafts. J Thorac Cardiovasc Surg. 114, 38-45 (1997).
  5. El-Kurdi, M. S., et al. Ovine femoral artery bypass grafting using saphenous vein: a new model. J Surg Res. 193, 458-469 (2015).
  6. Yuda, A., et al. Angiotensin II receptor antagonist, L-158,809, prevents intimal hyperplasia in dog grafted veins. Life Sci. 68, 41-48 (2000).
  7. McCann, R. L., Hagen, P. O., Fuchs, J. C. Aspirin and dipyridamole decrease intimal hyperplasia in experimental vein grafts. Ann Surg. 191, 238-243 (1980).
  8. Thomas, A. C. Animal models for studying vein graft failure and therapeutic interventions. Curr Opin Pharmacol. 12, 121-126 (2012).
  9. Hu, Y., Xu, Q. New mouse model of vein bypass graft atherosclerosis. Heart Lung Circ. 11, 182-188 (2002).
  10. Salzberg, S. P., et al. Increased neointimal formation after surgical vein grafting in a murine model of type 2 diabetes. Circulation. 114, I302-I307 (2006).
  11. Abbott, A. Laboratory animals: the Renaissance rat. Nature. 428, 464-466 (2004).
  12. Lindblad-Toh, K. Genome sequencing: three's company. Nature. 428, 475-476 (2004).
  13. Yu, P., Nguyen, B. T., Tao, M., Campagna, C., Ozaki, C. K. Rationale and practical techniques for mouse models of early vein graft adaptations. Journal of vascular surgery. 52, 444-452 (2010).
  14. Olver, D. T., Lacefield, J. C., Shoemaker, K. J. Evidence of bidirectional flow in the sciatic vasa nervorum. Microvascular research. 94, 103-105 (2014).
  15. Stubbendorff, M., et al. Inducing myointimal hyperplasia versus atherosclerosis in mice: an introduction of two valid models. Journal of visualized experiments : JoVE. , (2014).
  16. Conradi, L., et al. Immunobiology of fibrin-based engineered heart tissue. Stem cells translational medicine. 4, 625-631 (2015).
  17. Dashwood, M. R., Tsui, J. C. 'No-touch' saphenous vein harvesting improves graft performance in patients undergoing coronary artery bypass surgery: A journey from bedside to bench. Vascular Pharmacology. 58, 240-250 (2013).
  18. Bekler, H. I., Rosenwasser, M. P., Akilina, Y., Bulut, G. The use of an absorbable collagen cover (NeuraWrap) improves patency of interpositional vein grafts. Acta orthopaedica et traumatologica turcica. 44, 157-161 (2010).
  19. Geurts, A. M., et al. Knockout rats via embryo microinjection of zinc-finger nucleases. Science. 325, 433(2009).
  20. Moreno, C., et al. Creation and characterization of a renin knockout rat. Hypertension. 57, 614-619 (2011).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

מאמרים קשורים