Method Article

פיתוח מודל ישיר מכסת-זול עבור הערכת pulpal ריפוי פצע גיבוש מתקנת הדנטין של עכברים

DOI:

10.3791/54973

⸱

January 12th, 2017

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1The Shapiro Family Laboratory of Viral Oncology and Aging Research, The UCLA School of Dentistry, 2UCLA Jonsson Comprehensive Cancer Center, 3David Geffen School of Medicine at UCLA

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אנו מתארים שיטת צעד אחרת צעד ביצוע עיסה ישירה מכסה על שיני עכברים להערכת ריפוי פצע pulpal והיווצרות הדנטין מתקן in vivo.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מוך השן הוא איבר חיוני בשן המוגן באופן מלא על ידי אמייל ודנטין. כאשר מוך השן נחשף עקב פציעות קריוגניות או יאטרוגניות, הוא מכוסה לעתים קרובות בחומרים תואמים ביולוגית על מנת לזרז את ריפוי פצעי המוך. המטרה הסופית היא לחדש את הדנטין המשקם, מחסום פיזי שמתפקד כ"אטימה ביולוגית" ומגן על רקמת מוך השן הבסיסית. למרות שהליך כיסוי ישיר זה של מוך השן נמצא בשימוש מזה זמן רב ברפואת שיניים, המנגנון המולקולרי הבסיסי של ריפוי פצעי מוך השן והיווצרות דנטין משקם עדיין אינו מובן היטב. כדי לגרום לדנטין מתקן, מכסת מוך השן בוצעה באופן ניסיוני בבעלי חיים גדולים, אך פחות בעכברים, ככל הנראה בשל גודלם הקטן והקשיים הטכניים הנובעים מכך. כאן, אנו מציגים שיטה מפורטת, שלב אחר שלב, לביצוע הליך מכסת מוך בעכברים, כולל הכנת חלל דמוי Class-I, מיקום חומרי מכסה מוך השן והליך השיקום באמצעות חומר מרוכב דנטלי. מודל העכבר שלנו יהיה חיוני בחקירת המנגנונים המולקולריים הבסיסיים של ריפוי פצעים במוך השן בהקשר של דנטין in vivo מתקן, על ידי מתן אפשרות לשימוש בעכברים טרנסגניים או נוקאאוט הזמינים באופן נרחב בקהילת המחקר.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עששת שיניים היא אחת ממחלות הפה הנפוצות ביותר והגורם המוביל להתערבויות כירורגיות לשיניים כמעט בכל האנשים1,2. הפרוגנוזה של התערבויות כירורגיות ושחזור שן תלויה במידה רבה בתגובה נכונה של מוך השן וריפוי פצעים מוצלח. ואכן, עששת שחודרת עמוק דרך האמייל והדנטין מובילה לעתים קרובות לחשיפת רקמת מוך השן הבסיסית שלעתים קרובות "מכוסה" בחומרים דנטליים, כגון סידן הידרוקסיד (Ca(OH)2) או צמנט סידן-סיליקט הידראולי (HCSCs), כולל אגרגטים מינרליים תלת-חמצניים (MTA). המטרה הסופית של הליך כזה של כיסוי מוך השן היא לזרז את ריפוי פצעי מוך השן על ידי חידוש דנטין מתקן, מחסום פיזי המתפקד כ"חותם ביולוגי" כדי להגן על רקמת מוך השן הבסיסית ולהגדיל את תוחלת החיים של השן ואת בריאות....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עכברים נרכשו מ ג'קסון מעבדה ולעטוף ביבר חינם לפתוגן בחטיבת UCLA לרפואת בעלי חי מעבדה (DLAM). הניסויים בוצעו על פי ההנחיות מוסדיות המאושרות מן ועדת המחקר החי של הקנצלר (ARC # 2016-037).

1. עכבר הרדמה

  1. השתמש בן שמונה שבועות הנקבה C57 / BL6 עכברים (n = 3).
  2. להרדים את העכברים באמצעות קטמין (80-120 מ"ג / ק"ג של משקל העכבר) / xylazine (5 מ"ג / ק"ג של משקל העכבר) פתרונות ולנהל intraperitoneally (IP) במינון של 10 מ"ל / ק"ג.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הנה, הראינו את שלב-אחר-צעד נהלים לבצע עיסת מכסת על השיניים עכברים. אחד ההיבטים המרכזיים של עיסת מכסה בעכברים הוא לקבל את המנגנון המתאים. בהקשר זה, שיש מיקרוסקופ עם הגדלה כוח 10X חיוני (איור 1 א). כדי ליצור הכנת Class-I-כמו השן, השתמשנו בר ¼-סיבוב במאבק ידית במהירות גבוהה חשמלית ב 200,000 סל"ד (איור 1B). לחלופין, כל מנועי החיפוש האחרים, כולל אלה שמשתמשים אוויר דחוס, שניתן להשתמש בהם כדי להכין שן.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

נכון לעכשיו, ישנם מספר דגמים ניסיוניים שונים זמינים כדי לאמת את השפעות in vivo של חומרים דנטליים, פיגומים, או גורמי גדילה על בידול odontogenic של תאי גזע עיסת שיניים (DPSCs) 13. מודלים אלה כוללים בהשתלה עצמית אקטופי של DPSCs לתוך איבר, כגון הקפסולה כליות, או השתלה תת עורית של DPSCs לעכברים בעלי דיכוי חיסוני עם פיגומים 14,15. עם זאת, שיטות אלו מוגבלים כי אפקט odontogenic שלהם על DPSCs לא מבוצע בסביבה עיסת orthotopic. מצד השני, השתלת orthotopic לתוך נה.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למחברים אין מה לחשוף.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מחקר זה מומן על ידי R01DE023348 (RHK) מ NIDCR / NIH ואת מענק מחקר הפקולטה (RHK) מהמועצה למחקר של הסנאט האקדמי של חטיבת לוס אנג'לס של אוניברסיטת קליפורניה.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
מיקרוסקופ סטריאו BM-LEDMEIJI טכנומיקרוסקופ 
אופטימה MCX-LED Bien Air Dental1700588-001מנוע מנוע חשמלי
isofluraneהנרי שיין בריאות בעלי חייםNDC 11695-0500-2
1/4 עגול בורBrasseler001092T0
אנדודונטי K-fileRoydent98947
ProRoot MTADentsplyPROROOT5WMTA
נקודת ניירהנרי שיין100-3941
Ultra-EtchUltradent מוצר בע"מתחריט חומצה זרחתית
OptiBond SoloPlusKerr29669דבקים
Coltolux LEDColtene/whaledent Inc.C7970100115יחידת אור ריפוי
אפיון גווןBiscoT-14012זרימה מרוכבת
SkyscanBreuker1275uCT סורק
MicromThermoHM355SMicrotome
Hematoxyline-1Thermo Scientific7221
Eosin-YThermo Scientific7111
פתרוןהרכבהThermo Scientific8310-16
Cytoseal 60

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Dye, B., Thornton-Evans, G., Li, X., Iafolla, T. Dental caries and tooth loss in adults in the United States, 2011-2012. NCHS Data Brief. (197), 197(2015).
  2. Bagramian, R. A., Garcia-Godoy, F., Volpe, A. R. The global increase in dental caries. A pending public health crisis. Am J Dent<....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Direct Pulp cappingPulpal Wound HealingReparative Dentin FormationMouse ModelCavity PreparationMTA PlacementDental CompositeMicro CT ScanHistological AnalysisDMP1 Staining

Related Articles