הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

מיקרוסקופית Intravital ו אינדוקציה פקיק ב התנוך של עכבר חסר שיער

9.4K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/55174

⸱

2 באפריל 2017

 ,  ,  ,  , 
1Department of Otorhinolaryngology, Head and Neck Surgery "Otto Koerner", Rostock University Medical Center, 2Department of General, Thoracic, Vascular and Transplantation Surgery, Rostock University Medical Center, 3Institute for Experimental Surgery, Rostock University Medical Center

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

המודל האוזן של העכבר SKH1-HR HR שיער מאפשר מיקרוסקופ פלואורסצנטי intravital מיקרו מחזורי ואינדוקציה פקיק phototoxic בלי הכנה כירורגית מוקדמת במיטה בחן כלי הדם. לכן, האוזן של העכבר ללא שיער היא מעולה במודל vivo ללמוד את יחסי הגומלין המורכבים במהלך היווצרות פקיק כלי דם, התפתחות פקיק, ו thrombolysis.

תקציר

סיבוכים טרומבוטיים של מחלות כלי דם הם גורם מוביל אחד לתחלואה ולתמותה במדינות מתועשות. בשל יחסי הגומלין המורכבים בין מרכיבי דם הסלולר בלתי תאיים במהלך היווצרות פקיק, מחקרים אמינים של הפיסיולוגיה והפתופיזיולוגיה של פקק יכולים להתבצע רק in vivo. לכן, במאמר זה מציג מודל האוזן בעכברים חסרי שיער ומתמקדת in vivo ניתוח מיקרו מחזורי, היווצרות קריש דם, והאבולוציה פקיק. באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי intravital ואת תוך הוורידים (iv) היישום של צבעי ניאון בהתאמה, ניתוח חוזר של מייקרו ב האפרכסת יכול להתבצע בקלות, ללא צורך בהכנה כירורגי. יתר על כן, המודל הזה ניתן להתאים ללימודי in vivo של נושאים שונים, כולל ריפוי פצעים, פגיעה reperfusion, או אנגיוגנזה. לסיכום, האוזן של עכברים חסרי שיער הוא מודל אידיאלי עבור ב vivמחקר o מייקרו מחזור עור בתנאים פיסיולוגיים או pathophysiological ועבור ההערכה של התגובה שלה לטיפולים מערכתיים או אקטואליים שונים.

מבוא

מטרת המאמר הנוכחי היא לתאר את הטכניקה של מיקרוסקופיה intravital להחיל את אפרכסת עכבר ללא שיער עבור תצפית ישירה וניתוח מיקרו מחזורי, היווצרות קריש דם, והאבולוציה פקיק. עם שיעור ההיארעות של 1 ב 1000, פקקת ורידים היא עדיין גורם שכיח לתחלואה. למרות אבחון, אסטרטגיות מניעות, טיפולים פותחו בשנים האחרונות, שליש פקק ורידים מבטאים כמו תסחיף ריאתי 1. פקק עורקים משחק תפקיד קריטי מחלות לב וכלי דם, אשר הם הגורם השכיח ביותר למוות במדינות תעשייתיות. פקקת עורקים מבוסס על קרע של פלאק טרשת עורקים מעורב התקפי לב, אוטם mesenteric, חרון וחמה. כל ניתוח חושף מבני subendothelial לרכיבי דם, משנה את הדינמיקה של זרימת דם, ומשתק את החולה. בניתוח endoprosthetic של הגפיים התחתונות, לא איברransplantation ו פקק דש ניתוח הם גורמים שכיחים של סיבוכים. פקקת כלי הדם בפרט לעיתים קרובות גורם לנזק בלתי הפיך, בשל היעדר סימפטומים קליניים. כמו כן, פקקת כלי הדם ממלא שלטון מכריע בכמה מחלות, כולל ארגמנת תרומבוציטופנית טרומבוטיים, אלח דם, קרישה תוך-כלית מפושטת, תסמונת antiphospholipid, ו-ספיקה ורידית כרונית, בין היתר.

תרופות חדשות אחדות עבור הטיפול והמניעה של פקק פותחו בשנים האחרונות, אבל טסיות תרופות נגד קרישת דם עדיין יש תופעות לוואי, אנטגוניסטים חוסר, וכוללות תופעות משך זמן. ליקויים אלה להוביל לבעיות בטיפול רפואי דחוף. לפיכך, יש צורך במחקר נוסף כדי לחשוף את התהליכים המורכבים המתרחשים במהלך פקק, אשר בקושי ניתן לדמות במבחנה.

עכבר hr SKH1-HR השיער התגלה 1926 בגן חיות בלונדון.בשל פגם גנטי בכרומוזום 14, החיה מאבדת את הפרווה שלה אחרי יום הלידה 10. זה הופך את מיקרוסקופיה היטב vascularized אפרכסת נגישה intravital של כלי. העובי הממוצע של האוזן הוא 300 מיקרומטר. הוא מורכב משתי שכבות של הדרמיס, אשר מופרדים על ידי סחוס. בצד הגב הקמור של הסחוס, 3 חבילות וסקולרית להיכנס התנוך. קשתות וסקולריים Apical ו shunts הבסיס לחיבור שלושת חבילות. Venules יש בקטרים ​​בין 200 מיקרומטר (basal) ו 10 מיקרומטר (פסגה). נימים-מרושתים לסגור המקיפים את השיער הריק זקיקי 2. האנטומיה של העכבר hr SKH1-HR שיער הופכת את אפרכסת מודל עוצמה וחסכוני למחקר פקקת.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל הניסויים vivo ב (7221.3-1-006 / 15) נערכו בהתאם לחקיקה גרמנית על הגנה על בעלי חיים מדריך NIH לטיפול ושימוש בחיות מעבדה (Institute of Resources בחיות מעבדה, המועצה הלאומית למחקר).

שמירת 1. כללי של בעלי החיים

  1. בצע את הניסויים עם עכברים SKH1-HR HR זכר בגילאי 4 עד 6 שבועות. משתמשים בבעלי חיים עם משקל בין 20 ו 25 גרם.
  2. שמור את החיות במתקן הפתוגן נטול בתנאים סטנדרטיים של 24 עד 26 מעלות צלזיוס וכ לח 60% ביחס, עם גישה קבועה כדי כרצונך מים ומזון.
  3. שמור עד חמש חיות זכר בכלוב אחד. ספקו מצעים וחומר העשרה במהלך הדיור של בעלי חיים ורווחתם.

2. סידור מכוון של בעלי החיים

  1. לשקול עכבר וטען את התרופה המתאימה (למשל, קנבינואידים, 5 מ 'משקל גוף g / kg (BW)) לתוך מזרק אינסולין. נהל דק תרופת 30 לפני גיוס פקיק.
  2. על ידי החזקת הצוואר של העכבר בין האגודל לבין האצבע המורה ואת הזנב של העכבר עם האצבע הקטנה, למתוח את החיה ואת להזריק את התרופה intraperitoneally (IP) לתוך ברבע השמאלי התחתון של הבטן. שים את החיה בחזרה לתוך הכלוב עבור 15 דקות.
  3. הכן הרדמה עם קטמין (90 מ"ג / ק"ג BW) ו xylazine (25 מ"ג / ק"ג BW). 15 דקות לפני אינדוקציה פקיק, להרדים את העכבר. שים את העכבר בכלוב, למשוך את הזנב מעט, ולהזריק את ip הרדמה עם מזרק אינסולין.
  4. שים את העכבר בחזרה לתוך הכלוב עד תחילת ההרדמה. כדי לאמת הרדמה מספיק, לצבוט את הזנב עם מלקחיים.
  5. טען 0.05 מ"ל של dextran isothiocyanate שכותרתו והעמסת מופשר (FITC-dextran; 5%, 150 KDA) לתוך מזרק אינסולין. תוך מילוי המזרק, להבטיח כי אין בועות אוויר להישאר, כי intravenousl הקטנה אפילוy (iv) בועות אוויר -administered יכול להיות קטלני עבור החיה.
  6. מניחים את העכבר הרדים על צלחת חימום בעמדה כלפי מטה. התאם את צלחת חימום עד 37 מעלות צלזיוס.
  7. שם משחת עיניים על הקרנית של העכבר. לחטא את העור ולהשתמש בכלים סטריליים.
  8. Stitch שני תפרים של פוליפרופילן 7/0 לתוך קצה הגולגולת ואת הזנב של האוזן הימנית. מניח את התפרים קרובים לקצה וכפי הפרוקסימלי לבסיס ככל האפשר (1B איור).
  9. העבר את העכבר למצב הגבי. לתקן את כל הרגליים לפלטפורמת acrylglass באמצעות רצועות דבקות. הוק תפר תחת השיניים הקדמיות ולמקם את הראש ב dorsiflexion ידי דבק תפר את acrylglass עם רצועות דבקות.
  10. Translocate חיה על הפלטפורמה תחת סטראו הפעולה. השתמש גדלת 16X.

3. הכנת וריד הצוואר שמאל הזרקת FITC-dextran

הערה: מיקרופוןroscopy של האוזן הימנית, להכין את וריד הצוואר השמאלי.

  1. באמצעות אזמל, ליצור חתך 5 מ"מ בעור בצד השמאלי של הצוואר לכיוון סקראל הזנב. לנתח את הרקמה התת עורית עם microforceps ו microscissors. כך או כלי למעבר ולקשור עם התפרים פוליאסטר 8/0 או עם electrocoagulation.
  2. שחרר את הווריד מן adventitia שלה באמצעות microforceps ו microscissors בלי לגעת הספינה.
  3. השתמש מזרק אינסולין מוכן להזרקה של צבע פלואורסצנטי. בזהירות לתפוס את הקיר כלי עם microforceps, ללא ניקוב הווריד. לחדור את דופן כלי נפוחה עם המזרק להזריק iv FITC-dextran.
  4. לעצור את הדימום לאחר משיכת מזרק באמצעות צמר גפן. הימנע דם לצבוע זיהום של האוזן.

4. מיצוב של האוזן הימנית עבור מיקרוסקופ פלואורסצנטי Intravital

  1. מעבירים את החיה על צלחת חימום ל C acrylglassonstruction עם חריץ עבור צלחת חימום מטוס 0.5 סנטימטר גבוה עבור מיצוב לאוזן.
  2. תקן את פן חיה מטה על צלחת החימום באמצעות רצועות דבקות. מניח את הסחוס החזק קמור יחסית בבסיס האוזן ליד המטוס 0.5 סנטימטר הגבוה עבור האוזן (האיור 1B) כך שחלק הפסגה של האוזן ניתן למקם שטוח על המטוס.
  3. להוסיף טיפה אחת של-בטמפרטורת החדר 0.9% NaCl למטוס acrylglass כדי למקם את האוזן. מניח את האוזן הימנית, עם התפרים המוסכמים על צד הגחון הקעור שלה פונים כלפי מטה, על הירידה של 0.9% NaCl. באמצעות צמר גפן, לספוג ירידה של NaCl ולתת לכוחות נימי לצרף את המטוס האוזן אל acrylglass.
  4. קלט את התפרים אל acrylglass כדי לתקן את העמדה של האוזן.
  5. להוסיף טיפה אחת של NaCl הטמפרטורה 0.9% מקום בצד הגבי הקמור של האוזן. בזהירות לשים coverslip אחד (0.5 ס"מ קוטר) על האוזן מבלי לדחוס כלי הבסיס הזנת האוזן דואר. באמצעות צמר גפן, להסיר NaCl ככל האפשר מתחת coverslip כדי למזער את המרחק בין coverslip וכלי יעד אוזן.

5. מיקרוסקופ פלואורסצנטי Intravital ו פקיק אינדוקציה של האוזן הימנית

  1. התאם את מיקרוסקופ פלואורסצנטי intravital עבור להדמיה FITC-dextran (450 - 490 ננומטר; FT: 510; LP: 520). השתמש מנורת כספית משתנה 100-W כמקור אור. חבר מצלמה CCD ברזולוציה גבוהה, בשחור-לבן כדי צורב DVD.
  2. מעבירים את החיה על acrylglass המכיל את צלחת חימום עם האוזן נחטף קבוע לדלפק של מיקרוסקופ פלואורסצנטי intravital.
  3. באמצעות גדלת 20X (20X / צמצם מספרי 0.95) ו 20% עוצמת אור, לחפש כלי ורידים 50 - 60 מיקרומטר בקוטר עם זרימת דם האנטרוגרד של 400 - 600 מיקרומטר / s.
  4. להוסיף טיפה אחת של מים בטמפרטורת החדר כדי coverslip עבור טבילה במים של 63x magnificatioמטרת n (63X / 0.95 צמצם מספרי). השתמש במזרק עם צינורית בקוטר 1 מ"מ ומניחים את הירידה על המטרה של מיקרוסקופ. להוסיף מספיק מים כדי לפנות coverslip ואת המטרה עם טיפת מים.
  5. מייד לאחר היישום של טיפת המים, להתחיל להקליט את הכלי עבור 20 s עם 20% עוצמת אור עבור המדידה המחוברת של הזרימה בקוטר ודם.
  6. התחל אינדוקציה פקיק 5 דקות לאחר הזרקה של-dextran FITC. לשם כך, להעלות את עוצמת האור עד 100%.
  7. במהלך אינדוקצית פקיק, לסגור את הצמצם של מיקרוסקופ עבור 2 ימים בתוך תקופה של 30-ים כדי לבדוק את זרימת הדם. במקרה של התמדת זרימת דם, לפתוח את הצמצם שוב. במקרה של זרימת דם פסיק, לבחון את הכלי עבור 30 s.
    הערה: הכלי מסווג האפיל אם הזרימה עומדת מלכה עבור 30 s או יותר או אם הדם זורם retrogradely. אם זרימת הדם orthograde מתחיל שוב, לגמרי לפתוח את הצמצם ואת Contin UE אינדוקציה פקיק עד חסימת כלי מתרחשת כפי שתואר לעיל. במהלך אינדוקציה פקיק מוקדם, להבטיח כי פעמים כאשר הצמצם היה סגור כדי לבדוק את זרימת הדם הם קצרים ככל האפשר על מנת לשמור כמעט EPI-תאורה רציפה. מאוחר יותר, במהלך צמיחת פקיק, הספינה perfused עם צבע פלואורסצנטי פחות, אז זה יכול להיות שנצפה ברציפות.
  8. בחר לחסום 5 ספינות לכל אוזן. הגבל את הזמן של אינדוקציה פקיק תחת מיקרוסקופ כ 1 שעות לאחר הזרקה של-dextran FITC.

6. פעילויות המשך

  1. בצע סגירת הפצע של הצוואר באמצעות פוליפרופילן transcutaneous 6/0 תפרים.
  2. במהלך ההתאוששות מההרדמה, לשים את העכבר בחזרה לתוך הכלוב ולחמם את החיה באמצעות אור אינפרא אדום.
  3. מעבירים את הנתונים שנרשמו מן מקליט DVD לתוכנה המאפשר מדידה של קוטר כלי ומהירות זרימת הדם.
_title "> 7. בחינת האוזן השמאלית

  1. בואו החיה להתאושש ולחסל מוזרק כל FITC-dextran עבור 48 h.
  2. הרץ שוב את השלבים המתוארים לעיל, והפעם הכנת וריד תקין הצוואר ואת האוזן השמאלית.

8. רקמות Asservation

  1. לאחר מיקרוסקופ פלואורסצנטי intravital של האוזן השמאלית, מדגם 0.5 מ"ל של דם מן מקלעת וריד retrobulbar של העין באמצעות נימי זכוכית. בזהירות לחדור זווית palpebral הפנימית עם תנועות דופקות, עד דם ורידים זורם דרך הנימים. אסוף את החללית בחומצת ethylenediaminetetraacetic (EDTA) צינור דם.
  2. לאחר לקיחת דמים, להקריב את החיה על ידי הזרקת 500 מ"ג / ק"ג BW קטמין לווריד הזנב.
  3. ספירת תאי הדם באמצעות נתח המטולוגיה עבור הערכה כמותית של לויקוציטים, אריתרוציטים, טרומבוציטים, המוגלובין, המטוקריט ו.
  4. צנטריפוגה דם EDTA הנותרים 2500 טמפרטורת XG ואת מקום 10 מ 'ב. פיפטה להקפיא את הפלזמה בדם לחקירות נוספות.
  5. בעזרת מספריים, לחתוך את auricles ולתקן אותם בפורמלין 4% עבור בדיקה היסטולוגית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

ההשפעות של טיפול הקנבינואידיים Thrombogenesis

לאחר הזרקה של 0.05 מ"ל של FITC-dextran, אינדוקציה פקיק phototoxic מוביל הנגע האנדותל היווצרות תקע טסיות הקודקודית (איורים 2 ו 3). במחקר הנוכחי, אינדוקציה פקיק לאחר הזרקת ip של קנבינואידים (5 מ"ג / ק"ג BW) או הרכב הביא חסימת כלי טרומבוטיים בכל venules

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

ישנם מספר שלבים קריטיים עבור אינדוקצית פקיק המוצלחת התנוך של עכברי hr SKH1-HR. לפתרון בעיות, את הצעדים המתאימים של הפרוטוקול מסומנים בסוגריים.

תנאי בחינה הם אידיאליים בחיות צעירות בגיל 4 - 6 שבועות עם cornification הנמוכה של האפידרמיס. אצל בעלי חיים מבוגרים, האיכות להדמיה של הכלי גרועה ופחות דומה בשל המרחק הגבוה בין משטח העור וכלי היעד (שלב 1.1).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

החוקרים אין לחשוף.

תודות

יש המחברים שום תודות.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
ניתן לרכוש עכברי SKH-1/hrCharles River477מספקים אחרים 
מזון מעבדה סטנדרטיssniff SpezialdiaetenV1594-0 ניתן לרכוש מספקים אחרים 
מבצע סטריאומיקרוסקופLeica M651/M655 ניתן לרכוש מספקים אחרים 
מיקרוסקופ תוך-חיוניZeissAxiotech Vario 100 ניתן לרכוש מספקים אחרים 
אובייקטיבי (20X/0.95) Zeiss20x/0.50 W; תוכנית-NEOFLUAR ניתן לרכוש מספקים אחרים 
אובייקטיבי (63X/0.95)Zeiss63x/0,95 W; אכרופלן ניתן לרכוש מספקים אחרים 
מצלמת CCD בשחור-לבן פייפר FK 6990 IQ-S ניתן לרכוש מספקים אחרים 
מקליט DVDPanasonicDMR-EX99V ניתן לרכוש מספקים אחרים 
נתרן כלוריבראון5/12612055/1011ניתן לרכוש אצל ספקים אחרים 
קטמין 10%Bela pharmF3901-6ניתן לרכוש אצל דוכנים אחרים 
קסילזין 2%באייר6293841.00.00אפשר לקנות אצל דוכנים אחרים 
FITC-דקסטרן 5%סיגמא ניתן לרכוש 46945-100MG-Fמספקים אחרים 
ניתן לרכוש משחת עיניים dexapanthenol 5%Bayer6029009.00.00מספקים אחרים 
פורמלדהיד 4%סיגמאHT501128-4 ליטרניתן לרכוש מספקים אחרים 
472301 DMSOSigmaמספקים אחרים 
כיסויים 5 x 5 x 1 מ"מMenzelL4339ניתן לרכוש מספקים אחרים 
ניתן לרכוש רצועות דבקLeukosilk4683400מספקים אחרים 
ניתן לרכוש צנטריפוגהבקמן קולטרCLGS 15מספקים אחרים 
מנתח המטולוגיהSysmexKX-21 A6980מספקים אחרים 
ניתן לרכוש את צינור הדם EDTASarstedt201,341מספקים אחרים 
צמר גפןSanyo604-A-1מספקים אחרים 
אור אינפרא אדוםBeurer5/13855ניתן לרכוש מספקים אחרים 
סינרינג חד פעמיבראון 2020-08מספקים אחרים 
מזרק אינסוליןBraun9161502ניתן לרכוש אצל ספקים אחרים 
ניתן לרכוש מחטים היפודרמיות חד פעמיותבראון465 7640מספקים אחרים 
Sarstedt19,447מקצה לקצהמספקים אחרים 
ניתן לרכוש פלטת חימוםKlaus EffenbergOP-T 185/03מספקים אחרים 
מספריים 14.5 ס"מAesculapBC259Rניתן לרכוש מספקים אחרים 
מחזיק מחטAesculapBM081Rניתן לרכוש מספקים אחרים 
ניתן לרכוש מיקרו-מלקחייםAesculapBD331Rמספקים אחרים 
ניתן לרכוש מספרייםAesculapOC496Rמספקים אחרים 
אזמל 21Dahlhausen11.000.00.511ניתן לרכוש מספקים אחרים 
Prolene 7-0EthiconXNEH7470מספקים אחרים 
פרולן 6-0אתיקוןXN8706. ניתן לרכוש P33מספקים אחרים 
צריבה חשמליתServopraxH40140ניתן לרכוש מספקים אחרים 
כרית אקרילגלסחימום משולב, 0.5  מישור גבוה ס"מ
ניתן לרכוש ניתן לרכוש ניתן לרכוש ניתן לרכוש את ניתן לרכוש נימי ניתן לרכוש את

מקורות

  1. White, R. H. The epidemiology of venous thromboembolism. Circulation. 107 (23), I4-I18 (2003).
  2. Benavides, F., Oberyszyn, T. M., VanBuskirk, A. M., Reeve, V. E., Kusewitt, D. F. The hairless mouse in skin research. J Dermatol Sci. 53 (1), 10-18 (2009).
  3. Grambow, E., Strüder, D., Klar, E., Hinz, B., Vollmar, B. Differential effects of endogenous, phyto and synthetic cannabinoids on thrombogenesis and platelet activity. Biofactors. , (2016).
  4. Eriksson, E., Boykin, J. V., Pittman, R. N. Method for in vivo microscopy of the cutaneous microcirculation of the hairless mouse ear. Microvasc Res. 19 (3), 374-379 (1980).
  5. Barker, J. H., et al. The hairless mouse ear for in vivo studies of skin microcirculation. Plast Reconstr Surg. 83 (6), 948-959 (1989).
  6. Goertz, O., et al. Evaluation of a novel polihexanide-preserved wound covering gel on dermal wound healing. Eur Surg Res. 44 (1), 23-29 (2010).
  7. Goertz, O., et al. Determination of microcirculatory changes and angiogenesis in a model of frostbite injury in vivo. J Surg Res. 168 (1), 155-161 (2011).
  8. Roesken, F., et al. A new model for quantitative in vivo microscopic analysis of thrombus formation and vascular recanalisation: the ear of the hairless (hr/hr) mouse. Thromb Haemost. 78 (5), 1408-1414 (1997).
  9. Sorg, H., et al. Antithrombin is as effective as heparin and hirudin to prevent formation of microvascular thrombosis in a murine model. Thromb Haemos. 96 (3), 371-377 (2006).
  10. Sorg, H., et al. Efficacy of antithrombin in the prevention of microvascular thrombosis during endotoxemia: an intravital microscopic study. Thromb Res. 121 (2), 241-248 (2007).
  11. Kovács, I. B., Sebes, A., Trombitás, K., Csalay, L., Görög, P. Proceedings: Improved technique to produce endothelial injury by laser beam without direct damage of blood cells. Thromb Diath Haemorrh. 34 (1), 331(1975).
  12. Laschke, M. W., Vollmar, B., Menger, M. D. The dorsal skinfold chamber: window into the dynamic interaction of biomaterials with their surrounding host tissue. Eur Cell Mat. 20 (22), 147-167 (2011).
  13. Grambow, E., et al. Effect of the hydrogen sulfide donor GYY4137 on platelet activation and microvascular thrombus formation in mice. Platelets. 25 (3), 166-174 (2014).
  14. Fiebig, E., Ley, K., Arfors, K. E. Rapid leukocyte accumulation by spontaneous rolling and adhesion in the exteriorized rabbit mesentery. Int J Microcirc Clin Exp. 10 (2), 127-144 (1991).
  15. Harder, Y., et al. Gender-specific ischemic tissue tolerance in critically perfused skin. Langenbecks. Arch Surg. 395 (1), 33-40 (2010).
  16. Langer, S., et al. Effect of polyvinylpyrrolidone-iodine liposomal hydrogel on wound microcirculation in SKH1-hr hairless mice. Eur Surg Res. 38 (1), 27-34 (2006).
  17. Saniabadi, A. R., Umemura, K., Matsumoto, N., Sakuma, S., Nakashima, M. Vessel wall injury and arterial thrombosis induced by a photochemical reaction. Thromb Haemost. 73 (5), 868-872 (1995).
  18. Herrmann, K. S., et al. Platelet aggregation induced in the hamster cheek pouch by a photochemical process with excited fluorescein isothiocyanate-dextran. Microvasc Res. 26 (2), 238-249 (1983).
  19. Rumbaut, R. E., Slaff, D. W., Burns, A. R. Microvascular thrombosis models in venules and arterioles in vivo. Microcirculation. 12 (3), 259-274 (2005).
  20. Lee, W. M., Lee, K. T. Advanced coronary atherosclerosis in swine produced by combination of balloon-catheter injury and cholesterol feeding. Exp Mol Pathol. 23 (3), 491-499 (1975).
  21. Callahan, A. B., Lutz, B. R., Fulton, G. P., Degelman, J. Smooth muscle and thrombus thresholds to unipolar stimulation of small blood vessels. Angiology. 11, 35-39 (1960).
  22. Rosen, E. D., et al. Laser-induced noninvasive vascular injury models in mice generate platelet- and coagulation-dependent thrombi. Am J Pathol. 158 (5), 1613-1622 (2001).
  23. Agero, U., et al. Effect of mutalysin II on vascular recanalization after thrombosis induction in the ear of the hairless mice model. Toxicon. 50 (5), 698-706 (2007).
  24. Menger, M. D., Rösken, M., Rücker, M., Seiffge, D., Vollmar, B. Antithrombotic and thrombolytic effectiveness of rhirudin in microvessels. Langenbecks Arch Chir. 115 (1), 19-20 (1998).
  25. Bilheiro, R. P., et al. The thrombolytic action of a proteolytic fraction (P1G10) from Carica candamarcensis. Thromb Res. 131 (4), 175-182 (2013).
  26. Kram, L., Grambow, E., Mueller-Graf, F., Sorg, H., Vollmar, B. The anti-thrombotic effect of hydrogen sulfide is partly mediated by an upregulation of nitric oxide synthases. Thromb Res. 132 (2), 112-117 (2013).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

מיקרוסקופית Intravital ו אינדוקציה פקיק ב התנוך של עכבר חסר שיער
צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.