המטרה של פרוטוקול זה היא ליצור מודל שבר הקשורות אוסטאופורוזיס בחוליות עירום עכברוש יכול להיות הערכה longitudinally ויוו באמצעות semiautomated microcomputed מבוססי טומוגרפיה כמותיים וניתוח מבני.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
Semiautomated האורך מבוסס-טומוגרפיה Microcomputed כמותיים ניתוח מבנה של מודל הקשורות אוסטיאופורוזיס שבר בחוליות עכברוש עירום
במאמר זה
סיכום
תקציר
שברי לחץ בחוליות הקשורים לאוסטאופורוזיס (OVCFs) הם צורך נפוצות, קליניות קלינית עם הגדלת שכיחות כמו גילאי אוכלוסיית העולם. מודלים OVCF בעלי חיים חיוניים לפיתוח אסטרטגיות הנדסת רקמות translational פרה. בעוד מספר מודלים קיימת כעת, פרוטוקול זה מתאר שיטת אופטימיזציה עבור גרימת מספר פגמים בחוליות מאוד לשחזור חולדה עירום בודד. טומוגרפיה ממוחשבת הרומן האורך microcomputed semiautomated (µCT)-המבוססת על ניתוח מבנה כמותית של הליקויים בחוליות גם מפורט. בקצרה, חולדות היו עם תמונה-הזמן מרובות נקודות לאחר הניתוח. יום 1 הסריקה הייתה reoriented למיקום סטנדרטי, אמצעי אחסון רגיל עניין הוגדרה. µCT הבאים סריקות של כל עכברוש נרשמו באופן אוטומטי כדי לסרוק את יום 1 אז באותו אמצעי אחסון של עניין היה מכן נותחו כדי להעריך על היווצרות עצם חדשה. גישה זו תכליתי ניתן להתאים מגוון רחב של דגמים אחרים שבו ניתוח מבוססת הדמיה האורך יכול להפיק תועלת יישור מדויק של semiautomated תלת-ממד. יחדיו, פרוטוקול זה מתאר מערכת ברצון לכימות בקלות לשחזור למחקר אוסטאופורוזיס ועצמות. הפרוטוקול המוצע לוקח 4 חודשים כדי לגרום לאוסטאופורוזיס בחולדות ovariectomized עירום ובין h 2.7 ו- 4 כדי ליצור תמונה, לנתח שני פגמים בחוליות, בהתאם לגודל רקמות וציוד.
מבוא
יותר מ-200 מיליון אנשים ברחבי העולם סובלים אוסטאופורוזיס1. הבסיסית פתולוגיים הדירי צפיפות המינרלים של העצם (BMD) ולהגדיל המיקרו-ארכיטקטורה עצם שינו העצמות השבריריות, וכתוצאה מכך את הסיכון היחסי של שבר2. אוסטאופורוזיס היא נפוצה כל כך מזיק לבריאות אשר הגדיר זאת יש חשיבות מרכזית בבריאות הציבור. יתר על כן, כאשר אוכלוסיית העולם צפוי גיל, אוסטאופורוזיס צפוי להפוך שכיחה אפילו יותר.
שברי לחץ בחוליות osteoporotic נמצאים השברים הנפוצים השבריריות, מוערך יותר 750,000 לשנה בארצות הברית. והם קשורים עם תחלואה משמעותית, באותה מידה כפי שיעור התמותה גבוה יותר פי 9-3. בניסויים קליניים, כע....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
כל הניסויים בוצעו תחת פרוטוקול אושרה על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים שימוש הוועדה (IACUC) של Cedars-Sinai Medical Center (פרוטוקול # 3609). הרדמה היה מנוהל עבור כל הליכים כירורגיים הדמיה. כל החיות שוכנו בהתאם שאושרו פרוטוקולים IACUC.
הערה: העיצוב ניסיוני של פרוטוקול זה מוצג באיור 1. לרכוש בת שבוע 6 חולדות עם שלהם השחלות בניתוח הסרת ולהאכיל אותם LCD המורכב פוספט סידן ו- 0.77% 0.01%. לאחר תקופה של 4 חודשים של LCD, תרגיל פגם קריטי בגודל בחוליות בגופים הרביעית והחמישית המותני בחוליות (L4-L5). בעקבות הניתוח, תמונה העכברושים וביום יום 1 שבועות 2, 4, 8 ו- 12 לאחר הקמתה פגם. אתר פגם שולי בסריקה יום 1, כיוונה למיקום ס....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
באמצעות פרוטוקול זה, אחד יכול תמונה ולכמת לרגנרציה של n = 8 modeled osteoporotic בחוליות פגמים על פני נקודות זמן שונות. ההתאמה אנטומיים מתקבל על ידי הליך ההרשמה מאפשרת הניתוח של הקול אותו בנקודות כל הזמן. התוצאה ניתוח מאוד מדויקת histomorphometric תלת-ממד האורך, גם כאשר השוליים של הפגם המקורי כבר לא מוכרת. השתמשנו חמש נקודות זמן (יום 1 שבוע 2, שבוע 4, שבוע 8, בשבוע 12) כדוגמה על הערכה האורך של התחדשות העצם (איור 7). התחדשות ניתן להעריך את ההערכה איכותי של חתכ.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
אוסטאופורוזיס היא הגורם הנפוץ ביותר של שברים בחוליות הנגרמת על ידי עומס גובר על עמוד השדרה ועל התוצאה בקריסת הגוף בחוליות. עם זאת, כמעט בלתי אפשרי לייצר פציעה מכרסם אותנטי משכפל התמוטטות בחוליות דומה. במקום זאת, החוקרים ליצור חלל גלילי במרכז הגוף בחוליות לחקות OVCFs16,17,18,19,20,21,24 .......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
מחקר זה נתמך על ידי מענק ממכון קליפורניה עבור הרגנרציה לרפואה (CIRM) (TR2-01780).
תודות
המחקר נתמך על ידי מענק ממכון קליפורניה עבור הרגנרציה לרפואה (CIRM) (TR2-01780).
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| Isoflurane | MWI בריאות בעלי חיים, פסדינה, קליפורניה | 501017 | |
| BetadineSolution | MWI בריאות בעלי חיים, פסדינה, קליפורניה | 4677 | |
| פילינג כלורהקסידין גלוקונאט 2% MWI | בריאות בעלי חיים, פסדינה, קליפורניה | 510083 | |
| אלכוהול איזופרופיל 70% ליטר | MWI בריאות בעלי חיים, פסדינה, קליפורניה | 501044 | |
| קרפרופן | MWI בריאות בעלי חיים, פסדינה, קליפורניה | 26357 | |
| בופרנורפין 0.3 מ"ג/מ"ל | MWI בריאות בעלי חיים, פסדינה, קליפורניה | 56163 | |
| חולדות עירומות אתימיות שחלות | מעבדות הרלן, אינדיאנפוליס, אינדיאנה, IN | Hsd:RH-Foxn1 rnu | |
| מזון דל סידן | Newco Distributors, Inc., CA | 1814948 (5AV8 AIN-93M עם סידן נמוך) | |
| Phosphate Buffered Saline | Life Technologies Corporation | ||
| Dermabond | J ו- J ETHICON | DHVM12 | |
| מכונת הרדמה | פטרסון מדעי | TEC 3EX | |
| שקופיות תאי אינדוקציה עליונים | פטרסון סיינטיפיק | 78917833 | |
| ProStation תחנת עבודה מחוממת | פטרסון | 78914731 | |
| מדעי וילון כירורגי | HALYARD HEALTH INC | 89101 | |
| מערכת נסיגת קיבוע מגנטי | Fine Science Tools, Inc., CA | 18200-50 | |
| מספריים לניתוח, 10 ס"מ, מעוקל, SS | World Precision Instruments, FL | 14394 | |
| מספריים איריס, 11.5 ס"מ, 45 & מעלות; מכשירי דיוק עולמיים זווית, משוננים, חדים/חדים | , מלקחיים 503225 | ||
| , מס' 5 | מכשירים מדויקים עולמיים, FL | 555048FT | |
| מלקחיים המוסטטיים מיקרו יתושים | מכשירים מדויקים עולמיים, FL | 503360 | |
| גזה כותנה סטרילית | מדטרוניק, מיניאפוליס, MN | 9024 | |
| חניתות ספיגה - מדע עדין רכוב/סטרילי | כלים, מזרק CA | 18105-01 | |
| , 1 מ"ל | מחט TERUMO TERUMO MED | SS-01T | |
| , 25 מד | BD MED SYS הזרקת מערכת | ||
| קולט אדים למינרי | Baker | SterilGARD e3-Class II סוג A2 ארון | |
| ביולוגית יחידת סאטריה תרמית | World Precision Instruments, FL | 501292 | |
| מיקרו-מקדחה OmniDrill115/230V | World Precision Instruments, FL | 503598 | |
| טרפינים למקדחה מיקרו, כלי מדע עדינים בקוטר 2 מ"מ | , CA | 18004-20 | |
| 3-0 ויקריל לא צבוע 27 אינץ' SH מתחדד | J ו-J ETHICON | 1663G | |
| 4-0 אתילון שחור 18 אינץ' PC3 חיתוך קונבנציונאלי | J AND J ETHICON | 1954G | |
| Conebeam in vivo microCT (vivaCT 40) | Scanco Medical | vivaCT 40 | |
| SCANCO Medical microCT מערכות תוכנה חבילת תוכנה | Scanco Medical | vivaCT 40 | |
| ניתוח תוכנה | הדמיה ביו-רפואית, Mayo Clinic, רוצ'סטר, מינסוטה | ניתוח | 12 תוכנת ניתוח תמונה |
| משחת עיניים וטרינרית |
מקורות
- Wang, M. L., Massie, J., Perry, A., Garfin, S. R., Kim, C. W. A rat osteoporotic spine model for the evaluation of bioresorbable bone cements. Spine J. 7 (4), 466-474 (2007).
- Consensus development conference: prophylaxis and treatment of osteoporosis. Am J Med
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
