הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

אין ויוו מעקב של האדם נגזר שומן בתאי גזע Mesenchymal במודל דלקת מפרקים ניוונית של הברך עכברוש עם קרום Lipophilic פלורסנט לצבוע

8.5K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/56273

⸱

8 באוקטובר 2017

 ,  ,  ,  , 
1Cellular Biomedicine Group, China, 2Cellular Biomedicine Group, California, 3Department of Orthopedics, Shanghai TCM-Integrated Hospital, 4Department of Orthopedics, Shanghai East Hospital, Tongji University

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

פרוטוקול זה מתאר דרך יעילה כדי לנטר את התא התמדה ואת biodistribution של האדם נגזר שומן בתאי גזע mesenchymal (haMSCs) על-ידי קרינה פלואורסצנטית מרחיקת אדום תיוג במודל חולדה דלקת מפרקים ניוונית (קואה) הברך באמצעות הזרקה תוך-מפרקיות (IA).

תקציר

על מנת לתמוך היישום הקליני של האדם נגזר שומן mesenchymal טיפול בתאי גזע (haMSC) עבור דלקת מפרקים ניוונית בברך (קואה), בדקנו את היעילות של תאים התמדה ואת biodistribution של haMSCs במודלים של בעלי חיים. להדגים שיטה לתייג את קרום התא של haMSCs עם lipophilic הפלורסנט. לאחר מכן, הזרקה תוך-מפרקיות של התאים עם תוויות בחולדות עם קואה בניתוח המושרה נוטרו באופן דינאמי על-ידי יישום ויוו מערכת הדמיה. אנחנו נוקטים את lipophilic carbocyanines עשה (DilC18 (5)), אנלוגי דיל (dialkylcarbocyanines) פלורסנט מרחיקת אדום, אשר מנוצל לייזר אדום כדי להימנע עירור של autofluorescence ירוק טבעי מן הרקמות הסובבות. יתר על כן, האדום-העביר ספקטרום הפליטה של מותר לדימות רקמות עמוק בבעלי חיים וההליך תיוג גרם ללא אפקטים ציטוטוקסיות או פגיעה תפקודית haMSCs. גישה זו הוכח להיות שיטה מעקב יעיל אחר עבור haMSCs במודל קואה חולדה. היישום של שיטה זו יכולה לשמש גם כדי לקבוע את דרך ניהול אופטימלי ואת המינון של MSCs ממקורות אחרים במחקרים קליניים.

מבוא

דלקת מפרקים ניוונית בברך (קואה) היא הפרעה ניוונית הנובעות אובדן סחוס במפרק ודלקת מתקדמת, אשר הפך מרכזי מחלה כרונית אצל הקשישים ברחבי העולם1. עם זאת, טיפולים שוטפים באמצעות תרופות אנטי דלקתיות, תוספי הפיזי ניתוחים רק עשוי לספק הקלה זמנית לכאב סימפטומטי2.

האדם הנגזרות שומן בתאי גזע mesenchymal (haMSCs) הפכו להיות תרופה משובי מבטיח עבור דלקת מפרקים ניוונית בברך, בשל התמיינות multipotent שלהם פוטנציאל התחדשות הסחוס לבין מאפיינים immunomodulatory3, 4. לעומת מסלולים תרופתי לחקור מנגנונים של פעולה ויוו, מעקב אחר haMSCs בשידור חי במודלים חייתיים קואה קטן הוא מאלף כיום להקים את הרציונל ואת הכדאיות של טיפול haMSC לקראת יישום קליני. בדיקה פרה, meniscectomy המדיאלי (מ מ) שיערער את העומס המכני של המפרק לזירוז קואה בחולדות, המספקת מודל ריאלי יחסית עקבית הפארמצבטית5. תחילתה של KOA שנגזרות מ מ הוא מוקדם יותר חיתוך צולבת קדמית לבד או בשילוב עם meniscectomy המדיאלי חלקי6. לכן, יחסי גומלין לטווח ארוך haMSCs מוזרק עם microenvironment פתולוגית של KOA הם לעיתים קרובות העריכו בחולדות שנגזרות מ מ7,8.

למרות יעילות טיפולית של haMSCs כבר ידע רלוונטי שדווח בהרחבה על התמדתו ויוו של haMSCs מושתל באמצעות הזרקה תוך-מפרקיות (IA) הוא נדיר9,10. לפיכך, שונים הסלולר תיוג פותחו שיטות, כולל פראפין11לוציפראז12, תרביות תאים13 חלבון פלואורסצנטי ירוק, תחמוצת ברזל תיוג עבור דימות תהודה מגנטית (MRI)14 ,15,8,צבעי פלורסנט תא רבים16. אין ויוו הדמיה לא פולשנית בהשוואה היסטולוגיה מהגידולים ניתוחים, מעסיקה התקנים אופטיים כדי לזהות את התפלגות בזמן אמת ואת הדינמיקה של תאים עם תוויות עם אותות פלואורסצנט10,17. עבור הדמיה תפקודית תא חי, תיוג פלורסנט cytocompatible היא טכניקה מתוחכמת רדיואקטיבי ללא מעקב כדי לחשוף את פעילות הסלולר לאחר השתלת תא גזע18. יתר על כן, ססגוניות צבעי פלורסנט lipophilic בעלי יתרונות אמינו ונבדקים צבע הידרופילית או חלבונים פלורסנט, כולל שלהם תא משופרת חדירות פלורסצנטיות משופרת קוונטית התשואות19.

לפיכך, הפרוטוקולים כלולים כאן לנצל אדום לייזר כדי לעורר תאים המסומנת lipophilic carbocyanines עשה (DilC18(5)), וזו מרחיקת אדום פלואורסצנטי דיל (dialkylcarbocyanines) אנלוגי20. אדום-העביר עירור, פליטת הספקטרום של ימנע התערבות autofluorescent ומאפשר הדמיה על פני תקופה ארוכה של זמן חיים8רקמות עמוק. שיטה זו של מעקב אחר תאים ויוו המסומנת האם חוקי עבור ניטור המושתלים תאי גזע, כגון haMSCs, במודלים של בעלי חיים, שהוא חיוני להבין ולשפר את הטיפול משובי הנוכחי של תאי גזע.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

הליכים הכוללים נושאים בעלי חיים היו אושרה על ידי בעלי חיים מוסדיים מקומיים אכפת ועדת האתיקה, במאמץ לצמצם את סבלם של בעלי החיים. פרוטוקול הבאים אושרה על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים ועל שימוש הוועדה (IACUC) על אנשים התשיעית שנגחאי ’ s בבית החולים המסונף לקבוצת שנחאי ג'יאוטונג של בית הספר לרפואה של אוניברסיטת עם הפרוטוקול מספר [2017] 063.

1-הקמת מודל דלקת מפרקים ניוונית בברך עכברוש Surgically-Induced

  1. עבור הליך כירורגי, שימוש בשבוע 8-12 בן זכר חולדות ספראג Dawley (SD) עם משקל הגוף בין 250 עד 300 ג'
  2. עזים ומתנגד החיות עם tiletamine 40 מ"ג/ק"ג, zolazepam 40 מ"ג/ק"ג דרך זריקה תוך שרירית.
  3. למקם את החיה במיקום הלטראלי השמאלי על הבמה מחוממת. לגלח את ברך ימין ביסודיות עם סכין גילוח. לחטא את האזור הכירורגי עם 10% providone-יודיפלור תמיסה ואחריו 70% אתנול, חזור עוד פעמיים, ולאחר מכן צבעו 10% providone-יודיפלור תמיסה, לכסות את האזור ניתוחי עם כרית כירורגי.
  4. באמצעות אזמל כירורגי, עושים חתך 2 ס מ רוחבית לאורך הגיד ברך כדי לחשוף את jointcapsules.
  5. להשתמש באזמל כירורגי transect המדיאלי משני רצועה. לשקף את מניסקוס לכיוון עצם הירך.
  6. לטפטף פתרון סטרילי נתרן כלוריד 0.9% על פני השטח של הסחוס במפרק במהלך המבצע כדי למנוע את הסחוס מתייבשת.
  7. לתפוס את המניסקוס עם מלקחיים, לחתוך מניסקוס בנקודה הצרה ביותר שלה מן הקובץ המצורף הטיביאלי עם איזמל ( איור 1 א'). להימנע ופצעו את הסחוס.
  8. לסגור את הקפסולה משותפת בתפר שנספג 4-0-
  9. לפקח העכברושים כירורגי עד שהם ישובו להכרה.
  10. להזריק גנטמיצין 20 מ"ג/ק"ג כדי למנוע זיהום, 0.05 מ"ג/ק"ג. הבופרנורפין דרך נתיב שרירית להקל על כאבים לאחר הניתוח.
  11. לשמור על העכברושים מתקן בעלי טמפרטורה מבוקרת תחת מחזור/כהה 12 h 3-8 שבועות לתחילת קואה. חיות ימשיכו לקבל את התרופות, כולל אך לא מוגבל הבופרנורפין (0.05 מ"ג/ק"ג, i.m.) ו גנטמיצין (20 מ"ג/ק"ג, i.m.), כאב המומלצת. אם.

2. היסטולוגיה הערכה של עכברוש קואה דגם

  1. להקריב החולדות עם שאיפת 2 CO מוגזמת (הוספה קצב המילוי של-30% של אמצעי האחסון קאמרית לדקה עם פחמן דו-חמצני לאוויר הקיים בבית הבליעה של לגרום חוסר הכרה בבעלי חיים בתוך 2-3 דק CO2 לשמור על זרימה למשך תקופה מינימלית של 1 דקות לאחר נשימה מפסיק.) -ציינו נקודות זמן (נציג התוצאות יוצגו ב 8 שבועות האינדוקציה קואה ועד 3 8 שבועות) לאחר ניתוח של.
  2. לנתח את העור, השרירים סביב המפרקים בברך ולנתק את המפרקים בברך עם אזמל.
  3. לתקן את המפרקים בברך ב 4% paraformaldehyde (PFA) במשך 3 ימים בטמפרטורת החדר. לאחר מכן, decalcify את הדגימות ב 20% חומצה ethylenediaminetetraacetic (EDTA) על 4 שבועות ב 4 ° C ולאחר שנה של EDTA כל 3 ימים.
    התראה: Paraformaldehyde הוא רעיל, ללבוש הולם ציוד מגן אישי (PPE), כגון כפפות משקפיים.
  4. מייבשים את הדגימות באמצעות מעבד רקמות אוטומטית. להגדיר את התפריט כדי להתחיל מחזור סומק כדלקמן: 70% אתנול עבור 1 h; אז 80% אתנול וביו -אתנול 95% עבור 1 h בהתאמה; ואחריו 2 מחזורים של אתנול 100% עבור 1 h; לאחר מכן, קסילן פעמיים עבור 1 h בכל פעם, שעוות פרפין 3 פעמים ב 58 ° C עבור 1 h בכל פעם.
    התראה: קסילן רעיל, כך שמומלץ PPE המתאים, כגון כפפות משקפיים.
    הערה: לחלופין, להשתמש Coplin צנצנות התייבשות ידנית עם הסידור זהה כמו המעבד רקמות אוטומטי.
  5. למקם את האספקט המדיאלי של הפנים פרקים שלמים למטה, להטביע אותו לתוך הרחוב פרפין ברקמות מוטבע לתוך המרכז.
    הערה: לחלופין, להשתמש מלקחיים כדי להטביע את הדגימות לתוך הרחוב פרפין ידנית.
  6. מתחילים לחתוך 5 מיקרומטר הסאגיטלי קטעים מן השוליים המדיאלי של המפרק עבור 30 מיקרומטר מרווחים עם 2 סעיפים טורי על-ידי מיקרוטום רוטרי.
  7. הר מקטעים בשקופיות זכוכית, deparaffinize השקופיות קסילן. בין הסעיפים טורי 2, להכתים שקופית אחת עם Hematoxylin & אאוזין (H & E) צביעת: 0.1% Hematoxylin למשך 15 דקות, 1% פתרון חומצה אצטית 10 s ו- 0.5% אאוזין למשך 10 דקות. כתם על השקופית אחרים עם Safranin O/מהיר ירוק מכתים: 0.1% Hematoxylin למשך 15 דקות, 0.02% מהר ירוק במשך 3 דקות, 1% פתרון חומצה אצטית 10 s ו- 0.1% Safranin O עבור מינימלית 3
    התראה: קסילן רעיל, ללבוש PPE המתאים, כגון כפפות, משקפיים.
  8. להבקיע את השקופיות מוכתם בעזרת מערכת הערכה Histopathology הבינלאומי החברה לחקר אוסטיאוארתריטיס (OARSI) חולדות 6.

3. Labelling של האדם גזע Mesenchymal עם צבעי פלורסנט עשה

  1. להכין האם הפתרון תיוג תא ב 100% אתנול-ריכוז של 1 מ מ. להגן על הפתרון תיוג תא האור ואחסן אותו בטמפרטורת החדר במשך 6 חודשים.
  2. לגדול haMSCs תא סטנדרטי נהלי התרבות ב- Dulbecco ' s ששינה הנשר ' s בינוני (DMEM) בתוספת 1% פניצילין, סטרפטומיצין, 10% עגל עוברית סרום (FCS) בצלחת פטרי 10 ס מ.
  3. ניתוק haMSCs עם טריפסין 0.25% 2 מ עם זרימה לפני כ 80% EDTA 1 מ מ.
  4. לנטרל טריפסין 4 מ"ל תרבות בינונית, לסובב את התאים ב g x 800 למשך 3 דקות בטמפרטורת החדר.
  5. להשעות את התאים על צפיפות של עונה 1 פרק 10 6 תאים למ"ל במדיום תרבות ללא סרום מ ל.
  6. תווית בתאים על-ידי הוספת 50 µL האם תא-תיוג פתרון מ ל ללא סרום תרבות בינוני ב 37 ° C עבור 50 דק
  7. לסובב את התאים שכותרתו ב g x 800 במשך 3 דקות
  8. לשטוף את התאים שניכם יותר מדי פעמים עם 5 מ"ל פוספט מאגר תמיסת מלח (PBS) ב g 800 x למשך 3 דקות כל אחד.
  9. לבדוק את haMSCs עם תוויות ברורות באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי עם ערכת מסנן Cy5.
  10. לספור את התאים עם trypan blue מכתים ולקבל 2.5 x 10 6 התאים קיימא ב- PBS 100 µL להזרקה.

4. אין ויוו פלורסנט הדמיה המסלול haMSCs

  1. 8 שבועות לאחר הניתוח (שלב 1), עזים ומתנגד העכברושים קואה בזריקה תוך שרירית של tiletamine 25 מ"ג/ק"ג, 25 מ"ג/ק"ג zolazepam.
  2. לגלח את ברך ימין ביסודיות עם סכין גילוח כדי לחשוף את האזור המשותף. לחטא את האזור משותפת עם אתנול 70%-
  3. באמצעות מחט מזרק 26 גרם, להזריק 2.5 x 10 6 שכותרתו תאים הושעו ב- PBS 100 µL במרכז של אזור המשולש הנוצרת על-ידי הצד המדיאלי של רצועה ברך, המפרקתי הנמוך המדיאלי של הירך (בעצם הטיביאלי המדיאלי איור 1B).
  4. פתח את תוכנת הדמיה, לאתחל ביולומינסנציה ויוו מערכת הדמיה-
  5. בו פרקדן עכברים עמדה עמדה על הבמה המרכזית של מערכת ההדמייה וסגור את הדלת של התא.
  6. לבדוק " פלורסנט " תיבת סימון, בחר מסנן פלורסנט סטים של 640 ננומטר על עירור, 680 ננומטר על פליטה ( איור 2 א).
  7. בחר תצוגה של שדה כדי להגדיר ד פיקסל binning לבינונית (8), F/להפסיק כדי 2 וחשיפה זמן באופן אוטומטי. לשמור על האופטימלית זמן החשיפה עקבי כדי להשיג תוצאות דומות על פני המחקר כולו ( איור 2 א).
  8. להסיר את החיה הבמה ואת הצג ההתאוששות מן ההרדמה.
    הערה: המקום חיה על רכיב pad חימום מכוסה עם 2-3 שכבות של toweling.
  9. בחר את היחידות של קורנים יעילות מדידות קרינה פלואורסצנטית ( איור 2B). בחר אזורים מעניינים (ROI) לניתוח ולכמת אותות פלואורסצנט כל תמונה ( איור 2C).
  10. חזור על הפעולות ויוו הדמיה עבור כל עכברוש ברצף ללמוד haMSCs השמירה האורך בכלא.
    הערה: אנו מציעים הדמיה החיות ' אותות פלואורסצנט על ידי מערכת הדמיה ויוו פעם יום שני בשבוע הראשון לאחר ההזרקה, פעם אחת בכל שבוע עד אין אפשרות לזהות את האות.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

בתערובות לזירוז דגם קואה, מ מ בוצעה ב המפרק ברך ימין של חולדות SD (איור 3). 8 שבועות לאחר הניתוח, חולדות הוקרבו, הסעיפים טורי של המפרקים בברך הוערכו עם שתי H & E ו- Safranin O/מהיר ירוק מכתים (איור 4). עבור H & E מכתים, פני השטח של הסחוס במפרק הציג גבולות גסים בברכיים ניתוח מאשר המפרק נורמלי בלי ניתוח. עבור Safranin-O/Fast ירוק מכתים, אנחנו נצפתה ירידה פרוטאוגליקן (צביעת אדום) והגדילה fibrillated קולגן (צביעת ירוק) בניתוח...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

תקני בטיחות ולימודים biodistribution של טיפול בתאי גזע נחוצים בדחיפות לפני שנוכל להביא משובי בתאי גזע לטיפול קואה מהספסל אל המיטה. עם זאת, הסביבה פתולוגי של המחלה ממלא תפקיד חשוב התמדה ו biodistribution של המושתלים haMSCs10. לאחרונה, הקבוצה שלנו הוכיח כי הזרקה תוך-מפרקיות של haMSCs שהתמידו עוד בסביבה קואה פתולוגיים מאשר זריקות תחת תנאים נורמליים8. זה אפשרי כי microenvironment ואת ניוונית דלקתית יכול לגייס את גזע mesenchymal לתיקון, לאחר מכן טובה השמירה של1...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

מנג Li, מינג Hao, ון וונג נמצאים העובדים הנוכחי ומחזיקים אופציות מקבוצת וההתערבות הסלולר (סימול: CBMG). המחברים אחרים מצהירים ללא ניגוד אינטרסים.

תודות

המחקר הנוכחי נתמכה על ידי שנגחאי חדשנות מימון (1402H 294300) בחסות המדע, הטכנולוגיה עמלה של שנגחאי העירייה (CN) כדי ד ר ון וונג. ברצוננו להודות ד ר גואנג-דונג ג'ואו (הלאומי רקמות הנדסה מרכז של סין) שלו סיוע וייעוץ טכני מדעי עבור כתב יד זה. אנחנו רוצה גם להודות מר Huitang שיה (החולים שנגחאי התשיעית לאנשים בבית) על עזרתו רווחת בעלי חיים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מערכת הרדמה לבעלי חיים Matrx VMR MidmarkVIP3000
4-0 תפרשנחאי JinhuanKC439
RazorPritechLD-9987
GentamicinZhejiang Jindakang מוצר לבריאות בעלי חיים ושות', בע"מאף אחד 0.9
% תמיסת נתרן כלוריHunan Kelun Pharmaceutical Co., Ltd.
פניציליןשנחאי Kangfu כימי פרמצבטיקה ושות', בע"מללא
בופרנורפיןטיאנג'ין מכון מחקר פרמצבטי פרמצבטי ושות', בע"מללא
ParaformaldehydeSigma-Aldrich16005מדלל לריכוז סופי של 10% ב-PBS
EDTASigma-AldrichE9884מדלל לריכוז סופי של 20% בתמיסת PBS
0.1% Hematoxylin, Mayer' sSigma-AldrichMHS16
0.5% תמיסת Eosin Y, אלכוהוליSigma-AldrichHT110116
Safranin OSigma-AldrichS8884
Fast GreenSigma-AldrichF7258
Shandon Excelsior ESTM מעבד רקמותThermo FisherA78400006
Shandon Histocentre™ 3 הטמעת רקמות CenterThermo FisherB64100010
מיקרוטום סיבובי אוטומטי לחלוטיןLeicaRM2255
DiDבדיקות מולקולריות, Life
Technologies		V-22887
D-MEM גלוקוז גבוהסיגמא-אולדריץ'D5648
PBSGIBCO, Life Technologies14190-144
0.25% Trypsin-EDTAInvitrogen25200-114
10 ס"מ צנטריפוגה פטריV118877
צנטריפוגהבקמןאופטימה MAX-TL
מיקרוסקופ פלואורסצנטיאולימפוסBX53
0.4% תמיסת טריפאן כחולהסיגמא-אולדריץ'93595
TitetammeVirbac (Zoletil 50)1000000188
ZolazepamVirbac (Zoletil 50)1000000188
מזרק היפוסרמי סטרילי לשימוש חד פעמי 26Gשנחאי Misawa התעשייה הרפואיתNone
IVIS Spectrum In Vivo Imaging SystemPerkinElmer124262
Living Imaging 4.0 תוכנהPerkinElmerNone
H43020455

מקורות

  1. Loeser, R. F., Goldring, S. R., Scanzello, C. R., Goldring, M. B. Osteoarthritis: a disease of the joint as an organ. Arthritis Rheum. 64 (6), 1697-1707 (2012).
  2. Lane, N. E., Shidara, K., Wise, B. L. Osteoarthritis year in review 2016: clinical. Osteoarthritis Cartilage. 25 (2), 209-215 (2017).
  3. Wang, W., Cao, W. Treatment of osteoarthritis with mesenchymal stem cells. Sci China Life Sci. 57 (6), 586-595 (2014).
  4. Burke, J., et al. Therapeutic potential of mesenchymal stem cell based therapy for osteoarthritis. Clin Transl Med. 5 (1), 27(2016).
  5. Bendele, A. M. Animal models of osteoarthritis. J Musculoskelet Neuronal Interact. 1 (4), 363-376 (2001).
  6. Gerwin, N., Bendele, A. M., Glasson, S., Carlson, C. S. The OARSI histopathology initiative - recommendations for histological assessments of osteoarthritis in the rat. Osteoarthritis Cartilage. 18, Suppl 3. S24-S34 (2010).
  7. Janusz, M. J., et al. Induction of osteoarthritis in the rat by surgical tear of the meniscus: Inhibition of joint damage by a matrix metalloproteinase inhibitor. Osteoarthritis Cartilage. 10 (10), 785-791 (2002).
  8. Li, M., et al. In vivo human adipose-derived mesenchymal stem cell tracking after intra-articular delivery in a rat osteoarthritis model. Stem Cell Res Ther. 7 (1), 160(2016).
  9. Zhou, B., et al. Administering human adipose-derived mesenchymal stem cells to prevent and treat experimental arthritis. Clin Immunol. 141 (3), 328-337 (2011).
  10. Desando, G., et al. Intra-articular delivery of adipose derived stromal cells attenuates osteoarthritis progression in an experimental rabbit model. Arthritis Res Ther. 15 (1), 22(2013).
  11. Riester, S. M., et al. Safety Studies for Use of Adipose Tissue-Derived Mesenchymal Stromal/Stem Cells in a Rabbit Model for Osteoarthritis to Support a Phase I Clinical Trial. Stem Cells Transl Med. 6 (3), 910-922 (2017).
  12. Bai, X., et al. Tracking long-term survival of intramyocardially delivered human adipose tissue-derived stem cells using bioluminescence imaging. Mol Imaging Biol. 13 (4), 633-645 (2011).
  13. Wolbank, S., et al. Labelling of human adipose-derived stem cells for non-invasive in vivo cell tracking. Cell Tissue Bank. 8 (3), 163-177 (2007).
  14. Heymer, A., et al. Iron oxide labelling of human mesenchymal stem cells in collagen hydrogels for articular cartilage repair. Biomaterials. 29 (10), 1473-1483 (2008).
  15. Hemmrich, K., Meersch, M., von Heimburg, D., Pallua, N. Applicability of the dyes CFSE, CM-DiI and PKH26 for tracking of human preadipocytes to evaluate adipose tissue engineering. Cells Tissues Organs. 184 (3-4), 117-127 (2006).
  16. Shim, G., et al. Pharmacokinetics and in vivo fate of intra-articularly transplanted human bone marrow-derived clonal mesenchymal stem cells. Stem Cells Dev. 24 (9), 1124-1132 (2015).
  17. Chen, B. K., et al. A safety study on intrathecal delivery of autologous mesenchymal stromal cells in rabbits directly supporting Phase I human trials. Transfusion. 55 (5), 1013-1020 (2015).
  18. Chan, M. M., Gray, B. D., Pak, K. Y., Fong, D. Non-invasive in vivo imaging of arthritis in a collagen-induced murine model with phosphatidylserine-binding near-infrared (NIR) dye. Arthritis Res Ther. 17, 50(2015).
  19. Texier, I., et al. Cyanine-loaded lipid nanoparticles for improved in vivo fluorescence imaging. J Biomed Opt. 14 (5), 054005(2009).
  20. Honig, M. G., Hume, R. I. Fluorescent carbocyanine dyes allow living neurons of identified origin to be studied in long-term cultures. J Cell Biol. 103 (1), 171-187 (1986).
  21. Rahmati, M., Mobasheri, A., Mozafari, M. Inflammatory mediators in osteoarthritis: A critical review of the state-of-the-art, current prospects, and future challenges. Bone. 85, 81-90 (2016).
  22. Detante, O., et al. Intravenous administration of 99mTc-HMPAO-labeled human mesenchymal stem cells after stroke: in vivo imaging and biodistribution. Cell Transplant. 18 (12), 1369-1379 (2009).
  23. Hu, S. L., et al. In vivo magnetic resonance imaging tracking of SPIO-labeled human umbilical cord mesenchymal stem cells. J Cell Biochem. 113 (3), 1005-1012 (2012).
  24. Xia, Q., et al. Intra-articular transplantation of atsttrin-transduced mesenchymal stem cells ameliorate osteoarthritis development. Stem Cells Transl Med. 4 (5), 523-531 (2015).
  25. Jasmin,, et al. Optimized labeling of bone marrow mesenchymal cells with superparamagnetic iron oxide nanoparticles and in vivo visualization by magnetic resonance imaging. J Nanobiotechnology. 9, 4(2011).
  26. Lehmann, T. P., et al. Coculture of human nucleus pulposus cells with multipotent mesenchymal stromal cells from human bone marrow reveals formation of tunnelling nanotubes. Mol Med Rep. 9 (2), 574-582 (2014).
  27. Wang, W., et al. Human adipose-derived mesenchymal progenitor cells engraft into rabbit articular cartilage. Int J Mol Sci. 16 (6), 12076-12091 (2015).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

דימות פלואורסצנטי In Vivoסימון תאים באמצעות DiDהזרקה תוך-מפרקיתהתפלגות ביולוגית של הישרדות תאיםהשראה כירורגית של KOAצביעת H&E Safranin Oמערכת לדימות ביו-לומניסנציהצבע ממбраנה פלואורסצנטי
אין ויוו מעקב של האדם נגזר שומן בתאי גזע Mesenchymal במודל דלקת מפרקים ניוונית של הברך עכברוש עם קרום Lipophilic פלורסנט לצבוע
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.