מאמר זה מציג ששונה פרוטוקולים ניסיוני עבור dimethylmonothioarsinic חומצה (VDMMTA) סינתזה חומצה (VDMDTA) dimethyldithioarsinic, גרימת dimethylarsinic thiolation חומצה (DMAV) באמצעות ערבוב של DMAV , נה2S ו- H2אז4. פרוטוקול שהשתנה מספק קו מנחה ניסיוני, ובכך להתגבר על מגבלות של השלבים סינתזה גרם כשלים ניסיוני ב אנליזה כמותית.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
הכנת DMMTAV ו- DMDTAV באמצעות DMAV עבור ישומים סביבתיים: סינתזה, טיהור ואישור
במאמר זה
סיכום
תקציר
Dimethylated thioarsenicals כגון חומצה dimethylmonothioarsinic (DMMTAV) וחומצה dimethyldithioarsinic (DMDTAV), המיוצרים על ידי מסלול מטבולי של thiolation (DMAV) חומצה dimethylarsinic, היה לאחרונה למצוא הסביבה וכן את האיברים האנושיים. ניתן לכמת DMMTAV ו- DMDTAV כדי לקבוע את השפעות אקולוגיות של dimethylated thioarsenicals ויציבות שלהם בתקשורת סביבתית. שיטת סינתזה עבור תרכובות אלו היא unstandardized, ביצוע שכפול מחקרים קודמים מאתגר. יתר על כן, יש חוסר מידע על טכניקות אחסון, לרבות אחסון של תרכובות ללא שינוי מין. יתר על כן, כי מידע מוגבל לגבי שיטות סינתזה זמין, ייתכנו קשיים ניסיוני סינתזה כימיקלים תקן ביצוע אנליזה כמותית. פרוטוקול שהוצגו במסמך זה מספק שיטה סינתזה שהשתנה למעשה thioarsenicals dimethylated, DMMTAV ו- DMDTAV, ולא יעזרו כימות של מינים ניתוח הפרדה באמצעות נוזל ביצועים גבוהים כרומטוגרפיה בשיתוף עם פלזמה inductively בשילוב ספקטרומטר מסה (HPLC-ICP-MS). השלבים ניסיוני של הליך זה שונו על-ידי התמקדות הכנת ריאקטיבים כימיים, שיטות סינון ואחסון.
מבוא
מאז dimethylarsinic חומצה (DMAV) הוכח שהפגינו רעילות חריפה והן genotoxicity עקב עוברת מתילציה, thiolation בעת בליעה1,2, יש מסלול מטבולי של ארסן thiolation היה אינטנסיבי למד גם במבחנה וגם ויוו3,4 גם כן כמו הסביבה לתקשורת (למשל, לנדפיל leachate)5,6. מחקרים קודמים מצאו שניהם מופחת thiolated אנלוגים של DMAV חי תאים, למשל, dimethylarsinous חומצה (DMAהשלישי), חומצה dimethylmonothioarsinic (VDMMTA) של dimethyldithioarsinic....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
1. סינתזה של DMMTAV
-
טוחנת יחס ערבוב של DMAV, נה2S ו- H2והכנה כימיים וכו4
הערה: DMAV: נה2S:H2אז4 = 1:1.6:1.6- להמיס 5.24 גר' DMAV יונים 40 מ"ל ו- N2-לצמיתות (טיהר במשך לפחות 30 דקות) שפופרת צנטרפוגה 50 מ ל מים.
- להכין נה2S מגיב על ידי המסת 14.41 גר' נה2S·9H2O ב- 50 מ ל יונים ו N2-טיהר מים בבקבוקון 250 מ ל.
- תכין H2כך מגיב4 על-ידי הוספת 3.3 מ ל חומצה גופרתית מרוכזת (96%) עד 40 מ"ל של יונים וקצת N2-טיהר במים שפופרת צנטר....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
מאחר DMMTAV הוכן בטעות על ידי שיטת סינתזה19DMAהשלישי , אימות של DMMTA מסונתזV ו- DMDTAV הוא שלב קריטי עבור סינתזה, חילוץ וקביעת תקן אידיאלי חומרים כימיים. כימיקלים מסונתז ניתנת לאימות כמקורית על שיא של DMMTAV (MW 154 g·mol-1) ויחס DMDTAV (MW 170 g·mol-1) בנפח גדול לתשלום (מ/z) באמצעות מצב יון חיובי או שלילי או מסה-ספקטרומטריית electrospray יינון ספקטרומטר (ESI-MS) באמצע.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
פרוטוקול מפותחת יש מובהר שלבים קריטיים כי הקודם מחקרים1,3,4,8,15 מושמט או מקוצר, אשר ייתכן שהובילו קשיים או תקלה במהלך סינתזהV DMMTAV ו- DMDTA. כמו DMMTAV הוא רגיש חמצון1,5, ריאקטיבים כימיים עבור סינתזה שלו הוכנו באמצעות N2-טיהר מים יונים (שלבים 1.1.1 - 1.1.3.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
המחברים אין לחשוף.
תודות
מחקר זה נתמך על ידי תוכנית מחקר מדעי בסיסי (פרויקט מס: 2016R1A2B4013467) דרך לאומי מחקר קרן של קוריאה (ב- NRF) ממומן על ידי משרד המדע, ICT & 2016 תכנון העתיד, נתמכת גם על ידי מדע בסיסי קוריאה מכון תכנית המחקר (פרויקט מס: C36707).
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| חומצה קקודילית | Sigma-Aldrich | 20835-10G-F | |
| נתרן גופרתי nonahydrate | Sigma-Aldrich | S2006-500G | |
| חומצה גופרתית 96% | J.T.Baker | 0000011478 | |
| אמוניום אצטט | Sigma-Aldrich | A7262-500G | |
| חומצה פורמית 98% | Wako Pure Chemical Industries, Ltd. | 066-00461 | |
| דיאתיל אתר (טהור במיוחד) | Junsei Chemical | 33475-0380 | |
| מכסה מתאם ל-60 מ"ל בונד אלוט מחסניות | Agilent Technologies | 12131004 | סוג מזרק של מחסנית SPE |
| Bond Elut C18 | Agilent Technologies | 14256031 | סוג מזרק של SPE |
| HyPURITY C-18 | Thermo Scientific | 22105-254630 | 5 אום, 125 x 4.6 מ"מ |
| תא הכפפות | צ'ונגה-צ'ון, רפובליקת קוריאה | מותאם אישית | |
| Agilent 1260 Infinity Bio-inert LC | Agilent Technologies | DEAB600252, DEACH00245 | |
| Agilent Technologies 7700 Series ICP-MS | Agilent Technologies | JP12031510 | |
| Finnigan LCQ Deca XP MAX מערכת ספקטרומטר מסה | Thermo Electron Corporation | LDM10627 |
מקורות
- Suzuki, K. T., et al. Dimethylthioarsenicals as arsenic metabolites and their chemical preparation. Chem. Res. Toxicol. 17, 914-921 (2004).
- Kuroda, K., et al. Microbial metabolite of dimethylarsinic acid is highly toxic and genotoxic. Toxicol. Appl. Pharmacol. 198, 345-353 (2004).
- Naranmandura, H., Iwata, K., Suzuki, K.....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
