Inflammasomes הם פלטפורמות איתות המערכת החיסונית מולדת אשר נדרשים עבור הפקד מוצלחת של אורגניזמים פתוגניים רבים, אלא גם לקדם דלקתיות ומחלות autoinflammatory. Inflammasomes מופעלים על ידי רצפטורים זיהוי דפוס cytosolic, כולל בני משפחת קולטן (NLR) כמו במנוד ראש. רצפטורים אלו oligomerize על הגילוי של גירויים מיקרוביאלי או נזק-הקשורים. גיוס עוקבות של החלבון מתאם ASC טפסים מורכבים, inflammasome ברמה המיקרוסקופית הגלויים שמפעיל קספאז-1 דרך הפעלה אוטומטית קרבה-induced. לאחר ההפעלה, קספאז-1 cleaves pro-IL-1β ו- pro-IL-18, שמוביל ההפעלה ואת הפרשת ציטוקינים פרו-דלקתיים אלה. קספאז-1 שמתווכת גם הצורה דלקתיות של מוות של תאים הנקרא pyroptosis, אשר כולל האובדן של קרום התא של תקינות פירוק. קספאז-1 cleaves gasdermin D, שחרור השבר N-מסוף המהווה קרום פלזמה נקבוביות, שמוביל osmotic פירוק.
חוץ גופית בתוך, ההפעלה של קספאז-1 יכול להיקבע על ידי תיוג מקרופאגים הנגזרות מח עצם עם החללית קספאז-1 פעילות FAM-YVAD-FMK ועל ידי תיוג התאים עם נוגדנים נגד החלבון מתאם ASC. טכניקה זו מאפשרת זיהוי inflammasome גיבוש והפעלה קספאז-1 בתאים בודדים באמצעות מיקרוסקופ זריחה. מוות של תאים Pyroptotic ניתן להבחין באמצעות מדידת שחרורו של לקטט דהידרוגנאז cytosolic לתוך האמצעי. ההליך זה פשוט, חסכוני, שבוצעו בתבנית צלחת 96-ובכן, ומאפשר הסתגלות להקרנה. כתב יד זה, אנו מראים כי הפעלת inflammasome NLRP3 על ידי nigericin מוביל לוקליזציה שיתוף של מתאם חלבונים ASC ו קספאז פעיל-1, המוביל pyroptosis.