במאמר זה, נציג פרוטוקול כדי לגרום פגיעת ריאות חריפה חזירים בזריקה במרכז-ורידים של חומצה אולאית. זהו מודל חיה הוקמה ללמוד את תסמונת מצוקה נשימתית חריפה (ARDS).
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
במאמר זה, נציג פרוטוקול כדי לגרום פגיעת ריאות חריפה חזירים בזריקה במרכז-ורידים של חומצה אולאית. זהו מודל חיה הוקמה ללמוד את תסמונת מצוקה נשימתית חריפה (ARDS).
תסמונת מצוקה נשימתית חריפה היא מחלה הרלוונטיים נמרץ עם שכיחות הנעים בין 2.2% ו- 19% מהחולים נמרץ. למרות התקדמות הטיפול בעשורים האחרונים, ARDS מהחולים סובלים עדיין שיעורי התמותה בין 35 ל- 40%. יש עדיין צורך למחקר נוסף לשפר את התוצאה של חולים הסובלים ARDS. בעיה אחת היא שאין דגם אחד בעלי חיים שיכולים לחקות את pathomechanism מורכבים של תסמונת מצוקה נשימתית חריפה, אבל מספר מודלים קיימים ללמוד חלקים שונים של אותו. הזרקת חומצה אולאית (OAI)-ריאות המושרה פציעה הוא מודל ומבוססת ללמוד אסטרטגיות אוורור, הפצה מכניקה זלוף/אוורור הריאות בבעלי חיים. OAI מוביל חילוף הגזים נפגעת קשות, החמרה של הריאה מכניקה ובהפסקות של המכשול מכתשי-נים. החיסרון של מודל זה הוא הרלוונטיות מכניסטית השנוי במחלוקת של מודל זה ולצורך לגישה ורידים במרכז, אשר הוא מאתגר במיוחד במודלים של בעלי חיים קטנים יותר. לסיכום, OAI-induced לונג פציעה מובילה לתוצאות לשחזור בבעלי חיים קטנים וגדולים, ומכאן ומייצג מודל מותאם היטב עבור הלומדים ARDS. למרות זאת, מחקר נוסף יש צורך למצוא מודל זה מחקה את כל חלקי ARDS, חסרה את הבעייתיות מודלים שונים הקיימים היום.
תסמונת מצוקה נשימתית חריפה (ARDS) היא תסמונת טיפול נמרץ זה בהרחבה נחקרה מאז התיאור הראשון שלו לפני כ 50 שנה1. הגוף הזה של מחקר הוביל הבנה טובה יותר של הפתופיזיולוגיה וגורם להתפתחות ARDS וכתוצאה מכך שיפור הטיפול בחולה תסריט2,3. עם זאת, התמותה בחולים הסובלים ARDS נותר גבוה מאוד כ- 35-40%4,5,6. העובדה כי כ 10% של סדרי טיפול נמרץ ו- 23% מהמטופלים בטיפול נמרץ הזקוקים להנשמה נובע ARDS מדגיש את הרלוונטיות למחקר נוסף בתחום זה.
מודלים בעלי חיים נמצאים בשימוש נרחב במחקר לבחון שינויים pathophysiologic ואופני טיפול פוטנציאלי עבור סוגים שונים של מחלות. בשל המורכבות של ARDS, יש אין יחיד במודל חיה כדי לחקות את המחלה, אבל דגמים שונים המייצגים היבטים שונים7. מודל ומבוססת אחד הוא הזרקת חומצה אולאית (OAI)-induced פגיעת ריאות. מודל זה שימש במגוון רחב של בעלי חיים, לרבות עכברים8, חולדות9, חזירים10, כלבים11כבשים12. חומצה אולאית היא חומצת שומן רוויה חומצת השומן הנפוץ ביותר בגוף של בני אדם בריאים13. . זה נוכחות פלזמה, קרום התא, רקמת שומן אנושי13. מבחינה פיזיולוגית, זה בטוח אלבומין בזמן זה מתבצע דרך מחזור הדם13. רמות גבוהות של חומצות שומן בתוך זרם הדם קשורים עם הלקויות השונות ואת חומרת כמה מחלות בקורלציה עם רמות חומצת שומן סרום13. חומצה אולאית ARDS-דגם פותחה בניסיון לשחזר ARDS הנגרמת על ידי תסחיף השומנים המתעצבת הטראומה חולים14. חומצה אולאית יש השפעה ישירה על מולדת החיסון רצפטורים הריאות13 ו גורמים להצטברות נויטרופילים15, מתווך דלקתיים ייצור16ולאחר מותו תא13. מבחינה פיזיולוגית, חומצה אולאית גורם hypoxemia מתקדם במהירות, עליית לחץ הדם בעורק ריאתי והצטברות של הריאות extravascular מים. יתר על כן, הוא יוצר תת לחץ דם עורקי, דיכאון שריר הלב7. החסרונות של מודל זה הן בצורך לגישה ורידים במרכז, הרלוונטיות מכניסטית מפוקפק, פוטנציאל התקדמות קטלני נגרם על-ידי hypoxemia מהירה ודיכאון הלב. היתרון של מודל זה לעומת דגמים אחרים הוא השימושיות בבעלי חיים קטנים וגדולים, הפארמצבטית חוקי של המנגנונים הקשורים pathophysiological ב- ARDS, תחילת ARDS חריפה לאחר הזרקה של חומצה אולאית, והיא האפשרות ללמוד מבודדת ARDS ללא דלקת מערכתית. כמו רבים אחרים אלח דם מודלים7. במאמר הבא, אנו לתת תיאור מפורט של הפגיעה ריאות חומצה אולאית-induced חזירים, לספק נתונים נציג כדי לאפיין את היציבות של הפשרות בתפקוד הריאות. ישנם פרוטוקולים שונים עבור פגיעת ריאות OAI-induced. הפרוטוקול מסופקים כאן הוא מסוגל באופן אמין לגרום לפציעה ריאות חריפה.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
כל הניסויים המתוארים כאן אושרו על ידי הוועדה המוסדית של המדינה טיפול בבעלי חיים (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz, קובלנז, גרמניה; אישור מספר G14-1-077), נערכו בהתאם לקווים המנחים של החברה האירופית וגרמנית למדעים חיות מעבדה. הניסויים נערכו ומורדמת חזירים זכרים (sus scrofa דומסטיקה) בגיל 2-3 חודשים, שוקלת 27-29 ק ג.
1. הרדמה, צנרור, אוורור מכני
2. אינסטרומנטציה
3. מרביים במדידת לחץ החמצן החלקי (pO2)
הערה: את המדידה של פו2 עם החללית פו מרביים2-מדידה אינה חובה אלא עוזר להמחיש את השינויים בזמן אמת ב- pO2.
4. החדרת קטטר עורק הריאה
5. אינדוקציה של פגיעת ריאות
6. סוף הניסוי, המתת חסד
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פאו-2-/FiO-2-יחס פוחתת לאחר יישום fractionated של חומצה אולאית (איור 1). במסגרת המחקר הציג, 0.185 ± 0.01 מ ל ק ג-1 חומצה אולאית היה הכרחי עבור אינדוקציה הפגיעה ריאות. כל בעלי החיים הראה של חמצון לקוי לאחר אינדוקציה של פגיעה בריאה, עם זנים בזמנו עוד קורס. בחיה 1 ו- 3, נותרה ברמה אחת עם תנודות קטנות; בחיים 2, שאנו צופים גידול ראשוני, ולאחריו ירידה בקצה, בעוד החיה 4 מראה עלייה מתמדת. ובכל זאת, אנחנו מוצאים ליקוי מסומן חמצון בכל ב...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
מאמר זה מתאר שיטה אחת של חומצה אולאית-induced ריאות פגיעה כמודל ללמוד היבטים שונים של ARDS חמורה. ישנם גם פרוטוקולים אחרים עם אמולסיות שונות, באתרי הזרקה שונים בטמפרטורות שונות של אמולסיה23,24,25,26,27,28 ,29. השיטה שלנו מציע יציב הדירים הידרדרות בתפקוד הריאות. כמו ההשפעה של חומצה אולאית הו...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
כל המחברים לחשוף לא כספיים או אחרים ניגוד אינטרסים.
המחברים רוצה להודות דאגמר Dirvonskis לתמיכה טכנית מצוינת.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 3-way-stopcock כחול | Becton Dickinson Infusion Therapy AB הלסינגבורג, שוודיה | 394602 | |
| 3-way-stopcock אדום | Becton Dickinson Infusion Therapy AB הלסינגבורג, שוודיה | 394605 | |
| Atracurium | Hikma Pharma GmbH , Martinsried | 4262659 | |
| Canula 20 G | Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, ספרד | 301300 | |
| Datex Ohmeda S5 | GE Healthcare Finland Oy, הלסינקי, פינלנד | ||
| Desinfection | Schü לקה & Mayr GmbH, גרמניה | 104802 | |
| צינור אנדוטרכיאלי | Teleflex Medical Sdn. Bhd, מלזיה | 112482 | |
| מכניס צינור אנדוטרכיאלי | Rü sch | 5033062 | |
| Engströ m Carestation | GE Heathcare, מדיסון ארה"ב | ||
| Fentanyl | Janssen-Cilag GmbH, Neuss | ||
| Gloves | Paul Hartmann, גרמניה | 9422131 | |
| Incetomat-line 150 ס"מ | Fresenius, Kabi Germany GmbH | 9004112 | |
| Ketamine | Hameln Pharmaceuticals GmbH | ||
| לרינגוסקופ | טלפלקס רפואי Sdn. Bhdמלזיה | 671067-000020 | |
| מערכת ניטור לחץ לוגי | Smith- Medical Germany GmbH | MX9606 | |
| Logicath 7 Fr 3 לומן 30 ס"מ | Smith- Medical Germany GmbH | MXA233x30x70-E | |
| Masimo Radical 7 | Masimo Corporation Irvine, Ca 92618 ארה"ב | ||
| מסכה לכלבי הנשמה | הנרי שיין, גרמניה | 730-246 | |
| Neofox Kit | אופטיקה אוקיינוס לארגו, פלורידה ארה"ב | NEOFOX-KIT-PROBE | |
| Norepinephrine | Sanofi- Aventis, Seutschland GmbH | 73016 | |
| חומצה אולאית | Applichem GmbH דרמשטדט, גרמניה | 1,426,591,611 | |
| מזרק Perfusor מקורי 50 מ"ל Luer Lock | B.Braun Melsungen AG, גרמניה | 8728810F | |
| PA-Katheter Swan Ganz 7,5 Fr 110 ס"מ | Edwards Lifesciences LLC, אירווין קליפורניה, ארה"ב | 744F75 | |
| סט מבוא נדן מלעורי 8,5 und 9 Fr, 10 ס"מ עם שסתום המוסטזיס אינטגרלי/יציאה צדדית | Arrow international inc. רידינג, פנסילבניה, ארה"ב | AK-07903 | |
| Perfusor FM Braun | B.Braun Melsungen AG, גרמניה | 8713820 | |
| אשלגן כלורי | Fresenius, Kabi גרמניה GmbH | 6178549 | |
| פרופופול 2% | Fresenius, Kabi גרמניה GmbH | ||
| Saline | B.Braun Melsungen AG, גרמניה | ||
| Sonosite Micromaxx Ultrasoundsystem | Sonosite Bothell, WA, ארה"ב | ||
| נירוסטה מקינטוש גודל 4 | Teleflex Medical Sdn. Bhd, מלזיה | 670000 | |
| Sterofundin | B.Braun Melsungen AG, גרמניה | ||
| Stresnil 40 מ"ג/מ"ל | Lilly Germany GmbH, Abteilung Elanco מזרק לבריאות | ||
| 10 מ"ל | Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spain | 309110 | |
| מזרק 2 מ"ל | Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spain | 300928 | |
| מזרק 20 מ"ל | Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, Spain | 300296 | |
| מזרק 5 מ"ל | Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, ספרד | 309050 | |
| קטטר ורידי 22G | B.Braun Melsungen AG, גרמניה | 4269110S-01 |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.