תרסיסים פטריות על צמחים פורחים עשויה לחשוף הדבורים בודד כדי ריכוזים גבוהים של שאריות אבקה בעקיצות פטריות. באמצעות מבוסס מעבדה בניסויים המערבים במבחנה-דבורה גדלו הזחלים, מחקר זה בוחן את ההשפעות אינטראקטיבי של צריכת פטריות שטופלו אבקה נגזר צמחים המחשב המארח ופונדקאי.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
במבחנה גידול דבורים בודד: כלי להערכת גורמי סיכון זחל
במאמר זה
סיכום
תקציר
למרות דבורים בודד לספק שירותי האבקה מכריע עבור גידולי פרא ו מנוהלים, קבוצה זו מינים עתירי התעלמו במידה רבה במחקרים תקנה חומרי הדברה. הסיכון של חשיפה שאריות פטריות הוא עשוי להיות גבוה במיוחד אם הספריי מתרחשת על, או ליד צמחים פונדקאים בזמן הדבורים הן איסוף אבקה להקצות את קיניהם. עבור מינים של Osmia צורכים אבקה מתוך קבוצה נבחרת של צמחים (oligolecty), חוסר היכולת להשתמש זני צמחים פונדקאים שאינו יכול להגביר שלהם גורם הסיכון הקשורות פטריות רעילות. כתב יד זה מתאר פרוטוקולים המשמשים בהצלחה נמצאת מאחור oligolectic מייסון דבורים, Osmia ribifloris . שאתה לאטו, מביצה לשלב prepupal בתוך התא צלחות תרבות בתנאי מעבדה סטנדרטית. ה במבחנה-דבורים גדלו משמשות לאחר מכן לחקור את ההשפעות של מקור החשיפה ואבקה פטריות על כושר דבורה. בהתבסס על עיצוב העצרת 2 × 2 מלא חצה, הניסוי בוחן את ההשפעות העיקריות ואינטראקטיבי של מקור החשיפה ואבקה פטריות על כושר זחל, לכמת ביומסה prepupal, זחל התפתחותית, וזמן שאירים. היתרון העיקרי של שיטה זו הוא כי באמצעות במבחנה-דבורים גדלו מפחית את השתנות רקע טבעית ומאפשרת מניפולציה בו זמנית של מספר פרמטרים ניסיוני. הפרוטוקול המתואר מציג כלי רב-תכליתי עבור השערות בדיקות המערבים את הסוויטה של הגורמים המשפיעים על בריאות דבורה. עבור מאמצי השימור ייפגש עם הצלחה משמעותית, מתמשך, כאלה תובנות הגומלין המורכבים של גורמים פיזיולוגיים וסביבתיים נהיגה דבורה ירידות תוכיח כדי להיות קריטי.
מבוא
בהינתן תפקידם כמו הקבוצה השלטת של חרקים ומאביקים1, אובדן הכללית בקרב אוכלוסיות דבורה מהווה איום על ביטחון תזונתי ועל המערכת האקולוגית יציבות2,3,4,5,6 ,7. מגמות הפוחתת שתי האוכלוסיות דבורה מנוהל ופרוע יוחסו מספר גורמי סיכון משותף כולל פיצול בית גידול, המתעוררים טפילים פתוגנים, אובדן של מגוון גנטי, ואת המבוא של מין פולש3 ,4,7,8<....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
1. מכינים את Propiconazole פתרונות לניסויים חשיפה פטריות
- להכין 0.1 x פטריות פתרון על ידי המסת כרכים המתאים של propiconazole מסחרית שנרכשו 14.3% במים סטריליים היום של הניסוי. ודא כי הפיתרון היחיד של פטריות טריות משמש עבור כל הטיפולים.
- הוסף µL 23 של 0.1 x פתרון פטריות לגרם של אבקה הוראה כדי להשיג את הריכוז המרבי של propiconazole דיווח בעבר מאסף-דבורה אבקה24 (0.361 PPM או µg של המרכיב הפעיל g-1 של אבקה).
2. הקציר ביצים והוראות אבקה מארח בין קני הסוף Osmia
- באמצעות אזמל מעוקר, לנתח טרי מחובר קינון הקנים של Osmia, שמחלקים את זה לשני חלקים לאורך הקנה לחשוף את ....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
כושר זחל היה לכמת באמצעות שלושה מדדים (i) זחל התפתחותית זמן, ביומסה (ii) prepupal, שאירים (iii) אחוז. אנובה דו-כיווני נערך באמצעות חשיפה פטריות (שתי רמות: אין פטריות, פטריות) ומקור אבקה (שתי רמות: אבקה המארח, Non-פונדקאי אבקה) ' המשתנים תלויים, וכן זחל התפתחותית זמן המשתנה התלוי. ההשפעה העיקרית לחשיפה פטריות (F1,28 = 1.24, P = 0.28) היה בלתי-משמעותיים בין שטופלו פטריות (זאת אומרת ± SE) (28.14 ±1.98 d, N = 14), ולא טופלו (± 25.39 1.65 d, N = 1.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
גידול דבורים מחוץ הקנים הקינון הטבעי שלהם, בתנאי מעבדה, מאפשר בדיקה של השערות הנוגעים כושר זחל. כך גורמים לא מזוהה להמשיך לגרום לתמותה דבורה, לימודי הערכת סיכונים באמצעות במבחנה ניסויים יכול לעזור לזהות איומים פוטנציאליים ולהודיע לשיטות ניהול עבור קבוצת מינים עתירי למאביקים פראי 12 ,38,49,76,81,82.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
המחברים אין לחשוף.
תודות
המחברים תודה קלארק קימבל, טים Krogh למתן הקנים קינון Osmia , מרדית נסביט, מולי בידוול לסיוע המעבדה, ד"ר קמרון קורי, קריסטל Guédot, טרי גריסוולד, מייקל Branstetter, שלושה אנונימיים בודקים עבור את הערותיהם שימושי זה לשפר את כתב היד. עבודה זו נתמכה על ידי שירות המחקר החקלאי-USDA הופקעו קרנות (מחקר מידע המערכת הנוכחית 3655-21220-001), מחלקת החקלאות של ויסקונסין, במסחר הגנת הצרכן (#197199), הקרן הלאומית למדע (תחת מענק מס DEB-1442148), DOE הגדול אגמים Bioenergy המרכז לחקר (DOE משרד המדע בער דה-FC02-07ER64494).
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| ביצים של O. ribifloris sensu lato (s.l.) | קייסוויל, מחוז דייוויס, יוטה, ארה"ב | ||
| קני אוסמיה | Nativebees.com | NA | של קנים טריים סתומים |
| VWR | 89259-964 | לעקר לפני השימוש | |
| צבת אף ארוך | האסקי | 1006 | |
| 6 צלחות תרבית | באר VWR | 10062-892 | אטום סטרילי |
| 48 צלחות תרבית באר | VWR | 10062-898 | אטומות סטריליות |
| VWR | 25373100 | מרובעות אטומות סטריליות | |
| VWR | 10770-448 | ||
| מברשת שיער גמל | Bioquip | 1153A | |
| כמוסות פח | EA חומרים מתכלים | D1021 | לעקר לפני השימוש |
| סוכרוז | VWR | 470302-808 | |
| פרופיקונזול 14.3 | Quali-PPRO | 60207-90-1 | פרופיקונזול 14.3% |
| אבקת דבורת דבש | אנרגטית 897098001244 | אבקה גולמית, טבעית, לא מטופלת | |
| Microbalance | VWR | 10204-990 | |
| Pulverisette | LAB SYNERGY INC. | ||
| 30334913 מקלות עץ | VWR | 470146908 | לעקר לפני השימוש |
| סרט איטום | VWR | 89097-912 | |
| מיקרוסקופ | VWR | 89403-384 | |
| מגש שתילה | VWR | 470150-632 | |
| אתנול | VWR | BDH1158-4LP | |
| צינור צנטריפוגה | VWR | 21008936 | |
| מיקרו-מזרק | קול-פאלמר | UX-07940-07 | |
| פינצטת גומי | אמזון | ||
| VWR | 89219-334 | ||
| מייבש הקפאה | Labcono | LFZ-1L | |
| תוכנה סטטיסטית | SPSS | גרסה 21.0 |
מקורות
- Klein, A. -M., et al. Importance of pollinators in changing landscapes for world crops. P Roy Soc Lond B Bio. 274 (1608), 303-313 (2007).
- Biesmeijer, J. C. J., et al. Parallel declines in pollinators and insect-pollinated plants in Britain ....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
