כדי מקרוב מחקים המצב של פציעות לשרוף מחייבת יחסי הגומלין בין תצפיות קליניות מחקרים בבעלי חיים. במחקר זה, מודל החזירים של פציעה חמורה צריבה הוקמה כדי להעריך ההלבשה ניסיוני ב הגדרות פיזיולוגיים הקשורים pathophysiological.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
כדי מקרוב מחקים המצב של פציעות לשרוף מחייבת יחסי הגומלין בין תצפיות קליניות מחקרים בבעלי חיים. במחקר זה, מודל החזירים של פציעה חמורה צריבה הוקמה כדי להעריך ההלבשה ניסיוני ב הגדרות פיזיולוגיים הקשורים pathophysiological.
ריפוי הפצע הוא תהליך דינמי תיקון והוא תהליך ביולוגי המורכבים ביותר בחיי האדם. בתגובה לשרוף פציעה, שינויים מסלולים ביולוגיים לפגום התגובה דלקת, וכתוצאה מכך ריפוי הפצע מושהית. ריפוי פצעים לקוי לעתים קרובות מתרחשת בחולים עם סוכרת מובילה לתוצאות שלילי כגון קטיעה. לפיכך, רטבים יש השפעה מיטיבה בקידום לצרוב את הפצע תיקון נחוצים. עם זאת, מחקרים על צריבה בפצע טיפול מוגבלות בשל חוסר מודלים בעלי חיים נאותה. המחקר הקודם שלנו הפגינו ביצועים ריפוי פצע במודלים עכברים וחזירים בטכניקה כירורגית פולשנית. מחקר זה נועד להדגים מודל החזירים של פציעה חמורה צריבה המבטל את הפצע התכווצות, יותר מקרוב קירוב התהליכים האנושיים של epithelialization מחדש, היווצרות רקמה חדשה. פרוטוקול זה מספק הליך מפורט עבור יצירת פצעים כוויות עקבי ובודקים את הביצועים, ריפוי פצע תחת הטיפול ההלבשה ניסיוני במודל של החזירים. פצעים כוויות שישה נוצרו באופן סימטרי dorsum, אשר היו מכוסים קליניים ההלבשה המורכבת של ארבע שכבות: שכבת הקשר הפנימית של חומרים ניסיוניים, שכבת ביניים הפנימי של הסרט עמיד למים, ביניים שכבה חיצונית של גזה שכבה חיצונית של טיח דבק. עם השלמת הניסויים, נבחנו סגירת הפצע אזור הפצע, ונקובר הצלקת סרגל ניקוד. הדגימות של העור resected מההקרבה שלאחר כל בעלי חיים הוכנו בהיסטולוגיה, צבעונית באמצעות hematoxylin אאוזין מכתים. אנטיבקטריאלי של כל ההלבשה בהקשר של ריפוי הפצע גם נבדק. היישום של הרוטב קליניים לפציעות במודל החזירים מחקה את התהליכים הביולוגיים של ריפוי לגבי התהליכים של epithelialization, התפשטות הסלולר אנגיוגנזה הפצע האנושי. לכן, מודל חזיר זה מספק שיטה קל ללמוד, חסכונית, וחזק כדי להעריך את ההשפעה של רטבים קליניים בפציעה חמורה צריבה.
פגיעה צריבה יוזם תהליך דלקתי ומשרה מורכב אפקטים פתולוגיים, אשר משפיעים על תפקודי גוף רבים מיד לאחר תאונה, וכתוצאה מכך השפעה שלילית על איכות החיים של המטופלים. ריפוי פצעים לקוי גורם משמעותי התחלואה והתמותה בקרב חולים עם סוכרת1,2. רוב החולים עם פציעות לשרוף לחוות כאב במהלך הצריבה הפצע הטריה, הידוע בשם תהליך התופת למרות השימוש של משככי כאבים אופיואידים חזק3.
בניגוד יונקים אחרים, החזירים לשתף מספר מאפיינים אנטומיים, הפיזיולוגיות עם בני האדם לגבי התהליך של epithelialization, התפשטות הסלולר אנגיוגנזה. זה גורם החזירים מודל פוטנציאלי טוב יותר עבור פרוצדורות של מחקרים מסוימים, הם משמשים לעתים קרובות מחקרים מאוחרים יותר הראו תוצאות מבטיחות בעכברים. תכונות אלה הובילו השימוש הגובר החזירים כמינים העיקריים בבדיקות פרה. לאחרונה, עלייה מהירה המחקר הביו-רפואי עם כבוד אל הלב וכלי הדם, השתן, הכסות, מערכות העיכול נצפתה4,5,6. מחקר זה נועד להמחיש מודל החזירים של פציעה כוויות חמורות מבטלת את הפצע התכווצות ומספק הערכה קרובה יותר של תהליכי ריפוי הפצע האנושי ואת היווצרות רקמה חדשה. פצעים כוויות שישה נוצרו באופן סימטרי על dorsum, שלוש בכל צד של עמוד השדרה של החזירים. בשלב הבא, הלבשה anexperimental נבדקה במודל החזירים של פגיעה כוויות חמורות, אשר ניתן להתאים כדי לשכפל ריפוי הפצע האנושי (איור 1). הפצעים היו מכוסים ההלבשה קליני, המורכב משילוב של ארבע שכבות: שכבת הקשר הפנימית של חומרים ניסיוניים, שכבת ביניים הפנימי של הסרט עמיד למים, ביניים שכבה חיצונית של גזה, שכבה חיצונית של טיח דבק. סרט עמיד למים שומר על הסביבה הפצע לח תוך מניעת זיהום חיידקי ומאפשר גזים לחלחל את הרוטב. השכבה החיצונית ביניים של גזה היה מוחל על הסרטים עמיד למים, מאובטח על ידי שכבה חיצונית של טיח דבק. בתום הניסויים, נבחנו סגירת הפצע אזור הפצע, ציון גודל הצלקת ונקובר (VSS). הדגימות של העור resected מההקרבה שלאחר כל בעלי חיים הוכנו בהיסטולוגיה והמוכתמות באמצעות hematoxylin מכתים אאוזין (הוא). אנטיבקטריאלי של כל ההלבשה בהקשר של ריפוי הפצע נבדק גם במודל זה. המחקר הקודם שלנו הוכיחה ריפוי פצע ביצועים במודל עכברים וחזירים באמצעות טכניקה כירורגית פולשנית7. היות שלא היו שש לשרוף פצעים על dorsum בתוך כל החזירים, כל ההלבשה ניסיוני היה נבדק, מוערכות כל העמדות כדי למזער את הטיית הקשורים פצע את תהליך הריפוי במקומות שונים על dorsum החזירים. לכן, הדגם החזירים של פציעה כוויות חמורות הוקמה במחקר זה מספק גישה חדשה על ההערכה של רטבים קליניים ואסטמה ומקילה על ההתפתחות של טיפול הרומן על הפגיעה צריבה. מחקר זה מספק כלי חיוני לחשוף הפתופיזיולוגיה של כוויות ריפוי הפצע.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הליכים הכוללים נושאים בעלי חיים אושרו על ידי ועדת אכפת לי חיה-המרכז הרפואי של הביטחון הלאומי, טייוואן (R.O.C). מחקר זה נערך במרכז חיות מעבדה במרכז הרפואי הביטחון הלאומי. חזיר במשקל בין 20 ל 25 ק ג יש כבר בהצלחה שעברו אינסטרומנטציה באמצעות פרוטוקול זה.
1. עיבוד של החיות לטיפול אנושי
2. הרגעה
3. צנרור ואוורור
4. הרדמה
5. עיקור של האתר כירורגית
6. לצרוב את הפצע הבריאה
7. הכנת רטבים
8. פוסט-לצרוב טיפול ומדידה
9. התפתחות חיידקים ניסויים של רקמות לאחר הצריבה
10. המתת חסד, קיבוע הרקמה
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
צריבה משך 30 שניות על ידי ברזל חמה הביא את הפצעים שהיו עגול עם שוליים מוגדרים היטב וחיוור בצורה אחידה עם שפה של אריתמה (איור 1D). בתוך כל בעל חיים, היו שישה פצעי כוויה על dorsum. הסידור של פצעים כוויות תוארה באיור1 K. פצעים כוויות היו מכוסים ברוטב כמוסות המכילות לחלוטין, להשתמש כדי להעריך את העומק של היווצרות צלקת בימים שלאחר צריבה 0, 7, 21, ו 42, epithelialization מחדש, כפי שנקבע על-ידי גרוס פיקוח. צריבה הפצעים היו epithelialize...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
המחקר הנוכחי הקימה מודל החזירים של פגיעה חמורה צריבה ובחן את הדגם בעזרת כמוסות המכילות ההלבשה. התוצאות שלנו מראים כי מודל זה חזיר יכול לשמש למעקב אחר ביצועי קליני של רטבים ניסיוני, כולל מאפיין בקטריאלי. ריפוי קצב סגירת הפצע, אנטיבקטריאלי הפצע נותחו גם באמצעות מבחן מוכתמים, ואנטי -בקטריאלי VSS, H & E. השימוש של דגמים בעלי חיים צריבה פותחה ככלי חשוב כדי לסקור את הפתופיזיולוגיה של צריבה פציעה. ישנם יתרונות ביולוגי מסוים של שימוש חולדות נושאים ניסיוני, כולל המספר הגבוה של ריאגנטים ספציפיים עכברוש, בהיבטים של קבלת העכברים הטר...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
המחברים אין לחשוף.
מחקר זה נתמך על ידי מענק של החולים הכללי Tri-שירות; המרכז הרפואי של הביטחון הלאומי, טייוואן (TSGH-C107-042); משרד המדע, הטכנולוגיה, טייוואן (רוב-014 106-2314-B-016); ואת המרכז הרפואי הביטחון הלאומי (MAB-106-055; MAB-106-010; MAB-107-064).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| <חזק>הרגעה: | |||
| קטמין | מריאל | 2528 ESP | 10 מ"ל בקבוקון |
| אזפרון | סין כימיקלים ותרופות | 47W406 | 100 מ"ל בקבוקון |
| אטרופין | עבודות כימיות מזרחיות | IN120802 | בקבוקון 1 מ"ל |
| <חזק>הרדמה: < / חזק> | |||
| טילטמין + זולאזפם | Virbac | BC91 | בקבוקון 5 מ"ל |
| איזופלורן | בקסטר | N002A225 | 100 מ"ל בקבוקון |
| <חזק>ניתוח: < / חזק> | |||
| קוצץ שיער | Moser | - | - |
| תמיסת קרצוף יוד פובידון | כוכב אי פעם | HA161202 | 4 ליטר |
| חבית ברזל שונה | - | -- | |
| 0.9% תמיסת מלח | CHI SHENG | KC130 | 500 מ"ל בקבוקון |
| גזה | מרכז חבישות כירורגיות בסין | MO15900080 | 10 x10 ס"מ |
| CAPS | CoreLeader Biotech Co., Ltd, טאיפיי, טייוואן | - | - |
| נייר סרט | 3M | NDC-8333-1530-01 | 2.5 ס"מ x 9.1 מ' |
| סרט עמיד למים | 3M | NDC-8333-1600-40 | 10 ס"מ x 10 מ' |
| טיח דבק | BH1426015 | כימי צעיר | 10 ס"מ x 10 מ |
| <חזק>דיסקציה: < / חזק > | |||
| זוג מספריים ישרים חדים / קהים סטנדרטיים (14 ס"מ) | מכשירי Shinetec | ST-S114 | - |
| הלסטד-מוסקיטו (12.5 ס"מ) | מכשירי Shinetec | ST-H012-ידית | |
| (# 4) | מכשירי Shinetec | ST-H004-להב | |
| כירורגי(#21) | מכשירי Shinetec | ST-B021 | - |
| <חזק>לאחר קיבוע & אחסון: | |||
| 50 מ"ל צינור צנטריפוגה מפלסטיק | Falcon | 352070-10 | |
| % פורמלין ניטרלי חומצי | Leica | 3800604EG | - |
| <ניסויי גידול חיידקים חזקים> | |||
| צלחת אגר דם (BAP) (TSA עם 5% דם כבשים) | CMP-90 | מ"מ מונו |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.