מאמר שיטה

המדידה האקוקרדיוגרפית של פרמטרים של הימני החדרית בעכבר

DOI:

10.3791/58021

⸱

27 באפריל 2019

 ,  , 
1Ludwig Boltzmann Institute for Lung Vascular Research, 2Department of Physiology, Otto Loewi Research Center, Medical University of Graz

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כאן אנו מתארים ומשווים שתי עמדות לקבלת השקפה של ארבעה קאמריים בעכברים. תנוחות אלה מאפשרות את כימות התפקוד הימני של הפונקציה, לספק תוצאות דומות, ניתן להשתמש לסירוגין.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

בתפקוד הדיאסטולי היא תכונה בולטת של הימין הנכון (RV) שיפוץ הקשורים בתנאים של עומס יתר של לחץ. עם זאת, הפונקציה RV הדיאסטולי מכמת לעתים נדירות במחקרים ניסיוניים. זה יכול להיות בגלל הקשיים הטכניים בהדמיה של הקרוואן בנוף הרשמי ארבע-קאמרית של מכרסמים. כאן אנו מתארים שתי תנוחות הקלה על ההדמיה של השקפה הארבעה קאמרית הרשמי בעכברים כדי להעריך את הפונקציה RV הדיאסטולי.

התצוגה הרביעית-קאמרית מופעלת על-ידי הטיית פלטפורמת קיבוע העכבר לשמאל ולאי (LeCa) או לימין ולגולגולת (ריצ'ר). שני המיקומים מספקים תמונות של איכות דומה. התוצאות של הפונקציה RV הדיאסטולי שהתקבלו משתי מיקומים אינם שונים באופן משמעותי. קל לבצע את שני המיקומים זהובה. פרוטוקול זה ניתן לשלב בפרוטוקולים שפורסמו ומאפשר חקירות מפורטות של הפונקציה RV.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

בתפקוד הדיאסטולי היא תכונה בולטת של הנכון של המוח הימני (RV) שיפוץ1 והוא משויך עם עומס הלחץ בתנאים2. אקו-קרדיוגרפיה (אכאוקg) ניתן להשתמש לאפיון של בתפקוד הדיאסטולי של RV3,4. למרות ההתפתחויות האחרונות באקו בעלי חיים קטנים, מדידות של פרמטרי דיאסטולי מדווחים לעתים נדירות. לעומת זאת, המידות של הפונקציה הסיסטולי משמשות רבות לאפיון עכברים טרנסגניים5, כמו גם להערכת תגובת הטיפול6.

זה יכול להיות מוסבר בחלקו על ידי הקשיים במדידה של הפרמטרים הדיאסטולי מהנוף ארבעה הקאמרית הרשמי. ויזואליזציה של הלב בתנוחה זו ניתן להקל על ידי הטיית פלטפורמת הקיבעון LeCa או ריצ'ר. גם אם נעשה שימוש במניפולציות האלה, echocardiographers לא תדווח עליהם בכתבי היד4,7. לכן, לא ברור אם מניפולציות אלה מספקות תוצאות דומות. יתר על כן, זה גם מונע התפתחות של מינוח מתוקננת של מיקום זה עבור עכברים.

מטרת מחקר זה הייתה לתאר שתי עמדות עבור הדמיית תצוגה ארבע-קאמרית ולהשוות את תוצאותיהם. כדי לקבוע את ההבדלים בין שתי התנוחות, יש לנו מנוצל העכבר פסי עורק הריאות (PAB) מודל, שבו הקליפ טנטלום מוביל לחסימה חלקית של עורק הריאות. . ותפקוד לקוי של החדר הימני פרטים מלאים על פעולת ה-PAB ניתן למצוא בעבודהשפורסמה בעבר. עכברים מופעלים, שבו הקליפ הוצב ליד עורק הריאות, שימשו להשוואה. החקירות של אפעה בוצעו שלושה שבועות לאחר הניתוח באמצעות מערכת הדמיה עם ראש הסריקה 30 MHz (ראה טבלת חומרים עבור שניהם). מינוח לתיאור המיקומים והכיוונים בין העכבר לבין קרן האולטרסאונד משמש כמתואר על ידי ג'ואו ואח '7.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחקר בוצע על פי תקנות לאומיות לניסויים בבעלי חיים והוראת האיחוד האירופי 2010/63. הכנת ציוד כמתואר בעבר על ידי בריטני et al.8.

1. הכנת העכבר

  1. השיגו 12 עד 13 שבוע גברים C57Bl6/J עכברים והבית אותם עם 12 h מחזור אור/כהה, בטמפרטורת חדר קבוע, עם גישה למעלה libitum לאכול מעבדה רגילה ומים, עד תחילת הניסוי.
  2. מורדם העכבר באמצעות הרדמה כללית אושרה על ידי המכון ולבדוק את היעדר תגובה צביטה הבוהן. תחת הרדמה קלה עם isofלוריאן 0.8%-1.2%, לתקן את העכבר על מצע מחומם. החל ג'ל אלקטרודה על הגפיים שלו על הניטור המתמשך של קצב הלב והטמפרטורה שלו.
  3. להסרת שיער החזה של העכבר באמצעות קרם אפילציה. כדי להפחית את הלחץ על החזה שלה, לא להחיל את ג'ל צימוד אולטרסאונד ישירות על החזה; ליתר דיוק, להחיל שכבה של ג'ל על קצה התמר.

2. רכישת תמונה

  1. השקפה של ארבעה קאמריים עם זווית שמאלית וזנב של הרציף
    1. לאחר הכנת העכבר, שאיפה את הרציף שמאלה בשעה 10 ° – 15 ° ולאחר מכן הנחת 10 ° – 15 °.
    2. הצב את המתמר מעל הפיסגה עם מישור ההדמיה ~ 45 ° למישור הקורולי והציר המרכזי של קרן האולטרה-סאונד בבימויו של הגולגולת, האחורי, ושמאלה כדי לקבל את התצוגה הרביעית קאמרית. לחץ על לחצן מצב b כדי להפעיל את התמונה במצב b/דו-ממדי.
      הערה: התמר יכול להיות מוחזק באופן ידני או קבוע על ידי שלב. המונח "B-mode" מגיע ממערכת הדמיה שהיתה בשימוש במקום המונח המוכר יותר "דו מימדי" (2-D) והוא משמש לאורך כל הפרוטוקול.
    3. חפש את המראה של המבנים הבאים בחלון האקוסטי: החדר השמאלי (LV), אטריום שמאל (לוס אנג'לס), הקרוואן, האטריום הימני (RA), צניפי שסתום (MV), ואת תלת-צניפי שסתום (טלוויזיה).
    4. לתמרן את מישור ההדמיה במישור הקורילי ולסובב שעון-ונגד כיוון השעון סביב הציר המרכזי עד שני החדרים הם דמיינו בממד הארוך ביותר שלהם הן אטריה גלויים. זוהי ההשקפה הארבע-קאמרית (איור 1).
    5. לחץ על הלחצן Cine store כדי לשמור את ההקלטה.
    6. לחץ על לחצן הסריקה/הקפאה כדי להשהות את המערכת.
  2. מדידת מהירויות זרימת הדם הtranstricuspid
    1. לחץ על לחצן הסריקה/ההקפאה כדי להפעיל את המערכת.
    2. לחץ על לחצן כיסוי מספר פעמים כדי להפעיל את אמצעי האחסון לדוגמה עבור pw (גל פעמו) מצב.
    3. בזמן שמירה על התצוגה המתקבלת ארבע-קאמרית, השתמש בכדור העקיבה כדי למקם את נפח המדגם בפתיחת השסתומים התלת-צניפי למדידת מהירויות הזרימה הנכנס (E ומהירויות שיא).
    4. לחצו על הלחצן ' מצב Pw ' למדידת מהירויות הזרימה הנכנס (E ומהירויות שיא).
      הערה: מכיוון ששסתומים תלת-צניפי קשים להמחיש בתנוחה זו, ביצוע מדידות מספר מסייע ליישר כראוי את עוצמת הדגימה עם זרימת הדם. בצע את דגימת דופלר עם זווית השכיחות הקטנה ביותר בין קרן דופלר לכיוון זרימת הדם. הפרופיל המתקבל מזרימת הדם אמור להתאים לקריטריונים הבאים: 1) פרופיל זרימה בדומה לצורת M עם הפסגה הראשונה הנמוכה מהשניה; 2) אפנון הנשימה עם משרעת מוגברת על ההשראה; 3) משרעת מקסימלית של המהירויות במספר מדידות (איור 2).
    5. לחץ על הלחצן Cine store כדי לשמור את ההקלטה הממוטב.
    6. לחץ על לחצן הסריקה/הקפאה כדי להשהות את המערכת.
  3. מדידה של טיול סיסטולי של המטוס תלת-צניפי טבעתי (טאפסה)
    1. לחץ על לחצן הסריקה/ההקפאה כדי להפעיל את המערכת.
    2. עבור אל מצב B על-ידי לחיצה על לחצן מצב b . מניפולציות מסוימות על התמונה עשויות להיות נחוצות כדי להחזיר את הנוף הנכון לארבעה קאמריים.
    3. לחץ על לחצן כיסוי מספר פעמים כדי להפעיל את הנפח לדוגמה של מצב M. באמצעות כדור העקיבה, ליישר את הנפח לדוגמה עם החלק הרוחבי של תלת-צניפי lus השנתי. על-ידי משיכת הקצוות של הנפח לדוגמה באמצעות כדור העקיבה, ליישר את אורך הנפח לדוגמה כדי לכסות את משרעת כולה של תנועת הלב במהלך מחזור הלב.
    4. לחץ על לחצן מצב m כדי להפעיל מצב m. תנועות תלת-צניפי lus השנתי אמור להופיע גל (איור 2).
    5. לחץ על הלחצן Cine store כדי לשמור את ההקלטה.
    6. לחץ על לחצן הסריקה/הקפאה כדי להשהות את המערכת.
  4. מדידה של רקמה דופלר פרמטרים
    1. לחץ על לחצן הסריקה/ההקפאה כדי להפעיל את המערכת.
    2. לחץ על לחצן מצב b כדי להפעיל מצב b.
      הערה: מניפולציות מסוימות באמצעות שויון במישור הסובב ובשעון הרוטציה-וכנגד כיוון השעון סביב הציר המרכזי של התמונה, ייתכן שיהיה צורך להחזיר את הנוף הנכון של ארבעת הקאמריים.
    3. לחץ על לחצן שכבת-על במספר פעמים כדי להפעיל את עוצמת הדגימה עבור TDI (הדמיה דופלר של הרקמה). באמצעות כדור העקיבה, ליישר את הנפח לדוגמה עם החלק הרוחבי של תלת-צניפי lus השנתי, שם הקיר חינם RV יוצר זווית עם שסתום תלת-צניפי. על-ידי משיכת הקצוות של הנפח לדוגמה באמצעות כדור העקיבה, להתאים את הנפח לדוגמה כדי לכלול הן הסיסטולי ואת המיקומים קיצוניים הדיאסטולי של השנתי.
    4. לחצו על הלחצן ' רקמה ' להפעלת מצב TDI.
      הערה:       מעקב צהוב של הקלטת TDI מופיע בהתאם לקריטריונים הבאים: 1) הקלטה הדומה לצורת M הפוכה; 2) בבירור E ' ו ' פסגות במהלך דיאמו S ' שיא במהלך systole; 3) משרעת מקסימלית של המהירויות במספר מדידות (איור 2).
    5. לחץ על הלחצן Cine store כדי להקליט תמונה ממוטבת.
    6. לחץ על לחצן הסריקה/הקפאה כדי להשהות את המערכת.
  5. השקפה מארבע-קאמרית עם זווית ימנית וגולגולתית של הרציף
    1. שאיפה את הרציף ימינה ב 10 ° – 15 ° ולאחר מכן הגולגולת ב 10 ° – 15 °. בצע את המידות כפי שתוארו בסעיפים הקודמים עבור שלבי LeCa (שלבים 2.1, 2.2, 2.3 ו-2.4).
      הערה: במהלך החקירה, מומלץ להיות מרוצה בין 0 ל-1.2 כדי לשמור על קצב לב העכבר ב-400 – 440. בטווח זה, פסגות נפרדות של זרימת הדם transtricuspid ורקמות דופלר (DTI) המהירויות הן מדידה. כדי למנוע את השפעת אובדן החום על הימודינמיקה, הנתונים נרשמים והניתוח מבוצע במצב לא מקוון. רק אותות שהתקבלו בתפוגת הסוף משמשים לניתוח. המידות של 3-5 פעימות לב ממוצעים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

התצוגה הרביעית-קאמרית קשה להשגה בעכברים. לכן, מניפולציות על מיקום הפלטפורמה יכול לעזור להמחיש את הלב על ידי שינוי מיקומו בחזה. הטיית הפלטפורמה שמאלה וימינה שיפרה את החלון האקוסטי וסיפק תמונות של איכות דומה במצב B (איור 1). לאחר קבלת המיקומים הנכונים, מדידות ב-PW-, M-, ו-TDI-מצבי סיפק תמונות של איכות דומה (איור 2). המדידה של הפרמטרים דיאסטולי בוצעה על מזויפים ו-PAB מופעלים עכברים (טבלה 1). שני המיקומים (ריצ'ר ו Le...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הפונקציה של RV אקו לב והערכת ממדים ממיקומים parasternal תוארו היטב. לעומת זאת, העמדה האפיical בהאקו העכבר הוזפה חלקית עקב קשיים טכניים. באמצעות מיקום פלטפורמה אופקית, קשה להשיג חלון אקוסטי מספיק לדימות תצוגה של ארבעה קאמריים. כדי להקל על הדמיה של תנוחה זו, הפלטפורמה יכולה להיות מוטה שמאלה, מניפולציה דומה מיקום צד שמאל של חולים. זה צריך להביא למיקום שמאלי ומיקום מעולה יותר של הלב, ובכך לשפר את החלון האקוסטי. לכן, LeCa היא העמדה הסטנדרטית שלנו להדמיה הדמיית. עם זאת, בתוך כ 30% – 35% של עכברים, איכות התמונה במיקום זה יכול ל...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

. למחברים אין מה לגלות

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחקר מומן על ידי מכון לודוויג בולצמן למחקר כלי דם ריאה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
ראש סריקה RMV-707B 30 מגה-הרץVisual SonicsP/N 11459ראש סריקת עכבר
VisualSonics Vevo 770® מערכת הדמיה ברזולוציה גבוההVisual Sonics770-230מכונת אולטרסאונד
קרם אפילציה Veet לעור רגישVeet 07768307 
סרט כירורגי Durapore 3M3M Deutschland GmbH1538-1לקיבוע
Askina Brauncel ספוגיות תאיתB.Braun9051015
ג'ל אולטרסאונד AquasonicParker Laboratories Inc.BT025-0037L
אלקטרודה ג'לGE מערכות רפואיות טכנולוגיות מידע בע"מ2034731-002חל על הגפיים לניטור א.ק.ג וקצב לב
מחמם ג'ל ThermasonicParker Laboratories Inc.82-04-20כדי להפחית את אובדן החום לחמם את ג'ל האולטרסאונד לפני השימוש

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Egemnazarov, B., Crnkovic, S., Nagy, B. M., Olschewski, H., Kwapiszewska, G. Right ventricular fibrosis and dysfunction: Actual concepts and common misconceptions. Matrix Biology: Journal of the International Society for Matrix Biology. 68-69, 507-521 (2018).
  2. Rain, S., et al. Right ventricular diastolic impairment in patients with pulmonary arterial hypertension. Circulation. 128, 1-10 (2013).
  3. Egemnazarov, B., et al. Pressure overload creates right ventricular diastolic dysfunction in a mouse model: assessment by echocardiography. Journal of the American Society of Echocardiography. 28, 828-843 (2015).
  4. Crnkovic, S., et al. Functional and molecular factors associated with TAPSE in hypoxic pulmonary hypertension. American Journal of Physiology. Lung Cellular and Molecular Physiology. 311, 59-73 (2016).
  5. Shi, L., et al. miR-223-IGF-IR signalling in hypoxia- and load-induced right-ventricular failure: a novel therapeutic approach. Cardiovascular Research. 111, 184-193 (2016).
  6. de Raaf, M. A., et al. Tyrosine kinase inhibitor BIBF1000 does not hamper right ventricular pressure adaptation in rats. American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 311, 604-612 (2016).
  7. Zhou, Y. Q., et al. Comprehensive transthoracic cardiac imaging in mice using ultrasound biomicroscopy with anatomical confirmation by magnetic resonance imaging. Physiological Genomics. 18, 232-244 (2004).
  8. Brittain, E., Penner, N. L., West, J., Hemnes, A. Echocardiographic assessment of the right heart in mice. Journal of Visualized Experiments. (81), e50912(2013).
  9. Kitchen, C. M. Nonparametric vs parametric tests of location in biomedical research. American Journal of Ophthalmology. 147, 571-572 (2009).
  10. Yan, F., Robert, M., Li, Y. Statistical methods and common problems in medical or biomedical science research. International Journal of Physiology, Pathophysiology and Pharmacology. 9, 157-163 (2017).
  11. Guihaire, J., et al. Non-invasive indices of right ventricular function are markers of ventricular-arterial coupling rather than ventricular contractility: insights from a porcine model of chronic pressure overload. European Heart Journal Cardiovascular Imaging. 14, 1140-1149 (2013).
  12. Sareen, N., Ananthasubramaniam, K. Strain Imaging: From Physiology to Practical Applications in Daily Practice. Cardiology in Review. 24, 56-69 (2016).
  13. Thavendiranathan, P., et al. Use of myocardial strain imaging by echocardiography for the early detection of cardiotoxicity in patients during and after cancer chemotherapy: a systematic review. Journal of the American College of Cardiology. 63, 2751-2768 (2014).
  14. Sengelov, M., et al. Global Longitudinal Strain Is a Superior Predictor of All-Cause Mortality in Heart Failure With Reduced Ejection Fraction. JACC: Cardiovascular Imaging. 8, 1351-1359 (2015).
  15. Silvani, A., et al. Physiological Mechanisms Mediating the Coupling between Heart Period and Arterial Pressure in Response to Postural Changes in Humans. Frontiers in Physiology. 8, 163(2017).
  16. Mohan, M., Anandh, B., Thombre, D. P., Surange, S. G., Chakrabarty, A. S. Effect of posture on heart rate and cardiac axis of mice. Indian Journal of Physiology and Pharmacology. 31, 211-217 (1987).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Apical Four Chamber ViewTricuspid Annular Plane ExcursionBM

מאמרים קשורים