הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

השימוש השתלת תא גזע Hematopoietic להעריך את מקורם של התסמונת המיאלודיספלסטית

9.1K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/58140

⸱

3 באוקטובר 2018

 ,  ,  , 
1Genetics Branch, Center for Cancer Research, National Cancer Institute, National Institutes of Health, 2LGI Flow Cytometry Core Facility, Center for Cancer Research, National Cancer Institute, National Institutes of Health

במאמר זה

סיכום

אנו מתארים את השימוש השתלת תא גזע hematopoietic (HSCT) כדי להעריך את פוטנציאל ממאיר של תאים מהונדסים גנטית hematopoietic. HSCT שימושית לצורך הערכת שונים תאים ממאירים hematopoietic ויוו , כמו גם יצירת קבוצה גדולה של עכברים עם תסמונות myelodysplastic (MDS) או לוקמיה להעריך טיפולים חדשניים.

תקציר

תסמונות Myelodysplastic (MDS) הם קבוצה מגוונת של תא גזע hematopoietic הפרעות המוגדרות על-ידי hematopoiesis לא יעילה, cytopenias דם היקפיים, דיספלסיה, נטייה לשינוי כדי לוקמיה חריפה. העכברים הטרנסגניים NUP98-HOXD13 (NHD13) מסכם את הדברים MDS האנושי במונחים של דם היקפיים cytopenias דיספלזיה, טרנספורמציה כדי לוקמיה חריפה. אנחנו בעבר הראו כי MDS יכול להיות מועבר מן עכבר מהונדסים עם MDS פראי-סוג הנמענים על-ידי משתילים MDS תאים במח העצם nucleated (BMNC). יותר מבין בבירור את התא MDS ממוצא, פותחו גישות להשתיל ספציפי, immunophenotypically מוגדרת hematopoietic קבוצות משנה. במאמר זה, אנו מתארים את תהליך בידוד משתילים אוכלוסיות ספציפיות של גזע hematopoietic, ובתאים. בעקבות ההשתלה, נתאר גישות כדי להעריך את היעילות של השתלת ויכולת ההתמדה של התאים MDS התורם.

מבוא

תסמונות Myelodysplastic (MDS) מייצגים קבוצה מגוונת של הפרעות במחזור הדם המשובטים מאופיין hematopoiesis לא יעילה, ראיות מורפולוגיות של דיספלסיה, נטייה לשינוי לוקמיה מיאלואידית חריפה (AML)1,2 3, ,4. Hematopoiesis לא יעיל מזוהה כמספר מעצר ההבשלה במח העצם, ותוצאות דם היקפיים cytopenias למרות במקרי מח עצם1,3. השכיחות של MDS הוערך בדרכים שונות כמו 2-12 מקרים לכל 100,000 אנשים מדי שנה בארצות הברית, השכיחות של MDS עולה עם הגיל, שהופך את תנאי חשוב להבין לאור הזדקנות האוכלוסייה בארה ב3, 5. למרות ברוב המקרים של MDS אין אטיולוגיה ברורה, בחלק מהמקרים MDS הם חשבו להיות עקב חשיפה לסוכנים genotoxic ידועים, לרבות ממיסים כמו בנזן, כימותרפיה לסרטן6.

בדרך כלל חולי MDS שרכשו מוטציות בגן התאים MDS7. למרות נדיר יחסית, מספר חולי MDS שרכשו translocations כרומוזומלית מאוזנת המערבים גנים כגון NUP98, EVI1, RUNX1 ו- MLL (http://cgap.nci.nih.gov/Chromosomes/Mitelman). המעבדה שלנו יש עניין ארוכת שנים translocations כרומוזום, שכרוכים ג'ין NUP988. העכברים הטרנסגניים כך מפורשת transgene NUP98-HOXD13 (NHD13) מוסדר על ידי האמרגן Vav1, משפר אלמנטים להציג את כל התכונות העיקריות של MDS, כולל cytopenias דם היקפיים, ראיות מורפולוגיות של דיספלסיה, וטרנספורמציה ל AML9 .

למרות MDS זוהו למעלה מ-60 שנה10, נחשבים הפרעה בתאי גזע המשובטים, מאמצים engraft התא האנושי MDS בעכברים immunodeficient לא הצליחו במידה רבה, כי התאים MDS engraft גרוע11, 12,13,14 ו העכברים אינם מפתחים מחלה קלינית. במאמץ לזהות אילו תאים hematopoietic יכול לשדר MDS, אנחנו הפך למודל NHD13, והראה כי אנחנו יכולים engraft MDS כישות המחלה הראה את כל התכונות קרדינל של MDS האנושי, כולל cytopenias דם היקפיים, דיספלסיה, ו טרנספורמציה AML15. בדו ח זה, אנו מציגים את הפרטים הטכניים של ניסויים אלה, כמו גם גישות נוספות fractionate hematopoietic גזע ותאים קודמן (HSPC), בניסיון לזהות תאים ייזום-MDS.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

בעלי חיים בהליכים המתוארים במאמר זה אושרו על-ידי המכון הלאומי לסרטן ב Bethesda חיה אכפת והוועדה שימוש ולאחר לציית למדיניות הנכלל מדיניות שירות בריאות הציבור על טיפול אנושי, שימוש של חיות מעבדה, חוק צער בעלי חיים, המדריך עבור טיפול והשתמש של חיות מעבדה.

1. תא הכנה

  1. מח עצם האיסוף nucleated תא (BMNC)
    1. השתמש רק סטרילי חומרים. לחטא כלי שמיש מחדש באמצעות של תא לחץ אדים. לרכוש את מחטי מזרקים, וואר פלסטיק במיכלים סטריליים לשימוש יחיד. ביצוע מניפולציות כל חיה ותא Class II, סוג A2 הקבינט בטיחות ביולוגית.
    2. להכין BMNCs ב mL 14 סיבוב התחתית התחתונה המכיל 3 מ"ל של HF2 (של האנק מאוזנת תמיסת מלח בתוספת 2% סרום שור עוברית).
    3. המתת חסד C57Bl6 בדרך כלל 2-6 חודשים, גיל התורם עכברים (חיובי עבור CD45 אלל CD45.2), באמצעות תא2 CO.
    4. לחטא את הגווייה העכבר ע י ריסוס אתנול 70% על פני הגוף כולו עם בקבוק ספריי. לקלף את העור מן הרגליים, מהאגן עד הקרסול.
    5. הסר את femora ואת tibiae הגווייה באמצעות מספריים סטרילי (ישר, חד/חד, 11.5 ס מ) וחדים (Graefe, משונן, עצה 0.8 מ מ רוחב). חתוך את השרירים המחוברים באופן ברור.
    6. חותכים את הקצוות לקרע, בשוקיים עם המספריים. מחזיקים בשוקיים עם מלקחיים, הכנס מזרק 27-מד 3 מ"ל המכילה 2.5 מ של HF2 לתוך חלל מח הטיביאלי בקצה הדיסטלי של עצם השוקה (קרסול). לרוקן את התאים במח העצם של עצם השוקה באמצעות לחץ עדין לתוך mL 14 סיבוב התחתית התחתונה.
      1. חזור על עצם השוקה אחרים.
    7. חותכים את הקצוות הפרוקסימלית ו דיסטלי של עצם הירך עם מספריים. סומק חלל מח עצם הירך על ידי החדרת מחט 20 גאייג-לצרף מזרק 3 מ"ל המכילה 2.5 מ של HF2 בתוך הסוף דיסטלי של חלל מח עצם הירך והחלת לחץ עדין על המזרק.
      1. חזור על עצם הירך אחרים, איסוף כל מח עצם בשני tibiae, femora ב mL 14 באותו סיבוב התחתית התחתונה.
    8. לפזר את המסה מח על ידי כ רפה בעברית למעלה ולמטה מספר פעמים עם 20 גאייג-באותה המחט מחוברת המזרק 3 מ.
  2. נוגדן מכתים של BMNC
    1. הרוזן BMNC. הוסף 20 µL של פתרון חומצה אצטית 3% µL 20 של ההשעיה BMNC שנוצר בשלב 1.1.8. לאחר מכן, לספור באמצעות hemocytometer של מיקרוסקופ הפוכה.
    2. גלולה של BMNC על ידי צנטריפוגה עדין ב g x 450 דקות 5-4 מעלות צלזיוס. Resuspend בגדר עם HF2 באמצעות 90 µL לכל 107 תאים ולהוסיף 10 µL של נוגדנים נגד השושלת biotinylated קוקטייל התליה תא.
    3. לאחר המקננת כעשרים דקות ב 4 ° C, לשטוף את התאים ויטראז'ים עם 3 מ ל תמיסת באגירה פוספט (PBS).
    4. Resuspend את BMNC עם µL 100 של HF2 לכל 107 תאים. להוסיף 2 µL של allophycocyanin (APC) מצומדת נוגדן אנטי ביוטין כדי התליה תא, ואחריו הדגירה ב 4 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות.
    5. לשטוף את BMNC ויטראז'ים עם 3 מ"ל של PBS, resuspend את BMNC עם HF2 בתוספת 0.2 µg/mL של יודיד propidium (PI) עבור מיון תא cytometry זרימה.
  3. Flow cytometry מיון תא של BMNC
    1. כיילו סדרן התא cytometry זרימה. למטב את כל צינורות האופטיקה (PMTs), פיזור ופרמטרים פלורסצנטיות באמצעות תאים וללא רבב ולהגדיר בתוך הטווח. ליניארית של כל גלאי.
    2. להכין וללא רבב, מוכתם PI, APC שכותרתו שושלת התאים קוקטייל במקביל מהשלב 1.2. ניתוח ספקטרלי לפיצוי.
    3. תפלה כפיל תאים על-ידי gating רציפים של FSC-H נגד האס-H, 640-האס-A לעומת 640-האס-H ו- 640-האס-S לעומת 640-האס-וו
    4. הכללת תאים nonviable באמצעות PI נרגש 561 ננומטר, פליטה שנאסף עם מסנן לעבור הלהקה 614/20. לרגש השושלת APC המסומנת תאים על פליטת nm ולאסוף 640 671/30 מסנן.
    5. להקליט פלורסצנטיות ערכים כמו מתח גובה ולאסוף לפחות 100,000 אירועים בקבצי נתונים מצב הרשימה כדי להמחיש את אוכלוסיות ימוין.
    6. חישוב פיצויים ספקטרלי לאחר שרכשה שלוש דוגמאות של 10,000 תאים עבור הגורמים הבאים: ללא תווית תאים PI שכותרתו התאים, נוגדנים נגד השושלת קוקטייל מצומדת עם APC שכותרתו תאים.
    7. להגדיר שלושה אזורים כדי למיין השושלת שלילי (LN), שושלת היוחסין חיובי (LP) עם עוצמת קרינה פלואורסצנטית דים (LP1), והאוכלוסייה LP עם פלורסצנטיות בהיר (LP2) לתוך צינורות 5 מ"ל המכילה 0.5 מיליליטר 10% FBS מדיה.
    8. סוג תאים באמצעות טיפה אחת אופפים ולטהר את מצב הביטול.
    9. מבצע ניתוח מיון פוסט עם תאים סך 1,000 כל מדגם ממוינים כדי לאשר את הטוהר ואת הכדאיות של תאים ממוינים.
    10. איסוף תאים ממוינים על ידי צנטריפוגה-g x 450 עבור 5 דקות ב 4 ° C, resuspend תא גלולה עם 0.5 מ של HF2.
    11. לאשר מספר עם hemocytometer ו- Trypan blue ממוינים התא. התאם מספר תאים עם HF2 עבור השתלת.
      הערה: קשת רחבה של אוכלוסיות BMNC ניתן לבודד עבור השתלת באמצעות שילובים נוספים של נוגדנים fluorochrome מצומדת בשלב 1.2.2 לעיל.

2. הנמען עכברים והכנה השתלת תא גזע Hematopoietic (HSCT)

  1. הכנה של השתלת הנמענים
    1. לשמור על וטרינרי ועל גידול טיפול congenic הנמען עכברים (B6-LY5.1/Cr, CD45.1) במתקן פתוגן מסוים (SPF) חינם בעלי חיים.
    2. טיהור מניעתי של המסלול במערכת העיכול, מספקים במים סטריליים המכיל 100 מ ג/ליטר של ציפרופלוקסאצין לנמענים עבור 7 ימים לפני מנה קטלנית (9 Gy) הקרנה, לשמור למשך 14 ימים בעקבות הקרנה.
    3. מספקים של הקרנה מנה קטלנית (9 Gy) ממקור מדעי המחשב כדלקמן. השתמש מפעיל מיומן, מוסמך במדעי המחשב. להגדיר את המכשיר מקור Cs לספק 70 cGy/min גמא גופית. מקום 10 עכברים בעל אישית מעוצבת והכנס את המחזיק אל החדר בעוצמה. לספק 9 Gy גופית 13 דקות ולחזור העכברים לכלובים.
  2. השתלת תא גזע hematopoietic
    1. מערבבים פראי סוג (WT) BMNC מ- congenic הנמען עכבר (B6-LY5.1/Cr, CD45.1) במינון תא של 2 x 105 תאי עכבר עם 2 עד 5 x 104 תאים של הבדיקה מטוהרים ש-BMNC מוכן עם לזרום cytometry מיון כמו שמתואר 1.3 לעיל. מערבבים תאים במזרק אותו.
      הערה: BMNC WT לספק קרינה ממעט-אפקט העכבר הנמען, לאפשר להישרדותה של העכבר הנמען אם התאים הבדיקה אינם תומכים hematopoiesis. BMNC WT השתמשו בסוג זה של הניסוי אקספרס אלל CD45.1, וניתן ובכך מכובד מתאי הבדיקה באמצעות נוגדנים אשר להפלות בין CD45.1 לבין CD45.2. התאים WT מוניטור מכונים "המסייע תאים", "קרינה ממעט תאים" או "המתחרה תאים".
    2. לכוון את עוצמת הקול של התא תערובת כדי µL 200 לכל נמען באמצעות HF2 סטריליות להקלה על הזריקה.
    3. השתלות של תערובות תא ועד לקרינה אולם עכברים נמען באמצעות הזנב תוך ורידי וריד להזרקה באמצעות מזרק 1 מ"ל ואת מחט בקוטר 28, בתוך 24 שעות של הקרנה. מקום זנב העכבר תחת מנורת חימום, כמו חום מוביל אל הזנב התרחבות וריד.
      הערה: המתת חסד כל העכברים הנמען בסוף המחקר ולהעריך את התקדמות המחלה על ידי necropsy, היסטולוגיה cytometry זרימה.

3. engraftment Assay באמצעות Cytometry זרימה

  1. כדי להעריך את התורם תא engraftment, לאסוף דם היקפיים (PB) העכברים הנמען-בשבוע ה-6, בשבוע ה-12, ובשבוע ה-16 לאחר ההשתלה.
  2. לחמם את הנמענים בכלוב עם מנורת החימום עבור 1 דקות והניחו העכבר לתוך restrainer.
  3. לחתוך את וריד הזנב עם איזמל (להב 10, ידית האזמל #3) ולאסוף µL 100 של PB לכל נמען באמצעות צינור microcapillary המכילה EDTA בתור נוגדת קרישה.
  4. לחלק את PB שנאספו aliquots שווה שני על ידי הצבת 50 µL צינור microcentrifuge סטרילי. השתמש aliquot אחד עבור ספירת אוטומטיות דם (CBC) (מתבצעות בתוך ליבת Histopathology NCI) לשימוש נוגדן מכתימה את aliquot השנייה, flow cytometry.
  5. כדי לזהות engraftment התורם cytometry זרימה, lyse בתאי הדם האדומים (RBC) על-ידי הוספת 1 מ"ל של RBC היפוטוניק פירוק מאגר (8.29 g/L של NH4קלרנית, 1 g/L של KHCO3, 0.037 g/L של נה2EDTA, pH 7.2) µL 50 של PB שנאספו. מערבולת הדגימה כדי לערבב דגירה 10 דקות בטמפרטורת החדר.
  6. Centrifuge את lysed PB ב 4,600 x g עבור 1.5 מינימלית בקפידה וארוקן את תגובת שיקוע ולמחוק.
  7. חלקית לשבש בגדר תא על-ידי בעדינות הקשה או "מצליף" בתחתית הצינורית. להוסיף מ 1.3 ל- PBS לתוך בגדר הממוקמים צינור צנטריפוגה ב g 4,600 x עבור 1.5 מינימלית בקפידה וביופסיה, להשליך תגובת שיקוע.
  8. לשבש בגדר תא על-ידי הקשה או להכות אותך, וכן להוסיף 200 µL של HF2 בתוספת 5% עכברוש לנסיוב בגדר התא.
  9. מוסיפים נוגדן anti-CD45.2 (1 µL) מצומדת עם allophycocyanin (APC) כדי התליה תא. דגירה ב 4 מעלות צלזיוס לפחות 30 דקות, בקצרה מערבולת התערובת.
  10. לאחר ההכתמה, לשטוף את התאים פעמיים כמתואר לעיל, resuspend עם µL 400 של HF2 בתוספת 1 µg/mL של פאי.
  11. לאתר את engraftment באמצעות cytometer 4-צבע זרימה. לקבלת מידע נוסף על סוגי תאים בתוך הדם ההיקפיים על-ידי הוספת נוגדנים נוספים כדי לזהות סוגי תאים ספציפיים, כגון B או T לימפוציטים.
  12. רישום נתונים טורי engraftment באמצעות גיליון אלקטרוני כדי לאפשר ניתוח נוסף של נתונים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

אנו מראים דמויות נציג עבור התוצאות של מספר ניסויים. איור 1 מראה של cytometry זרימה נציג מיון הניסוי. במהלך התמיינות hematopoietic נורמלי, כמו התאים להיות מחויבים שושלת hematopoietic ספציפיים, הם רוכשים מגדיר-שושלת היוחסין סמני פני שטח התא, לאבד את פוטנציאל התחדשות עצמית. לכן, בעכברים פראי-סוג, התחדשות עצמית בתאי גזע מוגבל BMNC היוחסין-שלילי. בניסוי זה, אנחנו מיון BMNC ממח העצם NHD13 לתאי שושלת היוחסין-חיובית חיובי וגבוה שושלת היוחסין-שלילי, נמוכה. דייב תאים ו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

למרות MDS הפרעה בתאי גזע hematopoietic המשובטים, MDS "גזע", או תאים ייזום, לא עוד היה שאפיינו. אנחנו הפגינו בעבר כי MDS ניתן שיפותחו לעכברים WT באמצעות מח העצם של עכברים NHD13 מאת HSCT, המאופיין האנמיה, לויקופניה, נויטרופניה, ראיות מורפולוגיות של דיספלזיה15. בנוסף, מבחני איכלוס תחרותי מזוהה יתרון צמיחה של תאים ממח העצם NHD13 MDS. ממצאים אלה יחדיו, לרמוז קיומו של גזע MDS או תא ייזום. ניסויים נוספים נמצאים כעת בעיצומו, מכוון זיקוק immunophenotypic את המאפיינים של MDS ייזום תא15

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

אין לנו לחשוף.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי מגזר תוכנית המחקר של המכון הלאומי לסרטן, מכון הבריאות הלאומי (מענק המספרים זיא SC 010378 ו לפנה ס 010983).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
צינור תחתון עגול 14 מ"לפלקון352057
תמיסת המלח המאוזנת של האנקלונזה10-527F
נוגדן אנטי-CD45.2 SouthernBiotech1800-15LOT # A077-T044O
3 מ"ל מזרקמונו-ג'קט8881513934
מחט 27-G BD305109
מחט 20-GBD
305176 קוקטייל שושלתMiltenyi130-090-858LOT # 5170418221
נוגדנים נגד ביוטיןMiltenyi130-113-288LOT #
5171109046 1 מ"ל מזרקExcelint26027מנורת חימום מזרק אינסולין
Thermo Fisher ScientificE70001901
מכונת FACSCytecFACScan2 לייזרים, 5 גלאי צבע
מכשיר מיון FACSבקמן קולטרMOFLO ASTRIOS5 לייזרים, 23 פרמטרים, 6 מיון אוכלוסייה בו זמנית
Propidium IodideThermo Fisher ScientificP3566
Gamma Irradiatorהטוב ביותר TheratronicsGammacell 40
צינור איסוף דםRAM Scientific76011
נמען עכבריםצ'ארלס ריברB6-LY5.1 / Cr, CD45.1
NUP98-HOXD13 עכבריםn/aC57Bl / 6, CD45.2מושבה מתוחזקת בצינור
תחתון עגול NIH 5 מ"לFalcon352058

מקורות

  1. Corey, S. J., et al. Myelodysplastic syndromes: the complexity of stem-cell diseases. Nature Reviews Cancer. 7 (2), 118-129 (2007).
  2. Garcia-Manero, G. Myelodysplastic syndromes: 2015 Update on diagnosis, risk-stratification and management. American Journal of Hematology. 90 (9), 831-841 (2015).
  3. Heaney, M. L., Golde, D. W. Myelodysplasia. The New England Journal of Medicine. 340 (21), 1649-1660 (1999).
  4. Nimer, S. D. Myelodysplastic syndromes. Blood. 111 (10), 4841-4851 (2008).
  5. Aul, C., Giagounidis, A., Germing, U. Epidemiological features of myelodysplastic syndromes: results from regional cancer surveys and hospital-based statistics. International Journal of Hematology. 73 (4), 405-410 (2001).
  6. Pedersen-Bjergaard, J., Christiansen, D. H., Desta, F., Andersen, M. K. Alternative genetic pathways and cooperating genetic abnormalities in the pathogenesis of therapy-related myelodysplasia and acute myeloid leukemia. Leukemia. 20 (11), 1943-1949 (2006).
  7. Uy, G. L., et al. Dynamic changes in the clonal structure of MDS and AML in response to epigenetic therapy. Leukemia. 31 (4), 872-881 (2017).
  8. Gough, S. M., Slape, C. I., Aplan, P. D. NUP98 gene fusions and hematopoietic malignancies: common themes and new biologic insights. Blood. 118 (24), 6247-6257 (2011).
  9. Lin, Y. W., Slape, C., Zhang, Z., Aplan, P. D. NUP98-HOXD13 transgenic mice develop a highly penetrant, severe myelodysplastic syndrome that progresses to acute leukemia. Blood. 106 (1), 287-295 (2005).
  10. Block, M., Jacobson, L. O., Bethard, W. F. Preleukemic acute human leukemia. Journal of the American Medical Association. 152 (11), 1018-1028 (1953).
  11. Thanopoulou, E., et al. Engraftment of NOD/SCID-beta2 microglobulin null mice with multilineage neoplastic cells from patients with myelodysplastic syndrome. Blood. 103 (11), 4285-4293 (2004).
  12. Kerbauy, D. M., Lesnikov, V., Torok-Storb, B., Bryant, E., Deeg, H. J. Engraftment of distinct clonal MDS-derived hematopoietic precursors in NOD/SCID-beta2-microglobulin-deficient mice after intramedullary transplantation of hematopoietic and stromal cells. Blood. 104 (7), 2202-2203 (2004).
  13. Benito, A. I., et al. NOD/SCID mice transplanted with marrow from patients with myelodysplastic syndrome (MDS) show long-term propagation of normal but not clonal human precursors. Leukemia Research. 27 (5), 425-436 (2003).
  14. Medyouf, H., et al. Myelodysplastic cells in patients reprogram mesenchymal stromal cells to establish a transplantable stem cell niche disease unit. Cell Stem Cell. 14 (6), 824-837 (2014).
  15. Chung, Y. J., Choi, C. W., Slape, C., Fry, T., Aplan, P. D. Transplantation of a myelodysplastic syndrome by a long-term repopulating hematopoietic cell. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105 (37), 14088-14093 (2008).
  16. Pietras, E. M., et al. Functionally Distinct Subsets of Lineage-Biased Multipotent Progenitors Control Blood Production in Normal and Regenerative Conditions. Cell Stem Cell. 17 (1), 35-46 (2015).
  17. Yardeni, T., Eckhaus, M., Morris, H. D., Huizing, M., Hoogstraten-Miller, S. Retro-orbital injections in mice. Lab Animal. 40 (5), 155-160 (2011).
  18. Chung, Y. J., Fry, T. J., Aplan, P. D. Myeloablative hematopoietic stem cell transplantation improves survival but is not curative in a pre-clinical model of myelodysplastic syndrome. PLoS One. 12 (9), e0185219(2017).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

CD45 2
השימוש השתלת תא גזע Hematopoietic להעריך את מקורם של התסמונת המיאלודיספלסטית
צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.