מאמר שיטה

פרוטוקול קליני של ייצור רקמת שומן-Derived השבר בכלי הדם סטרומה עבור פוטנציאל התחדשות הסחוס

DOI:

10.3791/58363

⸱

29 בספטמבר 2018

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Mipro Medical Clinic, 2National Leading Research Laboratory, Department of Biological Sciences, Myongji University

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לייצר של רקמת שומן-derived סטרומה וסקולרית שבר ויישומו לשיפור הברך פונקציות על-ידי התחדשות רקמות הסחוס כמו בני אדם חולים עם דלקת מפרקים ניוונית.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

דלקת מפרקים ניוונית (OA) הוא אחד של הפרעות מתישה הנפוץ ביותר. לאחרונה, ניסיונות רבים נעשו כדי לשפר את הפונקציות של הברכיים באמצעות צורות שונות של גזע mesenchymal (MSCs). ב קוריאה, תרכיזים מח עצם ו חוט נגזר דם בתאי גזע אושרו על ידי המזון קוריאנית סמים המינהל (KFDA) עבור התחדשות הסחוס. בנוסף, כבר מותר של רקמת שומן-derived סטרומה וסקולרית שבר (SVF) על ידי KFDA לזריקות משותפת בחולים אנושיים. SVF נגזר רקמת שומן עצמיים מכיל מטריצה חוץ-תאית (ECM) בנוסף בתאי גזע mesenchymal. ECM מפריש ציטוקינים שונים, אשר, יחד עם חומצה היאלורונית (HA), טסיות דם עשיר פלזמה (PRP) מופעל על ידי סידן כלורי, עשוי לסייע MSCs כדי להתחדש הסחוס ולשפר את הברך פונקציות. במאמר זה הצגנו פרוטוקול לשיפור הברך פונקציות על-ידי התחדשות רקמות הסחוס כמו בחולים אנושיים עם OA. התוצאה של הפרוטוקול דווחה לראשונה בשנת 2011 ולאחריו מספר פרסומים נוספים. הפרוטוקול כרוך שאיבת שומן כדי לקבל lipoaspirates עצמיים מעורבבים עם collagenase. תערובת זו lipoaspirates-collagenase ואז לחתוך, הומוגני להסיר גדול סיבי רקמת זה ייתכן סותמים את המחט במהלך ההזרקה. לאחר מכן, התערובת מודגרת להשיג SVF נגזר רקמת שומן. וכתוצאה מכך נגזר רקמת שומן SVF, המכיל גם רקמת שומן-derived MSCs וגם שרידי ECM, מוזרק הברכיים של חולים, בשילוב עם HA ומופעל סידן כלורי PRP. כלולים שלושה מקרים של חולים שטופלו באמצעות פרוטוקול שלנו וכתוצאה מכך שיפור של כאבי ברכיים, נפיחות, טווח התנועה יחד עם המגנטית ראיות רקמת סחוס hyaline דמוי.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

גזע mesenchymal (MSCs) ידועים יש את היכולת להתחדש הסחוס1,2,3,4,5,6. הם יכולים לקבל בקלות ממקורות שונים: מח עצם, דם טבורי, רקמת שומן בקרב רבים אחרים. בין מקורות אלה, רקמת שומן הוא המקור היחיד שבו ניתן להשיג מספר מספיק של MSCs ללא כל הרחבה תרבות להתחדש הסחוס הגדרות קליניים7,8. מח עצם אוטולוגי סטרומה השבר בכלי הדם (SVF) ניתן להשיג בקלות גם כן. אולם, מספר תאי גזע הכיל במח המורחב-תרבות הוא נמוך מאוד7,8. דם טבורי עשוי להכיל מספר מספיק של MSCs. עם זאת, דם טבורי אינה מקור זמין SVF עצמיים.

שיטות רבות של רקמת שומן עיבוד כדי להשיג SVF זמינים עבור יישומים קליניים. בין אלה, השיטה של קבלת MSCs של רקמת שומן באמצעות collagenase, שפותחה ומאושר על-ידי צוק. et al. 5 , 6, מקובל מאוד. שיטה זו של שימוש collagenase שונתה ליישומים קליניים באורטופדיה. כדי להחיל הגדרות קליני, המערכת להיות מערכת סגורה כדי לשמור על העקרות תוך שמירה על הנוחות. שינוי מסוים אחד שהוצגו במאמר זה כרוך המגון lipoaspirates. Lipoaspirates בגודל קטן מתעכלים מהר יותר גדולים כי הם וכתוצאה מכך התפלגות לא אחידה של רקמת שומן יחסית. יתר על כן, אלה lipoaspirates בגודל גדול יותר עשויה לייצר סיבי הרקמות זה יכול סותמים את מזרקים ומחטים בעת ביצוע משותף זריקות9,10. על מנת למנוע בעיות אלה, lipoaspirates עשוי להיות הומוגני על ידי חיתוך לקמץ את lipoaspirates לפני הדגירה עם collagenase. SVF וכתוצאה מכך נגזר רקמת שומן עשויה להכיל יותר אחיד מטריצה חוץ-תאית (ECM) בהשוואה lipoaspirates שאינם הומוגני11. ה-ECM רעוע הכלול את SVF יפעלו כמו לגרדום12.

בשנת 2009, כבר מותר SVF נגזר רקמת שומן עצמיים על ידי המזון קוריאנית סמים המינהל (KFDA) כאשר מעובד בתוך מתקן רפואי עם עיבוד מינימלי על ידי רופא13. לאחר מכן, יש כבר מנוצל SVF נגזר רקמת שומן עצמיים כסוכן פוטנציאל לשיפור הפונקציות הברך בחולי דלקת מפרקים ניוונית (OA) על ידי פוטנציאל התחדשות רקמות הסחוס כמו10,14,15 , 16 , 17 , 18 .

בשנת 2011, פאק הראה לראשונה כי נגזר רקמת שומן בתאי גזע (השיקופיים) הכלול SVF רקמת שומן-derived יכול לשפר את הברך פונקציות פוטנציאל התחדשות רקמות הסחוס כמו בחולי OA אנושי כאשר הזריקו טסיות דם עשיר פלזמה (PRP) 14. בנוסף, פאק. et al. דיווחו על נתוני בטיחות בחולים 91 מעורבים 2013. את שיעור היעילות הממוצע דיווח נתוני בטיחות זה היה 67%15. כתוצאה מכך, מחקרים נוספים על ידי פאק. et al. הראה הברך משופרת פונקציות שעשויות להיות עקב התחדשות רקמות הסחוס כמו בחולים עם מניסקוס דמעה לבין chondromalacia patellae10,16,17 ,18. מבוסס על מאמרים דיווח, זה ידוע כי מספר תאי גזע הכלול 100 גרם של רקמת שומן מעובד על-ידי הפרוטוקול שהוצג במאמר זה עשויים לנוע בין 1,000,000-40,000,000 בהתאם המטופלים מאפיינים8, 19 , 20 , 21 , 22 , 23.

כאן, אנו מציגים את פרוטוקול קליני של OA בברך האדם באמצעות SVF נגזר רקמת שומן עצמיים עם HA, PRP מופעל עם סידן כלורי. הגרסה הראשונה של פרוטוקול קליני זה, הכוללים מערכת סגורה, ידנית כדי לשמור על העקרות, דווח ב- 201114. פרוטוקול זהה אופטימלי, שמירה על עקרות, ודיווח10,2013 ו ריו דה ז'ניירו15. . הנה, פרוטוקול ממוטבת מוצג. סקירה סכמטי של הפרוטוקול מוצג באיור1.

figure-introduction-1
איור 1: סקירה סכמטי של הפרוטוקול. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אישור והסכמה לדווח בעקבות הדו חות היו ויצטרף ועדת דירקטוריון סקירה מוסדיים האוניברסיטה Myongji (MJUIRB). יתר על כן, פרוטוקול קליני זה היה בהתאם להנחיות הצהרת הלסינקי ורגולציה KFDA. לקבלת מידע אודות הליכי, מידיעה ההסכמות התקבלו מן המטופלים.

1. שאיבת שומן

הערה: בצע עם סטרילי טכניקה.

  1. השתמש לקריטריוני ההכללה הבאה: MRI (1), עדות שלב 3 OA; (2) זכר או נקבה; (3) מעל גיל 18; (4) מספיק רקמת שומן (100-110 גר') עבור שאיבת שומן; (5) נכונות להמשיך עם התערבות כירורגית; (6) כשל של ניהול שמרנית; (7) כאב השבתת מתמשך.
  2. השתמש הקריטריונים הדרה הבאים: (1) מחלות דלקתיות או רקמת חיבור פעיל חשב להשפיע על מצב הכאב (קרי,זאבת, דלקת מפרקים שגרונית, פיברומיאלגיה); (2) פעיל ההפרעה האנדוקרינית העלולים להשפיע מצב הכאב (קרי, בלוטת התריס, סוכרת); (3) פעיל הפרעה נוירולוגית העלולים להשפיע מצב הכאב (קרי, נוירופתיה, טרשת נפוצה); (4) מחלת ריאות פעיל המחייב שימוש תרופות; (5) אין היסטוריה של זריקות סטרואידים משותף כבר 3 חודשים.
  3. להכניס את החולה לחדר הניתוח עם ברדס A class הביולוגי ומניחים לו (או לה) במצב פרקדן.
  4. לנקות את אזור הבטן של המטופל עם betadine 5% (povidone-יוד), לעטוף את החולה בטכניקה סטרילי, לחשוף את האזור נקי של הבטן עבור שאיבת שומן.
  5. כ 5 ס infero-רוחבית מ הטבור, עזים ומתנגד שני אתרים (אחד בצד השמאל ואת השני מצד ימין הטבור) של החתך to-להיות-עשה שימוש 2 מ של לידוקאין 2% ללא אפינפרין עם מחט מזרק 5-mL (מד 25, 1½ אינץ) על ידי הזרקת כל אתר ברמה באפידרמיס.
  6. עזים ומתנגד האתר של חתך to-להיות-שנעשה באמצעות 5 מ של פתרון בפוליצר (500 מ ל מ ל נורמלי מלוחים, 40, של לידוקאין 2%, 20 מ של 0.5% נמשך, 0.5 מ של אפינפרין 1:1000) במזרק 10-mL עם מחט (25 מד, 1½ אינץ ').
  7. לעשות 2 חתכים של 0.5 ס מ כ 5 ס מ מתחת הטבור רוחבית על ידי התכווצות העור כדי להעלות את העומק של רמת תת עורית.
  8. באמצעות להב מס 11, לתקוע את העור מוגבה לחדור דרך לשלב תת עורית אך לא לחדור דרך דופן הבטן.
  9. באמצעות 20 ס מ 16-מד בצינורית, עזים ומתנגד רמת תת עורית של כל החלק התחתון של הבטן, אשר to-להיות-liposuctioned, עם 700 עד 800 מ של הפתרון בפוליצר.
  10. לאחר גימור חדירה של הבטן התחתונה כל עם הפתרון בפוליצר, להכין מנגנון שאיבת שומן על-ידי חיבור של בצינורית 3.0 מ מ מחובר מזרק של 60 מ ל (או של 30 מ ל) עבור שאיבת שומן ידני או של בצינורית שתוכנן במיוחד 3.0 מ מ מחובר צנטריפוגה קיט, מזרק סגור-מערכת לצורך שמירה על העקרות, מחובר למכונה ואקום עבור שאיבת שומן בסיוע ואקום.
  11. לבצע שאיבת שומן כדי להשיג 100-110 גרם של רקמת שומן לא כולל פתרון בפוליצר. בעת ביצוע שאיבת שומן, רקמת שומן ניתן להשיג יחד עם הפתרון בפוליצר, אשר צריכים להיות מופרדים ו הוסר.
  12. כדי להפריד את הפתרון בפוליצר, תחילה על ידי כוח המשיכה, להעביר את רקמת שומן בערכה צנטריפוגה מזרק 60 מ ל ולמקם את המזרק למטה (דהיינו, שהחלק של המזרק נמצאת בתחתית). מאת מחכה 5-6 דקות, יופרדו את רקמת שומן ונוזלים בפוליצר. הסר את הנוזלים בחלק התחתון של המזרק על-ידי לחיצה על החלק העליון של הבוכנה מזרק.
  13. בצע את השלבים לעיל 1.9-1.11 עד סך של 100-110 גרם של רקמת שומן (lipoaspirates) לכל ברך שנצבר.

2. הכנת התערובת עולה/ECM עם מערכת סגורה סטרילי

  1. לאחר הפרדת הפתרון בפוליצר על-ידי כוח הכבידה ולאסוף 50-55 גר' lipoaspirates לכל כל ערכה צנטריפוגה 60 מ ל, מערכת סגורה סטרילי, למקם את ערכות צנטריפוגה 2 לתוך צנטריפוגה מיכל דלי ספין-x 1600 g עבור 5 דקות, עיבוי lipoaspirates, הפרדת הנוזלים מן ובינות לרקמה. זה תהליך נוסף וידחוס, lipoaspirates יכולות להפיק שמן שומני במקרים מסוימים.
  2. והיזהר לא לנער, להסיר את המכסה הבטיחותי ואת התקע בחלק התחתון של ערכת צנטריפוגה.
  3. הסר את הנוזלים התחתון על ידי לאט לוחץ על ראש הבוכנה של ערכת צנטריפוגה.
  4. על המזרק נפרדת 60 מ ל, להמיס 10 מ ג של collagenase (5 מ"ג של collagenase ספציפיות עבור רקמת חיבור24 ) ו- 5 מ"ג של collagenase מסוימת של רקמת שומן25, 50 מ של תמיסת מלח.
  5. מערבבים כ 25-30 מ של lipoaspirate מרוכז עם collagenase המומס (5 מ"ג של collagenase ספציפיות עבור רקמת חיבור) ו- 5 מ"ג של collagenase ספציפיות עבור רקמת שומן ביחס של 1:1 (v: v) על-ידי חיבור המזרק 60 מ ל ערכת צנטריפוגה באמצעות מחבר מיוחדים.
  6. ביסודיות מערבבים את lipoaspirate מרוכז, את collagenase על ידי דחיפת התכנים בין המזרק 60 מ ל ערכות צנטריפוגה באמצעות מוט או סוחר.
  7. להעביר את התערובת את lipoaspirate, את collagenase חזרה מזרקים 60 מ.
  8. התחבר כל מזרק 60 מ ל המכיל את התערובת עם מהמגן רקמות אשר מכיל את הלהבים.
  9. להתחבר עם מזרק ריק 60 מ ל הקצה השני של מהמגן.
  10. לדחוף את התערובת אל המזרק 60 מ ל אחרים דרך מהמגן 4-6 פעמים, וכתוצאה מכך הביתור ועל הא של lipoaspirate.
  11. העבר את lipoaspirate homogenized ואת התערובת collagenase לחזור 60 מ ל ערכות צנטריפוגה דרך מחבר מיוחדים
  12. מקם את ערכות צנטריפוגה במיכל שימוקם בתוך אינקובטור כי כבר מחומם מראש ב- 37 מעלות צלזיוס.
  13. דגירה צנטריפוגה שתי ערכות עם התערובת homogenized ב 37 מעלות צלזיוס למשך 40 דקות תוך כדי סיבוב ב 45 rpm.
  14. לאחר 40 דקות של דגירה, להסיר את המכולה החממה בצורה סטרילית. לאחר מכן, להסיר את ערכות צנטריפוגה, מקם אותם בתוך מכונת צנטריפוגה.
  15. Centrifuge את תערובות ב x 800 גרם במשך 5 דקות להפריד את רקמת שומן-derived SVF.
  16. לאחר לצנטריפוגה, להסיר את תגובת שיקוע (אשר כולל collagenase, מתעכל רקמת שומן) של כל ערכות צנטריפוגה על-ידי הסרת הכיפה מזרק על ראש הבוכנה והצבת מזרק 30 מ על הבוכנה פתיחה באמצעות מזרק נעל חיבור.
  17. לאט לאט לחץ כלפי מטה החלק חבית של המזרק 30 מ עבור תגובת שיקוע למלא לתוך המזרק 30 מ.
  18. לחץ על הקנה מזרק 30 מ ל כל הדרך mL 3-4 האחרון של החלק התחתון של ערכת צנטריפוגה, להשאיר רק את האחרון 3-4 מ של רקמת שומן-derived SVF. תגובת שיקוע נמחקת.
  19. הסר את המזרק 30 מ ל מהחלק העליון של הבוכנה ולמלא את המזרק עם דקסטרוז 5% בתמיסת הרטמן (D5LR).
  20. על-ידי הצמדת את המזרק 30 מ ל מלא D5LR על ראש הבוכנה פתיחה, למלא את ערכות צנטריפוגה, המכילים 3-4 מיליליטר SVF נגזר רקמת שומן, עם D5LR עד 55 מ ל.
  21. הסר את המזרק 30 מ ל, קאפ על הבוכנה, centrifuge ערכות צנטריפוגה שוב ב 300 x גרם במשך 4 דקות.
  22. חזור על הצעדים 2.17-2.21 סך של 4 כביסות. Collagenase בשימוש הוא xenogenic. לכן, רוב collagenase יוסר על ידי 4 כביסות. עם זאת, לאישור ה-FDA, כוונון של הפרוטוקול ייתכן שיהיה צורך להסיר לחלוטין את שאריות collagenase באמצעי האחסון הסופי, למרות הכמות הנוכחית של משקעים collagenase עשוי להיות מספיק זניח של חולים שאין להם יותר קליני תופעות לוואי.
  23. לאחר צנטריפוגה 4th , על מנת לקבל את SVF הסופי להזרקה, להסיר את כובע הבטיחות ואת התקע ליד הפתח התחתון של ערכת צנטריפוגה, מבלי לרעוד או לכבות את הקיט צנטריפוגה.
  24. לצרף מזרק 20 מ"ל בתחתית ערכת צנטריפוגה לפתוח באמצעות מחבר שתוכנן במיוחד.
  25. למשוך את הבוכנה של המזרק מספר פעמים הלוך ושוב לזעזע את התאים התיישבו על החלק התחתון של ערכת צנטריפוגה.
  26. להסיר את האחסון הכולל הרצוי של SVF המכיל גם את השיקופיים וגם את ה-ECM יחד עם תאים ורקמות אחרות (בדרך כלל כ 3-4 מ"ל של כל ערכה צנטריפוגה לזריקות משותפת הברך).

3. PRP הכנה עם סטרילי טכניקה

  1. בעת הכנת את השיקופיים ואת ה-ECM, צייר 30 מ של דם עצמיים עם 2.5 מ של פתרון דקסטרוז ציטראט קרישה.
  2. להעביר את הדם נמשך ערכות צנטריפוגה 60 מ.
  3. Centrifuge הדם מצוירות ב x 730 גרם במשך 5 דקות ולהסיר את תגובת שיקוע לתוך ערכה חדשה של צנטריפוגה 60 מ. Centrifuge את תגובת שיקוע ב x 1300 גרם במשך 4 דקות, והתוצאה היא 3-4 מיליליטר PRP.
  4. ממש לפני הזריקה, להוסיף 3% (w/v) סידן כלורי ביחס של 10:2 (PRP: סידן כלורי, v: v) PRP כדי להפעיל אותו.
  5. להוסיף 0.5% (w/v) HA, בדומה לפיגום, PRP מופעל עם סידן כלורי. אלה השיקופיים עם ה-ECM, יחד עם PRP, מופעל על ידי סידן כלורי, HA מסמלת את התערובת עולה/ECM.

4. טיפול המבוסס על תערובת ASC/ECM

  1. לנקות את הברך של המטופל עם betadine 5%, לעטוף את זה בצורה סטרילית.
  2. ימשש הקדמי של הברך עבור מרחב משותף בין עצמות הטיביאלי, הירך.
  3. עזים ומתנגד ההזרקה שטחי עם לידוקאין מדולל (1 מ"ל של לידוקאין 1% מדולל עם 4 מ"ל של תמיסת מלח) מן העור רק מחוץ הקפסולה משותפת.
  4. עזים ומתנגד בתוך הקפסולה משותפת עם ropivacaine מדולל (1 מ"ל 0.75% ropivacaine מדולל עם 3 מ"ל של תמיסת מלח).
  5. לערבב 2 מ"ל של HA עד mL 6-8 של SVF הכלול מזרק 20 מ"ל המחבר מזרק-כדי-מזרק.
  6. באמצעות מחבר מזרק-כדי-מזרק, להוסיף 0.4 מ של סידן כלורי 3-4 מיליליטר עצמיים PRP זה הוכן כבר ולהיות מוכן בתוך מזרק 5-mL.
  7. משלבים 3.5-4.5 מ ל PRP/סידן כלורי מזרק 5 מ ל 8-10 מ"ל של HA/SVF תערובת של מזרק בפטרת באמצעות מזרק-כדי-מזרק מחבר.
  8. מיד להזריק את התערובת (בערך 12-15 מ"ל) לאט לאט לתוך המפרק tibio-הירך הקדמי של הברכיים באמצעות מחט בקוטר 18 מ מ 38 עם או ללא הדרכה אולטרסאונד.
  9. אחרי הזריקה, חבוש ההזרקה עם לחץ על ידי קיפול גאזה כותנה 4 x 4 4 פעמים הצבת קלטות על הגזה 4 x 4 מקופל.
  10. להנחות את המטופל להישאר עדיין במשך 60 דקות לאפשר את התא מצורף.
  11. להנחות את המטופל כדי להגביל פעילות מינימלית של 1 שבוע אחרי השחרור מהמרפאה.
  12. חזור אל הקליניקה שלוש זריקות נוספים של PRP מופעל על ידי סידן כלורי מעל 3 שבועות.

5. שלאחר הטיפול לעקוב

  1. להעריך החולה בשבוע של 2, 4 ו- 16 (18 או 22) כאב שיפור במונחים של סולם חזותי אנלוגי (VAS) ושיפור תפקוד מבחינת פיזיותרפיה פרמטרים. לקבוע מדד דירוג פונקציונלי (ו'), ווס, טווח התנועה (ROM) כמו שתואר לעיל26,27.
  2. בצע את החולה על ידי שלאחר הטיפול MRI 3 חודשים לאחר הטיפול.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

שלושה מטופלים (אחד נקבה בת 87 עם שלב 3 OA, אחד זכר בן 68 עם שלב 3 OA, נקבה אחת בת 60 עם שלב 3 OA) ללא כל העבר משמעותי ההיסטוריה הרפואית הציגה למרפאה עם כאב ברכיים מתמיד, נחשק עבור פוטנציאל עצמיים רקמת שומן-derived SVF טיפול. כל החולים שלושה היה הברך שלהם נבדק על ידי מומחה לכירורגיה אורטופדית היו מציעים לי החלפת ברך הכולל (TKR), היו מוכנים לעבור את הניתוח. לפני ההליך, כל החולים שלושה קיבלו מספר זריקות של סטרואידים ו HA ללא שום שיפור ממושך.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

בשנת 2001, צוק ואח. תאי גזע בודד של רקמת שומן על-ידי פירוק קולגן המטריצה עם collagenase6. לאחר מכן, הקבוצה העלתה כי אלה בתאי גזע מבודד את רקמת שומן יכול להפוך הסחוס ורקמות אחרות של והמזודרם במקורם, להוכיח כי אלה בתאי גזע היו mesenchymal במקורם.

באופן דומה, ההליך שהוצגו במאמר זה הוא פרוטוקול ששונה כדי להחיל את השיטה דומה בחולים אנושיים. השינוי העיקרי של הפרוטוקול הוא שילוב של מערכת סגורה מזרקים תוך קבלת ועיבוד של lipoaspirates על מנת לצמצם את מגע האוויר תוך שמיר...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים אין לחשוף.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחבר מודה תמיכה מן הצוות של מרפאה Mipro, עיצוב איור מאת Lee Jaepil/דוד. עבודה זו נתמכה על ידי מענקי מחקר מ ביו & תוכנית פיתוח טכנולוגיה רפואית של ה-NRF במימון של MSIT (מספר ה-NRF-2017M3A9E4078014); את נבחרת מחקר קרן של קוריאה (NRF) ממומן על ידי משרד המדע ICT (במדבר ה-NRF-2017R1A2B4002315 של ה-NRF-2016R1C1B2010308).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
<חזק>חומר
5% בטדין (פובידון-יוד) פירסון ושות', בע"מ
2% לידוקאין דאהאן פרמצבטיקה
תמיסת גידול מיונגמון פארם בע"מN01BB01התמיסה הורכבה מ-500 מ"ל תמיסת מלח רגילה, 40 מ"ל 2% לידוקאין, 20 מ"ל 0.5% מרקאין ו-0.5 מ"ל אפינפרין 1:1000.
ציון מחקר Liberase TL ו-TM רוש מדע יישומי5401020001
D5LRDahan Pharm. Co., Ltd.645101072דקסטרוז 5% בתמיסת רינגר חבית 
תמיסת דקסטרוז ציטראט נוגד קרישה פנוואל בע"מNDC:0942-0641התמיסה הורכבה מ-0.8% חומצת לימון,
0.22% נתרן ציטראט ו-0.223% דקסטרוז.
3% (w/v) סידן כלורי חברת התרופות צ'ונגוואי
0.5% (w/v) HA (חומצה היאלורונית)Dongkwang pharm. ושות', בע"מ
0.25% RopivacaineHuons ושות', בע"מ670600150
<חזק>ציוד
3.0 מ"מ צינורית WOOJU מכשירים רפואיים ושות'
מזרק Luer-Lock 60 מ"לBD (Becton Dickinson) 
309653 ערכת חבית צנטריפוגה CPL ושות', בע"מ30-0827044
הומוגנייזר רקמות המכיל להביםCPL Co., Ltd.30-0827045
מערבל חממה מסתובבMedikan Co., LtdMS02060092
צנטריפוגהHanil Scientific Inc.CE1133
הדמיית תהודה מגנטיתפיליפס מערכות רפואיות בע"מ18068
מערכת הדמיית אולטרסאונדסמסונג מדיסון ושות', בע"מCT-LK-V10-ICM-09.05.2007
657400260670603480644902101645902030ML30200

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Arnoczky, S. P. Building a meniscus. Biologic considerations. Clinical Orthopaedics and Related Research. (367 Suppl), S244-S253 (1999).
  2. Barry, F. P. Mesenchymal stem cell therapy in joint disease. Novartis Foundation Symposium. 249, 86-241 (2003).
  3. Usuelli, F. G., et al. Adipose-derived stem cells in orthopaedic pathologies. British Medical Bulletin. 124 (1), 31-54 (2017).
  4. Zhang, H. N., Li, L., Leng, P., Wang, Y. Z., Lv, C. Y. Uninduced adipose-derived stem cells repair the defect of full-thickness hyaline cartilage. Chinese Journal of Traumatology. 12 (2), 92-97 (2009).
  5. Zuk, P. A., et al. Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells. Molecular Biology of the Cell. 13 (12), 4279-4295 (2002).
  6. Zuk, P. A., et al. Multilineage cells from human adipose tissue: implications for cell-based therapies. Tissue Engineering. 7 (2), 211-228 (2001).
  7. Baer, P. C., Geiger, H. Adipose-derived mesenchymal stromal/stem cells: tissue localization, characterization, and heterogeneity. Stem Cells International. 2012, 812693(2012).
  8. Zhu, Y., et al. Adipose-derived stem cell: a better stem cell than BMSC. Cell Biochemistry and Function. 26 (6), 664-675 (2008).
  9. Bellei, B., Migliano, E., Tedesco, M., Caputo, S., Picardo, M. Maximizing non-enzymatic methods for harvesting adipose-derived stem from lipoaspirate: technical considerations and clinical implications for regenerative surgery. Scientific Reports. 7 (1), 10015(2017).
  10. Pak, J., Lee, J. H., Park, K. S., Jeong, B. C., Lee, S. H. Regeneration of Cartilage in Human Knee Osteoarthritis with Autologous Adipose Tissue-Derived Stem Cells and Autologous Extracellular Matrix. BioResearch Open Access. 5 (1), 192-200 (2016).
  11. Alexander, R. W. Understanding Adipose-derived Stromal Vascular Fraction (AD-SVF) Cell Biology and Use on the Basis of Cellular, Chemical, Structural and Paracrine Components: A Concise Review. Journal of Prolotherapy. 4, e855-e869 (2012).
  12. Benders, K. E., et al. Extracellular matrix scaffolds for cartilage and bone regeneration. Trends in Biotechnology. 31 (3), 169-176 (2013).
  13. Korean Food and Drug Administration (KFDA). Cell therapy: Rules and Regulations. KFDA. , (2009).
  14. Pak, J. Regeneration of human bones in hip osteonecrosis and human cartilage in knee osteoarthritis with autologous adipose-tissue-derived stem cells: a case series. Journal of Medical Case Reports. 5, 296(2011).
  15. Pak, J., Chang, J. J., Lee, J. H., Lee, S. H. Safety reporting on implantation of autologous adipose tissue-derived stem cells with platelet-rich plasma into human articular joints. BMC Musculoskeletal Disorders. 14, 337(2013).
  16. Pak, J., Lee, J. H., Kartolo, W. A., Lee, S. H. Cartilage Regeneration in Human with Adipose Tissue-Derived Stem Cells: Current Status in Clinical Implications. BioMed Research International. 2016, 4702674(2016).
  17. Pak, J., Lee, J. H., Lee, S. H. A novel biological approach to treat chondromalacia patellae. PLoS One. 8 (5), e64569(2013).
  18. Pak, J., Lee, J. H., Lee, S. H. Regenerative repair of damaged meniscus with autologous adipose tissue-derived stem cells. BioMed Research International. 2014, 436029(2014).
  19. Aust, L., et al. Yield of human adipose-derived adult stem cells from liposuction aspirates. Cytotherapy. 6 (1), 7-14 (2004).
  20. De Ugarte, D. A., et al. Comparison of multi-lineage cells from human adipose tissue and bone marrow. Cells Tissues Organs. 174 (3), 101-109 (2003).
  21. Guilak, F., et al. Clonal analysis of the differentiation potential of human adipose-derived adult stem cells. Journal of Cellular Physiology. 206 (1), 229-237 (2006).
  22. Mitchell, J. B., et al. Immunophenotype of human adipose-derived cells: temporal changes in stromal-associated and stem cell-associated markers. Stem Cells. 24 (2), 376-385 (2006).
  23. Oedayrajsingh-Varma, M. J., et al. Adipose tissue-derived mesenchymal stem cell yield and growth characteristics are affected by the tissue-harvesting procedure. Cytotherapy. 8 (2), 166-177 (2006).
  24. Liberase TL information available from Sigma Millipore online. , https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/roche/05401020001?lang=en®ion=US (2018).
  25. Liberase TM information available from Sigma Millipore online. , https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/roche/Libtmro?lang=en®ion=US (2018).
  26. Childs, J. D., Piva, S. R. Psychometric properties of the functional rating index in patients with low back pain. European Spine Journal. 14 (10), 1008-1012 (2005).
  27. Price, D. D., McGrath, P. A., Rafii, A., Buckingham, B. The validation of visual analogue scales as ratio scale measures for chronic and experimental pain. Pain. 17 (1), 45-56 (1983).
  28. Pilgaard, L., Lund, P., Rasmussen, J. G., Fink, T., Zachar, V. Comparative analysis of highly defined proteases for the isolation of adipose tissue-derived stem cells. Regenerative Medicine. 3 (5), 705-715 (2008).
  29. D'Ambrosi, R., Indino, C., Maccario, C., Manzi, L., Usuelli, F. G. Autologous Microfractured and Purified Adipose Tissue for Arthroscopic Management of Osteochondral Lesions of the Talus. Journal of Visualized Experiments. (131), e56395(2018).
  30. Packer, J. D., Chang, W. T., Dragoo, J. L. The use of vibrational energy to isolate adipose-derived stem cells. Plastic Reconstructive Surgery-Global Open. 6 (1), e1620(2018).
  31. Hanke, C. W., Bernstein, G., Bullock, S. Safety of tumescent liposuction in 15,336 patients. National survey results. Dermatologic Surgery. 21 (5), 459-462 (1995).
  32. Illouz, Y. G. Complications of liposuction. Clinics in Plastic Surgery. 33 (1), 129-163 (2006).
  33. Dixit, V. V., Wagh, M. S. Unfavourable outcomes of liposuction and their management. Indian Journal of Plastic Surgery. 46 (2), 377-392 (2013).
  34. Lehnhardt, M., et al. Major and lethal complications of liposuction: a review of 72 cases in Germany between 1998 and 2002. Plastic and Reconstructive Surgery. 121 (6), 396e-403e (2008).
  35. Iyer, S. S., Rojas, M. Anti-inflammatory effects of mesenchymal stem cells: novel concept for future therapies. Expert Opinion on Biological Therapy. 8 (5), 569-581 (2008).
  36. Zhang, J., Middleton, K. K., Fu, F. H., Im, H. J., Wang, J. H. HGF mediates the anti-inflammatory effects of PRP on injured tendons. PLoS One. 8 (6), e67303(2013).
  37. Li, N. Y., Yuan, R. T., Chen, T., Chen, L. Q., Jin, X. M. Effect of platelet-rich plasma and latissimus dorsi muscle flap on osteogenesis and vascularization of tissue-engineered bone in dogs. Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 67 (9), 1850-1858 (2009).
  38. Parsons, P., et al. The biological effect of platelet rich-plasma on the fracture healing process. The Journal of bone and joint surgery. British volume. 91-B, 293(2009).
  39. Wu, W., Chen, F., Liu, Y., Ma, Q., Mao, T. Autologous injectable tissue-engineered cartilage by using platelet-rich plasma: experimental study in a rabbit model. Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 65 (10), 1951-1957 (2007).
  40. Cooper, T. W., Eisen, A. Z., Stricklin, G. P., Welgus, H. G. Platelet-derived collagenase inhibitor: characterization and subcellular localization. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 82 (9), 2779-2783 (1985).
  41. Uzuki, M., Sawai, T. A. A comparison of the affinity of sodium hyaluronate of various molecular weights for degenerated cartilage: a histochemical study using hyaluronic acid binding protein. International Congress Series. 1223, 279-284 (2001).
  42. Pagano, C., et al. Molecular and morphometric description of adipose tissue during weight changes: a quantitative tool for assessment of tissue texture. International Journal of Molecular Medicine. 14 (5), 897-902 (2004).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

מאמרים קשורים