מאמר שיטה

מודל במבחנה של מערכת מקבילה-Plate זלוף ללמוד חיידקי ההקפדה להשתיל רקמות

DOI:

10.3791/58476

⸱

7 בינואר 2019

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Cardiovascular Developmental Biology, Department of Cardiovascular Sciences, KU Leuven, 2Centre for Molecular and Vascular Biology, Department of Cardiovascular Sciences, KU Leuven, 3Department of Biohybrid & Medical Textiles, AME - Helmholtz Institute for Biomedical Engineering, RWTH Aachen University, 4European Homograft Bank, Saint Jean Clinique, 5Division of Clinical Cardiac Surgery, Department of Cardiovascular Sciences, KU Leuven

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אנו מתארים שבאתר מעוצב במבחנה זרימה קאמרית מודל, אשר מאפשר החקירה של חיידקי ההקפדה להשתיל רקמות.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

תעלות valved שונים ושסתומים רכוב סטנט משמשים עבור יצוא נכון חדרית בדרכי (RVOT) החלפת שסתום בחולים עם מחלת לב מולדת. בעת השימוש בחומרים תותבת עם זאת, אלה שתלי רגישים זיהומים חיידקיים ותגובות מארח שונים.

זיהוי גורמים בקטריאלי, המארח לשחק תפקיד חיוני endovascular הדבקות של מיקרואורגניזמים, יש חשיבות כדי להבין טוב יותר את הפתופיזיולוגיה של תחילת זיהומים כמו אנדוקרדיטיס זיהומית (IE) וכדי לפתח מניעתי אסטרטגיות. לפיכך, פיתוח מודלים המוסמכת לחקור אדהזיה חיידקי בתנאים הטיה פיזיולוגית נחוצה. כאן, אנו מתארים את השימוש החדש תוכנן במבחנה זלוף תא בהתבסס על לוחות מקבילים המאפשר שהמחקר של חיידקי ההקפדה מרכיבים שונים של השתלת רקמות כגון חשוף מטריצה חוץ-תאית, תאי אנדותל ואזורי אינרטי . שיטה זו בשילוב עם המושבה יוצרי יחידה (CFU) סופר מספיקה להעריך של הנטייה של שתל חומרים לקראת הדבקה חיידקית תחת זרימה. בהמשך, מערכת קאמרית הזרימה עשויה לשמש כדי לחקור את התפקיד של רכיבי הדם אדהזיה חיידקי בתנאים הטיה. להדגים כי המקור של רקמות, שלהם מורפולוגיה משטח וספציפיות חיידקים אינם היזע הגדולות בחיידקיים ההקפדה להשתיל רקמות באמצעות מודלי שלנו ללא צורך במיקור חוץ מעוצב במבחנה זלוף.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Staphylococcus aureus (S. aureus) מעסיקה במגוון אסטרטגיות התקפה אלימה כדי לעקוף את מערכת ההגנה החיסונית המארח להמדינות משטחים ביולוגי או הלא-ביולוגיים מושתלים במחזור האנושי, אשר מוביל לזיהומים קרישה תוך-כלית חמורות כגון אלח דם, IE1,2,3,4,5. שרידים IE לטיפול חשוב הקשורים סיבוך בחולים לאחר ההשתלה של מסתמי לב תותב תוך בודדים גורמים התורמים תחילתה של IEare לא אך מובן לחלוטין6,7. תחת תנאי זרימה, חיידקים מפגש כוחות גזירה, אשר הם צריכים להתגבר על מנת לדבוק קיר הספינה8. מודלים, אשר מאפשרים לימוד יחסי הגומלין בין חיידקים לבין רקמת שסתום תותבת או אנדותל תחת זרימה, הן עניין הם משקפים ויוו המצב יותר.

מספר מנגנונים מסוימים להקל על הדבקות חיידקים לתאי אנדותל (ECs) וכדי חשוף subendothelial המטריקס (ECM) המוביל קולוניזציה רקמת ההבשלה של גידולים, להיות צעדים חיוניים מוקדם ב- IE9. Staphylococcal פני שטח חלבונים שונים או MSCRAMMs (חיידקים משטח רכיבי זיהוי מולקולות מטריקס דבק) תוארו כמתווכים של אדהזיה לתאי המארח, ECM חלבונים על ידי אינטראקציה עם מולקולות כגון fibronectin, פיברינוגן, קולגן, Willebrand פון פקטור (VWF)8,10,11. עם זאת, על רקע קיפול אינטרה-מולקולרית של כמה גורמים התקפה אלימה, למד בעיקר בתנאים סטטי, רבים של אינטראקציות אלה ייתכן רלוונטיות שונים זיהומים endovascular במחזור הדם.

לכן, אנו מציגים ללא צורך במיקור חוץ מעוצב במבחנה במקביל-plate זרימה קאמרית מודל, אשר מאפשר את ההערכה של חיידקי ההקפדה מרכיבים שונים של ECM ו ECs בהקשר של רקמות השתלים מושתלים התנוחה RVOT. המטרה הכללית של השיטה המתוארת בעבודה זו היא ללמוד מנגנונים של האינטראקציה בין חיידקים ורקמות הבסיסית endovascular בתנאים זרימה, אשר קשורה קשר הדוק הסביבה ויוו של פתוגנים למחזור הדם כגון S. aureus. גישה חדשנית זו מתמקדת הרגישות של שתל משטחי רקמות כדי הדבקות חיידקים כדי לזהות גורמי סיכון פוטנציאלי לפיתוח של IE.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. מכינים את השתלת רקמות ללימודי במבחנה

הערה: שלושה סוגים של רקמות שימשו: תיקון קרום הלב שור (BP), שתלי מאותו מין Cryopreserved (CH), ומוחלף שור (BJV). במקרה של צינור BJV ושר (רקמות מעובד על ידי הבנק האירופי מאותו מין (אב) ומאוחסנים לפני השימוש בחנקן נוזלי), שימשו קיר והן valvular פליירים. BP תיקון של צינור BJV נרכשו מן היצרנים. לפני השימוש, יש להפשיר CH בעקבות ההוראות אב12.

  1. שוטפים לכל רקמות עם 0.9% NaCl לפני השימוש.
  2. להכין ביופסיות רקמות באמצעות ביופסיה העור חד פעמי ניקוב לחתוך חתיכות רקמה מעגלית (10 מ מ קוטר).
  3. חותכים כל רקמת טלאים לאותו גובה שימוש חד פעמי סטרילי ואזמלי מנתחים.
  4. בשביל לרקמות קבוע עם גלוטראלדהיד (לדוגמה BJV conduit), דגירה שתל חתיכות בן לילה 4 ° C עם 200 גרם/ליטר של אלבומין האדם לנטרל את מקבע.
  5. תשטוף את שאריות גלוטראלדהיד עם 0.9% NaCl בצלחת microtiter.  חזור על 3 פעמים במשך דקה אחת.

2. הכנת את החיידקים לניסויים זלוף

הערה: שלושה מבודד חיידקי שימשו: S. aureus קאוון (בקרת האוויר 12598), ס' epidermidis בקרת האוויר 149900, ס sanguinis NCTC 7864. S. aureus ו ס epidermidis גדלו ב- 37 מעלות צלזיוס ב ציר סויה tryptic (TSB), ס' sanguinis גדל ב 37 ° C עם 5% CO2 בהמוח הלב אינפוזיה מרק (BHI).

  1. מכינים לילה התרבות של חיידקים על צלחת אגר דם מוצק.
    1. השתמש לולאה סטרילי שתגרד את החיידקים קפוא לחסן על צלחת אגר דם מולר-הינטון לתרבות לילה ב 37 º C.
  2. השתמש לולאה חיסון סטרילי כדי לאסוף מושבה בודדת מתרבות אגר דם לילה לחסן לתוך 10 מ"ל של TSB או BHI מ 14 ל צינור ותרבות בין לילה ב 37 º C.
  3. צנטריפוגה תרבויות לילה (3000 x g, 4 ° C, 10 דקות), resuspend כדורי ב- 10 מ ל תמיסת פוספט buffered (PBS). במקום 14 מ"ל צינורות על קרח.
  4. להכין את aliquot של 3.7 מ"ג/מ"ל תמיסת 5 (6) - carboxy - fluorescein N-הידרוקסי-succinimidyl אסתר (CF) אתנול ולאחסן ב-20 ° C. בהמשך לדלל את המניה של CF 150 µg/mL באמצעות מים 'הנדסה גנטית'.
    הערה: להגן על צינורות מן האור באמצעות נייר אלומיניום ולאחסן ב-20 ° C.
  5. Centrifuge החיידק (3000 x g, 4 ° C, 10 דקות), resuspend כדורי ב- 800 µL ל- PBS ולהוסיף 200 µL של הפתרון CF µg 150/mL (סופי ריכוז של 30 µg/mL המשמש זלוף ניסויים). להגן על צינורות מפני אור עם רדיד אלומיניום, תקופת דגירה של 30 דקות באמצעות של תפקודי לב / נשימה.
  6. לאחר תיוג, לחסום עם 2% של אלבומין שור (BSA) פתרון PBS, ספין (3000 x g, 4 ° C, 10 דקות). בצע בצעד לשטוף באמצעות 10 מ"ל של PBS צניפה חיידקים על ידי צנטריפוגה (3000 x g, 4 ° C, 10 דקות).
  7. לדלל חיידקים עם PBS להשיג 107 המושבה יוצרי יחידות (CFU) /mL (נבדק על ידי CFU סומך על פלטות אגר דם מולר-הינטון), המתאים יתר600 (צפיפות אופטית) של 0.65. לשמור על הצינורות בחושך על הקרח לפני ניסויים זלוף.
    שימו לב. זכור כי יתר600 מדידות ישקפו את המספר המשוער של חיידקים. כדי לספור את המינון חיסון יעיל, השיטה דילול טורי היא צעד הכרחי נוסף כדי לוודא OD המבוסס מספרים כמתואר בסעיף 3.8.

3. במבחנה זלוף ניסויים באמצעות תא לזרום במקביל-צלחת

  1. הר ביופסיות רקמות 10 מ מ קוטר, עובי אותה (להכין בשלבים 1.1-1.5) לתוך מערכת קאמרית זרימה עם השטח הפנימי כלפי מעלה ליצור קשר עם המתלה חיידקי.
    הערה: עובי רקמת אותה על פני שתלים שונים מבטיח כי באותו גובה רקמות מתמלאת בערוץ ומאפשר זרימה שכבתית בכל תנאי. כל מרכיבי התא זרימה שהוצגו, המתוארת באיור1.
    1. כדי להתחיל את הפרוטוקול, מקם את פיסת רקמה עגול בין שקופית מיקרוסקופ עם מחורר מעגלית 8 מ"מ אטם גומי.
      הערה: השקופית מיקרוסקופ בעל הסרט תחתון דק במיוחד כדי לאפשר את הדור של החור 8 מ מ. יחד עם הגיליון גומי, הוא מתקן את הרקמה כדי לאפשר את מגע ישיר בין הדגימה המדיום זורם, גם מונע שיבוש הביופסיה במהלך הניסוי. פני השטח של רקמת ובדוקים, אשר חשוף לזרימה (קוטר קטן יותר) לא יכול להיות המניפולציה של המלקחיים.
    2. הכנס בעל עם רקמת הגיליון אטם המוטבע במסגרת מתכת התחתון של החדר.
    3. לצרף את מסגרת מתכת עליון עם הסדין אטם המתאימים על החלק התחתון של התא עם בעל רקמות שהוספת קודם לכן. לאחר מכן לטעון את התא כולו עם שמונת הברגים ולעזאזל עם אגוזים. ודא כי הגובה קאמרית הוא תמיד אותו על פני שתלים.
      הערה: גובה החדר צריך להיות נחוש תמיד על הידוק הברגים. השתמש caliper או הסרגל.
  2. חבר תא זרימה עם משאבה סחרור, המאגר נוזלים עם הצינורות.
  3. Perfuse הרקמות עם השעיה של 107 CFU/mL (נבדק על ידי CFU סופר וכל הקשור OD600 מדידות) fluorescently התווית על-ידי חיידקים ב- PBS תוך מתן דגש הטיה של דיין 3/cm2 (דיין ליחידה הלחץ סנטימטר מרובע) על ידי אמצעים משאבת סחרור (תזרים שיעור 4 mL/min) עבור h 1 באמצעות 400 מ ל חיידקי מאגר (בתוך הבית עיצוב, איור 1) ממוזגים ב 37 ° C באמצעות תרמוסטט צלחת (טבלה של חומרים).
  4. Recirculate ברציפות המתלה חיידקי 100 מ ל באמצעות המאגר אוסף אותו.
  5. לאחר זלוף, לפרק את התא לשחרר את השתל. ולשטוף את היצירה רקמות פעמיים עם 4 מ"ל של PBS בצלחת 12-ובכן באמצעות ניעור מסלולית מעבדה במשך 3 דקות כל אחד. לאחר מכן חותכים החלק הפנימי של השתל באמצעות ביופסיה העור אגרוף של קוטר קטן יותר.
  6. מניחים כל ביופסיה רקמות לתוך צינור mL 14 נפרד המכיל 1 מ"ל של סטרילי 0.9% NaCl. תווית את הצינור כמו #1.
  7. לנתק את החיידקים מן הרקמה באמצעות אמבט sonication 10 דקות (משרעת = 100% ותדירות = 45 קילו-הרץ).
    הערה: ניתוק מלא של חיידקים מן הרקמה שתלי צריך להיות מוערך על דגירה של תיקונים בן לילה ב 37 מעלות צלזיוס במדיום נוזלי TSB ואחריו OD600 מדידות לעומת לשלוט תיקונים מטופלים עם פתרון ללא חיידקים.
  8. להשתמש בשיטה הטורית דילול על פלטות אגר דם מולר-הינטון לספור CFUs.
    1. הכן צינור יחיד mL 14 עם 10 מ ל תמיסת סטרילית כדי להפוך דילולים טורי של ההשעיה חיידקי שהושג לאחר sonication. תווית הצינורית הזאת כמו #2.
      הערה: לכל רקמות ניסוי שפופרת אחת עם 10 מ"ל של 0.9% NaCl הוא הכרחי.
    2. הכינו שלושה צינורות 14 מ עם 10 מ"ל של סטרילי 0.9% NaCl עבור דילולים טורי של השעיה חיידקי הראשוני מהשלב 2.7. תווית הצינורות כדלקמן #3, #4, #5.
      הערה: השלב זה נחוץ לדעת המספר CFU אמיתי ההשעיה חיידקי המשמש את הניסוי זלוף.
    3. מערבולת מערבבים כל שפופרת של מערבולת ס' 15 הצינורות עם ביופסיה רקמות, כמו גם ההשעיה חיידקי ראשוני כדי להפוך דילולים טורי.
    4. להכין שלוש צלחות אגר, שתיים לניסוי רקמות (זלוף של חיידקים זלוף שליטה של PBS), והשלישי על ההשעיה חיידקי ראשוני המשמש perfusions.
    5. תווית שלוש סקטורים צלחת לניסוי רקמת את האופן 10 הבאים-1, 10-3 , 10-4. כדי לספור את מספר CFUs ב perfusates חיידקי, לתייג את הצלחת כדלקמן: 10-1, 10-3, 10-5 ו- 10-7.
      הערה: כל הסימנים על אגר צלחות כגון 10-1, 10-3 וכן הלאה להפנות המספר הסופי של CFU/mL מחושב ביום הבא. לוח הבקרה אינו דורש כל המגזרים. לפני השימוש, פלטות אגר הדם צריך להיות ממוקם מתחת למכסה המנוע למינריות ופתח להוצאת עודפי הרטיבות.
    6. כדי להמשיך מכין את טורי דילולים, להעביר µL 100 צינור #1 שפופרת #2, מערבבים היטב עם מערבולת.
    7. מורחים µL 100 של התוכן של שפופרת #1 ו #2 על מגזרים 10 המקביל-1 ו- 10-3 של צלחת אגר. באופן דומה, להפיץ את µL 10 צינור #2-סקטור 10-4, חזור על שלב זה 4 פעמים להשיג 4 גידולים נפרדים של כל אמצעי אחסון של 10 µL.
      הערה: עקב אמצעי האחסון קטן המשמש עבור ציפוי על גבי סקטור 10-4, מומלץ לקיים מספר מספר טיפות כדי להפוך מספר ממוצע של מבוגר CFUs.
    8. כדי להכין את דילולים טורי של התרבות הראשונית, להעביר µL 100 חיידקי השעיה שלב 2.7 צינור #3, מערבבים היטב עם מערבולת. להוסיף 100 µL צינור #3 צינור #4, מערבבים היטב, חזור על הפעולות לכל העוקבים צינור #5.
    9. מורחים µL 100 של התוכן של צינורות #3, #4, #5, ההשעיה חיידקי מנוכי עונתיות (שלב 2.7), בהתאמה, על מגזרים 10-3, 10-5, 10-7 ו 10-1 של צלחת אגר דם.
    10. להשאיר הצלחות אגר דם בשכונה למינריות מהאוויר יבש בכפולות חיידקי, בדרך כלל למשך 10 דקות. לאחר מכן, מניחים את הצלחות ב 37 מעלות צלזיוס במשך לילה הדגירה.
    11. לאחר דגירה לילה, לספור מושבות חיידקים כדי להשיג את המספר של CFUs הנובע הידבקות רקמות ביופסיות, כמו גם CFUs/mL ההשעיה חיידקי ההתחלה המשמש את זלוף. תוצאות אקספרס כמו CFU/ס מ2.

4. זריחה מיקרוסקופיה של חיידקים מודבקת כדי להשתיל רקמות על זלוף

  1. לאחר זלוף, לשטוף את חתיכות רקמה עם PBS (ראה שלב 3.5) וחותכים את החלק הפנימי של השתלה באמצעות אגרוף של קוטר קטן יותר.
  2. להכין צלחת 6-ובכן ולמקם טיפות של הרכבה בינונית (טבלה של חומרים).
  3. במקום כל פיסת רקמה עם משטח perfused כלפי מטה על טיפת הרכבה בינונית.
  4. קרא צלחת משתמש בסורק קרינה פלואורסצנטית (טבלה של חומרים). להגדיר פרמטרים של אורכי גל עירור, פליטה לפי fluorophore המשמש עבור תיוג חיידקי.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כדי להבין טוב יותר את המנגנונים מאחורי IE פיתוח, מודל זה מאפשר הערכת בקטריאלי ולהציג גורמים רקמות הקשורים במצב ויוו תחילת הזיהום.

בפירוט, הגישה הרומן במבחנה מאפשר לכמת אדהזיה חיידקי בתנאי זרימה לרקמות שונות השתל על ידי פרפוזיה חיידקים fluorescently שכותרתו על הרקמות הפעלת הלחצים הטיה בטווח פיזיולוגיים של דיין 3-10 / ס מ2 עבור RVOT. בעבודה זו, השתמשנו קצב זרימה של 4 mL/min שמשקף דיין 3/ס מ

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

תצפיות קליניות האחרונות נותן מודעות מיוחדת IE כמו סיבוך בחולים שעברו החלפת שסתום של6,RVOT13. תפקוד לקוי של השסתום מושתל ב- IE הוא התוצאה של חיידקי אינטראקציה עם השתל endovascular שמוביל נרחב דלקתיות ו procoagulant תגובות1,14. המודל הציג הרומן במבחנה אפשר לנו לחקור אם הבדלים רקמות מבנים וגורמים חיידקי סביר לווסת את הרגישות לזיהומים ויוו בשימוש שתלי15. BJV ורקמות שת...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מחקר זה מומן על ידי מענק של לופן KU קרן מחקר (OT 14 097) שניתנה RH. TRV היה בחור דוקטורט של קרן המחקר FWO - פלנדרס (בלגיה; להעניק מספר - 12K0916N) ו RH הוא נתמך על ידי קרן מחקר קליני של UZ לוון.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מדבקת קרום הלב בקר (BP), Supple Peri-Guard PericardiumSynovis Surgical Innovations, ארה"בPC-0404SN
צינורות וריד צוואר בקר (BJV)Contegra; מדטרוניק בע"מ, ארה"בM333105D001
CH הומוגרפט שמור בהקפאהEuropean Homograft Bank (EHB)-
Acu-PunchAcuderm Inc, ארה"בP850 (8 מ"מ); P1050 (10 מ"מ)
אלבומין אנושיFlexbumin; בקסטר, בלגיהBE171464
LOT:16G12C
מרק סויה טריפטי (TSB)פלוקה, שטיינהיים, גרמניה22092-500 גרם
מרק עירוי לב (BHI)Fluka53286-500G
מלח פוספט חוצץ (PBS).Gibco14190-094
5(6)-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester (CF)Sigma-Aldrich, גרמניה21878-100MG-F
משאבה פריסטלטית (דגם ISM444B)תקן Ismatec BVP-Z; קול פארמר, ורטהיים, גרמניה631942-2
אמבט סוניקציהVWR מנקה אולטראסוני; VWR, רדנור, Pa142-6044230V/50 -60Hz 60VA; HF45kHz, 30W
ProLong Gold AntifadeMountant Invitrogen מאת ThermoFisherP36930
InCell Analyzer 2000 (סורק פלואורסצנטי)GE Healthcare Life Sciences, Pittsburgh, PA29027886
Arium Pro VF - מים אולטרה-טהורים - H2O MilliQMillipore87206462
שקופיות מיקרוסקופיות - תאי תרבית רקמות (1-well)Sarstedt94.6140.102
באר אחת על Lumox ניתנת להסרהSarstedt94.6150.101
נירוסטה - להבים כירורגייםSwann-Morton311
צינורות סיליקון טיגון, 1/8 אינץ' ID x 1/4 אינץ' ODCole-ParmerEW-95702-06טווח טמפרטורות: – 80 עד 200° עיקור C
: עם תחמוצת אתילן, קרינת גמא או חיטוי למשך 30 דקות, 15 psi של
לחץ צינורות PharMed BPTSaint-GobainAY242012ניתנים לחיטוי 30 דקות ב-121 מעלות; C
Tygon LMT-55 צינורותסנט גוביין ביצועים פלסטיק וסחר;
15312022 תרמוסטטBMG BIOMEDIZINTECHNIK300-0042230V, 90VA, 50Hz

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Que, Y. A., Moreillon, P. Infective endocarditis. Nature Reviews Cardiology. 8 (6), 322-336 (2011).
  2. Werdan, K., et al. Mechanisms of infective endocarditis: pathogen-host interaction and risk states. Nature Reviews Cardiology. 11 (1), 35-50 (2014).
  3. Moreillon, P., Que, Y. A. Infective endocarditis. The Lancet. 363 (9403), 139-149 (2004).
  4. Jalal, Z., et al. Selective propensity of bovine jugular vein material to bacterial adhesions: An in vitro study. International Journal of Cardiology. 198, 201-205 (2015).
  5. Sharma, A., Cote, A. T., Hosking, M. C. K., Harris, K. C. A Systematic Review of Infective Endocarditis in Patients With Bovine Jugular Vein Valves Compared With Other Valve Types. JACC Cardiovascular Interventions. 10 (14), 1449-1458 (2017).
  6. Malekzadeh-Milani, S., et al. Incidence and predictors of Melody(R) valve endocarditis: a prospective study. Archives of Cardiovascular Diseases. 108 (2), 97-106 (2015).
  7. Hill, E. E., et al. Management of prosthetic valve infective endocarditis. American Journal of Cardiology. 101 (8), 1174-1178 (2008).
  8. Claes, J., et al. Clumping factor A, von Willebrand factor-binding protein and von Willebrand factor anchor Staphylococcus aureus to the vessel wall. Journal of Thrombosis and Haemostasis. 15 (5), 1009-1019 (2017).
  9. Fowler, T., et al. Cellular invasion by Staphylococcus aureus involves a fibronectin bridge between the bacterial fibronectin-binding MSCRAMMs and host cell beta1 integrins. European Journal of Cell Biology. 79 (10), 672-679 (2000).
  10. Patti, J. M., Hook, M. Microbial adhesins recognizing extracellular matrix macromolecules. Current Opinion in Cell Biology. 6 (5), 752-758 (1994).
  11. Massey, R. C., et al. Fibronectin-binding protein A of Staphylococcus aureus has multiple, substituting, binding regions that mediate adherence to fibronectin and invasion of endothelial cells. Cellular Microbiology. 3 (12), 839-851 (2001).
  12. Jashari, R., et al. Belgian and European experience with the European Homograft Bank (EHB) cryopreserved allograft valves--assessment of a 20 year activity. Acta Chirurgica Belgica. 110 (3), 280-290 (2010).
  13. Cheatham, J. P., et al. Clinical and hemodynamic outcomes up to 7 years after transcatheter pulmonary valve replacement in the US melody valve investigational device exemption trial. Circulation. 131 (22), 1960-1970 (2015).
  14. Que, Y. A., et al. Fibrinogen and fibronectin binding cooperate for valve infection and invasion in Staphylococcus aureus experimental endocarditis. The Journal of Experimental Medicine. 201 (10), 1627-1635 (2005).
  15. Veloso, T. R., et al. Bacterial adherence to graft tissues in static and flow conditions. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (1), 325-332 (2018).
  16. Liesenborghs, L., Verhamme, P., Vanassche, T. Staphylococcus aureus, master manipulator of the human hemostatic system. Journal of Thrombosis and Haemostasis. 16 (3), 441-454 (2018).
  17. Chiu, J. J., et al. Shear stress increases ICAM-1 and decreases VCAM-1 and E-selectin expressions induced by tumor necrosis factor-[alpha] in endothelial cells. Artheriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 24 (1), 73-79 (2004).
  18. Jockenhoevel, S., Zund, G., Hoerstrup, S. P., Schnell, A., Turina, M. Cardiovascular tissue engineering: a new laminar flow chamber for in vitro improvement of mechanical tissue properties. ASAIO Journal. 48 (1), 8-11 (2002).
  19. Veltrop, M. H. A. M., et al. Bacterial Species- and Strain-Dependent Induction of Tissue Factor in Human Vascular Endothelial Cells. Infection and Immunity. 67 (11), 6130-6138 (1999).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Staphylococcus Aureus

מאמרים קשורים