הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

ספיגת של חלקיקים חדשים מצופים השומנים, המכיל Falcarindiol על ידי גזע אנושי Mesenchymal

8.5K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/59094

⸱

9 בפברואר 2019

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Chemical Engineering, Biotechnology and Environmental Technology, University of Southern Denmark, 2Center for Single Particle Science and Engineering (SPSE), Institute for Molecular Medicine, Health Sciences, University of Southern Denmark, 3Department of Mechanical Engineering and Material Science, Duke University, 4School of Pharmacy, University of Nottingham

במאמר זה

סיכום

מאמר זה מתאר את ומגעים falcarindiol ב מצופים השומנים חלקיקים nm 74. ספיגת הסלולר של חלקיקים באמצעות תאי גזע אנושי לתוך טיפות השומנים מנוטרת על ידי הדמיה פלורסנט, קונפוקלי. חלקיקים מיוצרים בשיטת הזרקת מהירה של הממס הסטה, הגודל שלהם נמדד עם טכניקה פיזור אור דינאמי.

תקציר

חלקיקים הם מוקד עניין מוגבר מערכות לטיפול בסרטן. חלקיקים מצופים השומנים הינם בהשראת מבנה וגודל ליפופרוטאין בצפיפות נמוכה (LDLs) כי התאים הסרטניים יש צורך מוגבר כולסטרול להתרבות, זו נוצלה כמנגנון להעברת תרופות לסרטן תאים. יתר על כן, בהתאם סמים כימיה, לבצע את התרופה יכול להיות יתרון כדי למנוע השפלה של התרופה במהלך מחזור ויוו. לפיכך, במחקר זה, עיצוב זה משמש כדי לפברק השומנים מצופים חלקיקי של falcarindiol תרופה נגד סרטן, מתן מערך פוטנציאל משלוח חדש של falcarindiol כדי לייצב את המבנה הכימי שלו נגד השפלה ולשפר שלה ספיגת על ידי גידולים. Falcarindiol חלקיקים, עם טפט פוספוליפיד וכולסטרול לבצע הליבה סמים מטוהרים של החלקיק, עוצבו. ציפוי טפט השומנים מורכב 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DSPC) כולסטרול (חול), 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-2000] (2000 פג DSPE) יחד עם פלורסנט תווית DiI (שן טוחנת יחסי של 43:50:5:2). חלקיקים מיוצרים בשיטת הזרקת מהירה, אשר היא טכניקה פשוטה ומהירה, כדי לזרז חלקיקים על ידי ממיס טוב לחילופי הממס אנטי. זה מורכב של זריקה מהירה של פתרון אתנול המכיל את הרכיבים nanoparticle לתוך שלב מימית. גודל חלקיקים פלורסנט נמדד באמצעות פיזור אור דינאמי (DLS) 74.1 ± 6.7 ננומטר. ספיגת של חלקיקים נבחנה האנושי בתאי גזע mesenchymal (hMSCs), עם תמונה באמצעות קרינה פלואורסצנטית ומיקרוסקופיה קונפוקלית. ספיגת של חלקיקים נצפית ב- hMSCs, מציעה את פוטנציאל סמים יציב משלוח מערכת כזו עבור falcarindiol.

מבוא

חלקיקים מצופים השומנים רואים שהאיחוד לגבי תפקידם כמו מערכות עבור סרטן טיפול1. סרטן התיכנות השומנים-מטבולי2 שונה ויש צורך מוגבר כולסטרול להתרבות3. הם overexpress LDLs1 , לקחת LDLs יותר מאשר תאים נורמליים, כך ספירת LDL של חולה סרטן יכולים ליפול אפילו4. ספיגת LDL מקדם פנוטיפים אגרסיבי5 והתוצאה היא התפשטות ופלישה סרטן השד6. שפע של רצפטורים LDL (LDLRs) הוא מחוון prognostic של פוטנציאל גרורתי7. בהשראת LDL ואת ספיגת שלה על ידי התאים הסרטניים, אסטרטגיה חדשה כבר נקרא: להפוך את הסם נראה מזון שהסרטן8. לכן, אלה nanoparticle סמים משלוח עיצובים חדשים8,9,10 בהשראת העיצוב הליבה ואת השומנים-מיוצב של ה LDLs טבעי11 כמנגנון להעברת תרופות נגד סרטן תאים סרטניים. זה פסיבי מיקוד מערכת משלוח תומך לבצע, במיוחד, סמים הידרופוביות, אשר ניתנות בדרך כלל בצורת מינון אוראלי אלא לספק רק כמות קטנה של התרופות למחזור הדם, אז הגבלת שלהם היעילות הצפוי12. כמו עם ליפוזומים התגנבות13, ציפוי פוליאתילן גליקול (PEG) מסייעת להפחית כל תגובה אוטואימונית, מרחיב את זרימת הדם במחזור הדם עבור ספיגת גידול אופטימלי באמצעות כביכול משופרת הסתננות ותוצאה השמירה (EPR) 14 , 15. עם זאת, בנוסף לכך, כמה מופעים, יציבות במחזור והפצה בלתי רצויות של מערכת16, כמה מכשולים נותרו לא פתורים, כגון כיצד, באיזו מידה חלקיקים כאלה נופלים בפח על ידי תאים מה הוא גורלם תאיים. . זה כאן כי מאמר זה עוסק ספיגת ננו-חלקיק של מסוים תרופה נגד סרטן הידרופוביות falcarindiol, באמצעות וידאו, epifluorescence הדמיה טכניקות

מטרת המחקר היא לפברק השומנים מצופים חלקיקי של falcarindiol ללמוד ספיגת תאיים שלהם ב- hMSCs. ובכך, פוטנציאלית ייצוב הניהול שלה, התגברות על האתגרים הקשורים המשלוח ושיפור הביולוגית. לפיכך הערכת מערכת משלוח חדשה על תרופה נגד סרטן. בעבר, falcarindiol יש כבר המתקדם אורלית ויה falcarindiol ריכוז גבוה מטוהרים בתור תוסף מזון17. עם זאת, אין צורך שיטה מובנית יותר לספק את התרופה מבטיח. לכן, חלקיקים falcarindiol, עם פוספוליפיד, כולסטרול לבצע חד שכבתי עם התרופה מטוהרים המהווים את הליבה של החלקיק, עוצבו. השיטה זריקה מהירה של הממס הסטה, שפותחה לאחרונה נידהם. et al. 8, משמש במחקר זה לתמצת את falcarindiol polyacetylene.

השיטה כבר בעבר בשימוש על הזיוף של חלקיקים השומנים לתמצת אבחון הדמיה סוכנים18,19, כמו גם מבחן מולקולות (triolein)27 וסמים (orlistat, niclosamide stearate)8 27, ,28. זה טכניקה פשוטה יחסית כאשר מתבצעת עם מולקולות הנכון. היא יוצרת חלקיקים nanosized, על גבול שלהם התגרענות קריטי (~ 20 ננומטר קוטר), של מומסים בגבול הידרופובי מסיסים מאוד מומס עם הממס קוטביים. ההחלפה הממס מושגת על ידי זריקה מהירה של הפתרון אורגניים לתוך עודף של antisolvent (בדרך כלל, שלב מימית 1:9 אורגני: יחס נפח מימית)20,21.

העיצוב ההלחנה של חלקיקים להצמיח יתרונות מרובים. הרכיבים DSPC:Chol מספקים של טפט מאוד חזק, כמעט אטום, מסתיימים ו מתכלה. יתדות מספק ממשק sterically המייצב אשר פועל כמגן מפני opsonization על ידי המערכת החיסונית, האטת ספיגת כל על ידי מערכת reticuloendothelial (כבד, טחול), הגנה נגד המערכת פגוציט תאי, מניעת שלהם השמירה והשפלה על ידי המערכת החיסונית, ומכאן, והגברת זרימת הדם שלהם בחצי משרה דם22. זה מאפשר את החלקיקים לזרום עד שהם בורחת באתרים נגועים, כגון גידולים, שבו מערכת כלי הדם היא דולפת, ומאפשר EPR-אפקט כדי להצמיח הצטברות פסיבי של החלקיקים. בנוסף, המעיל השומנים מאפשרת לקיים בקרה טובה יותר על הגודל של חלקיקים ע י kinetically לכידת את הליבה שלה גרעין קריטי ממד27,28. ליפידים זירוז מאפייני משטח שונים (כולל פפטיד מיקוד, אשר היה לא עדיין זמין עבור פרויקט זה), ליבה של הסמים טהור ו27,22,polydispersity נמוך28. השיטה המשמשת לניתוח גודל החלקיקים היא DLS, טכניקה המאפשרת לחוקרים למדוד את הגודל של מספר רב של חלקיקים באותו זמן. עם זאת, שיטה זו ניתן הטיה המדידות ועד מידות גדולות, אם חלקיקים אינם monodispersed23. בעיה זו שקובעת עם המעיל השומנים גם כן. עוד פרטים על עיצובים יסוד אלה, כימות של כל המאפיינים ניתנת אחר פרסומים27,28.

התרופה במארז חלקיקים היא falcarindiol, polyacetylene תזונתיים נמצאו צמחים ממשפחת סוככיים. זה מטבוליט משני מסוג אליפטיות C17polyacetylenes אשר נמצא כדי להציג אפקטים מקדמת בריאות, לרבות פעילות אנטי דלקתית, אנטי-בקטריאלי אפקטים cytotoxicity נגד מגוון רחב של שורות תאים סרטן. תגובתיות גבוהה שלה קשורה יכולתה כדי אינטראקציה עם מולקולות שונות, מתנהג כמו סוכן מסוכן מאוד תגובתי נגד mercapto, קבוצות אמינו24. Falcarindiol בעבר הוכח כדי להקטין את מספר הנגעים אמצעים17,הגס25, למרות המנגנונים הביולוגיים הם עדיין לא ידוע. זאת, חשבתי שבגלל זה מקיים אינטראקציה עם מולקולות כגון NF-κB, COX1, COX-2 ומתחים ציטוקינים, מעכבים גידול התקדמות ותא התפשטות מתהליכי שלהם, שמוביל עוצר את מחזור התא, תוך-פלזמית (ER), אפופטוזיס 17,26 בתאים סרטניים. Falcarindiol משמש במחקר זה כמו תרופה נגד סרטן למשל בשל הפוטנציאל נגד סרטן שלה מנגנון הם נחקר כעת, כי זה מראה מבטיח אפקטים נגד סרטן. ספיגת הסלולר של חלקיקים נבדק ב hMSCs, עם תמונה באמצעות epifluorescence ומיקרוסקופיה קונפוקלית. סוג התא זה נבחר בגלל הגודל שלה גדול, הופכות אותה לאידיאלית עבור מיקרוסקופ.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

1. Nanoparticle סינתזה על ידי ממיס מהיר הסטה טכניקה

  1. להגדיר את הפריטים הבאים עבור ההכנה של חלקיקים: בלוק חימום/דוגמת רכז, desiccator, מערכת שחולק דיגיטלי עם מזרק זכוכית 1 מ"ל, בקבוקון זכוכית 12 מ ל, פגים, פרעוש מגנטי (15 מ"מ x 4.5 מ מ, בצורת גליל עם ציפוי טפלון [PTFE]) בתוך המבחנה זכוכית, ואת המאייד על כל ההזמנות.
  2. לוותר על 2.4 mL 250 מניות falcarindiol של מיקרומטר, מומס 70% EtOH תערובת המים בבקבוקון נצנוץ.
  3. להתנדף השבר נוזלי, באמצעות דגימת במסוע במשך כ 4 שעות, כדי להשיג falcarindiol יבש.
    1. הכנס את המבחנה נצנוץ החימום בלוק; במסוע מדגם מספק גז על המדגם באמצעות מחטים פלדת אל-חלד, ריכוז המדגם. להתאדות בטמפרטורת החדר; אל תשתמש חום.
  4. ברגע מיובש, להוסיף את הרכיבים הבאים של ציפוי השומנים לתוך המבחנה נצנוץ הנ ל: µL 16.3 מ מ 31.64 DSPC כלורופורם פתרון מניות, µL 3.4 בפתרון מניות כלורופורם 17.82 מ מ 2000 פג DSPE, µL 24 25 מ מ כולסטרול כלורופורם מניות הפתרון, 6 µL של 4 מ מ DiI כלורופורם פתרון מניות. לנקות את המזרק עם הכלורופורם לאחר הוספת כל רכיב כדי למנוע זיהום לחצות.
    התראה: לסגור מיד את הבקבוקונים שמכילה ליפידים כך הממס לא להתאדות ולשנות, ובכך, הריכוז. לעבוד בשכונה fume.
    הערה: ריכוזי פתרונות מניות כלורופורם יכול להשתנות, בהתאם הספק כימית או דילולים שנעשו במעבדה.
  5. לעטוף את המבחנה עם רדיד אלומיניום על DiI מפני אור. השאירו את הדגימה בן לילה desiccator מתמוססות ההרדמה.
  6. להמיס את הדגימה מיובש באתנול מוחלטת באמצעי אחסון הסופי של 1.2 מ ל, אשר נותן הסופי ריכוזי DSPC, 2000 פג DSPE, כולסטרול ו- DiI של 0.43 מ מ, מ מ 0.05, 0.5 מ מ מ מ 0.02 נקודות, בהתאמה. פתרון זה מייצג את השלב אורגני.
  7. לקחת את המבחנה זכוכית 12 מ ל, למלא אותו 9 מיליליטר מים מטוהרים ולהוסיף, הפרעושים מגנטי לתוך המבחנה המכילה 9 מ ל מים. לשמור את הצנצנת על פגים, זע ב 500 סל ד (איור 1).
  8. לצרף את המזרק זכוכית 1 מ"ל למערכת שחולק ולנקות את זה עם הכלורופורם כדי למנוע כל זיהום. זה על-ידי, לאט לאט למשוך את הכלורופורם לתוך המזרק זכוכית dispensing ידנית לתוך tiems אספן פסולת לפחות 10.
    התראה: זה חייב להתבצע תחת ברדס fume.
  9. פריים את המזרק עם אתנול. לקרקע מחליף הממס הישן, כמו גם מסיר כל בועות האוויר.
    התראה: זה חייב להתבצע תחת ברדס fume.
  10. באמצעות המזרק, תשאף 1 מ"ל של שלב אורגני.
  11. הכנס את המזרק לתוך המבחנה זכוכית, עד אמצע סימן המים 9 מ ל, ולשמור על זה יציב באמצע המבחנה (כפי שמוצג באיור1).
  12. להזריק את הפתרון במהירות הנבחר של הזרקה (833 µL/s) על-ידי לחיצה על לחצן dispense על מערכת שחולק (איור 2). זה יוצר 10 מ"ל של 50 מיקרומטר השומנים מצופים חלקיקי של falcarindiol ב- 10% אתנול המכילים מים.
    הערה: מהירות הזרקת זו נמצאה כדי להשיג את החלקיקים המשובח, קבלת התפלגות גודל החלקיקים צרים. זה חיוני כדי לוודא כי המזרק הוא במרכז, יציב, ישר כאשר מחלק את הפתרון.
  13. מיד לאחר ההזרקה להסיר את המבחנה מערבב ולהעביר את הדגימה אל בקבוק עגול-התחתון 50 מ ל (RBF).
  14. לצרף את RBF המאדה, מתאדים 1 מ"ל של הממס האורגני, תוך שימוש על המאדה בטמפרטורת החדר. למנוע היווצרות בועה עודף.
    הערה: שלב זה תוביל ~ 5 דקות.
  15. להעביר את המתלים nanoparticle RBF בקבוקון זכוכית 12 מ ל אחר. ודא כי אמצעי האחסון 9 מ. פיצול הדגימה ב שתי מבחנות זכוכית 12 מ ל (put 4.5 מ ל כל אחד).
  16. להוסיף 0.5 מיליליטר מים הנדסה גנטית באחת מהמבחנות ו 0.5 מיליליטר 10 x באגירה פוספט תמיסת מלח (PBS) למבחנה אחרים. להוציא 1 מ"ל של כל דגימה עבור מדידת גודל חלקיקים.

2. חלקיקים בגודל הניתוח בטכניקה DLS

הערה: מדידות גודל בוצעו באמצעות מנתח DLS הקובע הפצות גודל החלקיקים. הוא מצויד לייזר mW 100 הפועלת על אורך גל של 662.2 ננומטר, עם גלאי פוטודיודה מפולת שלגים להציב בזווית של 90° זווית התקרית. הקרן מפוזרים על ידי חלקיקים, שזיהה את photodetector.

  1. להפעיל DLS המכשיר ולהגדיר לטמפרטורה הרצויה ב 20 מעלות צלזיוס, עד זה מייצבת.
  2. הגדר את פרמטרי כלי כדלקמן: נתוני רכישת זמן = 4 s, מספר רכישות = 30, פונקציית auto-הנחתה =, על גבולות הזמן אוטומטי-הנחתה = 0.
  3. למלא את cuvette פלסטיק 1 מ"ל של ננו-חלקיק השעיה ולהתחיל את המדידה.
  4. מדווחים את גודל נמדד בהתאם הממס בשימוש (מים או PBS).
    הערה: המדד ב- PBS עשוי שיש לי מושג משוער של גודל התאים בטווח הבינוני בטיפול התאים. הטיפול התא ייעשה עם חלקיקים מומס במים.
  5. חזור על המדידות 24 שעות לאחר הסינתזה, כדי לבדוק אם אגרגציה.

3. טיפול תא

  1. יגדלו hMSCs בינונית מזערי חיוני (מאמ) בתוספת 10% סרום שור עוברית (FBS) ו- 1% פניצילין/סטרפטומיצין, בתוך תא humified ב 37° C עם 5% CO2
    התראה: לעבוד את סטרילי למינארי על שלבים 3.1, 3.2 ו- 3.3.
  2. זרע כ 50,000 תאים כדי להשיג צפיפות התאים של-30% על coverslips #1.5 בעבר המוחלט-EtOH-עיקור להציב לוחות 6-. טוב. הוסף MEM כדי לקבל נפח סופי של 3 מ ל כל היטב. תקופת דגירה של 24 שעות תחת באותם התנאים כמו שלב 3.1. הזרע התאים 24 שעות לפני הטיפול.
    הערה: זה קריטי שהתאים הם נזרע לפחות 24 שעות לפני הטיפול ננו-חלקיק, כדי לוודא כי התאים נמצאים זרימה נאותה.
  3. מבלי להסיר את המדיום, להוסיף 3 µL של הפתרון ננו-חלקיק, ריכוז falcarindiol הסופי של 5 מיקרומטר. Incubate במשך 24 שעות ביממה, באותם התנאים כמו שלב 3.1.
    הערה: ההכנה של חלקיקים בוצע ביום של הטיפול התא, כדי להימנע אגרגציה.
  4. לאחר מכן, לאחר 24 שעות של טיפול, לשטוף את התאים 2 x עם PBS, לתקן אותן בפורמלין 4% 10 דקות בטמפרטורת החדר, ולאחסן אותם ב- PBS ב 4° C עבור אפילו מספר חודשים עד עם תמונה.
    התראה: זה חייב להתבצע תחת ברדס fume.
    1. לחלופין, לאחר קיבוע, 4 ′, 6-diamidino-2-phenylindole (דאפי) צביעת גרעינית יכולה להתבצע. בשביל זה, לאחר תיקון התאים, permeabilize אותם עם 0.1% טריטון X-100 במשך 30 דקות, לשטוף אותם 2 x עם PBS, כתם אותם עם µL 250 300 ננומטר דאפי למשך 5 דקות, מוגן מפני אור.

4. מיקרוסקופ

  1. מיקרוסקופ קרינה פלואורסצנטית
    1. השתמש במיקרוסקופ זריחה widefield מצויד עם מצלמת CCD כפול-אלקטרון כדי לרכוש תמונות. השתמש את 150 x נה 1.45 שמן המטרה וערוץ GFP LP.
  2. מיקרוסקופיה קונפוקלית
    1. לרכוש תמונות מיקרוסקופיה קונפוקלית, שימוש של 63 x 1.4 נה שמן אובייקטיבי, ללייזר (514 ננומטר) DiI, שני הפוטונים לייזר (780 ננומטר) עבור דאפי, כדי לוודא את ספיגת של חלקיקים לתוך התאים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

שני סוגים שונים של חלקיקים היו חלקיקים מפוברק, כלומר טהור falcarindiol falcarindiol מצופים השומנים חלקיקים. ריכוזים שונים של שומנים וכולסטרול נבדקו. כפי שמוצג בטבלה 1, ללא ציפוי חלקיקי שנוצר במים ונמדד ב PBS היה בקוטר של 71 nm ± 20.3 עם מדד polydispersity (PDI) 0.571. פרמטרים אלה נמדדו על מנתח DLS. חלקיקים מצופים השומנים של falcarindiol משמשת את הניסויים, והיא כל כך כולל את הפלורסנט, DiI, היו בגודל דומה, כלומר 74.1 ננומטר ± 6.7; עם זאת, הם כנראה יחסית monodispersed והיה P...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

פרוטוקול מפורט עבור בדיית מצופים השומנים חלקיקים למשלוח סמים עם התם, זריקה מהירה מהר, הדירים מדרגי שיטה של הסטה הממס היה בעקבות27,28 , כפי שהוצגו במאמר זה, להחיל על falcarindiol. על ידי שליטה המהירות של ההזרקה של השלב אורגני לשלב מימית, באמצעות ציפוי ליפידים בריכוזים המתאימים כדי מעיל המרכזי falcarindiol, חלקיק בטווח תת-100 ננומטר יכולה להיות מושגת בהצלחה. האפשרות של polydispersity המושרה בשל מעורבותם של ערבוב הסוערים של משקעים falcarindiol לבד היה נשלט על ידי הנ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים אין לחשוף.

תודות

המחברים תודה ד ר קאסם Moustapha (בית החולים של אוניברסיטת אודנסה, דנמרק) גזע mesenchymal האנושית. המחברים תודה המרכז Bioimaging הרפואי דנית לגישה מיקרוסקופים שלהם. המחברים תודה את היסודות קרלסברג ובירה Villum התמיכה הכספית (E.A.C.). המחברים להכיר את התמיכה הכספית שסופקו על-ידי בפרס נילס בוהר פרופסורה של קרן המחקר הלאומית הדנית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
בקבוקון צוואר בורג 12 מ"ל (זכוכית שקופה, חוט 15-425, 66 X 18.5 מ"מ)Microlab Aarhus A/SML 33154LP
6 צלחות בארGreiner Bio One International GmbH657160
אתנול אבסולוטEMD Millipore (VWR)EM8.18760.1000
כלורופורםראת'בורן כימיקלים בע"מRH1009
כולסטרולAvanti Polar Lipids, Inc.700000P
מיקרוסקופ קונפוקליZeiss LSM510
עובי החלקות כיסוי #1.5Paul Marienfeld GmbH & Co117650
מייבשבנייה
DiIInvitrogenD282
DLSבקמן קולטרDelsaMAXpro 3167-DMP
DSPC (מלאי כלורופורם)Avanti Polar Lipids, Inc.ברקוד 850365C 
DSPE PEG 2000 (מלאי כלורופורם)Avanti Polar Lipids, Inc.880120C
eVol XRSGE מדע אנליטי, Trajan Scientific Australia Pty Ltd.2910200
סרום בקר עובריGibco10270-106
מיקרוסקופ פלואורסצנטיOlymous IX81TIRF ידנית ו-Andor iXon EMCCD
Panasonic MCO-18AC
פרעוש מגנטיVWR כימיקלים15 x 4.5 מ"מצורה גלילית עם ציפוי PTFE
מערבל מגנטיIKART-10
מינימום מדיה חיוניתGibco32561-029
טבליות PBS לתרבית תאיםVWR כימיקלים97062-732
עט/סטרפטוקוקוסVWR כימיקלים97063-708
מלח מאגר פוספט (PBS, pH 7.4)Thermo Fisher10010031
מאייד סיבוביRotavapor, Bü chi Labortechnik AGR-210
רכז לדוגמא סטיוארט, חברת קול-פארמר אינסטרומנט, LLCSBHCONC/1
עצמית עם חממת

מקורות

  1. Firestone, R. A. Low-Density Lipoprotein as a Vehicle for Targeting Antitumor Compounds to Cancer Cells. Bioconjugate Chemistry. 5 (2), 105-113 (1994).
  2. Beloribi-Djefaflia, S., Vasseur, S., Guillaumond, F. Lipid metabolic reprogramming in cancer cells. Oncogenesis. 5 (1), 189(2016).
  3. Xin, Y., Yin, M., Zhao, L., Meng, F., Luo, L. Recent progress on nanoparticle-based drug delivery systems for cancer therapy. Cancer Biology & Medicine. 14 (3), 228(2017).
  4. Merriel, S. W. D., Carroll, R., Hamilton, F., Hamilton, W. Association between unexplained hypoalbuminaemia and new cancer diagnoses in UK primary care patients. Family Practice. 33 (5), 449-452 (2016).
  5. Yue, S., et al. Cholesteryl ester accumulation induced by PTEN loss and PI3K/AKT activation underlies human prostate cancer aggressiveness. Cell Metabolism. 19 (3), 393-406 (2014).
  6. dos Santos, R., et al. LDL-cholesterol signaling induces breast cancer proliferation and invasion. Lipids in Health and Disease. 13 (16), (2014).
  7. Gallagher, E. J., et al. Elevated tumor LDLR expression accelerates LDL cholesterol-mediated breast cancer growth in mouse models of hyperlipidemia HHS Public Access. Oncogene. 36 (46), 6462-6471 (2017).
  8. Needham, D., et al. Bottom up design of nanoparticles for anti-cancer diapeutics: "put the drug in the cancer's food". Journal of Drug Targeting. 24 (9), 836-856 (2016).
  9. Lacko, A. G., Mconnathy, W. J. Targeted cancer chemotherapy using synthetic nanoparticles. United States Patent Application Publication. , Pub. No.: US 2009/0110739 A1 (2009).
  10. Nikanjam, M., Gibbs, A. R., Hunt, C. A., Budinger, T. F., Forte, T. M. Synthetic nano-LDL with paclitaxel oleate as a targeted drug delivery vehicle for glioblastoma multiforme. Journal of Controlled Release. 124 (3), 163-171 (2007).
  11. Teerlink, T., Scheffer, P. G., Bakker, S. J. L., Heine, R. J. Combined data from LDL composition and size measurement are compatible with a discoid particle shape. Journal of Lipid Research. 45 (5), 954-966 (2004).
  12. Schweizer, M. T., et al. A phase I study of niclosamide in combination with enzalutamide in men with castration-resistant prostate cancer. PLoS ONE. 13 (8), 0202709(2018).
  13. Allen, T. M., Hansen, C. Pharmacokinetics of stealth versus conventional liposomes: effect of dose. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Biomembranes. 1068 (2), 133-141 (1991).
  14. Maeda, H. The Enhanced Permeability and Retention (EPR) Effect in Tumor Vasculature: The Key Role of Tumor-Selective Macromolecular Drug Targeting. Advances in Enzyme Regulation. 41 (1), 189-207 (2001).
  15. Wong, A. D., Ye, M., Ulmschneider, M. B., Searson, P. C. Quantitative Analysis of the Enhanced Permeation and Retention (EPR) Effect. PLoS ONE. 10 (5), 0123461(2015).
  16. Khodabandehloo, H., Zahednasab, H., Hafez, A. A. Nanocarriers Usage for Drug Delivery in Cancer Therapy. Iranian Journal of Psychiatry and Behavioral Sciences. 9 (2), (2016).
  17. Kobaek-Larsen, M., El-Houri, R. B., Christensen, L. P., Al-Najami, I., Fretté, X., Baatrup, G. Dietary polyacetylenes, falcarinol and falcarindiol, isolated from carrots prevents the formation of neoplastic lesions in the colon of azoxymethane-induced rats. Food & Function. 8, 964-974 (2017).
  18. Hervella, P., Parra, E., Needham, D. Encapsulation and retention of chelated-copper inside hydrophobic nanoparticles: Liquid cored nanoparticles show better retention than a solid core formulation. European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 102, 64-76 (2016).
  19. Hervella, P., et al. Chelation, formulation, encapsulation, retention, and in vivo biodistribution of hydrophobic nanoparticles labelled with 57Co-porphyrin: Octyl Amine ensures stable chelation of cobalt in Liquid Nanoparticles that accumulate in tumors. Journal of Controlled Release. , (2018).
  20. Zhigaltsev, I. V., et al. Bottom-up design and synthesis of limit size lipid nanoparticle systems with aqueous and triglyceride cores using millisecond microfluidic mixing. Langmuir. 28 (7), 3633-3640 (2012).
  21. Aubry, J., Ganachaud, F., Cohen Addad, J. -P., Cabane, B. Nanoprecipitation of Polymethylmethacrylate by Solvent Shifting:1 Boundaries. Langmuir. 25 (4), 1970-1979 (2009).
  22. Karnik, R., et al. Microfluidic Platform for Controlled Synthesis of Polymeric Nanoparticles. Nano Letters. 8 (9), 2906-2912 (2008).
  23. Gaumet, M., Vargas, A., Gurny, R., Delie, F. Nanoparticles for drug delivery: The need for precision in reporting particle size parameters. European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 69 (1), 1-9 (2018).
  24. Christensen, L. P., Brandt, K. Bioactive polyacetylenes in food plants of the Apiaceae family: Occurrence, bioactivity and analysis. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 41 (3), 683-693 (2016).
  25. Kobaek-Larsen, M., Christensen, L. P., Vach, W., Ritskes-Hoitinga, J., Brandt, K. Inhibitory Effects of Feeding with Carrots or (-) -Falcarinol on Development of Azoxymethane-Induced Preneoplastic Lesions in the Rat Colon. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 53, 1823-1827 (2005).
  26. Jin, H. R., et al. The antitumor natural compound falcarindiol promotes cancer cell death by inducing endoplasmic reticulum stress. CellDeath & Disease. 3, 1-9 (2012).
  27. Walke, P. Physico-Chemical Parameters of Nanoparticles that Govern Prodrug Design and Application in Anticancer Nanomedicine in Physics, Chemistry, Pharmacy. University of Southern Denmark (SDU). , (2018).
  28. Walke, P. B., Hervella, P., Needham, D. Lipid-Coated Stealth Nanoparticles of Novel Hydrophobic Prodrug, Niclosamide Stearate, as Cancer Therapeutic: Formulation and Physico-Chemical Characterization of Nanoparticles. 6th International Pharmaceutical Federation Pharmaceutical Sciences World Congress. , Stockholm, Sweden. (2017).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

הובלת פלקרינדיולשיטת הזרקה מהירהפיזור אור דינמימיקרוסקופיה קונפוקליתדימוי פלואורסצנטיספיגת ננוחלקיקיםאנקפסולציה של תרופותאנליזת גודל חלקיקים
ספיגת של חלקיקים חדשים מצופים השומנים, המכיל Falcarindiol על ידי גזע אנושי Mesenchymal
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.