הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

מודל לשחזור ואמין קריטי בגודל סגמנטלי הירך פגם בחולדות התייצב עם Fixator חיצוני מותאם אישית

8.7K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/59206

⸱

24 במרץ 2019

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Orthopedics and Rehabilitation, University of Wisconsin-Madison, 2Department of Biomedical Engineering, University of Wisconsin-Madison, 3Summit Orthopedics

במאמר זה

סיכום

In vivo בתרבית של מודלים של פגמים קריטיים בגודל העצם חיוניים עבור החוקרים ללמוד מנגנוני הריפוי וטיפולים אורתופדיים. כאן, אנחנו מציגים את פרוטוקול עבור היצירה של פגמים לשחזור, סגמנטלי, הירך אצל חולדות מיוצב בעזרת קיבוע חיצוני.

תקציר

מחקר אורטופדי מסתמכת במידה רבה על מודלים בעלי חיים לימוד מנגנונים של עצם ריפוי ויוו , כמו גם לחקור את טכניקות טיפול חדש. בגודל קריטית פגמים סגמנטלי מאתגרת להתייחס קלינית, מאמצי המחקר יכול להפיק תועלת מודל בעל חיים קטן אמין, פעולות כירורגיות של פגם הירך סגמנטלי. במחקר זה, אנו מציגים פרוטוקול כירורגי ממוטב עבור יצירה עקבית, לשחזור של פגם קריטי 5 מ מ diaphyseal עצם הירך עכברוש התייצב עם fixator חיצוניים. Ostectomy diaphyseal בוצעה באמצעות ג'יג מותאם אישית כדי למקם קירשנר 4 חוטים bicortically, אשר יוצבו התקן מותאם fixator חיצוניים. כותש העצמות נדנוד נעשה שימוש כדי ליצור את הפגם. ספוג קולגן לבד או ספוג קולגן טבולים rhBMP-2 היה מושתל לתוך הפגם, ריפוי עצם נוטרו מעל 12 שבועות באמצעות צילומי רנטגן. לאחר 12 שבועות, חולדות הוקרבו ולאחר ניתוח היסטולוגית בוצעה הפקד נכרת וטיפל עצמות הירך. פגמים עצם המכיל רק קולגן ספוג הביא והמעלית, בזמן הטיפול rhBMP הניבו את היווצרות עצם חדש וחסר חידוש שיפוץ. קיבוע טוב התאושש לאחר ההשתלה, וחיצוניים בעלי חיים הוכיחו מצליח לייצב את הליקויים הירך מעל 12 שבועות. מודל ניתוח יעיל זה יכול להיות מיושם בקלות ללמוד ריפוי עצם ואף מבחן biomaterials אורטופדי חדש ואת טיפולים משובי vivo בתוך.

מבוא

טראומה אורתופדיה הניתוח מתמקד בטיפול במגוון רחב של שברים מורכבים. קריטי עצם סגמנטלי diaphyseal פגמים הוכיחו קשה לטפל קלינית בשל היכולת משובי ירידה של השרירים המקיפים, קרום העצם, כמו גם על הכשל מקומי אנגיוגנזה1. טכניקות הטיפול מודרניים כוללים לקיבעון אופרטיביים עם בעזרת השתלת עצם, מתעכבת בעזרת השתלת עצם (Masquelet), עצם תחבורה, פיוז'ן, או קטיעה2,3,4. אצל רוב המטופלים שיש להם פונקציה אמבולטורי נשמר לאחר הטראומה שלהם, גפיים דיסטלי מתפקד היטב, להציל איבר ברור אפשרות טיפול טוב יותר5. טיפולים אלה הצלה לעיתים קרובות דורשים התערבויות כירורגיות בשלבים במהלך קורס טיפול ארוך. יש מחברים הראו שאת קיבוע חיצוני עדיפה לעומת שטח פנימי קיבוע ליישומים אלה עקב הרס הרקמה ירד במהלך ההשתלה, ירד מושתל, ו מוגברת לאחר הניתוח כוונון של fixator6. ניסוי מבוקר אקראי פרוספקטיבי זאת, כעת לדרך כדי לסייע להבהיר את המחלוקת פנימי לעומת קיבוע חיצוני בשברים פתוחים חמורה של שוקה7. למרבה הצער, עם הטיפול או שנבחר, סיבוך משמעותי וקצבי כשל נמשכות8,9. עם אחת מהשיטות הטיפול, לגבי אובדן עצם סגמנטלי, המנתח חייב להתמודד עם פגמים diaphyseal סגמנטלי שמציגים אתגרים משמעותיים. תיקונים של פגמים סגמנטלי חייב למקסם את ייצוב העצם ולשפר בו-זמנית את תהליך osteogenic10,11.

בשל החשיבות הקלינית, אך נפח נמוך, קריטי בגודל diaphyseal סגמנטלי פגמים, יעיל, לשחזור במודל חיה יש צורך לאפשר לצוותים מחקר לקדם את טכניקות הטיפול ולשפר בסופו של דבר את התוצאות הקליניות. החוקרים צריכים ללמוד ויוו הפיזיולוגיות מנגנוני הריפוי במודל בעלי חיים יונקים. בזמן כזה מודלים של קיבוע חיצוני כבר קיימים12,13,14,15, אנו מקווים לספק שיטה אמינה יותר עבור הלא-האיגודים ללא טיפול בבעלי החיים, הקטנת עלויות באמצעות הבחירה של חומרים fixator במחירים סבירים, מתאר פרוטוקול כירורגית פשוטה ליישום קל כדי מחקרים עתידיים. המטרה העיקרית של פרוטוקול זה היא ליצור מודל לשחזור ואמין של פגם diaphyseal קריטי אצל חולדות. ההליך הוערך על-ידי הערכת פעולות הייצוב והשימור עצם לריפוי עצמות הירך עכבר מעל 12 שבועות. מטרות משניות כללו: ביצוע מודל סבירים כמו עלות יעילה ככל האפשר, לפשט את הגישה כירורגי, מייצב, ומבטיחה אתית על בעלי החיים. הסופרים ואנשי צוות המחקר ערכו ניסויים מוקדמים עם מגוון של biomaterials שונים וטיפולים משובי פוטנציאל לשיפור ריפוי פגם סגמנטלי זה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

החולדות השתמשו במחקר זה קיבל טיפול יומי בהתאם להנחיות AVMA על המתת חסד של בעלי החיים: 2013 מהדורה16. אכפת לי חיה המוסדית והוועדה שימוש באוניברסיטת ויסקונסין-מדיסון הערכה, אישור פרוטוקול נסיוני זה לפני תחילת הפרויקט.

1. בעלי חיים

  1. השתמש outbred ספראג-Dawley זכר לעכברושים במשקל של-350 גרם.

2. הכנה של עצם Morphogenetic חלבון-2 (rhBMP 2) ספוג ספוג פיגומים

הערה: הכנה לגרדום צריך להתרחש רק לפני ההשתלה של עצם הירך (ראה צעד 6.14).

  1. בצע את הוראות היצרן לשימוש של ערכת שתל עצם rhBMP-2 הוקמה המכיל של קולגן ספוג, rhBMP lyophilized-2, ובמים סטריליים שיחזור17. שמירה על עקרות, לשקם את rhBMP-2 עם המים סטרילי כדי ריכוז של 1.5 mg/mL.
  2. באמצעות מספריים סטרילי וסרגל סטרילי, לקצץ את הספוג קולגן רטובה rhBMP-2 כדי לשנות את צורתו להתאמה של 5 מ"מ x 3 מ"מ x 3 מ"מ פגם.
  3. באמצעות מזרק, פזר את הפתרון rhBMP-2 באופן שווה מעל הספוג קולגן כך זה נספג.

3. הכנת התקן מותאם אישית קיבוע חיצוני

הערה: ראה איור 1A לקבלת הפירוט המלא יותר של ממדים.

  1. לחתוך אלומיניום גיליון מניות (6061, סוג 0.088" עובי) לשתי חתיכות (1.4" x-6") באמצעות פאזל או כלי אחר המתאים.
  2. הר שלמה למכונת הטחינה ו... באמצעות 1/8" ב- 90°-נקודת קרביד התרגיל טחנה, ארבעה חריצים 'וי' (0.035" עמוק) לאורכו. להשאיר את השני ללא חתכים.
  3. לחתוך לוחות בודדים של 0.3" רוחב של השני החלקים (איור 1B). למדוד, לקדוח חורי עבור הליך משנה 4-40. הקש על צלחת עם חריצים 'וי' עם החוט 4-40. תרגיל את הצלחת ללא חריצים עבור תרגיל הגוף #4 הבורג.
  4. חול שני החלקים לעגל פינות ולהפחית את משקל (איור 1C).
  5. לעזאזל עם חתיכות יחד עם 4-40, 18-8 נירוסטה לחצן בראש כיפה ברגים (0.25") כך חריצים מיושרים נגד במשטח רגיל (איור 1D)

4. הרדמה הליך, שיכוך כאבים

  1. לגרום הרדמה על ידי הנחת החולדה בחדר אינדוקציה אספקת 4 L O /min2עם 4% איזופלוריין.
    התראה: אנשי המחקר חייב למנוע שאיפת גז הרדמה, לשמור על המנוע תקין ואוורור במעבדות.
  2. להסיר את החולדה מן החדר לאחר העכברוש מאבד שקמה בעצמה אחרי שמפילים רפלקס, לצרף קונוס האף ולמקם במינון תחזוקה של הרדמה דרך האף (O2 משלוח שיעור לאיזופלוריין 2-3 L/min ו- 0.8%).
  3. מקם את החולדה על כרית חימום או תחת אור התחממות כדור הארץ כדי למנוע היפותרמיה.
  4. לאשר את עומק נאותה של הרדמה על ידי צובט את הבוהן או בדיקה את רפלקס palpebral.
  5. שימון חלות על העיניים כדי למנוע ייבוש מתוך הקרנית.
  6. לספק זריקה תת עורית של הבופרנורפין המורחבת לשחרר (1 מ"ג/ק"ג) על המטען/dorsum של העכברוש, רחוק באתר כירורגית, לספק שיכוך כאבים עד 3 ימים לאחר הניתוח.

5. aseptic והכנה המניעה לאנטיביוטיקה

  1. לגלח את האזור סביב hindleg באמצעות הצלעה 13, כף הרגל, האמצע הגבי האמצע הגחון כשוליים.
  2. סקראב גילח אזור בעזרת גזה סטרילית של 2 x 2, ספוגה povidone 10%-ואחריו 70% יוד EtOH (4 פעמים כל אחד, לסירוגין).
  3. לנהל זריקה תוך שרירית של צפאזולין (20 מ"ג/ק"ג) לתוך הארבע פעיל.
  4. לנהל enrofloxacin (0.25 mg/ml) במי שתייה במשך 7 ימים במשככי להגנה המשך באנטיביוטיקה.
  5. במקום חולדות על תרופות מזון (למשל, Uniprim) עבור משך המחקר כדי למנוע דלקות בדרכי pin.
  6. חלות אנטיביוטית זוגי הממשק העור פינים פעם אחת מדי יום במשך 3 ימים במשככי.
    הערה: להימנע כל פין קיבוע חיצוני או להשתמש במלחציים התרופפות אשר יכולים לתרום להתפתחות של זיהום.

6. ניתוח

הערה: בצע מתואמת של מאמץ כדי לשמור על סביבת עבודה בעלת שדה סטרילי ופעל סטרילי טכניקה לאורך כל מכלול של התיק.

  1. להרחיב את הרגל מגולח דרך מאסו fenestrated, דביק ברור וספסל כירורגי מכסה במגבות סטרילי כדי ליצור שדה סטרילי.
  2. ימשש עצם הירך ולהשתמש להב #15 כדי ליצור חתך anterolateral דרך העור המשתרעת עצם הפיקה הירך-עצם הירך הפרוקסימלית.
  3. בזהירות פצעים וחתכים fascia לרוחב הרגל לאורך מחצה intermuscular להפריד את vastus lateralis שריר הירך הארבע-ראשי anteriorly מיתרי הברך posteriorly עד עצם הירך לרוחב חשוף. לשמר את ההכנסה גיד gluteal החוטף-הירך.
  4. לבצע ניתוח זהיר, רקמות רכות במבניו atraumatic ולחשוף את עצם הירך ב שלה diaphysis אמצע החל על פני לרוחב. כדי לעשות זאת, השתמש בלהב #15 לחתוך בעדינות את השריר מן העצם שמתחת על ידי שמירה על הלהב מקבילים נגד קווי המתאר של פני השטח של העצם. השתמש פריוסט כדי להרים את השריר מן העצם חשוף כמו זה הוא גזור והמשך סביב הירך עד 7-10 מ מ diaphysis המרכזית נוקתה של רקמות רכות מכל הצדדים כדי להתכונן ostectomy.
    הערה: להימנע מפציעה על הצרור נוירו-וסקולריים הירך המדיאלי.
  5. הוספת 4 חוטים קירשנר (k) 1.0 מ מ: 2 proximal וביים 2 דיסטלי של עצם הירך בניצב עצם הירך לרוחב, ישר לרוחב כדי המדיאלי. ודא שכל הפינים לעסוק בשני cortices (bicortical) ליציבות נאותה (איור 2 א).
  6. להתחיל עם ה-pin דיסטלי ביותר קודם, רק ברמה של העלי הרוחבית. המקום פאזל פלאש בעצם הירך לרוחב והכנס k-חוט 1.0 עצה משורשרות.
  7. שמירה על מיקומו של התוכנית על העצם, לזהות בו ה-pin מקורב ביותר יזין העצם מבוסס על החורים יג. אחרי המיקום בקפידה פצעים וחתכים במקביל סיבי הגיד gluteal כנדרש, כדי ליצור פער קטן בתוך הרקמה עבור ה-pin proximal לעבור, ובכך למזער את הפגיעה iatrogenic הגיד. תרגיל 1.0 מ מ ללא הליכי משנה k-חוט פער זה, שוב להבטיח שה-pin עוסקת בשני cortices (איור 2B).
  8. של ג ' יג שמרו על קשר עם העצם, תרגיל שני 1.0 מ מ מושחל k-חוטים, אחד משני צדי פגם עתידיים באתר. ודא סיכות לעסוק בשני cortices (איור 2C).
  9. מניחים את fixator חיצוני בר ברמה 1 ס מ מעל העור, לדפוק בחוזקה, נועל את המחסום במקום. קליפ את אורך pin עודף (איור דו-ממדי).
  10. להכין ostectomy (פגם הבריאה) על-ידי הצבת מפסק קטן, מעוקל סביב עצם הירך anterior ואת אחורי כדי להגן על הרקמות שמסביב, שריר, צרור נוירו-וסקולריים. ניצול הסאגיטלי ~ 5 מ"מ נדנוד ראתה להב, בזהירות רבה ליצור פגם סגמנטלי 5 מ מ דרך diaphysis מאמצע. החל אור, גם הלחץ עם המסור להימנע מיותר שבר (2E איור).
  11. להחיל כמויות קטנות של השקיה (בטמפרטורת החדר 0.9% סטרילי תמיסת מלח (NS)) לפי הצורך תוך יצירת פגם כדי להימנע תרמי ונמק של העצם.
  12. לרוקן את הפצע באמצעות 10 מ"ל של NS אחרי יצירת את הפגם.
  13. לנהל 0.1 מיליליטר 0.25% נמשך עם אפינפרין (1:200, 000) על הפצע שיכוך כאב, מצר את כלי הדם.
  14. הוספה לגרדום (5 מ מ x 3 מ מ x 3 מ מ) של קולגן ספוג או rhBMP-2 ספוג ספוג (מתוך שלב 2) לתוך הפגם. כל לגרדום צריך בגודל כראוי כדי להקיף את אורך ונפח של הפגם, עוזר השנורר להישאר בעמדה.
    הערה: בשלב זה, מתחמי mRNA עשוי להיות מוכן והזריק כמתואר בצעדים 7.1-7.3 להלן אם ביצוע הדמיה ביולומינסנציה.
  15. סגור את המטוס שריר באמצעות התבנית קטע פשוט בתפר שנספג 4-0. סגור את שכבת העור באמצעות תבנית subcuticular פועל בתפר שנספג 4-0, איך מתקדמת כדי לסגור פערים סביב הפינים בולטות.
  16. הסר את החולדה קונוס האף, שנותרו על כרית חימום, ונטר ברציפות עד העכברוש הוא מסוגל באופן עקבי לשמור על תנוחה זקופה. בשלב זה, מניחים בתוך כלוב נקי כדי להתאושש.

7. הכנת mRNA ומורכבת והדמיה ביולומינסנציה

הערה: תרביות תאים עם מתחמי mRNA צריכה להתבצע במהלך הניתוח יום אחד לפני הפריה חוץ גופית הדמיה. להשתמש בטכניקות סטריליות בעת טיפול mRNA.

  1. µL מיקס 10 של ה-mRNA קידוד עבור Gaussia לוציפראז (מניות ריכוז של µg 1/µL) עם 30 µL של סוכן transfecting lipidic.
  2. לאפשר מתחמי ה-mRNA-השומנים לטופס על-ידי המקננת לפחות 5 דקות בטמפרטורת החדר. הסוכן transfecting lipidic לדחוס את מולקולות ה-mRNA, ייצוב אותם ושיפור יעילות תרביות תאים.
    הערה: אם מתחמי לא משמשים באופן מיידי, לאחסן אותם בקרח לתקופה מקסימלית של 1 h נגד חשמל סטטי.
  3. באמצעות פיפטה µL 20 מצוידים עם טיפים מסוננים, להזריק חצי נפח של mRNA מתחמי לקצה הדיסטלי, מקורב הפגם, בהתאמה.
  4. למחרת, 3 דקות לפני הדמיה, עזים ומתנגד העכברוש באמצעות איזופלוריין בשאיפה כפי שתואר קודם לכן ב- 4.1 שלב.
  5. מקם את החולדה ויוו הדמיה קאמרית מצויד קונוס האף אספקת איזופלוריין תחזוקה (0.8% איזופלוריין, O2 קצב משלוח של 2-3 L/min).
  6. מזריקים coelenterazine resuspended בתוך תמיסת מלח במינון של 4 מ"ג/ק"ג משקל גוף בקרבתו של הפגם.
  7. לרכוש תמונות ביולומינסנציה עם ה- ויוו מערכת (IVIS) על פי הוראות היצרן18הדמיה.

8. הדמיה פרוטוקול

  1. לאחר כיול המכשיר רדיוגרפי רגיל, מערכת צילום רנטגן19, עזים ומתנגד עכברים באמצעות איזופלוריין נשאפים כמו שתואר לעיל (ראה שלב 4.1) ומקם את החולדה בגביע האף עם איזופלוריין בשאיפה (0.8% איזופלוריין, O2 קצב משלוח של 2-3 L/min) עבור radiograph הירך anteroposterior (AP).
    1. כאשר העכבר נמצא recumbency בחזה ובצלעות, להתקדם קדימה, את hindlimb כירורגית כיפוף בירך, להחניק משותף. להגמיש את המפרק חנוק כ 90°. קלטת הצד plantar כפת, קרוב לקיר הגוף. מיקום עצם השוקה קדימה של עצם הירך כדי לשלול את האפשרות של superimposing את העצמות. כדי לספק החטיפה קלה של הירך, במקום ספוג שקוף (כ 15 מ מ עבה) באזור המפשעה. ואז להשיג תמונה (הגולגולת סימטרית) קדמי-את ישבנה של עצם הירך.
  2. חזור על תצוגה רדיוגרפי זו עצם הירך AP מיד לאחר הניתוח, 4 שבועות, ו- 12 שבועות. השתמש גאזה למצב כראוי את הגפיים של החיה איכות, הדמיה עקבית.
  3. הסר את החולדה קונוס האף ונטר ברציפות עד העכברוש הוא מסוגל באופן עקבי לשמור על תנוחה זקופה. אז, המקום בחזרה לתוך הכלוב.

9. הליך היסטולוגית

  1. המתת חסד חולדות בחדר עם CO בשאיפה2 על פי סטנדרטים אתיים AVMA16.
  2. לאחר המתת חסד, לגלח את hindlimb, להסיר את העור מן החמורים פעיל, disarticulate הירך בירך. הסר בזהירות את כל רקמות רכות של עצם הירך פעיל (כולל כל השרירים, הגידים והרצועות). להשאיר רק שכבה דקה של השרירים המקיפים את אתר פגם כדי להגן על האזור הריפוי מנזק בהיסח הדעת במהלך ניתוח.
  3. למקם את עצם הירך 10% נייטרלי Buffered פורמלין בטמפרטורת החדר במשך 3-4 ימים כדי לאפשר את הקיבעון. לשמור על פורמלין 15:1 יחס נפח הרקמה. לשנות את הפתרון ברגע באמצע תהליך קיבוע.
  4. Decalcify עצם הירך ב- 15% Ethylenediaminetetraacetic חומצה (EDTA) pH 6.5 פתרון עבור 3-4 שבועות. לאסוף צילומי טורי כדי לקבוע נקודת קצה decalcification.
  5. קטיעות עצם הירך longitudinally עם חתך ממכסה והשתרשה עמוק בלבה את ישבנה במטוס מאמצע-הווריד. להגיש רקמות פרפין סטנדרטי הטבעה hematoxylin ואת אאוזין (H & E) מכתים.
  6. לשלוח שקופיות H & E פתולוג עבור הערכה היסטולוגית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

הניתוחים בוצעו בעוד שעה בקירוב על ידי מנתח אחד עם העזרה של עוזר אחד. לאחר ניתוח אופטימיזציה, אינטרה - וסיבוכים לאחר הניתוח היו במידה רבה ממוזער, שימוש המנגנון ג'יג הבטיחו גודל עקבית (5 x 3 x 3 מ מ), לוקליזציה של פגמים הירך. חולדות היו פעולות כירורגיות הבאות מיד ההתאוששות מן ההרדמה, לא נראה לי כל דפוסי התנהגות שונה; ההליכה שלהם הייתה לא antalgic, הם לא הופיעו כדי להיות מוטרד על ידי fixator חיצוניים.

הליכי משנה שאינם k-חוטים נבחרו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

מודלים בעלי חיים קטנים של פציעות אורטופדיות כגון שברים בעצמות מלאה לאפשר מחקר זה בוחן את המנגנונים של הפוטנציאל הטיפולי biomaterials20פרכת והערכה. מחקר זה מציג חולדה פגם סגמנטלי דגם מיוצב על ידי fixator חיצוני מותאם אישית זה צוות המעבדה, הנדסה ביו-רפואית ניתן להפיק בקלות עבור מחקרים נוספים של תומך osteosynthetic עצם תיקון.

מחקרים קודמים באמצעות פגמים קריטיים בגודל חולדה דגמים בדרך כלל להסתמך על קיבוע פנימי צלחות21,22<...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים ללא אינטרסים כלכליים מתחרים או הטבות. היו בלי הטבות קיבל ישירות או בעקיפין על ידי מחברי מאמר זה.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי מענק ציוד-NIH 1S10OD023676-01 עם תמיכה נוספים הניתנים על-ידי מחלקות של אורטופדיה באוניברסיטת ויסקונסין, שיקום, בית הספר לרפואה ובריאות הציבור. ברצוננו להודות קרבון סרטן מרכז תמיכה גרנט P30 CA014520 ושימוש של UW של מתקן הדמיה חיה קטנה שלהם, כמו גם מענק הכשרה-NIH 5T35OD011078-08 לתמיכה של מרטין ה'. אנו מודים גם ומייקל שאנון מרי סו על תמיכתם של השותפות התחדשות השלד והשרירים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
0.9% תמיסת מלח סטריליתבקסטר2F7124משמש להשקיית פצעים והחזרת לחות
10% יוד/פובידוןCarefusion1215016משמש להכנת העור
10% ניטרלי חוצץ פורמליןVWR89370094משמש כחוט קירשנר קיבעוני
1 מ"מ ללא הברגהDePuy SynthesVW1003.15מעוקר, משמש לסיכה
הפרוקסימלית ביותרחוט קירשנר מושחל 1 מ"מDePuy SynthesVW1005.15מעוקר, משמש ל-3 חריצי הסיכות הדיסטליים ביותר
2x2 גזהCovidien4006130מעוקר, משמש להכנת עור וספיגת דם
4-0 Vicryl SutureEthicon4015304משמש לסגירת שכבות שרירים ועור
4-40 x 0.25 אינץ', 18-8 ברגי כובע ראש כפתור נירוסטהגנרי הרכבה
4200 נהג אלחוטיStrykerOR-S-4200משמש לקידוח חוטי קירשנר
4x4 גזהCovidien1219158מעוקר, משמש לספיגת דם
70% אתנולמשמש להכנת העור
BaytrilBayer Healthcare LLC, חטיבת בריאות בעלי חיים312.10010.3נוסף למים כאנטיביוטיקה
CefazolinHikma תרופות8917156אנטיביוטיקה טרום ניתוחית
CleanCap Gaussia Luciferase mRNA (5moU)TriLink BiotechnologiesL-7205קידוד mRNA שונה לגאוסיה לוציפראז, שמור על קרח במהלך השימוש
Coelenterazineמקורי NanoLight Technology303מצע לגואסיה לוציפראז, המשמש להערכת פעילות לוציפראז in vivo
משחה אנטיביוטית כפולהJohnson & ג'ונסון צרכן בע"מ8975432מיושם על אתרי סיכה לאחר הניתוח כטיפול בפצעים
מיקרובלייד כפול חיתוךסטרייקר5400-003-410משמש ליצירת פגם של 5 מ"מ בעצם הירך
חומצה אתילנדיאמין טטראצטית (EDTA)פישרBP120-500משמש להסרת אבדן עצם כדי להתכונן להיסטולוגיה
שחרור מורחב בופרנורפיןזואופארםמשמש כשיכוך כאבים 3 ימים
Fenestrated וילונות3M1204025משמש להקמת כבל ידית שדה סטרילי
עבור TPSStrykerOR-S-5100-4Nמשמש ליצירת פגם של 5 מ"מ בעצם הירך
כרית חימוםK& H Pet Products121239תחזוקת טמפרטורת גוף חולדה
מברג ראש משושהWiha263/1/16 " X 50הידוק מקבע חיצוני
תא אינדוקציהגנריתלחולדות
להחדיר ספוג קולגן עם חלבון מורפוגני עצם אנושי רקומביננטי-2מדטרוניק7510200טיפול רלוונטי קלינית המשמש כבקרה חיובית
IsofluraneClipper10250הרדמה לחולדות
IVISPerkin Elmer124262שיטת הדמיה ביולומינסנציה
ג'יגמותאם אישיתמשמש להצבת סיכות ביקורטיקליות
Lipofectamine MessengerMAXFisher ScientificLMRNA003חומר קומפלקס mRNA המאפשר העברת mRNA
Sensorcaine-MPF (Bupivicane (0.25%) ואפינפרין (1:200,000))APP Pharmaceuticals, LLCNDC 63323-468-37מיושם על אתר כירורגי לשיכוך כאבים והתכווצות כלי דם
מים סטרילייםHospira8904653משמש כממס לאבקת צפזולין
טיטניום לוחות קיבוע חיצונייםבהתאמה אישיתבבית עם גרוטאות טיטניום ומכונת כרסום קונסולת
ביצועים כוללת (TPS)StrykerOR-S-5100-1משמש ליצירת פגם של 5 מ"מ בעצם הירך
TPS MicroSaggital מסורStrykerOR-S-5100-34משמש ליצירת פגם של 5 מ"מ בעצם הירך
Ultrafocus Faxitron עם DXAFaxitronשיטת הדמיה רדיוגרפית ברזולוציה גבוהה
תזונת חולדות UniprimEnvigoTD.06596דיאטת חולדות רפואית
מתג יד אוניברסלי ל-TPSStrykerOR-S-5100-9משמש ליצירת 5 מ"מ פגם בעצם הירך
דבק רקמות Vetbond3M1469סגירת עור
מקבע חיצוני הרדמה מוכן מערכת

מקורות

  1. Filipowska, J., Tomaszewski, K. A., Niedźwiedzki, Ł, Walocha, J. A., Niedźwiedzki, T. The role of vasculature in bone development, regeneration and proper systemic functioning. Angiogenesis. 20 (3), 291-302 (2017).
  2. Charalambous, C. P., Akimau, P., Wilkes, R. A. Hybrid monolateral-ring fixator for bone transport in post-traumatic femoral segmental defect: A technical note. Archives of Orthopaedic and Trauma Surgery. 129 (2), 225-226 (2009).
  3. Xing, J., et al. Establishment of a bilateral femoral large segmental bone defect mouse model potentially applicable to basic research in bone tissue engineering. The Journal of Surgical Research. 192 (2), 454-463 (2014).
  4. Chadayammuri, V., Hake, M., Mauffrey, C. Innovative strategies for the management of long bone infection: A review of the Masquelet technique. Patient Safety in Surgery. 9 (32), (2015).
  5. Koettstorfer, J., Hofbauer, M., Wozasek, G. E. Successful limb salvage using the two-staged technique with internal fixation after osteodistraction in an effort to treat large segmental bone defects in the lower extremity. Archives of Orthopaedic and Trauma Surgery. 132 (19), 1399-1405 (2012).
  6. Fragomen, A. T., Rozbruch, S. R. The mechanics of external fixation. The Musculoskeletal Journal of Hospital for Special Surgery. 3 (1), 13-29 (2007).
  7. O’Toole, R. V., et al. A prospective randomized trial to assess fixation strategies for severe open tibia fractures: Modern ring external fixators versus internal fixation (FIXIT Study). Journal of Orthopaedic Trauma. 31, S10-S17 (2017).
  8. Fürmetz, J., et al. Bone transport for limb reconstruction following severe tibial fractures. Orthopedic Reviews. 8 (1), 6384(2016).
  9. Dohin, B., Kohler, R. Masquelet’s procedure and bone morphogenetic protein in congenital pseudarthrosis of the tibia in children: A case series and meta-analysis. Journal of Children's Orthopaedics. 6 (4), 297-306 (2012).
  10. Einhorn, T. A., Gerstenfeld, L. C. Fracture healing: Mechanisms and interventions. Nature Reviews Rheumatology. 11, 45-54 (2015).
  11. Pascher, A., et al. Gene delivery to cartilage defects using coagulated bone marrow aspirate. Gene Therapy. 11 (2), 133-141 (2004).
  12. Glatt, V., Matthys, R. Adjustable stiffness, external fixator for the rat femur osteotomy and segmental bone defect models. Journal of Visualized Experiments. (92), (2014).
  13. Betz, O. B., et al. Direct percutaneous gene delivery to enhance healing of segmental bone defects. The Journal of Bone and Joint Surgery. 88 (2), 355-365 (2006).
  14. Fang, J., et al. Stimulation of new bone formation by direct transfer of osteogenic plasmid genes. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 93 (12), 5753-5758 (1996).
  15. Kaspar, K., Schell, H., Toben, D., Matziolis, G., Bail, H. J. An easily reproducible and biomechanically standardized model to investigate bone healing in rats, using external fixation. Biomedizinische Technik. 52 (6), Berlin. 383-390 (2007).
  16. Leary, S., et al. AVMA guidelines for the euthanasia of animals: 2013 edition. American Veterinary Medical Association. , (2013).
  17. McKay, W. F., Peckham, S. M., Badura, J. M. A comprehensive clinical review of recombinant human bone morphogenetic protein-2 (INFUSE Bone Graft). International Orthopaedics. 31 (6), 729-734 (2007).
  18. Living lmage Software. , Perkin Elmer. (2006).
  19. Bassett, J. H. D., Van Der Spek, A., Gogakos, A., Williams, G. R. Quantitative X-ray imaging of rodent bone by faxitron. Methods in Molecular Biology. , 499-506 (2012).
  20. Histing, T., et al. Small animal bone healing models: Standards, tips, and pitfalls results of a consensus meeting. Bone. 49 (4), 591-599 (2011).
  21. Lieberman, J. R., et al. The effect of regional gene therapy with bone morphogenetic protein-2-producing bone-marrow cells on the repair of segmental femoral defects in rats. The Journal of Bone and Joint Surgery. 81 (7), 905-917 (1999).
  22. Tsuchida, H., Hashimoto, J., Crawford, E., Manske, P., Lou, J. Engineered allogeneic mesenchymal stem cells repair femoral segmental defect in rats. Journal of Orthopaedic Research. 21 (1), 44-53 (2003).
  23. Jiang, H., et al. Novel standardized massive bone defect model in rats employing an internal eight-hole stainless steel plate for bone tissue engineering. Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 12 (4), 2162-2171 (2018).
  24. Baltzer, A. W., et al. Genetic enhancement of fracture repair: Healing of an experimental segmental defect by adenoviral transfer of the BMP-2 gene. Gene Therapy. 7 (9), 734-739 (2000).
  25. Li, Y., et al. Bone defect animal models for testing efficacy of bone substitute biomaterials. Journal of Orthopaedic Translation. 3 (3), 95-104 (2015).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

פגם בגודל קריטימודל עצם בחולדהמסור עצם תנודתיהשמה של סיכת קירשנר (Kirschner wire)ספוג קולגןטיפול ב-rhBMP-2ניתוח ריפוי עצםבדיקה היסטולוגית
מודל לשחזור ואמין קריטי בגודל סגמנטלי הירך פגם בחולדות התייצב עם Fixator חיצוני מותאם אישית
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.