שימוש תחמוצת דאונטיום ככלי לא פולשני, לא קטלני להערכת הרכב הגוף צריכת המים ביונקים

סיכום

מאמר זה מתאר את הטכניקה לדילול תחמוצת הדאויום בשני יונקים, אוכלי בשר וטורף, כדי לקבוע מי הגוף המלא, מסת הגוף רזה, מסת שומן הגוף, ואת צריכת המים.

תקציר

מצב הגוף מערכות הניקוד ומדדי מצב הגוף הם טכניקות נפוצות המשמשות להערכת מצב הבריאות או הכושר של מינים. מצב הגוף מערכות הניקוד הם תלויי מעריך ויש להם את הפוטנציאל להיות סובייקטיבי מאוד. מדדי מצב הגוף יכול להיות מבולבל על ידי מזון, ההשפעות של משקל הגוף, כמו גם בעיות סטטיסטיות ומסקנות. חלופה למצב הגוף מערכות הניקוד מדדי מצב הגוף משתמש איזוטופ יציב כגון תחמוצת דאונטיום כדי לקבוע הרכב הגוף. השיטה לדילול תחמוצת דאונטיום היא שיטה כמותית, המשמשת להערכת הרכב הגוף בבני אדם, חיות בר, ומינים ביתיים. בנוסף, ניתן להשתמש בטכניקת הדילול תחמוצת הדאויום כדי לקבוע את צריכת המים של בעל חיים יחיד. כאן, אנו מתארים את עיבוד של טכניקת הדילול תחמוצת דאומיום להערכת הרכב הגוף בעטלפים חומים גדולים (eptesicus גומא) ולהערכת צריכת המים אצל חתולים (felis catis).

מבוא

מצב הגוף מערכות הניקוד ומדדי מצב הגוף הם טכניקות נפוצות המשמשות להערכת מצב הבריאות או הכושר של מין^1,2. מינים רבים ביתיים וזואולוגיים יש מערכות ייחודיות הגוף הבקיע (BCS) מערכת המשמשים להערכת השריר של בעל החיים רקמת שומן שטחית³. עם זאת, הערכת BCS מסתמך על המאבחן — כלומר BCS היא מדידה אובייקטיבית או חצי כמותית כאשר מוערך על ידי מעריך מיומן. במינים של חיות הבר, מדדי מצב הגוף משמשים בדרך כלל ולא BCS ומבוססים על היחס של מסת הגוף לגודל הגוף או מסת הגוף לזרוע². מצב הגוף הצביע מבולבל לעתים קרובות על ידי ההשפעות של האוכל והוא יכול להיות מבולבל על ידי גודל הגוף, כמו גם בעיות סטטיסטיות ומסקנות⁴.

חלופה למצב הגוף מערכות הבקיע ומדדי המצב הגוף משתמש איזוטופ יציב כדי לקבוע את הרכב הגוף. איזוטופ יציב בשימוש נפוץ הוא תחמוצת דאוטיום (D₂O), צורה לא רדיואקטיבית של מים שבו אטומי המימן הם איזוטופים מימן. השיטה לדילול תחמוצת דאונטיום המתואר במחקר זה יכול להיות שאינה סובייקטיבית, כמותית, ו לשחזור טכניקה המשמש להערכת הרכב הגוף בבני אדם⁵ מגוון רחב של זנים^4,6,7. טכניקה זו יכולה להיות יתרון עבור לימוד הרכב הגוף בחיות בר. לדוגמה, ניתן להשתמש בה להערכת שינויי האורך בקומפוזיציה הגוף, כגון לפני ואחרי פעולת ניהול. עם זאת, בכמה מינים של חיות בר דאומיום תחמוצת יכול להיות מפריז באופן מיותר את תוכן המים בפועל⁸. לכן, בהתאמת הטכניקה למין, חשוב לאמת את השיטה באמצעות השוואת שיטת התחמוצת הדאוטריום לניתוח של מינים שאינם בסכנת הכחדה. עבור מינים מאוימים ובסכנת הכחדה, יש להתייחס לשיטה לא הרסנית כגון בדיקת רנטגן כפולה (DXA) כשיטת השוואה חלופית לשיטה ההרסנית בתקן הזהב לניתוח מוחלט של הגווייה.

בנוסף לקומפוזיציה הגוף, ניתן להשתמש בטכניקת הדילול D₂O כדי לקבוע את צריכת המים של בעל חיים בודד⁹. יישום ייחודי זה של D₂O יכול לשמש כדי לענות לא רק שאלות מחקר, אבל יכול להיות שימושי להערכת צריכת המים של בעלי חיים בודדים שוכנו הגדרות חברתיות גדולות.

כאן, אנו מתארים את עיבוד של טכניקת D₂O דילול להערכת הרכב הגוף ב אוכלי בשר, עטלפים חומים גדולים (eptesicus גומא), ולהערכת צריכת המים בטורף, חתולים (felis catis).

פרוטוקול

כל הניסויים המתוארים כאן אושרו על ידי הוועדה לטיפול בבעלי חיים של אוניברסיטת מיזורי ובניצוחו של משרד החוץ במיזורי (MDC) היתר האוסף המדעי (היתרים #16409 ו#17649).

1. הכנת התמיסה סטרילית, איזוטוניק, מניות₂O של הפתרון

1. להפוך פתרון מניות 50 mL של 9.0 g/L salinated D₂O.
   1. שוקלים 450 מ ג של תרופות כיתה ולהעביר את כל ה-, לתוך 100 מ ל, מעוקר בגביע. הקלט את הכמות המדויקת של הפונקציה לארבעה מקומות עשרוניים במחברת המעבדה.
   2. באמצעות צילינדר לסיים סטרילי, למדוד 50 g של ≥ 99.8% מתוך תחמוצת העברת לתוך הגביע סטרילי המכיל את הנאל. הקלט את הכמות המדויקת של תחמוצת דאומיום ל -4 מקומות עשרוניים במחברת המעבדה או בגיליון האלקטרוני.
   3. מסנן 10 מ ל של כוח isosmotic (9.0 g/L) דרך מסנן דיסק סטרילי לא פירוגני עם נקבוביות יקרונים יקרון (0.2 μm).
   4. לצרף 20 גרם מחט מסנן דיסק סטרילי ללא פירוגניים עם נקבוביות יקרונים יקרון (0.2 μm) מצויד בחבית 10 מ"ל מזרק. הכנס לתוך המחיצה של 100 mL בקבוקון ריק סטרילי.
   5. לצרף שפופרת ואקום ל 22 המחט G ולהכניס את המחט לתוך המחיצה של 100 mL בקבוקון ריק סטרילי.
   6. יוצקים 10 מ ל של פתרון המניה לתוך חבית המזרק. לאט להדליק את הוואקום עד D₂O פתרון המניה מתחיל לאט לסנן לתוך בקבוקון סטרילי. להמשיך למזוג את הפתרון₂O מניות לתוך חבית מזרק עד כל 50 mL מסונן.
      הערה: ייתכן שפתרון המניה צריך להיות מדולל או מרוכז בהתאם למינון הנדרש. המינון של D₂O ישתנו בהתבסס על המינים ואת הרגישות של השיטה האנליטית. עבור חתולים, פתרון העבודה שימש לניהול מנה של 0.7 g/ק"ג D₂O. פתרון המניה שתוארה לעיל ממזער את כמות התמיסה התת-עורי שהוצגה לבעל החיים תוך שהיא עדיין מאפשרת מדידה מדויקת של המינון. עבור יונקים קטנים כגון עטלפים, ריכוז זה חייב להיות מדולל לפתרון עובד כגון 0.1600 g/mL. ריכוז זה מאפשר את המינון של 0.75 g/kg D₂O להיות נמדד במדויק ומנוהל כ 100 μl או פחות פתרון.

2. הכנת מניות סטרילי, איזוטוניקה, מלאי₂O לעבוד פתרון עבור עטלפים

1. שוקלים 10 mL ריק בקבוקון סטרילי ומשקל השיא הקרוב ביותר 4 המקומות העשרוניים. . קנה המידה של האריזה
2. השתמש מזרק 1.0 mL כדי להעביר 0.65 mL של הפתרון מניות D₂O לעבר, 10 ml ריק בקבוקון סטרילי. משקל השיא של D₂O עד 4 מקומות עשרוניים. . קנה המידה של האריזה
3. לחשב את עוצמת הקול של D₂O ב 10 מ"ל בקבוקון ריק. השתמש במשוואה הבאה.
   
   כאשר W הוא משקל נרשם D הוא צפיפות של 99.8% D₂O (1.107 g/mL).
4. השתמש באמצעי האחסון המחושב ובמשקל הידוע של D₂O כדי לקבוע את הנפח של מלוחים איזוטוניקה נדרש לעשות ~ 0.1600 g/mL פתרון העבודה.
5. הכנס לתוך המחיצה של 10 מ"ל בקבוקון סטרילי, המחט G 22 (מחובר שפופרת ואקום). הכנס לתוך המחיצה של 10 מ"ל בקבוקון סטרילי, 20 גרם מחט (מצורף מסנן מזרק 0.22 יקרומטר מצויד עם חבית מזרק mL 10).
6. יוצקים את מסה/נפח מחושב של איזוטוניקה לתוך חבית המזרק ולהדליק את הוואקום כדי לאפשר טפטוף איטי לתוך בקבוקון סטרילי 10 mL.
7. להקליט את המשקל של המבחנה ולהבטיח ~ 0.1600 g/mL פתרון העבודה נוצר.

3. קביעת הרכב הגוף של עטלפים חומים גדולים (Eptesicus האדום) עם D₂O

הערה: פתרון המניה של D₂O בשימוש בפרוטוקול הוא 0.1598 g/mL. לפני איסוף דם, להבטיח כי הסרת עד 200 μL של דם יהיה ≤ 10% של נפח הדם הכולל של המחבט הוא בתוך טיפול בעלי חיים מוסדיים והשימוש של הוועדה (IACUC) הוקמה הנחיות לאיסוף דם. כל בעלי החיים צריכים להיות מpalpated בבטן ולדאוג לקיבה ריקה. הארוחה האחרונה יכולה לשנות את משקלו של בעל החיים וכתוצאה מכך תוצאות מבולבל מאז חישובים לקביעת שומן הגוף להסתמך על מסת הגוף של החיה.

1. . לממש מחבט חום גדול
   1. השתמש ב-5.0% isoffor השראה. שמירה על מישור יציב של הרדמה באמצעות 0.5%-3.0% isofלוריאן.
   2. לקבוע עומק הרדמה נכונה על ידי בדיקת רפלקס הנסיגה דוושה (צובט את הבהונות של המחבט). המחבט לא צריך להגיב על התחושה ואת קצב הנשימה צריך להישאר איטי ויציב. לשמור על מישור יציב. של הרדמה
   3. שיעור הקלטה, רמת לב, קצב נשימה ומידע נוסף כנדרש על ידי IACUC.
2. שוקלים את המחבט החום הגדול ומקליטים את המשקל ל -4 מקומות עשרוניים.
3. נקו את הuropatagium (קרום הזנב) מעל וריד הירך עם משטח הכנה לאלכוהול ומאפשרים ייבוש. למרוח שכבה דקה של ריבת. נפט על הווריד הפנימי
4. השתמש במחט של 29 G כדי לנקב את החלק הגוייתי של הווריד הבין ולאסוף 100 μL של דם באמצעות צינורות פלסטיק הפארין הפרין הנתרן. להבטיח ערבוב הולם של הדם כולו עם הפארין נתרן על ידי מתגלגל בעדינות כל צינור אחרי האוסף תווית הצינור.
5. באמצעות מכונת DXA מכויל עבור יונקים קטנים, להשיג שלושה סריקות DXA של המחבט¹⁰.
6. לקבוע את המסה (ב g) של D₂O להזריק על ידי הכפלת משקל העטלף ק ג על ידי מינון D₂O של 0.75 g/ק"ג. לקבוע את הנפח של מינון D₂o מחושב (V) על ידי חלוקת המשקל של מינון d₂o על ידי ריכוז של פתרון העבודה.
   
   
7. השתמש מזרק אינסולין עם מחט של 29 גרם מוצמד לצייר את הנפח של D₂O מחושב. שוקלים את D₂O, מזרק אינסולין, ואת המחט. הקלטה ל-4 מקומות עשרוניים.
8. הכנס את D₂O תת-עורי על האזור הירך התחתית של העטלף מורדם.
9. אפשר עטלף להתאושש הרדמה ולהקליט את הזמן של הזרקה.
10. מיד לאחר ההזרקה, שוקלים את מזרק האינסולין הריק כעת עם מחט של 29 גרם מוצמד. הקלט את המשקל לארבעה מקומות עשרוניים.
11. לקבוע את המינון של D₂O מוזרק על ידי הפחתת משקל שלאחר ההזרקה של מזרק האינסולין מן ההזרקה לפני הזריקה D₂O מילא מזרק אינסולין. הקלטה ל-4 מקומות עשרוניים.
12. בתוך 30 דקות של איסוף דם הודעה, השתמש בצנטריפוגה המטקריט כדי לסובב כל צינור נימי עבור 5 דקות. אם צנטריפוגה המטקריט מאפשרת מהירויות מרובות, להגדיר ל 10,000 x g.
13. השתמשו במספריים חדים כדי לחתוך את צינור הקפילר הפלסטי בין כל הדם והפלסמה. השתמש בפיפטה 200 μL כדי לגרש את הפלזמה ישירות לתוך מתויג, 500 שפופרת אחסון μL.
14. לאחר תקופת האקוויליציה, לאסוף עוד 100 μL של דם מווריד הירך.
    הערה: התקופה העורפלת תשתנה לפי מינים ואם העטלפים ילכו לכיוון ההפוך. עבור עטלפים חומים גדולים, בדרך כלל 2 h הוא מספיק עבור תקופת השיווציה.
15. הפרד הפלזמה לתוך מתויג שני, 500 μL מיקרוצנטריפוגה בורג שפופרת העליון על ידי צעד חוזר 3.13. לחנות דגימות ב-20 ° c או קר עד הניתוח.

4. פורייה-המרה ספקטרופוטומטר אינפרא אדום ניתוח

1. הגדר את טמפרטורת אמבט חול עד 60 ° צ' כדי להקל על זיקוק (לאפשר הפרדת מים ו-D₂O מרכיבי דם אחרים).
2. פיפטה 50 μL של כל דגימת פלזמה ותקן על החלק הפנימי של כובע צינור מיקרו-מיקרוצנטריפוגה של 1.5 mL. כולל סטנדרטים המכילים ריכוזים ידועים של D₂O כבקרת איכות.
   הערה: באופן אידיאלי לכל בעל חיים יהיו שלושה משכפל לכל מדגם וממוצע שלושת המשכפלת מדווח. בשל נפח המדגם המוגבל ואת נפח המדגם הנדרש עבור ציוד FT-IR מנוצל על ידי המחברים, לא בוצעו משכפל עבור דגימות העטלף. אם מדגם כלשהו מכיל פחות מ-50 μL של פלזמה, מנקז את כמות המדגם על כובע צינור המיקרו-צנטריפוגה החרוט ולהקליט את עוצמת הקול.
3. שמור את המכסה מיקרוצנטריפוגה הפוך ולהרוס את הצינור 1.5 mL מיקרוצנטריפוגה חרוט על הכובע. מניחים את הצינור הפוך (הפוך) עם הכובע במגע עם החול באמבט חול למינימום של 12 h (לילה).
4. לאחר 12 h, להסיר את הכובע ולהחליף עם כובע חדש, נקי. דופק את צינור המיקרוצנטריפוגה. במשך 10 ס מ בצנטריפוגה
5. צור את התקנים הבאים: 0 עמודים לדקה (0 mg D₂O ב-1 ליטר מים מזוקקים), 293 דפים לדקה (293 mg d₂o ב-1 מים מזוקקים), 585 Ppm (585 mg d₂o ב 1 l מזוקק מים), 878 ppm (878 mg d₂o ב 1 מזוקק מים), ו-1170 ppm d₂o (1170 mg d₂o ב 1 מים מזוקקים).
   הערה: הערכים לעיל מוצעים עבור עקומה רגילה. ערכים חלופיים כגון 250 ppm, 500 ppm, 750 ppm, וכן הלאה ניתן להשתמש.
6. התקן תא שידור נוזלי לתוך ספקטרומטר פורייה ספקטרופוטומטר (FTIR) (טבלת חומרים). מלא את התא עם מתנול וחבר את יציאת ההזרקה. באיטיות למלא את התא עם מים ברקע תוך הסרת בזהירות את המזרק מתנול כדי להפחית את הסיכון של בועות אוויר. צרף צינורות ליציאת פלט כדי לאפשר הסרה של דגימות לאחר ניתוח.
7. הכן את תוכנת הספקטרומטר FTIR (טבלת חומרים) לניתוח של D₂O במים. הגדרות הפרמטרים עבור התוכנה הספקטרומטר המשמשות בפרוטוקול זה מפורטות בטבלה 1.
8. לאסוף דגימת רקע באמצעות דילול, 0.22 μm-מסוננים, מים מזוקקים. זה אמור להיות אותו המים. שמשמשים לסטנדרטים
9. הכנס 40 μL של 0 ppm D₂O והקלט את הספקטרום. שמור את הספקטרום כקובץ ערכים מופרדים באמצעות פסיקים (CSV).
10. המשך להזריק ולשמור את הספקטרום של כל התקנים כדי ליצור עקומה סטנדרטית.
11. חזור על הרקע והעקומה הסטנדרטיים כל 60 עד 90 דקות.
12. הכנס 40 μL של כל מדגם מזוקק לתוך תא השידור הנוזלי ולשמור את ספקטרום.
    הערה: לשנות את נפח ההזרקה של התקנים ודגימות מזוקקים המבוססות על נפח של תא שידור נוזלי. השתמש באמצעי אחסון קטן יותר תא שידור נוזלי אם הנפח לדוגמה הוא מתחת 40 μL או לדלל 1:1 עם מים מזוקקים ברקע.
13. לקבוע את הריכוז של D₂O של כל מדגם מ-ftir ספקטרה באמצעות תוכנית גיליון אלקטרוני כפי שמתואר על ידי ג'נינגס et al.¹¹ או את התוכנה ספקטרלית. בעת ביצוע משכפל, השתמש בריכוז הממוצע כדי לחשב את הרכב הגוף.

5. חישוב הרכב הגוף

1. המרת העשרה דאוטריום (ppm) עד אטום אחוז הריכוז עבור כל מדגם באמצעות המשוואה הבאה¹²:
   
   כאשר x הוא העשרה הנמדד דאויום (ppm) של המדגם ו 0.0001557 הוא חלק שומה של דאומיום דיווח בווינה תקן רגיל המים האוקיינוס (VSMOW)¹³.
2. לחשב את כל מי הגוף עבור כל דוגמה באמצעות המשוואה הבאה^4,12,14:
   )
   כאשר E הוא העשרה נמדד (אטום%) של דאוטריום במדגם לאחר תיקון רקע, B הוא מסת ההזרקה ב-g, ו 0.998 הוא ריכוז של D₂O הזריק.
   הערה: החלפת דאוטריום עם מימן יציב משך גורם 2% הערכה יתר של מסת המים הגוף הכולל. יש לתקן את כל מי הגוף על ידי הפחתת האומדן הכולל של מי הגוף על ידי 2% ממשקל הגוף.
3. העריכו את מסה נטולת שומן (מסת גוף רזה וכל הרכיבים האחרים שאינם שומן) של כל עטלף באמצעות המשוואה הבאה:
   
   הערה: השתמש בערך המקובל מקובל של 0.732 עבור תוכן הלחות החלקי של מסת הגוף הרזה עבור בריאה, מהתייבשות, עטלפים שאינם מניקות. התוכן החלקי לחות של מסה נטולת שומן יכול לשנות את החומים הגדולים המלידתי על בסיס שבוע הפוסט¹⁵. עבור מינים אחרים, להשתמש בערכים שפורסמו בספרות או לקבוע את התוכן החלקי לחות של מסת הגוף רזה לפני ביצוע חישובים של מסת הגוף רזה.
4. העריכו את מסת השומן בגוף באמצעות המשוואה הבאה:
   
5. להמיר את מסת שומן הגוף ב-g כדי אחוז מסת שומן הגוף באמצעות המשוואה הבאה:
   

6. קביעת הרכב המים בטורף (חתולים ביתיים)

1. הכן את פתרון המניה כמתואר בסעיף 1.
2. שוקלים כל חתול עד 3 המקומות הקרובים ביותר ומשקל שיא. לחשב את המינון עבור כל חתול כמתואר בשלב 3.6 באמצעות מינון D₂O של 0.70 g/ק"ג.
3. הכינו כל מנה כמתואר בצעדים 3.7-3.8. באמצעות מזרק 3 מ ל או 5 מ ל עם מחט של 22 גרם במקום מזרק אינסולין.
4. לאסוף 500 μL של דם שלם ולאחר מכן מנהל תת-עורי את 0.7 g/ק"ג D₂O. צנטריפוגה דם שלם ב 2,000 x g עבור 15 דקות ולאחסן פלזמה ב 1.5 mL מיקרוצנטריפוגה בורג צינורות העליון ב-20 ° c עד ניתוח.
5. לאסוף 500 μL של דם שלם 4 h לאחר ההזרקה. צנטריפוגה דם שלם ב 2,000 x g עבור 15 דקות ולאחסן פלזמה ב 1.5 mL מיקרוצנטריפוגה בורג צינורות העליון ב-20 ° c עד ניתוח.
6. לאסוף 500 μL של דם שלם 14 ימים לאחר ההזרקה. צנטריפוגה דם שלם ב 2,000 x g עבור 15 דקות ולאחסן פלזמה ב 1.5 mL מיקרוצנטריפוגה בורג צינורות העליון ב-20 ° c עד ניתוח.
   הערה: מספר הימים בין איסוף הדם יכול להיות מבוסס על הצרכים הניסיוניים ואת התקופה שלאחר ההזרקה שבה D₂O ניתן להבחין מעל רמות הרקע. 14 ימים היה אורכו של גושי טיפול תזונתיים מהופר ואח '⁹.
7. לבצע ניתוח FT-IR לפי סעיף 4 ולחשב את הרכב הגוף לפי סעיף 5 של פרוטוקול זה.
8. חישוב צריכת המים ב-mL/day באמצעות המשוואות הבאות:
   
   
   
   כאשר TBW היא מי הגוף הכולל, D הראשונית₂o ו-d הסופי₂o הם ריכוזים שנמדדו לדקה בתוך לאחר ההזרקה d_2oדגימות.

תוצאות

ניתן להשתמש בטכניקת הדילול תחמוצת הדאויום כדי להעריך את הרכב הגוף של מגוון מינים. כדי להדגים את הסתגלות, אנו מדווחים על השימוש הראשון של הטכניקה לדילול תחמוצת דאומיום במינים insectivorous bat בצפון אמריקה, eptesicus גומא, העטלף החום הגדול עבור תוצאות המייצג. מישור העיתוי הושלם על ידי נטילת דגימות דם הזרקת pre-D₂O, כפי שצריך להיעשות עם כל מין שבו תקופת האקוויליציה אינה ידועה. נקבע כי שעתיים שלאחר ההזרקה בעטלפים שאינם מתאימים הייתה נאותה לשפה מעורפלת. עם הזמן המפוקפק היד...

דיון

השימוש תחמוצת דאומיום כדי לקבוע tbw כבר בשימוש מאז 1940 s¹⁷ והוא משמש בבני אדם מגוון של מינים מקומיים וחיות בר^4,6,7. טכניקות אחרות שאינן הרסניות פותחו כולל ניתוח עכבה ביולוגית (BIA), DXA, ותהודה מגנטית כמותית (QMR). לכל שיטה יש יתרונות וחסרונות שיש לשקול לפני בחירת מתודולוגיה מסוימת להערכת הרכב הגוף. פרוטוקול זה נבחר להשתמש DXA כשיטת השוואה של תחמוצת דאולייט כדי להעריך את הרכב הגוף, כי הציוד זמין כמשאב הל...

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
מסנן דיסק לא פירוגני 0.2 מיקרון	Argos Technologies	FN32S	ניילון, קוטר 30 מ"מ, 0.22um,
צינורות מיקרוצנטריפוגה חרוטיים סטריליים 1.5 מ"ל	ארה"ב Scientific	1415-9701	צינור מיקרוצנטריפוגה עצמאי 1.5 מ"ל, טבעי עם כובע כחול
בקבוקון זכוכית סטרילי 10 מ"ל להזרקה	ציוד רפואי בצד ההר	MS-SEV10	יחידת הזרקת זכוכית שקופה וסטרילית
מזרק 10 מ"ל	בקטון דיקינסון	305219	סטרילי 10 מ"ל מזרק עטוף בנפרד
100 מ"ל בקבוקון זכוכית סטרילי להזרקה	ציוד רפואי בצד ההר	AL-SV10020	יחידת הזרקת זכוכית שקופה וסטרילית
20 מחט מד	Exel	26417	מחטים היפודרמיות 20 גרם x 1 אינץ' רכזת פלסטיק (צהובה) / שיפוע רגיל
22 מחט מד	Exel	26411	מחטים היפודרמיות 22 גרם x 1 אינץ' רכזת פלסטיק (שחור) / תחמוצת דאוטריום משופעת רגילה
	סיגמא-אולדריץ'	151882-25G	99.9 אטום % D
איזופלואורן	Vetone	3060	fluriso isoflurane, USP
OMNIC Spectra תוכנה	ThermoFisher Scientific	833-036200	FT-IR תוכנה סטנדרטית
וזלין	וזלין	305212311006	וזלין, 100% וזלין טהור, מקורי,
צינורות נימי פלסטיק	חדשני מד טק	100050	נתרן הפרין נוגד קרישה, 50 μ קיבולת L, אורך 30 מ"מ
ספקטרופוטומטר נוזלי אטום SL-3 FTIR CAF2 תא	מעבדת קריסטל בינלאומית	0005D-875	0.05 מ"מ
אורך מסלול נתרן כלורי	EMD Millipore	1.37017	מתאים לייצור ביו-פרמצבטי Thermo
Electron Nicolet 380 FT-IR ספקטרומטר	ThermoFisher Scientific	269-169400	דגם שהופסק, דגמים חדשים יותר זמינים