הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

מודל מורנה של היצרות הורידים המרכזית באמצעות Aortocaval פיסטולה עם היצרות זרימה יוצאת

7.1K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/59540

⸱

11 ביולי 2019

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Surgery, Yale University, 2Vascular Biology and Therapeutics Program, Yale University, 3Department of Vascular Surgery, University of Tokyo, 4Department of Diagnostic Radiology, Tokai University School of Medicine, 5Department of Cardiovascular Surgery, Tokyo Medical University, 6Department of Vascular Surgery, VA Connecticut Healthcare Systems

במאמר זה

סיכום

Aortocaval פיסטולה נוצר על ידי לפרוץ את העורקים מורנה אינפרא כליות באמצעות שני הקירות לתוך הורקאווה הנחותים ולאחר מכן הבריאה של היצרות בתוך הזרימה שלה באמצעות הארכה חלקית של האובורד הנחותים. מודל זה ניתן לשימוש כדי ללמוד היצרות הורידים המרכזי.

תקציר

היצרות הורידים המרכזית היא ישות חשובה התורמת לכשל פיסטולה עורקי העורקים (AVF). מודל AVF של murine שונה כדי ליצור הארכה חלקית של הבנה התחתית הנחותה (IVC) ביצוא של פיסטולה, מחקה היצרות הורידים המרכזית. היבטים טכניים של מודל זה מוצגים. אבי העורקים ו-IVC חשופים, בעקבות חתך הבטן. העורקים האינפרא-כליות ו-IVC מ, מניהים לכיוון הנכון, והעורקים המרוחק חשופים לניקוב. ה-IVC בנקודת האמצע בין הווריד השמאלי של הכליה לבין הביפריון של אבי העורקים הוא גזור בקפידה למקום 8-0 תפר מתחת ל-IVC. לאחר לסדר את העורקים ואת ה-IVC, AVF נוצר על ידי מחדירים את העורקים אינפרא-כליות דרך שני הקירות לתוך ה-IVC עם מחט של 25 גרם, ואחריו ליגגסת 22 G פנים ורידי (IV) קטטר ו-IVC יחד. הצנתר מוסר אז, יצירת היצרות ורידים הנוזפה ללא חסימה. העורקים ו-IVC לא מהודק לאחר שמאשרים הומוסטאזיס ראשוניים. זה מודל הרומן של היצרות מרכזית וריד קל לבצע, להציג, ויקל על המחקרים על כשל AVF.

מבוא

פיסטולות עורקית (AVF) הן הגישה השכיחה ביותר עבור המודיעין, עם הפטנטיות מעולה וזיהום מופחת לעומת כניסות אחרות כגון שתלים או קטטרים הורידים המרכזי. עם זאת, עד 60% של avf להיכשל בוגרת1,2,3; סקירה שיטתית לאחרונה דיווחו כי שיעורי הפטנטיות העיקריים בשנה 1 היו רק 60%4. היצרות לאורך זרימה ורידים בעיקר גורם לכישלון של התבגרות avf5,6. ישנם מיקומים אופייניים מסוימים נוטה היצרות הפנים הפנים אל הפיסטולה: מקטע הנדנדה הjuxtaanastomotic עבור פיסטולה radi, אזור הקשת החיקיתית עבור פיסטולה ברכהפלאי והווריד המרכזי עבור פיסטולה עם בעבר . או הווריד הפנימי של העורק7,8

היצרות הורידים המרכזי הוא לעתים קרובות אסימפטומטיים בחולים ללא AVF, אבל יכול לגרום לבצקת הגפיים הצלעות על ידי יתר לחץ דם ורידי, כמו גם כישלון של התבגרות פיסטולה כאשר מאותגרים על ידי פיסטולה flow9. הפתופסולוגיה של היצרות הורידים המרכזית היא ככל הנראה קשור לדלקת הקרישה מופעל המפל לאחר הצבת המכשיר. יתר על כן, תנועה קבועה של קצה הקטטר, כמו גם זרימה מוגברת מן הפיסטולה יכול לשנות את המתח הטיה, וכתוצאה מכך בתצהיר טסיות ובקירות ורידי העיבוי10. כדי להבין את המנגנונים הבסיסיים המשמשים כישלון AVF הנגרמת על ידי היצרות הורידים המרכזי, מודל חיה מחקה היצרות הורידים המרכזי עם AVF נדרש.

הקמנו מודל aortocaval פיסטולה murine כי הוא קל לבצע ולשלוט לכידה של הקורס הקליני של AVF האדם. 11 הקמנו את המושגים והטכניקה של כמה דגמי murine שהוקמו קודם לכן כדי ליצור מודל avf הרומן מורנ עם היצרות ורידים. אנו מציגים מודל aortocaval פיסטולה murine עם היצרות מסוג IVC בפיסטולה הזרימה ניתן להשתמש למחקר של היצרות הורידים המרכזי.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל הניסויים בוצעו באישור מטעם הוועדה לטיפול בבעלי חיים מוסדיים באוניברסיטת ייל והשימוש (IACUC).

1. הרדמה והליכים לפני הניתוח

  1. לחטא את כל כלי הניתוח והחומרים על ידי אוטוקלינג. הפעל את התקן התמיכה התרמית כדי לוודא שהוא חם (40 עד 42 ° c).
  2. מקום של 9 – 11-שבוע הישן C57BL/6 העכבר לתוך תא אינדוקציה אקרילי ל אותו עם מתאדה 2.5% isof ane ו 0.8 L/min חמצן. אינדוקציה הרדמה לוקח בערך 3 דקות.
  3. להסיר את העכבר מהתא. לאשר מטוס עמוק של הרדמה על ידי צביטה בבוהן, קמצוץ אוזן וקמצוץ זנב. מניחים את העכבר במיקום פרקדן על האזור כירורגי ולספק 2.5% isofלאנה באמצעות מסיכת סיליקון. לספק בופרנורפין ב 0.1 mg/ק"ג משכך כאבים ולהחיל משחה אופטלמולוגית לעיניים.
  4. להסיר את הפרווה מהצד הגחוני של הצוואר אל הבטן התחתונה באמצעות הנייר, מסיר שיער.
  5. לטהר ולחטא את האתר כירורגי באמצעות קרצוף שני שלבים עם 10% povidone-יוד ו 70% איזופנול. . למרוח כירורגיה כירורגית

2. הליכים אופרטיביים

  1. חשיפת אתרי המלחציים והניקוב
    1. הכינו מכשירים סטריליים ולבשו כפפות סטריליות כדי לשמור על עקרות במהלך הניתוח.
    2. הפוך את העור עמוק באמצע החתך הבטן עם אזמל מהרמה של הקצה התחתון של הכבד כדי ממש מעל הערווה. חותכים את השרירים עם מספריים. כדי לפתוח את חלל הבטן
    3. להכניס מפסק לתוך הבטן ולמשוך את המעיים בצד ימין. שמור אותם לחים על ידי גלישה בגזה ספוגה בתמיסת מלח. שלפוחית השתן ואת שלפוחיות הזרע (בעכברים זכרים) ולמשוך אותם אל הצד caudal. מנתח את המצע המעי בין הרקטום והטוב עם מחזיק מיקרו מחט כדי לקבל תצוגה מלאה של העורקים ו-IVC.
    4. לנתח את העורקים האינפרא-כליות ואת IVC en בגוש מן הרקמות הסובבות לרוחב והתת עם בעל מחט מיקרו כדי להצליב אותם יחד.
    5. מנתחים את הרקמות המקיפות כדי לחשוף את אתר הניקוב של אבי העורקים בערך שלושה רבעים של המרחק מווריד הכליה השמאלי אל הבייון אבי העורקים.
  2. ניתוח IVC
    1. הניתוח בין העורק האינפרא-כליות לבין העורקים הבין-מיידי לווריד השמאלי של הכליות. הארך את הניתוח באמצע הדרך בין הווריד השמאלי של הכליה לבין הביפריון של אבי העורקים, כך את מערך אינפרא-הכליה, הן במעלה והן במורד הזרם אל היצרות, ניתן לצפות בדואר האלקטרוני.
      הערה: הניתוח הקהה בין ה-IVC לבין העורקים צריך להתבצע באופן מיידי לווריד הכליה השמאלי שבו רקמת החיבור בין ה-IVC לבין העורקים משוחררת יחסית.
    2. הפוך חלון כדי להפריד את ה-IVC מתוך העורקים ברמה זו ולנתח את ה-IVC מן הרקמה הסובבת. מניחים 8-0 לתפור את הראשון מתחת ל-IVC ואת אב העורקים (איור 1A), ואז למקם את התפר מתחת רק את ivc (איור 1a) על ידי משיכת הקצה תפר דרך החלון.
      הערה: מאז ה-IVC הוא שביר, מבתר לאורך האדוורטיה של אבי העורקים הוא שימושי כדי ליצור חלון כדי למנוע את ה-IVC, כמו גם את הענפים הקטנים או האבי העורקים מלהיות ניזוק. אם מתרחשת דימום, הוא עשוי להיות בלתי נשלט. אם ל-IVC יש ענפים צדדיים נפרדים, הציבו 8-0 תפר את הענפים
  3. יצירת AVF
    1. לכופף את המחט 25 גרם לזווית 45-60 ° בנקודה ~ 4 מ"מ מקצה המחט.
    2. הצמד את העורקים האינפרא-כליות ואת IVC על ידי החלת קליפ מיקרוכירורגית.
    3. לסובב את העורקים מבחינה מדיה והקלה על ידי אוחז את רקמת החיבור סביב הבייון כדי לחשוף את האתר ניקוב של העורקים מתחו אותו מעט בצד הגחוני.
    4. החזקת העורקים בעמדה מתאימה, ניקוב דרך העורקים לתוך ה-IVC באמצעות מחט המוכן 25 G (איור 1C).
    5. לשחרר את העורקים ולכסות את האתר ניקוב עם הרקמה הסובבת מושך מהצד השמאלי של העורקים. להוציא את המחט ולחץ על האתר ניקוב בעדינות באמצעות משטח משופעת כותנה עבור הומוקיפאון.
  4. יצירת היצרות האיוג
    1. מניחים קצה של צנתר 22 G IV (לראות את הטבלה של חומרים) על longitudinally-ivc. ליגייט את קטטר IV ו-IVC יחד עם 8-0 תפר (איור 1D), ולאחר מכן להסיר את הצנתר IV.
    2. אישור הומוסטזיס ראשי (איור 1E) ולאחר מכן ביטול התפס של העורקים ואת ה-ivc. מכסים את האתר הניקוב 1 דקות יותר כדי להבטיח הומוקיפאון.
      הערה: אין להדק במשך זמן רב מדי, כדי להימנע מפקקת ומניעת היצרות של IVC.
    3. להחזיר איברים לעמדותיהם המקורי ולסגור את הבטן עם 6-0 תפרים.

3. הליכים שלאחר הניתוח

  1. , לאחר סגירת הפצע בבטן. הפסק את השאיפה הכניסו את העכבר לכלוב יחיד ללא מצעים ומניחים את הכלוב על התקן תמיכה תרמית כדי למנוע היפותרמיה.
    הערה: העכבר נצפה עד שהם משיגים ושומרים על שכיבה. החלת טיפול שלאחר הניתוח כולל כאבים וטיפול בפצעים בהתאם להמלצות של IACUC מקומי. עבור כאבים אנחנו משתמשים בופרנורפין ב 0.1 מ"ג/ק"ג הפנים כל 12 h עבור 48 h בעקבות הליכים כירורגיים ולאחר מכן לפי הצורך.
  2. אשר באמצעות אולטרסאונד דופלר (עיין בטבלת החומרים). בנוסף, למדוד את מאפייני כלי הקיבול והזרימה האחרים כנדרש.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

עכברים זכרים עברו את הפעולה שהוזכרו לעיל כדי ליצור הן AVF ו היצרות IVC. עכברים שליטה עברו רק כריתת אונה וניתוח של הרקמות המקיפות את ה-IVC, למשל, הליך מזויף, או רק יצירה של היצרות של IVC ללא יצירה בו של AVF.

ה-IVC נצפתה באולטרסאונד של הדופלר ביום 7 לאחר ההליך הכירורגי (איור 2). פיסטולה ואזורים היצרות של IVC התגלו בקלות בתצוגת האורך (איור 2C, E). ה-IVC בי...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

מודל מוראו avf שימש לחקר המנגנונים הבסיסיים והאירועים המולקולריים המובילים לבגרותו של האבף13,14. במחקר זה, שינו מודל AVF הוקמה מורנין כדי ליצור מודל aortocaval פיסטולה הרומן murine עם היצרות מסוג IVC במערכת הזרימה של הפיסטולה. מודל הקשור שלנו דומה למספר דגמים שתוארו בעבר, המשתמשים באמצעות הארכה של כלי הדם. מודל מורין של פקקת וריד עמוק נוצר באמצעות הצרת IVC חלקית עם מרווח המחט של 30 גר'15; השתמשנו הגדול ביותר 22 G מרווח קטטר הרביעי כדי ליצו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

. למחברים אין מה לגלות

תודות

עבודה זו נתמכת על ידי המכון הלאומי לבריאות של ארה ב (NIH) גרנט R01-HL128406; ארצות הברית המחלקה של ותיקי לענייני מעבדה ביו רפואי מחקר ופיתוח תוכנית הצטיינות סקירה פרס I01-BX002336; כמו גם עם המשאבים והשימוש במתקנים ב-VA קונטיקט הבריאות מערכת, מערב הייבן, CT.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
ראש סריקה של 20-60 מגה-הרץVisualSonics Inc.RMV-704
8-0 תפר מיקרו סטרילי, 6 מ"מ (140 ומיקרו;), 3/8 מעגל, מחט נקודתTAPתפריםT06A08N14-13פוליאמיד מונופילמנט
תא אינדוקציה, 2 ליטר
3.75 אינץ' רוחב x 9.00 אינץ' D x 3.75 אינץ' H		VetEquip941444
איזופלו, נוזל איזופלורןZoetis26675-46-7
עכברים, C57BL/6Jהג'קסון מעבדה664
כרית חימום מיקרוגל מיטת חיות מחמדלהתכרבל בטוח6250
מחט PrecisionGlide 25GBD305122
Surflo IV קטטר 22GTerumoSR-OX2225CA0.85 מ"מ קוטר חיצוני
מהדק כלי דםRoboz מכשיר כירורגיRS-5424
Vevo770 מערכתהדמיה ברזולוציה גבוההויז'ואלסוניקס בע"מ770

מקורות

  1. Dember, L. M., et al. Effect of clopidogrel on early failure of arteriovenous fistulas for hemodialysis: a randomized controlled trial. JAMA. 299 (18), 2164-2171 (2008).
  2. Dixon, B. S. Why don't fistulas mature? Kidney International. 70 (8), 1413-1422 (2006).
  3. Wilmink, T., Hollingworth, L., Powers, S., Allen, C., Dasgupta, I. Natural History of Common Autologous Arteriovenous Fistulae: Consequences for Planning of Dialysis. European Journal of Vascular and Endovascular Surgery. 51 (1), 134-140 (2016).
  4. Al-Jaishi, A. A., et al. Patency rates of the arteriovenous fistula for hemodialysis: a systematic review and meta-analysis. American Journal of Kidney Diseases. 63 (3), 464-478 (2014).
  5. Rocco, M. V., Bleyer, A. J., Burkart, J. M. Utilization of inpatient and outpatient resources for the management of hemodialysis access complications. American Journal of Kidney Diseases. 28 (2), 250-256 (1996).
  6. Roy-Chaudhury, P., Sukhatme, V. P., Cheung, A. K. Hemodialysis vascular access dysfunction: a cellular and molecular viewpoint. Journal of the American Society of Nephrology. 17 (4), 1112-1127 (2006).
  7. Quencer, K. B., Arici, M. Arteriovenous Fistulas and Their Characteristic Sites of Stenosis. AJR: American Journal of Roentgenology. 205 (4), 726-734 (2015).
  8. Kian, K., Asif, A. Cephalic arch stenosis. Semin Dial. 21 (1), 78-82 (2008).
  9. Agarwal, A. K. Central vein stenosis. American Journal of Kidney Diseases. 61 (6), 1001-1015 (2013).
  10. Glanz, S., et al. Axillary and subclavian vein stenosis: percutaneous angioplasty. Radiology. 168 (2), 371-373 (1988).
  11. Yamamoto, K., et al. The mouse aortocaval fistula recapitulates human arteriovenous fistula maturation. American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 305 (12), H1718-H1725 (2013).
  12. North American Symptomatic Carotid Endarterectomy Trial. Methods, patient characteristics, and progress. Stroke. 22 (6), 711-720 (1991).
  13. Kuwahara, G., et al. CD44 Promotes Inflammation and Extracellular Matrix Production During Arteriovenous Fistula Maturation. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 37 (6), 1147-1156 (2017).
  14. Protack, C. D., et al. Eph-B4 regulates adaptive venous remodeling to improve arteriovenous fistula patency. Scientific Reports. 7 (1), 15386(2017).
  15. Payne, H., Brill, A. Stenosis of the Inferior Vena Cava: A Murine Model of Deep Vein Thrombosis. J Vis Exp. (130), (2017).
  16. Nam, D., et al. Partial carotid ligation is a model of acutely induced disturbed flow, leading to rapid endothelial dysfunction and atherosclerosis. American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 297 (4), H1535-H1543 (2009).
  17. Ene-Iordache, B., Remuzzi, A. Disturbed flow in radial-cephalic arteriovenous fistulae for haemodialysis: low and oscillating shear stress locates the sites of stenosis. Nephrology, Dialysis, Transplantation. 27 (1), 358-368 (2012).
  18. Yamamoto, K., et al. Disturbed shear stress reduces Klf2 expression in arterial-venous fistulae in vivo. Physiological reports. 3, (2015).
  19. Remuzzi, A., Ene-Iordache, B. Novel paradigms for dialysis vascular access: upstream hemodynamics and vascular remodeling in dialysis access stenosis. Clinical Journal of the American Society of Nephrology. 8 (12), 2186-2193 (2013).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

מודל AVF בעכבריםהיצרות של ה-IVCהליך כירורגיאולטרסאונד דופלרהיצרות של הש transplanted veinהמוסטזיס ראשוניאאורטה תת-כלייתיתפיסטולה ורידית
מודל מורנה של היצרות הורידים המרכזית באמצעות Aortocaval פיסטולה עם היצרות זרימה יוצאת
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.