הטמעה מדויקת של מינון מינימלי של אריתמה (מד) בדיקות להערכת וריאציה אינדיבידואלית בתגובה דלקתית אנושית

סיכום

מינון מינימלי אריתמה (מד) בדיקות משמש להקמת מינון לוחות זמנים עבור פוטותרפיה קרינה אולטרה סגולה. הוא יכול להעריך וריאציה בודדת בתגובה דלקתית אך חסרה מתודולוגיה להשגת תוצאות שונות. כאן, אנו מציגים יישום מדויק של MED ומדגימים את יכולתה ללכוד וריאציה בודדת בתגובה דלקתית.

תקציר

מינון מינימלי אריתמה (מד) בדיקות משמש לעתים קרובות הגדרות קליניות לקביעת הכמות הקטנה ביותר של אולטרה סגול (UV) הקרנה הצורך לייצר אודם (אדמומיות דלקתית) על פני השטח של העור. בהקשר זה, מד הרפואה נחשב גורם מפתח בקביעת מינון התחלתי עבור פוטותרפיה UV לתנאי עור נפוצים כגון פסוריאזיס ו אקזמה. במסגרת הגדרות מחקר, בדיקות MED יש גם פוטנציאל להיות כלי רב עוצמה להערכת בתוך-ובין אנשים וריאציה בתגובות דלקתיות. עם זאת, בדיקות MED לא אומצה באופן נרחב לשימוש בהגדרות מחקר, כנראה עקב חוסר הנחיות שפורסמו, שהוא מכשול להשגת תוצאות שאינן מתקבלות מתוך שיטת הפעולה. כמו כן, פרוטוקולים וציוד להקמת MED משתנים באופן נרחב, ומקשה על השוואת התוצאות בכל המעבדות. כאן, אנו מתארים שיטה מדויקת וניתנת לקריאה כדי לגרום ולמדוד אריתמה שטחית באמצעות פרוטוקולים שעוצבו לאחרונה ושיטות שניתן בקלות להתאים ציוד אחרים וסביבות מעבדה. השיטה המתוארת כאן כוללת פרטים על הליכים שיאפשרו התרוממות של המינון הסטנדרטי לוח זמנים לציוד אחר, כך שפרוטוקול זה יכול להיות מותאם לכל מקור קרינה UV.

מבוא

מינון מינימלי אריתמה (מד) בדיקות הוא הליך מאושר ה-FDA להעריך רגישות עורית לקרינה בדרך כלל UVB טווח, למרות MED ניתן לקבוע באורכי גל אחרים UV וספקטרום גלוי¹. אריתמה מוגדר האדמומיות שטחית על פני השטח של העור הנגרמת על ידי engorgement שחתה של נימים (בשלבים מאוחרים יותר של אריתמה ידועים יותר כמו כוויות שמש). בדיקות MED נעשה שימוש נרחב בספרות דרמטולוגיה והגדרות פוטותרפיה קלינית כדי לזהות את הכמות המינימלית של אולטרה סגול (UV) קרינה אשר יפיק את היחידה הקטנה ביותר של שינוי מדידה באדמומיות של העור. בדיקות MED ניתן להשיג עם מנורת UV זמין מסחרית, שווה ערך למה משמש ברוב מתקני שיזוף מסחרי.

בדיקות MED כרוכה בפיזור מתמשך של קרינת UV או אור מן הספקטרום הנראה על פני השטח של העור למשך זמן מוגדר מראש, עם מינון לוחות זמנים בעיקר על פיגמנטציה של העור ואת עוצמת וסוג של קרינה . הליך זה משמש בדרך כלל הגדרות קליניות כדי לקבוע מינון לוחות זמנים עבור חולים שקיבלו טיפול קרינה UV לתנאי העור כגון פסוריאזיס ו אקזמה^2,3. הליכים בסיסיים לקביעת מד הרפואה בהגדרות הקליניות תוארו במקומות אחרים⁴, והוא יכול לשמש כדי להתאים את המינון הכולל של קרינת UV כלפי מעלה או כלפי מטה, בהתאם וריאציה בודדת רגישות לעור.

עור פיגמנטציה הוא אולי המשתנה החשוב ביותר הנושא הספציפי בניהול ומדידת התוצאות של ההליך MED⁶. זה בגלל המשך החשיפה UV הנדרש לעורר את תגובת אודם מינימלית נקבעת בעיקר על ידי הקלילות או החושך של העור של המשתתף, כפי שהוגדר על ידי סוג העור של המשתתף פיצפטריק (FST). FST⁷ היא ערכה מספרית לסיווג צבע העור האנושי. סולם פיצפטריק הוא כלי מוכר עבור מחקר דרמטולוגיים לעור האדם פיגמנטציה^8,9, ו מסווג את העור האנושי לתוך אחת מתוך שש קטגוריות מן הבהיר (fst I) כדי הכהים ביותר (fst VI).

הצורה האפלה יותר של FST מצריכה משך UV, ולכן סיווג מדויק של FST חשוב. יש ספרות נרחבת על שיטות להערכה מדויקת של FST, באמצעות מגוון רחב של גישות כולל דו ח עצמי, רופא עור והערכה מבוססת מיכשור. משקיף דירוגים של FST הוכחו להיות מתואמים עם הנוכחי, אך לא טבעי צבע העור¹⁰, עם זאת fst יכול להיקבע סובייקטיבי¹¹ באמצעות דו ח עצמי באמצעות שאלון¹² ו/או הערכה אובייקטיבית באמצעות ספקטרופוטומטר. פיצפטריק הקלדה על ידי ספקטרופוטומטר הוכח לתאם את הדוח העצמי המשתתף במספר מחקרים^10,13,14,15.

למרות השירות ושימוש נרחב של בדיקות MED בשירותים קליניים, הליך זה לא אומצה באופן נרחב הגדרות מעבדה למדידת וריאציה בודדת בתגובה גירוי אנטי דלקתיות. מטרת המתודולוגיה המתוארים כאן היא לספק טכניקות והליכים צעד-אחר-צעד המגבירים את הדיוק והשימוש בתהליך הבדיקה הרפואית, על מנת להקל על העבודה העתידית בהגדרות המעבדה המתמקדים בדייקנות קוונפיקציה של שינויים פנים-אישיים בתגובה דלקתית. אנו מספקים עוד תוצאות מייצגות הממחישים את היכולת של פרוטוקול מתוקננת זה כדי ללכוד במדויק את הווריאציה של אדם-אל-אדם בדלקת.

פרוטוקול

כל השיטות המתוארות להלן, כולל השימוש במתנדבים אנושיים, נבדקו ואושרו על-ידי הוועד המקומי לסקירה מוסדית (IRB), והינם בהתאם להצהרת הלסינקי ולדוח בלמונט. כל המשתתפים (N = 72) חתמו על הסכמה מושכלת כלפי פרוטוקול IRB. תנאי הכללה/הוצאה לאור ופרוצדורות הפסקת המשך נועדו למקסם את בטיחות המשתתף, וכל סטייה מהליכים אלה צריכה להיחשב לנוכח השפעתם על הסיכון והסבילות לנושאים אנושיים. בהקשר של העבודה המוצגת כאן, קריטריונים ההסחה מוגבלת השתתפות לאנשים ללא היסטוריה אישית או משפחתית של מצבים דלקתיים, או כל ליקיאו חומרים לא חוקיים. ההצדקה לעשייה זו היא שגורמים אלה עשויים להשפיע על תגובות להליך הבדיקה הרפואית.

1. בחירת משתתפים

1. השתמש בקריטריוני ההכללה הבאים: 18-55 שנים; בריאות כללית טובה כפי שנקבע על ידי רשימת תסמינים רפואיים (MSCL)⁵; יכול להבין ולתקשר על פרוטוקול בטיחות המעבדה המוצגת באנגלית; יכול לספק הסכמה בכתב.
2. השתמש בקריטריוני אי-הכללה הבאים: פיצפטריק מסוג העור אני, כפי שנקבע על-ידי דו ח עצמי; משתמש בציוד שיזוף מסחרי באופן סדיר; פצעים בעור או נגעים באתר המתוכנן של חשיפה; סרטן העור הנוכחי, או היסטוריה אישית של סרטן העור; משפחה של סרטן העור; סוכרת פסוריאזיס או מחלת עור דלקתית אחרת; מחלת כלי דם היקפיים, מחלת עורקים היקפית, מחלת ריינרד, או כל הפרעות מאבחנים במחזור הדם; כל הפרעות מוטוריות בלתי רצוניות; אלרגית לדבק; לוקח שאפה סטרואידים לאסטמה (למשל, Fluticasone); לוקח כל קורטיקוסטרואידים; 2 או יותר של הבאים (מאובחן יתר לחץ דם, hyperlipidemia, כולסטרול גבוה, סיגריות עשן, היסטוריה משפחתית של מחלת כלילית או טרשת עורקים (הורים/אחים לפני גיל 55)); תלות בחומר פעיל-משפטית או לא חוקית; אנשים עם תלות בחומר החדש להחלמה (פחות משנה אחת); שימוש בתרופות המשפיעה על תפקוד ה-CN, כולל פסיכוטרופיים, תרופות אופיאטים או קורטיקוסטרואידים, במהלך שלושת החודשים האחרונים; תרופות פסיכוטרופיות שנקבעו כלשהן, כיום או במהלך 3 החודשים האחרונים (אלה כוללים תרופות לחרדה, דיכאון או בעיות פסיכולוגיות אחרות).

2. תזמון והכנה לרפואה

1. תזמן משתתפים לשתי פגישות: הראשון, אירוע החשיפה הרפואית (כ-45 דקות), והשני, מעקב כדי לאסוף קריאות ספקטרופוטומטר (כ -10 דקות). תזמן את פעילות המעקב עבור 24 שעות בהמשך לפגישה הראשונה.
2. לפני המשתתפים מגיעים, לפרוס ולהגדיר ציוד חיוני כולל שני מינון בדיקות אזיקים וציוד בטיחות. יש מגוון של בגדים הגנה מפני UV (כגון שרוולים ספורט מגן uv, כפפות מגן UV, שרוול ארוך חלוק רפואי, יריעות UV-מגן וקלטת כדי לצרף את הסדינים) הן המשתתף והן החוקר לכסות את כל העור חשוף UV קרינה.
3. כיול את הספקטרוסקופיה בהתאם למפרט היצרן. בצע פעולה זו עבור כל נושא וכל הפעלה.

3. קביעת מסוג העור של פיצפטריק (FST)

1. כאשר המשתתף מגיע לאירוע החשיפה הרפואית (בקר 1), זהה FST באמצעות דוח עצמי או ספקטרופוטומטר. כדי למקסם את בטיחות המשתתף, אל תנהל בדיקות MED על המשתתפים המסווגים כ-FST 1. עבור כל סוגי העור האחרים של פיצפטריק (2-6), השתמש בציון FST כדי לקבוע באיזה לוח זמנים לחשיפה יש להשתמש.

4. חפתים 1 יישום

1. הסבר למשתתף כיצד הבדיקה ' מד ' פועלת ומשדל שאלות לפני שתמשיך.
2. באופן כללי, בצע את ההליך הרפואי בחלק הפנימי של האמה הלא דומיננטית.
3. המקום כפות 1 (עם כל כיסויי הצמצם הוסרו) הימנעות נמשים, שומות, צלקות, שיער (עד כמה שניתן), וכל חתכים, חבורות או נגעים על העור. הסר רק את נייר שעווה מגן גיבוי מן החלקים לרוחב (לא מרכזי) של השרוול 1. חשוב כי נייר שעווה גיבוי מהחלק המרכזי של השרוול 1 לא יוסרו, כמו דבק יש פוטנציאל חזק כדי לגרות את העור כאשר מקולף לאחר קריאות בסיסית, גרימת האדומות של העור האבוכי הפתחים.
4. לאחר למקם את השרוול 1 באתר החשיפה המיועדת, במקום ציוני דרך באמצעות סמן קבוע כדי להבטיח כי השרוול 2 יהיה ממוקם בדיוק באותו מיקום. סמן את העור בארבע נקודות מחוץ לקמטים של כל אחד מדשי הצד של השרוול 1, הימנית העליונה, השמאלית העליונה, הימנית התחתונה והשמאלית התחתונה נקודות.
   1. הפוך את הסימנים האלה כהה מספיק כדי לשרוד כ 24 שעות, כפי שהם ישמשו גם כדי למקם את השרוול 3 בדיוק באותו מיקום בפגישה המעקב 24 שעות מאוחר יותר.

5. קריאה בסיסית: חפתים 1 יישום

1. באמצעות ספקטרוסקופיה כי כבר מכויל על פי מפרטי היצרן, להשיג ולצמיתות להקליט קריאות בכל אחד מששת הפתחים הפתוחים ברצף.
2. ודא כי ספקטרוסקופיה ממוקם במרכז של פתחים השרוול תוך הימנעות שומות, צלקות, או פגמים אחרים במידה האפשרית.
3. רשום לצמיתות את כל ערכי "SCI" (L, A, B). כדי להבטיח קריאות עקביות עם אותה נקודת כיול, יש לשמור על הספקטרוסקופיה במשך הזמן של הליך ה-MED ולא לכבות עד להשלמת הקריאות שלאחר החשיפה.
4. לאחר הקלטת המדידות ספקטרופוטומטר בסיסית, להסיר את השרוול 1. כדי למזער אי נוחות משתתף, להחיל הממס דבק רפואי להיקף של השרוול 1 כפי שהוא קלוף, אשר תמנע הסרה כואבת של שיער על הזרוע.

6. לפני חשיפה לקריאה: חפתים 2 יישום

1. לאחר הסרת השרוול 1, למקם את השרוול 2 באותו מיקום באמצעות ציוני דרך שצוירו על העור עבור השרוול 1. הגיבוי דבק מלא עשוי להיות חשוף ולהחיל כדי להבטיח כי השרוול 2 הוא אטום מספיק כדי למנוע חשיפה בין הפתחים בשל הדבקה מספיק על העור.
2. יש גם את המשתתף וגם את החוקר דון ביגוד מגן UV ואביזרי בטיחות. לכל הפחות, המשתתף, הטכנאי לנהל את ההליך ואת כל הצדדים האחרים בחדר חייב לדון משקפיים מגן UV. טכנאי צריך ללבוש שרוולים ארוכים או להשתמש בשרוול הגנה UV.
3. לפני הפעלת המנורה, הטכנאי מסייע למשתתף לכסות את כל העור החשוף, כולל הזרוע מעל הטלאי, הזרוע ושורש כף היד מתחת לטלאי, היד, וחלקי החזית או האחורי של הזרוע שעלולים להיחשף בצידי המדבקה (UV- יריעות הגנה וקלטת לצרף את הסדינים עשוי להועיל זה. בנוסף, חלק מהמשתתפים לובשים חולצות עם הקווים הפתוחים עשוי לרצות לעטוף בד UV-מגן על הצוואר שלהם החזה אם האזורים האלה יהיו קרובים למקור UV.
4. הפיצו בד מגן-UV תחת זרועו של המשתתף (כדי להקטין את ההשתקפות ממשטח השולחן).

7. MED ההליך: טרום חשיפה

הערה: הקרניים מהמנורה חייבות להיות בניצב לאתר החשיפה. באופן כללי, תנועה פיזית של המנורה אפשרית פחות מאשר תנועה או הסדר של זווית הזרוע של המשתתפים.

1. לפני הפעלת המנורה, מסדרים את זרועו של המשתתף כך שקרני UV מהמנורה יהיו בניצב לזווית השרוול 2 על זרועו של המשתתף.
2. לזהות את המרחק הנכון בין המנורה לבין השרוול 2 על זרועו של המשתתף. מניחים את החיישן של הרדיומטר מול מנורת UV במקביל למשטח של העור וקרוב ככל האפשר למיקום של השרוול 2.
3. לכסות את הזרוע המשתתפים עם בד הוכחה UV כדי למנוע חשיפה, ובקצרה להפעיל את המנורה כדי להתאים את המרחק לשרוול 2 עד חיישן הרדיומטר קורא 270 μW/cm².
   1. כדי להשיג קריאה זו, להתאים את המרחק בין המנורה לבין פני השטח של העור עד הרדיומטר קורא 270 μW/cm² (± 10 μw). , ברגע שהמרחק המתאים נקבע. נטרל את המנורה
      הערה: חשוב לציין כאן שהבדלים קטנים בזווית הרדיומטר ישפיעו רבות על הקריאה. לפיכך, זווית הרדיומטר צריכה להיות קרובה במקביל למשטח העור ככל האפשר.
4. לבצע התאמות נוספות במרחק לאורך כל המפגש חשיפה כדי למנוע סחיפה במיקום של הזרוע. בכל קריאה, לאשר את המרחק ולקרוא בדיוק לפי הצורך כדי לשמור על קריאות רדיומטר ב כ 270 μW/cm² (± 10 μw).

8. רפואה ההליך: חשיפה

1. השתמש בסטופר כדי ליישם את לוח הזמנים של MED. הסר את הצמצם הראשון כיסוי לפני הפעלת מקור UV. הפעל את המקור ואת סטופר בו ולהסיר כל מפתח המכסה על השרוול 2 על פי לוח הזמנים שצוין להלן, מבוסס על FST.
2. בנקודת ההסרה של כל כיסוי הצמצם, הקלט את קריאת הרדיומטר כאשר הרדיומטר מוחזק במקביל למשטח העור והצביע על המנורה. אם המרחק השתנה, להתאים את המרחק למנורה כדי להבטיח את הקרינה שוב קורא 270 (± 10) μW/cm².
3. ודא שטכנאי מפקח על זרועו של המשתתף כדי להבטיח מיקום עקבי. במיוחד, לקרוא את היד רק אם היד מסתובבת, כמו משתתפים רבים לסובב את הזרוע כפי שהם להירגע. בעקבות כל התאמות, לאשר מחדש כי הרדיומטר קורא 270 μW/cm² (± 10 μw).
4. כבה את המנורה בזמן מדויק שצוין על-ידי לוח המינון בטבלה 1. אין להשבית את הסטופר, כמו סדרה נוספת של קריאות ספקטרוסקופיה יש לאסוף בדיוק 7 דקות בעקבות הביטול של המנורה, כפי שמתואר להלן.

9.7 דקות לאחר חשיפת הקריאה

1. בדיוק 7 דקות לאחר הביטול של המנורה, להקליט את הקריאות ספקטרוסקופיה הסופי מכל צמצם בשרוול 2. המטרה באיסוף נתונים מיד לאחר הליך החשיפה היא לאשר תחילה תגובה שלילית לקרינת UV, ושנית להעריך את התגובות הראשוניות, אשר במקרים מסוימים יכול להיות קל, אבל באופן שונה למדי מ בסיס ( טרום חשיפה) ערכים. כל עלייה באדמומיות לאחר 7 דקות צפוי להיות אפקט תרמי ולא אודם.
   הערה: תגובה שלילית לחשיפה לקרינה UV לאחר 7 דקות סביר להניח קשורה למינון urticarial מינימלי של urtiקריה סולארית, הפרעת תמונה רכשה. הפרעות בפוטורגישות מוערך לפני ההליך MED ונושאים עם הפרעות אלה יש לשלול. עם זאת, אם זה נצפה בכל שלב במהלך בדיקה את פרוטוקול החשיפה יש להפסיק מיד.
2. לאחר החשיפה לקרינת UV, השרוול 2 יכול להיות קשה במיוחד כדי להסיר. השימוש בכיתה רפואית הממס דבק, אם יש צורך, כדי למזער את אי נוחות המשתתפים במהלך ההסרה של השרוול 2. משתתפים עם עור במיוחד שעירות או רגיש אחרת עשוי למצוא את זה מועיל להחיל או שמן זית או מסיר דבק מבוסס אלכוהול מתחת לקצה של השרוול 2, כפי שהם מסירים את התיקון לאט. לאחר השרוול 2 מוסרים המשתתפים עשוי להיות דבק שיורית על העור שלהם, אשר ניתן גם להסיר עם שמן זית או הממס דבק רפואי.
3. לפני היציאה מן המפגש חשיפה, להזכיר למשתתפים לא לשטוף את ציוני הדרך ולא להחיל כל תחליבים לאתר חשיפה.

10. מעקב אחר מינוי: חפתים 3 יישום

1. לפני שמשתתף מגיע, כיול את הספקטרוסקופיה לפי מפרטי היצרן.
2. להכין את השרוול 3 על ידי הסרת כל כיסויי הצמצם (להשאיר את הנייר שעווה לבן גיבוי על החלק המרכזי של התיקון). כאשר ממקמים את השרוול 3 על זרועו של המשתתף, להסיר את הנייר שעווה לבן גיבוי משני המדפים הצדדיים של התיקון. באמצעות ציוני הדרך על הזרוע של המשתתף, המקום השרוול 3 באותו מיקום כמו שתי הטלאים הקודמים.
3. יש לקרוא בכל אחד מששת הפתחים הפתוחים ברצף. בנוסף, חזותית לבדוק את כל הצמצם ולהקליט אם נראה שיש ראיות חזותיות של תגובת אודם בכל אחד מששת הפתחים (עור אדום או ורוד מציין אודם). לאחר ההקלטה לצמיתות ספקטרוסקופיה קריאות, להסיר את השרוול 3, באמצעות ממיס אם יש צורך.
4. כדי לשפר עוד יותר נוחות ובטיחות משתתף, לספק 4-6 לשימוש יחיד ג'ל כוויות או אלוורה, ולציין את המשתתף כי אם אתר החשיפה הופך מגרד או לא נוח, זה יכול להיות מטופלים כמו כוויות שמש עם אלה או דומה על מוצרים הדלפק.

תוצאות

לוח הזמנים של התזמון המוצג בטבלה 1 הוא לוח זמנים של המינון הרומן שחושב ללכוד את מד הרפואה, בממוצע, באמצע נקודת החשיפה (כלומר, צמצם 3 או 4) עבור כל fst. הבסיס ללוח הזמנים המחושב הוא כדלקמן.

עבודה קודמת הקימה כי עבור אנשים עם FST 2, החציון MED עבור קרינה בטווח UVB הוא 66.9 מיליואט (mW) לכל ס מ², 77.429 mW/cm² עבור fst 3 ו 85.0 עבור fst 4¹⁶. תחת הנחה של אנרגיה מתמדת UVB של 270 μW/cm², אנו מצביעים על זה קבוע לתוך התחום הזמני...

דיון

היישום המדויק של בדיקות MED כפי שמתואר כאן יכול להציע מספר יתרונות על פני אתגרים דלקתיים אחרים המבוססים על מעבדות אשר השיגו שימוש פופולרי. לדוגמה, שלפוחית השאיבה פרוטוקולים^17,18,19 להעלות נוזל מלא שלפוחית על העור כי הוא מוקרם לאחר מכן עם מזרק כדי לקבל גישה ישירה מיקרו הסביבה ציטוקינים. למרות העור בועות הוא כלי ידוע לימוד אימונולוגיה העור ודלקת²⁰, והוא עשוי להיות יעיל במיוחד עבור קבלת גישה אוכלוסיות נדירות...

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
מדבקת בדיקת מינון של 6 צמצמים (" שרוול")	דאבלין	<סטרונג>	<חזק>
רפואי כיתה דבק ממס
לא רפלקטיבי UV הוכחה בד
רדיומטר	SolarLight	דגם 6.2 UVB מד
לשימוש חד פעמי אלוורה או ג'ל
ספקטרופוטומטר	Konika-Minolta	CM-2600D
שעון
מנורת UV – ספקטרום פליטת פיג'י Sun	Sperti		280 ננומטר-400 ננומטר, כ-25%
משקפי בטיחות עמידים בפני UV (2 זוגות)
שרוול
כפפות כותנה לבנות (2 זוגות)

צריבה עצרחסין UV