כאן, אנו מתארים שיטה להעברת תרופות למערכת העצבים המרכזית העכברוש על ידי שתילת קטטר לתוך החלל המותני הפנימי של עמוד השדרה. אנו מתמקדים במסירת מחלת האנטי-הגיונית, למרות ששיטה זו מתאימה גם לאספקה של שיטות טיפוליות אחרות.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
משלוח פנימי של אנטי-סנס וליגונו, במערכת העצבים המרכזית של חולדה
* These authors contributed equally
במאמר זה
סיכום
תקציר
מחסום מוח הדם (BBB) הוא הגנה חשובה מפני הכניסה של גורמים רעילים או גורמי הרסניות מהדם אל מערכת העצבים המרכזית (CN). עם זאת, קיומה גם מוריד באופן דרמטי את הנגישות של סוכנים רפואיים מנוהלים בצורה מערכתית ל-CN. שיטה אחת להתגבר על זה, היא להזריק את הסוכנים האלה ישירות לתוך הנוזל השדרתי (שדרתי), ובכך לעקוף את BBB. זה יכול להיעשות באמצעות השרשה של קטטר עבור אינפוזיה רציפה באמצעות משאבת אוסמוטי, או עבור משלוח בודד. במאמר זה, אנו מתארים פרוטוקול כירורגי למסירה של מערכת היעד האנטי הגיונית פורוזימטר (אסוס) באמצעות קטטר מושתל ישירות לחלל תסמונת זנב של עמוד השדרה למבוגרים חולדה. כתוצאות מייצגות, אנו מראים את היעילות של בודד באמצעות הזרקת הרכב (IT) באמצעות המערכת הזאת מערכת להפיל את RNA היעד באזורים שונים של ה-CN של החולדה. ההליך הוא בטוח, יעיל ואינו דורש ציוד יקר או כלים כירורגיים. ניתן להתאים את הטכניקה המתוארת כאן לאספקת סמים גם באופנים אחרים.
מבוא
מערכת כלי הדם של מערכת העצבים המרכזית (CN) התפתחה כרגולטור קריטי של הומאוסטזיס, שליטה על התנועה של מולקולות, אספקת חומרים מזינים ולהיפטר פסולת. מערכת זו היא גם קו ההגנה הראשון מפני תקיפות של פתוגנים חיצוניים, הודות לחלוקה צפופה של צמתים הדוקים לאורך קירות התאים האנדותל. הצמתים הצמודים האלה מפצות על היבט אחד של מחסום מוח הדם (BBB). בעוד bbb מאפשר את ההובלה של מולקולות הדרושות כדי להגשים דרישות התזונתיים והאנרגיה (g., יוני, גלוקוז), זה גם מגביל באופן סלקטיבי את המעבר של פתוגנים, כמו גם כימיקלים רעילים1,2,3.
באופן אירוני, אותו תפקיד מגן של BBB כי מגביל מעבר של פתוגנים וכימיקלים רעילים גם הוא המכשול העיקרי ליכולתנו לגשת בקלות את ה-CN עם טיפולים טיפוליים לאחר הממשל מערכתית לאורגניזם2, 4,5. תפקיד זה של BBB מבקש פיתוח של שפע של טכנולוגיות חדשות להפצת סמים וגישות6.
אחת הדרכים להתגבר על מכשול זה היא להזריק את התרופות ישירות לתוך הנוזל המוחי-שדרתי (שדרתי) כי ברציפות הן המוח והן חוט השדרה7,8,9,10. במאמר זה, אנו מתארים שיטה כדי לספק בהצלחה סוכנים לתוך החלל המותני המותניים על ידי הצבת הקצה הפנימי של הקטטר לחלוטין בחלל תסמונת זנב של עמוד השדרה חולדה. תיאור של הליך זה פורסם בעבר על ידי מזור ואח'.
הפרוטוקול הוא יעיל מאוד ומייצרת גדול מ 90% שיעור הצלחה של antilig, משלוח כמותי (ה-ASO) המסירה ל-CN כאשר מוערך על ידי תגובת שרשרת פולימראז כמותית (qPCR) ניתוח של היעד הגנטי הסתרה8. ההליך גורם אי-נוחות מינימלית לבעלי החיים, כמו 100% של חולדות לשרוד את הניתוח ולהראות נפיחות מינימלית סביב הפצע כירורגי ואין סימנים של מצוקה (למשל, היפראקטיביות, התייבשות, מקיפים, אובדן של איזון, ירידה צריכת המזון, ו התייבשות) במהלך התבוננות שלאחר ניתוח. יתרון נוסף של השיטה המתוארת כאן הוא שהוא אינו דורש ציוד יקר, או כלים מיוחדים.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
כל בהליכים vivo בוצעו תחת השימוש המוסדי Biogen בעלי חיים והוועדה טיפול (IACUC) מאושר פרוטוקולים אשר לעקוב אחר ההנחיות שנקבעו על ידי ארצות הברית הלאומי המכון לבריאות מדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה.
1. הכנת חומרים וכלים
- הכינו את הצינורית המיוחדת למדריך.
- השתמש בכלי רוטרי עם גלגל חתוך (או מסור חד) כדי לחתוך את שני הקצוות של המחט G 19, וכתוצאה מכך באמצעות צינורית מדריך ארוך של ~ 1.5-2 ס מ (איור 1aiii). להשתמש בגלגל לטחינת של הכלי רוטרי להחליק את שני הקצוות.
הערה: ניתן לרכוש באמצעות ספק מסחרי ובאמצעות צינורית מדריך מוכן וסטרילי (רשימת חומרים).
- השתמש בכלי רוטרי עם גלגל חתוך (או מסור חד) כדי לחתוך את שני הקצוות של המחט G 19, וכתוצאה מכך באמצעות צינורית מדריך ארוך של ~ 1.5-2 ס מ (איור 1aiii). להשתמש בגלגל לטחינת של הכלי רוטרי להחליק את שני הקצוות.
- הכינו את הקטטר/הרכבת תיל.
- גזור פיסת 8 ס"מ ארוך של צינורות PE-10 (פוליאתילן אבובים, קוטר 0.011 אינץ ') כדי לשמש צנתר התוך הפנימי. לעשות סימן 2 ס מ מקצה אחד עם עט הסמן עמידים בפני אתנול. לחתוך כבל מצופה באורך 11 ס מ מחוטי נירוסטה. הכנס את התיל stylet (איור 1הכל) לתוך לומן של הצנתר PE-10 (איור 1Ai).
הערה: מערכת קטטר/תיל אחת (איור 1באב) נדרשת עבור כל חיה. לחילופין, קטטרים ומוצרי קטלייט ניתנים לרכישה מספק מסחרי (טבלת חומרים).
- גזור פיסת 8 ס"מ ארוך של צינורות PE-10 (פוליאתילן אבובים, קוטר 0.011 אינץ ') כדי לשמש צנתר התוך הפנימי. לעשות סימן 2 ס מ מקצה אחד עם עט הסמן עמידים בפני אתנול. לחתוך כבל מצופה באורך 11 ס מ מחוטי נירוסטה. הכנס את התיל stylet (איור 1הכל) לתוך לומן של הצנתר PE-10 (איור 1Ai).
- להכין צנתר משלוח הרכבה.
- חותכים פיסת קטטר PE-50 (5-10 ס מ, אבובים פוליאתילן, קוטר 0.023 אינץ ') (איור 1Bi). לקצה אחד של הקטטר PE50 להוסיף 23 G אבובים מתאם (איור 1באלה). קצה זה יהיה מחובר למזרק 100 μL (טבלת חומרים) במהלך הניתוח. הוספת המחט שונה 30 G עם הרכזת לחתוך (איור 1biii) לתוך כ 0.5 ס מ בחתיכה של הצינורות Pe-10 (איור 1biii) ולחבר את הצינורות pe-10 לקצה השני של הצנתר.
- The 30 המחט הקצה של הרכבה קטטר המסירה (איור 1Bv) יהיה מחובר לקצה המרוחק של הצנתר המושתל PE-10 בחולדה במהלך הניתוח.
הערה: לחלופין, ניתן לרכוש את הרכבת קטטר המסירה (איור 1Bv) מספק מסחרי (טבלת חומרים).
- הכינו את מכלול המחט המנחה (איור 1אבי) על-ידי הצבת צינורית מדריך (איור 1aiii) בסוף מחט של 23 גר'.
- לחטא את כל כלי הניתוח כולל צינורית המדריך ואת ערכות התיל/קטטר באמצעות מעקר תחמוצת אתילן עבור 12 h.
הערה: כל כלי הניתוח מלבד הקטטר יכול להיות אוטומטית; קטטר ימס בטמפרטורה גבוהה.
2. הכנת כירורגיה
הערה: הליך זה מבוצע באופן שגרתי על גברים ועכברים מג הנשי משחק עם משקולות הגוף בין 200 g ו 400 g. שני חולדות ממוקמים לכלוב תחת 12 h מחזור אור/כהה עם גישה חופשית למזון ולמים.
- משקל חולדה ומניחים אותו בחדר isofלבנה כדי לגרום להרדמה (1-5% isofלוריאן ב O2, טיטרציה כדי להשפיע).
הערה: העכברוש מורדם ברציפות עם isof, כדי לשמור על הרדמה עמוקה באמצעות חרוט אף לאורך כל ההליך. שיטת הרדמה חלופית (למשל, ניהול של קטמין 100 mg/ק"ג ו xylazine 10 מ"ג/ק"ג) ניתן להשתמש כפי שאושרו על ידי IACUC. - כאשר החולדה נכשלת להגיב לצביטה בבוהן, לגלח את גבו מן הזנב אל השדרה החזה של caudal ולמקם את העכברוש מגולח על סדין סטרילי הניח על גבי כרית חימום.
- מיקום שפופרת צנטריפוגה חרוטי 50 ml מתחת לבטן החולדה כדי לכופף את עמוד השדרה באזור המותניים (איור 2א) ולהחיל משחה אופטלמולוגית על העיניים.
- הכנס בופרינורפין שחרור מתמשך (1.0 מ"ג/ק"ג; רשימת חומרים) . תת-עורי בחולדה לנקות את העור חשוף עם povidone לסירוגין וחלוק אלכוהול ולחזור על זה שלוש פעמים.
הערה: ניתן להשתמש בשיכוך כאבים חלופיים כמאושרים על-ידי פרוטוקול IACUC. - לעטוף את החיה עם העטוף שקוף סטרילי כי כבר מדורגים על האתר כירורגי.
3. כירורגיה
- עם עכברוש נתמך על ידי צינור 50 mL, לזהות את שני בורות טבעיות בין השרירים מעל האגן (חיצים באיור 2א). עם יד אחת מחזיק את הבורות האלה, להשתמש ביד השנייה כדי ללחוץ בעדינות ולהרגיש את עמוד השדרה של caudal לכיוון rostral ולמצוא את הכניסה הגדולה הראשונה בין החוליות וזה החלל הבין החוליות בין S1 ו L6 חוליות (איור 2B ).
- העבר מעט rostrally כדי לזהות את ההזחה הבאה, את המרחב הבין החוליות בין L5 ו L6 חוליות ואת אתר ההזרקה (* באיור 2א). השתמש אזמל לעשות חתך לא יותר 2 ס"מ ארוך בעור לאורך קו האמצע מ rostral כדי caudal כך באתר ההזרקה היא במרכז החתך (קומנוקד באיור 2א).
- השתמשו במספריים לחיתוך כדי לנתח את רקמת החיבור כדי להמחיש את שכבת השריר. ואז לעשות חתך 1 ס מ בקפסולה שריר מיד לרוחב לתהליך השדרה הצדדית של חוליית המותניים L6.
הערה: העצמות של חוליית המותניים של L6 יכולות להיות מדמיינו בשלב זה. - מקמו את מכלול המחט של המדריך בסמוך להיבט הקדמי של חוליית המותניים השישית ודחפו אותו לתוך החלל הבין-חולייתי לאורך ההיבט הקדמי של החוליה השישית, כך שסוף המחט חודר לתעלת השדרה. לחצו על צינורית המדריך במקום לאורך המחט והסירו את המחט של 23 גר' שעוזבת רק את צינורית ההנחיה במקומה.
הערה: מומלץ להשתמש בלקחיים בוטים כדי לאתר את התהליך הL6 של חוליית המותניים לפני החדרת המחט. באופן כללי, נוזל שדרתי הנוזלים ניתן לראות כניסה לרכזת מחט (נוזל זה עשוי להיות מעובד עם רמז של דם, אבל זה לא מעיד כי הנזק נעשה או כי המחט אינה ממוקמת כראוי). המחברים לא ראו כמות גדולה של דם או דימום חמור במהלך הליך זה. אם זה קורה, יש ליצור קשר עם וטרינר כדי לקבוע את הטיפול המתאים, ואם יש לקבל בעלי חיים מורדמים. - הכנס את הרכבת הקטטר. לתוך צינורית המדריך זווית למטה צנתר-תיל הרכבה בקירוב זווית 45 ° לתעלת השדרה ולאלץ את הסוף כ 0.3 ס מ לתוך תעלת השדרה.
- הסירו את צינורית המדריך, והשאירו את הקטטר במקום. הסר את התיל stylet כ 2.5 ס מ מהקצה הפנימי של הצנתר ולקדם את הקטטר לתוך תעלת השדרה עד 2 ס"מ סימן הוא בכניסה של התעלה (רק גלוי מתחת לשריר) כפי שמוצג באיור 1bvi.
הערה: הקטטר שהוכנס צריך להאריך rostrally לתוך מרחב התת-מזהה. מיקום מוצלח צריך לאפשר תנועה חופשית של הצנתר בחלל זה. - משיכת לחלוטין את חוט התיל, ו שדרתי נראה להיכנס הצנתר מושתל.
- לחבר את הרכבת קטטר מסירה לקצה המרוחק של הצנתר מושתל דרך המחט 30 G (איור 1Bv, vi).
- טען 60 μL של תמיסת מלח סטרילית לתוך מזרק 100 μL (מזרק השטיפה). טען את המנה של 30 μL של מתחם הבדיקה (למשל, פתרון ASO) למזרק שני (מזרק הזרקה).
- לחבר את מזרק השטיפה (טעון עם מלוחים) אל המתאם אבובים הקצה של הרכבת קטטר מסירה (איור 1Bv). הכנס 20 μL של תמיסת מלח סטרילית לתוך המרחב הפנימי (הזרקה לפני ההזרקה).
- לחבר את מזרק ההזרקה (טעון עם מתחם בדיקה) למתאם אבובים בקצה של הרכבת קטטר מסירה (איור 1Bv). הכנס 30 μL של תרכובת הבדיקה לחלל הפנימי מעל 30 s.
הערה: נפח ההזרקה השגרתי של ASO הוא 30 μL כדי להשיג הסתרה טוב בחוט השדרה ובקליפת המוח. דווח כי אמצעי האחסון להזרקה עלולים להשפיע על התפלגות מורכבת12, למרות שאמצעי אחסון שונים של הזרקה לא נבדקו. אם נעשה שימוש בתרכובת או באמצעי אחסון אחרים, הבטיחות והיעילות צריכים להיקבע באמצעות הסדר האמפירי. - חזור על שלב 3.10 ו לשטוף את הקטטר עם אחר 40 μL של תמיסת מלח סטרילי (שלאחר הזרקה שטיפה). ואז לנתק את הרכבת קטטר המסירה מן הצנתר מושתל.
הערה: ריקון מראש ולאחר הזרקה הוא חשב להפחית את הקיבוע על המקומית של תרכובות ולשפר את ההפצה שלהם למבנים rostral12. - חתך aseptically ומחממים את הצנתר מושתל: מקום זוג של מלקחיים לחיתוך סטרילי בתוך עיקור חרוז עד שהם חמים מאוד, אז מלקחיים על אבובים עם קצה חם של מלקחיים.
הערה: פעולה זו ממיסה את הצנתר. כך, החור בצינור מתמוטט וכל הצדדים נדבקים זה לזה, איטום אבובים באופנה אספטי ולאחר מכן הוא ממוקם לתוך החלל התת עורית. - השתמש בתפרים מונופינט לספיגה כדי לאבטח את הצנתר שנותר אטום החום לרקמת החיבור. לאחר מכן השתמש בתפרים מונופינט לא נספגים כדי לסגור את העור על הצנתר המאובטח אטום החום.
הערה: ניתן להשתמש בקליפי הפצע גם כמאושרים על-ידי פרוטוקול IACUC. הטכניקה תואמת לזריקות חוזרות ונשנות למרות שהיא משמשת רק לזריקות חד פעמי בידינו. הכדאיות של זריקות חוזרות צריך להיות מוערך במידה מדעית עם אישור IACUC. - השתמש גזה ותמיסת מלח לשטוף כל דם מן העור ולאפשר לבעל החיים להתאושש מן ההרדמה בחממה מחוממת עד הנייד, ובשלב זה הוא חזר כלוב הבית שלה (שני חולדות לכל כלוב).
הערה: בעת ביצוע ניתוחים על חולדות מרובות באותו יום, כלים נקיים המשתמשים במים כדי להסיר דם ולעקר מחדש תוך שימוש בעיקור מחומם יבש מחוטא (לפחות 20 s, עם זמן להתקרר) בין בעלי חיים. סט חדש של מכשירים משמש כל 5 בעלי חיים. - עקוב אחר בעלי החיים מדי יום לפחות 3 ימים לאחר הניתוח ולהמשיך לעקוב אחר החיות לשבוע לאחר התאוששות מהניתוח בהתאם לפרוטוקול IACUC.
הערה: אם מתרחשים סיבוכים כלשהם (החזקת שתן, דלקות חתך, הפרעה נוירולוגית כגון תפיסה או שיתוק), יש ליצור קשר עם וטרינר כדי לקבוע את הטיפול המתאים, ואם יש להמתו בעלי חיים. אם שחרור מתמשך בופרנורפין אינו משמש, הקלה בכאב יש להינתן מדי יום לאחר הניתוח בהתאם לפרוטוקול IACUC.
4. הערכה של המחנוק מסוים לאחר הזרקת הנייר
- שבועיים לאחר הזרקת ההזנה של אסוס, לאסוף אזורים שונים של המוח (כלומר, קליפת מוחין, סטריאטום והמוח) כמו גם קטעים שונים של חוט השדרה (כלומר, צוואר הרחם, החזה, והמותניים). לחלץ את ה-RNA רקמות הכולל באמצעות ערכת החילוץ RNA מסחרי ולבצע תגובת סינתזה cDNA כמתואר בעבר13.
הערה: ריאגנטים רגיל שימשו ל-qPCR עם מספר השורות הבאות: עכברוש Malat1 ועכבר. רמות התעתיק היחסיות חושבו באמצעות השיטה 2-ΔΔCt (CT = מחזור הסף).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
באמצעות השיטה המתוארת כאן, הזרקנו שתי קבוצות של חולדות נשים בוגרות (250-300 גרם; n = 10/קבוצה) עם מנת אחת של מלוחים באגירה של פוספט-PBS או 300 μg של ASO מיקוד ארוך שאינו קידוד (לינק) RNA Malat1; במעבדה שלנו אנו משתמשים באופן שגרתי Malat1 ASO כמו מתחם כלי, כי Malat1 מתבטאת אוביקוויטיות ברמות גבוהות בכל הרקמות14, כולל המוח חוט השדרה. Malat1 ASO עובד באמצעות מנגנון RNaseH1 בתיווך15 כי מבזה את RNA, המוביל לנוק (KD). בניסוי שמתואר כאן, אספנו אזור...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
המאמר הנוכחי מראה שיטה רבת עוצמה כדי לספק סוכנים טיפוליים ישירות לתוך ה-CN של החולדה. בתאוריה, טכניקה דומה יכולה להתבצע גם בעכברים, אם כי במידה הקטנה יותר, השיטה יכולה להיות מאתגרת יותר. לכן, הקבוצה שלנו מבצעת הזרקת המוח התאיים (ICV) בעכברים עבור העברת תרופות ה-CN, המגיעות לאותן מטרות באמצעות תוואי אחר של המינהל. שיטה זו תוארה במחקר אחר16.
יתרון השיטה המתואר כאן הוא שהוא אינו דורש ציוד יקר, או כלים מיוחדים. אנו ממליצים על הכנת מכלול הקטטר/התיל המוצג
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
המחברים הם כל העובדים של Biogen, Inc. או ביולס פרמצבטיקה. המחברים מקבלים את התרופות האנטי-הגיוניות המתוארות במאמר מ-Ionis פרמצבטיקה.
תודות
אנחנו רוצים להודות Ionis פרמצבטיקה על אספקת אסוס המתואר במאמר.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 3M Steri-Drape וילון קטן עם צמצם דבק | 3M | 1020 | |
| 70% אתנול | Decon Laboratories, Inc | 8416-160Z | |
| מקלות ספוגית אלכוהול | Dynarex | NO 1204 | |
| BD מזרקים לשימוש כללי 1 מ"ל טיפ Luer-Lok | BD | 1 מ"ל TB קצה Luer-Lok | BD 302830 |
| BD צינורות PE אינטרמדיק | BD | צינורות פוליאתילן PE50 קוטר 0.023 | ב-BD 427400 (10ft, Fischer Scientific 22-204008) או 427401 (100ft, Fischer Scientific 14-170-12P) |
| BD Intramedic PE Tubing | BD | צינורות פוליאתילן PE10 קוטר 0.011 ב-BD | 427410 (10ft, Fischer Scientific 14-170-11B) או 4274011 (100ft, Fischer Scientific 14-170-12B) |
| BD Intramedic PE Tubing Adapters | BD | 23 gauge intramedic luer stub adaper | BD 427565 או Fisher Scientific 14-826-19E |
| BD PrecisionGlide מחטים חד פעמיות 30G | BD | BD | |
| בופרנורפין שחרור מתמשך מעבדה | ZooPharm | מרשם נדרש | |
| מעקר אתילן אוקסיד | אנדרסן סטרילייזר INC. | 74i, מעקר גז | צינורית מדריך 74i |
| 19G x 1 WT (1.1 מ"מ x 25 מ"מ) מחט | BD 305186 | ||
| מזרק המילטון 100ul | חברת המילטון | מזרק המילטון 100ul | |
| חרוז חם מעקר | כלי מדע עדינים STERILIZER | MODELNO FST 250 | |
| משחת עיניים | Dechra veterranery מוצר | 17033-211-38 | |
| Pocket Pro Pet Trimmer | Braintree Scientific | CLP-9931 B | |
| Povidone scrub | PDI | S48050 | |
| מי מלח | בקסטר | נתרן כלוריד 0.9% עירוי תוך ורידי BP 50 מ"ל | |
| FE1306G | אזמל נוצות | אזמל חד פעמי | מס' 10 |
| כרית חימום לבעלי חיים קטנים | K& H ייצור | דגם # 1060 | |
| Stylet Wire | McMaster-Carr | 1749T14 | LH-36233780 |
| וילון מגבת ניתוח | Dynarex | 4410 | |
| מספריים ומלקחיים כירורגיים | FST ו-Fisher Scientific | ||
| Setures | Ethicon | 4-0 או 5-0 | |
| כלי להכנת המדריך הקנולרי | Grainger | כלי סיבובי (דרמל) | 14H446 (Mfr: EZ456) |
| מנעול EZ מנותק גלגל | 1PKX5 (Mfr: 3000-1/24) | ||
| גלגל השחזה, תחמוצת אלומיניום | 38EY44 (Mfr: EZ541GR) | ||
| ציר מנעול EZ | 1PKX8 (Mfr: EZ402-01) | ||
| אריח רצפת גלגל יהלום | 3DRN4 (Mfr: EZ545) | ||
| <חזק>מקור חלופי לחומרים מוכנים מראש ומעוקרים להליך זה | |||
| מערכת צנתר מינון | SAI מערכות | RIDC-01 | |
| צינורית | מדריך SAI מערכות | RIDC-GCA | |
| צנתרים פנימיים | SAI מערכות עירוי SAI | RIDC-INC | |
| Stylet חוט | SAI מערכות | עירוי | RIDC-STY |
מקורות
- Abbott, N. J. Dynamics of CNS barriers: evolution, differentiation, and modulation. Cellular and Molecular Neurobiology. 25 (1), 5-23 (2005).
- Greene, C., Campbell, M. Tight junction modulation of the blood brain barrier: CNS delivery of small molecules. Tissue Barriers. 4 (1), e1138017(2016).
- Daneman, R., Engelhardt, B. Brain barriers in health and disease. Neurobiology of Disease. 107, 1-3 (2017).
- Ballabh, P., Braun, A., Nedergaard, M. The blood-brain barrier: an overview: structure, regulation, and clinical implications. Neurobiology of Disease. 16 (1), 1-13 (2004).
- Cardoso, F. L., Brites, D., Brito, M. A. Looking at the blood-brain barrier: molecular anatomy and possible investigation approaches. Brain Research Reviews. 64 (2), 328-363 (2010).
- Larsen, J. M., Martin, D. R., Byrne, M. E. Recent advances in delivery through the blood-brain barrier. Current Topics in Medicinal Chemistry. 14 (9), 1148-1160 (2014).
- Brinker, T., Stopa, E., Morrison, J., Klinge, P. A new look at cerebrospinal fluid circulation. Fluids Barriers CNS. 11, 10(2014).
- Standifer, K. M., Chien, C. C., Wahlestedt, C., Brown, G. P., Pasternak, G. W. Selective loss of delta opioid analgesia and binding by antisense oligodeoxynucleotides to a delta opioid receptor. Neuron. 12 (4), 805-810 (1994).
- Wahlestedt, C., et al. Antisense oligodeoxynucleotides to NMDA-R1 receptor channel protect cortical neurons from excitotoxicity and reduce focal ischaemic infarctions. Nature. 363 (6426), 260-263 (1993).
- Wahlestedt, C., Pich, E. M., Koob, G. F., Yee, F., Heilig, M. Modulation of anxiety and neuropeptide Y-Y1 receptors by antisense oligodeoxynucleotides. Science. 259 (5094), 528-531 (1993).
- Mazur, C., et al. Development of a simple, rapid, and robust intrathecal catheterization method in the rat. Journal of Neuroscience Methods. 280, 36-46 (2017).
- Wolf, D. A., et al. Dynamic dual-isotope molecular imaging elucidates principles for optimizing intrathecal drug delivery. Journal of Clinical Investigation Insight. 1 (2), e85311(2016).
- Becker, L. A., et al. Therapeutic reduction of ataxin-2 extends lifespan and reduces pathology in TDP-43 mice. Nature. 544 (7650), 367-371 (2017).
- Zhang, X., Hamblin, M. H., Yin, K. J. The long noncoding RNA Malat1: Its physiological and pathophysiological functions. RNA Biology. 14 (12), 1705-1714 (2017).
- Crooke, S. T., Witztum, J. L., Bennett, C. F., Baker, B. F. RNA-Targeted Therapeutics. Cell Metabolism. 27 (4), 714-739 (2018).
- DeVos, S. L., Miller, T. M. Direct intraventricular delivery of drugs to the rodent central nervous system. Journal of Visualized Experiments. (75), e50326(2013).
- McCampbell, A., et al. Antisense oligonucleotides extend survival and reverse decrement in muscle response in ALS models. Journal of Clinical Investigation. 128 (8), 3558-3567 (2018).
- Schoch, K. M., Miller, T. M. Antisense Oligonucleotides: Translation from Mouse Models to Human Neurodegenerative Diseases. Neuron. 94 (6), 1056-1070 (2017).
- Lane, R. M., et al. Translating Antisense Technology into a Treatment for Huntington's Disease. Methods in Molecular Biology. 1780, 497-523 (2018).
- Wurster, C. D., Ludolph, A. C. Antisense oligonucleotides in neurological disorders. Therapeutic Advances in Neurological Disorders. 11, (2018).
- Haché, M., et al. Intrathecal Injections in Children With Spinal Muscular Atrophy: Nusinersen Clinical Trial Experience. Journal of Child Neurology. 31 (7), 899-906 (2016).
- Goodkey, K., Aslesh, T., Maruyama, R., Yokota, T. Nusinersen in the Treatment of Spinal Muscular Atrophy. Methods in Molecular Biology. 1828, 69-76 (2018).
- Wurster, C. D., Ludolph, A. C. Nusinersen for spinal muscular atrophy. Therapeutic Advances in Neurological Disorders. 11, (2018).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
תגיות
