קרצינומה של תאי הכליה (RCC) הואהסרטן הנפוץ ביותר 7 בארצות הברית. מדי שנה, 74,000 אמריקאים מוערך להיות שאובחנו לאחרונה, חשבונאות עבור יותר מ 14,000 מקרי מוות (ברור תא משנה היסטולוגית, או ccRCC, הוא סוג המשנה הנפוץ ביותר, חשבונאות עבור כ 80% של מקרים RCC. חולים עם ממאירות מותאמים לשפות אחרות מטופלים עם כריתת הנפרוטומיה ויש להם שיעור חיובי הישרדות 5 שנים של 73%1. עם זאת, 25%-30% מהחולים לפתח גרורות רחוקות איברים חיוניים כגון הריאות, וכתוצאה מכך הישרדות עני מרושע של 13 חודשים ושיעור ההישרדות של 5 שנים של רק 11%1,2,3. הבנה נוספת של מנגנון גרורתי נדרש כדי לשפר את התוצאה הקטלנית של ccRCC גרורתי.
ההפסד של הגן מדכא סרטן vhl הוא נגע גנטי החותם נצפתה ברוב של מקרים האדם ccrcc4,5,6,7. עם זאת, המנגנון האונגניים המדויק של אובדן VHL ב-ccRCC אינו ידוע. כמו כן, מצב ביטוי VHL אינו ניבוי של תוצאה ב-ccRCC8. בעיקר, למרות ניסיונות רבים על הכליה-אפיתל-המיקוד VHL ממוקד, מדענים לא הצליחו ליצור חריגות כליות מעבר לנגעים פיברוזיס preneoplastic נצפתה בעכברים9, גם כאשר בשילוב עם מחיקה של דכאי גידול אחרים כגון pten ו p5310. ממצאים אלה תומכים ברעיון כי הפסד VHL לבד אינו מספיק עבור tumorigenesis או גרורות ספונטנית הבאים.
לאחרונה, המעבדה שלנו יצרה הסתרה vhl חדש (vhl-KO) קו התא באמצעות מחיקת crispr/Cas9 בתיווך של הגן vhl ב-murine vhl ושקו התא (renca, או vhl-WT)11,12. הראנו כי VHL-KO היא לא רק mesenchymal, אלא גם מקדם את האפיתל למעבר mesenchymal (פרמדיק) של VHL-WT תאים12. חובש ידוע לשחק תפקיד חשוב בתהליך גרורתי13. העבודה שלנו עוד הראה כי גרורות ריאה מרחוק מתרחשת רק עם השרשה של VHL-KO ו VHL-WT תאים בכליה, תמיכה מנגנון שיתופי של גרורות. חשוב לעשות זאת, הדגם VHL-KO המושתל שלנו, והמודל VHL-WT שלנו, מוביל לגרורות ריאות חזקות, ובכך מופקת את התיקים הקליניים של ccRCC. המודל הספונטני הזה של ccRCC מפצה על חוסר מודל העכבר הגרוגני הטרנסגניים, במיוחד בפיתוח של תרופות נגד גרורות הרומן. פרוטוקול זה מדגים את ההשתלה קפסולת הכליות של אוכלוסיות תאים הטרוגנית של תאי RENCA הנדסה גנטית.
עוף פקה מודלים יש היסטוריה ארוכה במחקר על אנגיוגנזה וביולוגיה של הגידול בשל היתרונות הרבים שלהם, כפי שמסוכם בטבלה 114,15,16,17,18. בקצרה, חלון הזמן עבור צמיחה הגידול פקה קצר, המאפשר מקסימום של 11 ימים עד מצלמת הושמדה על ידי בקיעה של עוף16. למרות זמן הצמיחה הקצר, אספקת התזונה העשירה והמצב החיסוני של העובר העופות מאפשרים הגידול היעיל מאוד בתאום16,19,20,21. לבסוף, העלות של כל ביצה מופרית היא ~ $1, לעומת מעל $100 עבור העכבר SCID. יחד, מודל מצלמת יכול לשמש כמודל בעלי ערך חלופי בעלי חיים בהקמת PDXs חדש בחיסכון גדול בזמן ועלות בהשוואה לעכבר. בפרוטוקול זה, אנו העריכו אם המודל היה מסוגל ללכוד את הביולוגיה של ccRCC גרורתי שנצפו במודל העכבר הנושא אורתוקרט.
| (SCID) עכבר | צלמת | הערה |
| עלות | > 100 דולר לכל | ~ $1 כל | הכדאיות החל מ 50-75% |
| הצורך בדיור מחסום | כן | לא | עוד מפחית עלות & מפשט ניטור סדרתי של גידולים |
| הגידול נראה ישירות | לא | כן | איור 3A |
| הזמן לחרט הראשון (RENCA) | 2 שבועות | 2-4 ימים | שופט 14, 15 |
| נקודת השיא של הצמיחה (RENCA) | 3-6 שבועות | 10 ימים | שופט 14, 15 |
| גרורה (RENCA) נצפתה | כן | כן אצל אפרוחים | איור 3D |
| מעברים סידוריים | כן | כן | 16-18 שופט |
| מעבר לעכברים (RENCA) | כן | כן | הו, ג'יי, ואח ' ביקורת (2019) |
| לשמור על טרוגניות הגידול | כן | כן | הו, ג'יי, ואח ' ביקורת (2019) |
טבלה 1: יתרונות ומגבלות של העכבר ומודלים קאם. הטבלה הזאת משווה בין שני המודלים ליתרונות ולמגבלות שלהם במונחים של זמן, עלות, עבודה וביולוגיה. מודל CAM יש יתרונות ביעילות, אבל יש לו גם מגבלות ייחודיות משלה בשל המבנה השונים בין ציפורים ויונקים. לכן, חשוב לאשר כי המודל יכול לשמור על ביולוגיה של שתלי xenografts