הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

סינתזה של Aptamer-PEI-g-PEG שונה חלקיקי זהב טעון עם וקסורוביצ'ין עבור משלוח תרופות ממוקדות

5.8K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/61139

⸱

23 ביוני 2020

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1College of Life Sciences, Xinyang Normal University, 2Department of Imaging & Pathology, University of Leuven and Oral & Maxillofacial Surgery, University Hospitals Leuven, 3Analysis & Testing Center, Xinyang Normal University

במאמר זה

סיכום

בפרוטוקול זה, דולסורוביצ'ין טעון AS1411-g-PEI-g-PEG חלקיקי זהב שונה מסונתזים באמצעות תגובות אמיד שלושה שלבים. לאחר מכן, דוסורוביצ'ין נטען ונמסר כדי למקד תאים סרטניים לטיפול בסרטן.

תקציר

בשל עמידות לתרופות ורעילות בתאים בריאים, השימוש ב- doxorubicin (DOX) הוגבל בטיפול קליני בסרטן. פרוטוקול זה מתאר את העיצוב של פולי (אתילנימין) מושתל עם פוליאתילן גליקול (PEI-g-PEG) חלקיקי זהב פונקציונליים (AuNPs) עם aptamer טעון (AS1411) ו DOX באמצעות תגובות אמיד. AS1411 מחובר במיוחד עם קולטני גרעין ממוקדים על תאים סרטניים, כך DOX מטרות תאים סרטניים במקום תאים בריאים. ראשית, PEG הוא carboxylated, לאחר מכן מושתל PEI מסועף כדי לקבל COPolymer PEI-g-PEG, אשר אושרה על ידי ניתוח 1H NMR. לאחר מכן, חלקיקי זהב מצופים קופולימר PEI-g-PEG (PEI-g-PEG@AuNPs) מסונתזים, ו- DOX ו- AS1411 נקשרים בקובאליות ל- AuNPs בהדרגה באמצעות תגובות עמידות. הקוטר של AS1411-g-DOX-g-PEI-g-g-PEG@AuNPs מוכן הוא ~ 39.9 ננומטר, עם פוטנציאל זטה של -29.3 mV, המציין כי חלקיקים יציבים במים ובינוני תאים. מבחני ציטוטוקסיות התא מראים כי AuNPs DOX שתוכנן לאחרונה מסוגלים להרוג תאים סרטניים (A549). סינתזה זו מדגימה את הסידור העדין של קופולימרים PEI-g-PEG, aptamers, ו DOX על AuNPs מושגים על ידי תגובות אמיד רציפות. כזה aptamer-PEI-g-PEG פונקציונלי AuNPs לספק פלטפורמה מבטיחה עבור אספקת תרופות ממוקדות בטיפול בסרטן.

מבוא

בהיותו הבעיה העיקרית בבריאות הציבור ברחבי העולם, סרטן מאופיין באופן נרחב כבעל שיעור ריפוי נמוך, שיעור הישנות גבוה ושיעור תמותה גבוה1,2. השיטות הקונבנציונליות הנוכחיות נגד סרטן כוללות ניתוח, כימותרפיה והקרנות3, ביניהן כימותרפיה היא הטיפול העיקרי לחולי סרטן במרפאה4. תרופות קליניות נגד סרטן בשימוש כוללות בעיקר paclitaxel (PTX)5 ו דוקסורוביצין (DOX)6,7. DOX, תרופה אנטי-ניאופלסטית, יושמה באופן נרחב בכימותרפיה קלינית, בשל היתרונות של ציטוטוקסיות סרטן ועיכוב התפשטות תאים סרטן8,9. עם זאת, DOX גורם לב-חזה10,11, ואת זמן מחצית החיים הקצר של DOX מגביל את היישום שלה במרפאה12. לכן, נשאי תרופות מתכלים נדרשים לטעון DOX ושחרור subequently באופן מבוקר לאזור ממוקד.

חלקיקים נמצאים בשימוש נרחב במערכות משלוח תרופות ממוקדות ויש להם מספר יתרונות בטיפול בסרטן (כלומר, יחס משטח לנפח גדול, גודל קטן, היכולת לתמצת תרופות שונות, כימיית משטח מתכווננת, וכו ') 13,14,15. בפרט, חלקיקי זהב (AuNPs) היו בשימוש נרחב ביישומים ביולוגיים וביו-רפואיים, כגון טיפול בסרטן פוטותרמי16,17. המאפיינים הייחודיים של AuNPs, כגון סינתזת facile ופונקציונליזציה משטח כללי, יש סיכויים מצוינים בתחום הקליני של טיפול בסרטן18. כמו כן, AuNPs שימשו כדי לזהות אסטרטגיות אספקת תרופות, לאבחן גידולים, להתגבר על ההתנגדות במחקרים רבים19,20.

למרות זאת, AuNPs צריך להיות מותאם עוד יותר כדי להתגבר על עמידות לסמים באמצעות שחרור מקומי גבוה בנגעים הגידול באמצעות חדירה משופרת ושמירה (EPR), כגון תכונות מיקוד ונגישות. תרופות רב-תכליתיות פולימריות הפגינו יתרונות ייחודיים, כגון מסיסות מים משופרת של תרופות הידרופוביות נגד סרטן וזמן זרימת דם ממושך21,22. פולימרים שונים בעלי תאימות ביולוגית שימשו לציפויים של AuNP, כגון פוליאתילן גליקול (PEG), פוליאתילנימין (PEI), חומצה היאלורונית, הפרין וקסנטן גאם. ואז היציבות, כמו גם את המטען, של AuNPs הוא השתפר היטב23. באופן ספציפי, PEI הוא פולימר מסועף מאוד המורכב מיחידות חוזרות רבות של אמינים ראשוניים, משניים ושלישוניים24. PEI יש מסיסות מעולה, צמיגות נמוכה, רמה גבוהה של פונקציונליות, אשר מתאים ציפוי על AuNPs.

מצד שני, תרופות נגד סרטן צריך להיות מועבר לתאי סרטן ישירות עם יעילות טעינה משופרת, ועם רעילות נמוכה יותר לטיפול בגידולים גרורתיים ראשוניים ומתקדמים25. ligands ממוקד יש פוטנציאל גדול עבור תרופות נגד סרטן ממוקד מערכות משלוח26. הסלקטיביות שלה עבור מולקולת היעד מחייב מעניק תרופה נגד סרטן מיקוד ספציפיות ומגביר את העשרת התרופה ברקמות חולות27. ליגנדים נוספים כוללים נוגדנים, פוליפפטידים ומולקולות קטנות. בהשוואה ליגנדים אחרים, חומצת גרעין aptamers יכול להיות מסונתז במבחנה והם קלים לשינוי. AS1411 הוא אוליגונוקלאוטיד phosphodiester 26 bp ללא שינוי המהווה מבנה G-tetramer דימרי יציב לאגד במיוחד קולטן חלבון גרעיני היעד overexpressed על תאים סרטניים28,29,30. AS1411 מעכב את התפשטותם של תאים סרטניים רבים אך אינו משפיע על הצמיחה של תאים בריאים31,32. כתוצאה מכך, AS1411 שימש כדי לפברק מערכת אספקת סמים ממוקדת אידיאלית.

במחקר זה, קופולימר PEI-g-PEG מסונתז באמצעות תגובת אמיד, אז PEI-g-PEG חלקיקי זהב מצופים (PEI-g-PEG@AuNPs) הם מפוברק. בנוסף, DOX ו- AS1411 מקושרים ברצף PEG@AuNPs PEI-g-g המוכן, כפי שמוצג באיור 1. פרוטוקול מפורט זה נועד לסייע לחוקרים להימנע רבים מהמלכודות הנפוצות הקשורות לייצור PEG@AUNPS PEI-g-PEG@AuNPs חדש טעון עם DOX ו- AS1411.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

התראה: הקפד להתייעץ עם כל גיליונות הנתונים הרלוונטיים לבטיחות החומרים (MSDS) לפני השימוש בכל הכימיקלים. כמה כימיקלים המשמשים להכנת copolymer וננו חלקיקים רעילים מאוד. חלקיקים יש גם סכנות פוטנציאליות. הקפד להשתמש בכל נוהלי הבטיחות המתאימים וציוד מגן אישי, כולל כפפות, חלוק מעבדה, ברדסים, מכנסיים באורך מלא ונעליים קרובות.

1. סינתזה של פוליאתילן גליקול כפול קרבוקסיל (CT-PEG)33

  1. הוסף 1.46 גרם (14.6 mmol) של אנהידריד סוציני (SA) ו 209 מ"ג (1.71 mmol) של 4 דימתילמינופירידין (DMAP) לבקבוקון תחתון עגול 100 מ"ל.
  2. הוסף 15 מ"ל של tetrahydrofuran נטול מים (THF) לבקבוק המשמש בשלב 1.1 ולהתאים פקק זכוכית. שמור על הבקבוק ב 0 מעלות צלזיוס במשך 30 דקות.
  3. יש להוסיף 4.28 גרם (4.28 מ"ל) של פוליאתילן גליקול (PEG) ו-1.8 מ"ל (12.8 מ"ל) של טריאתילאמין (TEA) לבקבוקון חדש.
  4. הוסף 15 מ"ל של THF נטול מים לבקבוק המשמש בשלב 1.3 ולהתאים פקק זכוכית. להעביר את הפתרון לאט בקבוק בשימוש בשלב 1.2, באמצעות מזרק תחת אווירת חנקן.
  5. מערבבים את הפתרון ב 0 מעלות צלזיוס במשך 2 שעות, ולאחר מכן להמשיך את התגובה בטמפרטורת החדר (RT) לילה.
  6. באמצעות מאייד סיבובי (40 °C (40 °C, 0.1 MPa), לרכז את פתרון התגובה ולהסיר את ממס THF.
  7. ב RT, להמיס את פתרון התגובה משלב 1.6 ב 15 מ"ל של 1.325 גרם / מ"ל dichloromethane (DCM), ולאחר מכן להוסיף 15 מ"ל של אתר דיתיל קר (Et2O) כדי לקבל את מוצר המשקעים (פוליאתילן גליקול diacid). הסר את הממס באמצעות נייר סינון.
    הערה: ניתן לחזור על שלב המשקעים פי 3.
  8. יבש את המשקעים תחת ואקום ב RT במשך 48 שעות.

2. סינתזה של קופולימר PEI-g-PEG

  1. הוסיפו 305.47 מ"ג CT-PEG משלב 1.8 ו-5 מ"ל של דימתיל סולפוקסיד (DMSO) לבקבוק ומערבבים ב-RT כדי להבטיח שה-CT-PEG מומס במלואו ב-DMSO.
  2. להמיס 49.46 מ"ג של 1-(3-דימתילאמינופרופיל)-3-אתילקרבודימיד הידרוכלוריד (EDC) ב 5 מ"ל של DMSO, ולאחר מכן להוסיף את הפתרון לבקבוק בשימוש בשלב 2.1 ומערבבים במשך 30 דקות ב RT.
  3. להמיס 29.69 מ"ג של N-hydroxysuccinimide (NHS) ב 5 מ"ל של DMSO ולהוסיף את הפתרון בקבוק בשימוש בשלב 2.1. ממשיכים לבחוש ב-RT במשך 3 שעות.
  4. להמיס 28.6 μL של פוליאתילנימין (PEI) ב 10 מ"ל של DMSO ולהוסיף את הפתרון dropwise לבקבוק בשימוש בשלב 2.1. מערבבים במשך 3 ימים, לפחות.
  5. העבר את הפתרון המגיב משלב 2.4 לשקית דיאליזה (1,000 ניתוק משקל מולקולרי [MWCO]). מניחים את שקית הדיאליזה לתוך 1 L עם 500 מל של מים אולטרה סגולים כמו dialysate. לשנות את המים אולטרה דק כל 12 שעות במשך 3 ימים.
  6. להעביר את הפתרון בשלב 2.5 לשקית דיאליזה אחרת (10,000 MWCO). מניחים את שקית הדיאליזה לתוך 1 L עם 500 מל של מים אולטרה סגולים כמו dialysate. לשנות את המים אולטרה דק כל 12 שעות במשך 3 ימים.
  7. לרכז את הפתרון משלב 2.6 באמצעות מאייד סיבובי (40 °C (40 °C, 0.1 MPa) ולהקפיא לייבש את המדגם כדי להשיג את אבקת PEI-g-PEG.

3. סינתזה של PEI-g-PEG@AuNPs

  1. ממיסים 5 מ"ג של PEI-g-PEG מוכן (שלב 2.7) ב-5 מ"ל של מים אולטרה-דקים בבקבוקון חדש ומתאימים לעצירת זכוכית.
  2. הוסף 100 מ"ל של 0.3 mM HAuCl4 פתרון בקבוק ומערבבים את הפתרון במשך 3 שעות ב RT.
    הערה: צבע הפתרון צריך להשתנות מיד מצהוב לכתום.
  3. הוסף 1 מ"ל של 1 מ"ג / מ"ל NaBH4 פתרון בקבוק ומערבבים את הפתרון במשך 3 שעות ב RT.
    הערה: פתרון התגובה צריך להפוך באופן מיידי בורגונדי.
  4. חייג את מוצר התגובה באמצעות שקית דיאליזה (1,000 MWCO) במשך 3 ימים כמתואר בשלב 2.5 כדי להשיג את הפתרון PEI-g-PEG@AuNPs.

4. סינתזה של DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs

  1. הוסף 1 מ"ל של 2.2 מ"ג / מ"ל DOX פתרון ו 20 מ"ל של PEI-g-PEG@AuNPs פתרון בקבוק חדש ולהתאים עם פקק זכוכית.
  2. להמיס 0.727 מ"ג של EDC ב 1 מ"ל של מים אולטרה מתוקים ולהוסיף את פתרון EDC לבקבוק בשימוש בשלב 4.1.
  3. להמיס 0.437 מ"ג של NHS ב 1 מ"ל של מים אולטרה סגולים. מוסיפים את פתרון NHS לבקבוק ומערבבים ב- RT במשך שעה.
  4. חייג את מוצר התגובה באמצעות שקית דיאליזה (1,000 MWCO) במשך 3 ימים כמתואר בשלב 2.5 כדי להשיג את הפתרון DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs.

5. סינתזה של AS1411-g-DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs

  1. הוסף 20 מ"ל של פתרון DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs ו- 4OD של AS1411 (OD = צפיפות אופטית; 1OD ≈ 33 מיקרוגרם) לבקבוקון חדש.
  2. להמיס 28.76 מ"ג של EDC ב 1 מ"ל של מים אולטרה מתוקים ולהוסיף את פתרון EDC לבקבוק בשימוש בשלב 5.1.
  3. להמיס 17.27 מ"ג של NHS ב 1 מ"ל של מים אולטרה סגולים. הוסף את פתרון NHS לבקבוק המשמש בשלב 5.1 ומערבבים את התגובה במשך שעה אחת ב- RT.
  4. חייג את מוצר התגובה באמצעות שקית דיאליזה (1,000 MWCO) במשך 3 ימים כמתואר בשלב 2.5 כדי להשיג AS1411-g-DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs.

6. אפיון לדוגמה

  1. להמיס את פולימר CT-PEG (שלב 1.8) ו PEI-g-PEG copolymer (שלב 2.7) בכלורופורם-d בצינורות תהודה מגנטית גרעינית (NMR), בהתאמה. לנתח את הדגימות באמצעות ספקטרומטר NMR 600 MHz מצויד מגנט מוליך-על 14.09 T ו 5.0 מ"מ 600 MHz פס רחב Z-שיפוע בדיקה ברזולוציה גבוהה כדי לאשר את המבנה הכימי34.
  2. פזרו את ה-AUNPs, DOX ו-AS1411 והכינו את PEI-g-PEG@AuNPs (שלב 3.4), DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs (שלב 4.4) ו-AS1411-G-DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs (שלב 5.4), בהתאמה במים אולטרה-דקים. לאחר מכן, העברה לקובטים והקלט ספקטרום אולטרה סגול גלוי (UV-vis) באמצעות ספקטרופוטומטר UV-vis.
  3. חבר דבק דו-צדדי (~ 2 מ"מ x 2 מ"מ) לנייר אלומיניום, וטבל את הפתרון לדוגמה (PEI-g-PEG@AuNPs, DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs ו- AS1411-g-DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs) בקלטת כולה באופן אחיד. לנתח את הדגימות באמצעות מנתח ספקטרוסקופיה פוטואלקטרון רנטגן.
  4. פזרו פתרונות PEI-g-PEG@AuNPs, DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs ופתרונות PEG@AUNPS AS1411-G-DOX-g-PEI-g-g,, בהתאמה במים אולטרה-דקים. לאחר מכן, העבר ל- cuvettes והערך את התפלגות הגודל באמצעות פיזור אור דינמי.
  5. פזרו פתרונות PEI-g-PEG@AuNPs, DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs ופתרונות PEG@AUNPS AS1411-g-DOX-G-PEI-g-g במים אולטרה-דקים (טיפה אחת של דגימה לכל 5 מ"ל מים אולטרה-דקים עבור כל דגימה). סוניקאט ל-2 שעות. טובלים את רשת הנחושת בפתרונות לדוגמה ומתייבשים תחת מנורת אינפרא אדום. לאפיין את המורפולוגיה באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים שידור.
  6. הזרק 1 מ"ג של AS1411-g-DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs לתוך 20 kDa MWCO קלטת דיאליזה, ולאחר מכן למקם 80 מ"ל של מלוחים מאגר פוספט (PBS) עם 5% אלבומין סרום בקר (BSA). מערבבים ב 37 מעלות צלזיוס.
  7. בנקודות הזמן שנקבעו מראש, לאסוף 100 μL aliquots ולהחליף עם PBS טרי. השתמש ספקטרופוטומטר UV-vis כדי למדוד את עוצמת הפלואורסצנטיות DOX של aliquots.

7. CCK-8 מבחנים של חלקיקי AS1411-g-DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs

  1. לגדל תאי A549 במדיום הנשר שונה של Dulbecco (DMEM) בתוספת 10% סרום שור עוברי, 100 U / mL פניצילין, ו 100 מיקרוגרם / מ"ל סטרפטומיצין תחת אווירה לחה של 95% אוויר ו 5% CO2 ב 37 °C (67 °F). החלף את מדיום התרבות כל יומיים. השתמש בתאים במעבר 5 עבור התפשטות התא ו cytotoxicity מבחנים כדי להעריך כמותית את cytotoxicity של מוכן AS1411-g-DOX-g-PEI-g-PEG@AuNPs חלקיקים.
  2. הוסף 100 μL של פתרון חלקיקים לתוך כל באר מכילים 1 מ"ל של מדיום התא. לאחר culturing עבור 24 שעות ו 48 שעות, להסיר את המדיה תרבות מצלחות תרבות התא, ולאחר מכן להוסיף 300 μL של מדיה תרבות טריים ו 30 μL של ערכת ספירת תאים-8 (CCK-8) פתרונות ערכת מיד לכל באר. דגירה עבור 4 שעות באינקובטור CO2 ב 37 °C (69 °F).
  3. העבר 200 μL של פתרונות תגובה משלב 7.2 לתוך צלחת באר 96. קרא את הצפיפות האופטית (OD) של כל באר ב 570 ננומטר עם קורא microplate.
  4. שימו לב למורפולוגיה של התאים במהירות של 24 שעות ו-48 שעות מתחת למיקרוסקופ.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

1 ספקטרוסקופיית H NMR שימשה לאישור הסינתזה המוצלחת של פולימר CT-PEG וקופולימרים PEI-g-PEG(איור 2). איור 2a מראה כי אות פרוטון מתילן ב- δ = 3.61 עמודים לדקה ואות פרוטון קרבוקסיל ב- δ = 2.57 עמודים לדקה מאשרים את הסינתזה המוצלחת של פולימרים CT-PEG. איור 2b מראה כי אות פרוטון המתילן של PEG ב- δ = 2.6 עמודים לדקה ואות פרוטון של PEI ב- δ = 1.66 עמודים לדקה מאשרים את הסינתזה של קופולימרים PEI...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

ספקטרום NMR 1H (איור 2) מאשר את הסינתזה המוצלחת של קופולימר CT-PEG וקופולימר PEI-g-PEG. המשקולות המולקולריות של PEG ו-PEI היו 1,000 ו-1,200, בהתאמה. בנוסף, המערכת הקטליטית EDC / NHS שימשה לסנתז PEI-g-PEG קופולימר באמצעות תגובות אמיד. יש לציין כי אם המשקלים המולקולריים של PEG ו- PEI השתנו לסנתז PEI-g-PEG copolymer, אז זמן התגובה ואת המערכת הקטליטית צריך להיות הערכה מחדש. כמו כן, מצב התגובה עבור ציפוי COPolymer PEI-G-PEG על AuNPs צריך להיות מותאם עוד יותר, בעיקר בגלל משקל המולקולה ו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

מחקר זה מומן על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (31700840); פרויקט המחקר המדעי המרכזי של מחוז הנאן (18B430013, 18A150049). מחקר זה נתמך על ידי תוכנית המלומדים של נאנחו לחוקרים צעירים של XYNU. המחברים רוצים להודות לסטודנט לתואר ראשון זבו קו מהמכללה למדעי החיים ב- XYNU על יצירותיו המועילות. המחברים רוצים להכיר במרכז ניתוח ובדיקות של XYNU לשימוש בציוד שלהם.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
4-DimethylaminopyridineMacklinD807273
A549 תאATCC CCL-185TM
AS1411BBI Life Sciences Corporation5'-d (TTTGGTGGTGTGGTTGTGTGGTGGTGGTGG) FL-AS1411 (פלואורופור מסומן AS1411)
נטול מים טטרהידרופוראן (THF)SinoPharm Chemical Reagent Co., Ltd
ערכת ספירת תאים -8 ( CCK-8)סיגמא אולדריץ'96992-500TESTS-F
דיכלורומתאןרפואה סינית מסורתית80047318
אתר דיאתיל (Et2O)SinoPharm Chemical Reagent Co., Ltd
דימתיל סולפוקסידמקליןD806645
מדיום הנשר המותאם של דולבקו (DMEM)סיגמא אולדריץ
'דוקסורוביצין הידרוכלורידRhawnR017518
אתר מוחלטרפואה סינית מסורתית80059618
העברת פליטת שדה מיקרוסקופאלקטרונים FEI CompanyTecnai G2 F 20
Gold(III) כלוריד טריהידראטRhawnR016035
מכשיר לייזר בגודל חלקיקיםMalvern Instruments LtdZetasizerNanoZS/ Masterszer3000E
Microplate Readerמכשירים מולקולרייםSpectraMax 190
N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimide hydrochlorideMacklinN808856
N-HydroxysuccinimideMacklinH6231
NMR תוכנהדלתא 5.2.1
ספקטרומטר תהודה מגנטית גרעיניתJEOLJNM-ECZ600R/S3
מקור 8.5OriginLab
פניציליןסיגמא אולדריץ'V900929-100 מ"ל
מי מלח חוצץ פוספטסיגמא אולדריץ'P4417-100TAB
פולי (אתילן גליקול)סיגמא אולדריץ'81188BioUltra, תמיסת Mn ~ 1000
פולי (אתילנימין) ממוצעתסיגמא אולדריץ'482595ממוצע Mn ~ 1200, 50 wt.% ב-H2O
נתרן בורוהידריד, אבקהAcrosC18930
StreptomycinSigma Aldrich85886-10ML
אנהידריד סוקסינירפואה סינית מסורתית30171826
Tetrahydrofuranרפואה סינית מסורתית40058161
Triethylamineרפואה סינית מסורתית80134318
ספקטרומטר UV/VIS/NIRLambda950Lambda950
ספקטרומטר פוטו-אלקטרונים רנטגןThermo  פישר  מדעK-ALPHA 0.5EV

מקורות

  1. Abad, J. M., Bravo, I., Pariente, F., Lorenzo, E. Multi-tasking base ligand: a new concept of AuNPs synthesis. Analytical and Bioanalytical Chemistry. 408 (9), 2329-2338 (2016).
  2. Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. Cancer statistics, 2019. CA-A Cancer Journal for Clinicians. 69 (1), 7-34 (2019).
  3. Jang, B., Kwon, H., Katila, P., Lee, S. J., Lee, H. Dual delivery of biological therapeutics for multimodal and synergistic cancer therapies. Advanced Drug Delivery Reviews. 98, 113-133 (2016).
  4. Gansler, T., et al. Sixty years of CA: a cancer journal for clinicians. CA-A Cancer Journal for Clinicians. 60 (6), 345-350 (2010).
  5. Li, J., et al. Molecular Mechanism for Selective Cytotoxicity towards Cancer Cells of Diselenide-Containing Paclitaxel Nanoparticles. International Journal of Biological Sciences. 15 (8), 1755-1770 (2019).
  6. Zhao, D., et al. Precise ratiometric loading of PTX and DOX based on redox-sensitive mixed micelles for cancer therapy. Colloids Surfaces B: Biointerfaces. 155, 51-60 (2017).
  7. Blum, R. H., Carter, S. K. Adriamycin. A new anticancer drug with significant clinical activity. Annals of Internal Medicine. 80 (2), 249-259 (1974).
  8. de Lima, R. D. N., et al. Low-level laser therapy alleviates the deleterious effect of doxorubicin on rat adipose tissue-derived mesenchymal stem cells. Journal of Photochemistry Photobiology B. 196, 111512(2019).
  9. Markowska, A., Kaysiewicz, J., Markowska, J., Huczynski, A. Doxycycline, salinomycin, monensin and ivermectin repositioned as cancer drugs. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. 29 (13), 1549-1554 (2019).
  10. Songbo, M., et al. Oxidative stress injury in doxorubicin-induced cardiotoxicity. Toxicology Letters. 307, 41-48 (2019).
  11. Ewer, M. S., Ewer, S. M. Cardiotoxicity of anticancer treatments. Nature Reviews Cardiology. 12 (9), 547-558 (2015).
  12. Gabizon, A., Shmeeda, H., Barenholz, Y. Pharmacokinetics of pegylated liposomal Doxorubicin: review of animal and human studies. Clinical Pharmacokinetics. 42 (5), 419-436 (2003).
  13. Xu, X., Ho, W., Zhang, X., Bertrand, N., Farokhzad, O. Cancer nanomedicine: from targeted delivery to combination therapy. Trends in Molecular Medicine. 21 (4), 223-232 (2015).
  14. Feng, S., Nie, L., Zou, P., Suo, J. Effects of drug and polymer molecular weight on drug release from PLGA-mPEG microspheres. Journal of Applied Polymer Science. 132 (6), 41431(2015).
  15. Chen, D., et al. Injectable Temperature-sensitive Hydrogel with VEGF Loaded Microspheres for Vascularization and Bone Regeneration of Femoral Head Necrosis. Materials Letters. 229, 138-141 (2018).
  16. Abadeer, N. S., Murphy, C. J. Recent Progress in Cancer Thermal Therapy Using Gold Nanoparticles. The Journal of Physical Chemistry C. 120 (9), 4691-4716 (2016).
  17. Riley, R. S., Day, E. S. Gold nanoparticle-mediated photothermal therapy: applications and opportunities for multimodal cancer treatment. WIREs Nanomedicine and Nanobiotechnology. 9 (4), 1449(2017).
  18. Fratoddi, I., et al. Highly Hydrophilic Gold Nanoparticles as Carrier for Anticancer Copper(I) Complexes: Loading and Release Studies for Biomedical Applications. Nanomaterials (Basel). 9 (5), 772(2019).
  19. Lee, S. M., et al. Drug-loaded gold plasmonic nanoparticles for treatment of multidrug resistance in cancer. Biomaterials. 35 (7), 2272-2282 (2014).
  20. Dreaden, E. C., Alkilany, A. M., Huang, X., Murphy, C. J., El-Sayed, M. A. The golden age: gold nanoparticles for biomedicine. Chemical Society Reviews. 41 (7), 2740-2779 (2012).
  21. Wei, T., et al. Anticancer drug nanomicelles formed by self-assembling amphiphilic dendrimer to combat cancer drug resistance. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (10), 2978-2983 (2015).
  22. Galluzzi, L., Buque, A., Kepp, O., Zitvogel, L., Kroemer, G. Immunological Effects of Conventional Chemotherapy and Targeted Anticancer Agents. Cancer Cell. 28 (6), 690-714 (2015).
  23. Muddineti, O. S., Ghosh, B., Biswas, S. Current trends in using polymer coated gold nanoparticles for cancer therapy. International Journal of Pharmaceutics. 484 (1-2), 252-267 (2015).
  24. Hu, W., et al. Methyl Orange removal by a novel PEI-AuNPs-hemin nanocomposite. Journal of Environmental Sciences. 53, 278-283 (2017).
  25. Gu, F. X., et al. Targeted nanoparticles for cancer therapy. Nano Today. 2 (3), 14-21 (2007).
  26. Srinivasarao, M., Galliford, C. V., Low, P. S. Principles in the design of ligand-targeted cancer therapeutics and imaging agents. Nature Reviews Drug Discovery. 14 (3), 203-219 (2015).
  27. Liu, Z., Shi, Y., Chen, Z., Duan, L., Wang, X. Current progress towards the use of aptamers in targeted cancer therapy. Chinese Science Bulletin (Chinese Version). 59 (14), 1267(2014).
  28. Ghosh, P., Han, G., De, M., Kim, C. K., Rotello, V. M. Gold nanoparticles in delivery applications. Advanced Drug Delivery Reviews. 60 (11), 1307-1315 (2008).
  29. Vandghanooni, S., Eskandani, M., Barar, J., Omidi, Y. Antisense LNA-loaded nanoparticles of star-shaped glucose-core PCL-PEG copolymer for enhanced inhibition of oncomiR-214 and nucleolin-mediated therapy of cisplatin-resistant ovarian cancer cells. International Journal of Pharmaceutics. 573, 118729(2020).
  30. Andghanooni, S., Eskandani, M., Barar, J., Omidi, Y. AS1411 aptamer-decorated cisplatin-loaded poly(lactic-co-glycolic acid) nanoparticles for targeted therapy of miR-21-inhibited ovarian cancer cells. Nanomedicine. 13 (21), 2729-2758 (2018).
  31. Palmieri, D., et al. Human anti-nucleolin recombinant immunoagent for cancer therapy. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (30), 9418-9423 (2015).
  32. Pichiorri, F., et al. In vivo NCL targeting affects breast cancer aggressiveness through miRNA regulation. Journal of Experimental Medicine. 210 (5), 951-968 (2013).
  33. Hou, S., McCauley, L. K., Ma, P. X. Synthesis and erosion properties of PEG-containing polyanhydrides. Macromolecular Bioscience. 7 (5), 620-628 (2007).
  34. Nie, L., et al. Injectable Vaginal Hydrogels as a Multi-Drug Carrier for Contraception. Applied Sciences. 9 (8), 1638(2019).
  35. Zou, P., Suo, J., Nie, L., Feng, S. Temperature-responsive biodegradable star-shaped block copolymers for vaginal gels. Journal of Materials Chemistry. 22 (13), 6316-6326 (2012).
  36. Etrych, T., Šubr, V., Laga, R., Říhová, B., Ulbrich, K. Polymer conjugates of doxorubicin bound through an amide and hydrazone bond: Impact of the carrier structure onto synergistic action in the treatment of solid tumours. European Journal of Pharmaceutical Sciences. 58, 1-12 (2014).
  37. Safari, F., Tamaddon, A. M., Zarghami, N., Abolmali, S., Akbarzadeh, A. Polyelectrolyte complexes of hTERT siRNA and polyethyleneimine: Effect of degree of PEG grafting on biological and cellular activity. Artificial Cells, Nanomedicine, and Biotechnology. 44 (6), 1561-1568 (2016).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

DoxorubicinPEI g PEGAS1411NMR
סינתזה של Aptamer-PEI-g-PEG שונה חלקיקי זהב טעון עם וקסורוביצ'ין עבור משלוח תרופות ממוקדות
צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.