הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

חיזוי קטיעה באמצעות תאי אב מונונוקלאואריים במחזור מקומי בחולים שטופלו באנגיופלסטיקה עם איסכמיה קריטית של הגפיים

3K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/61503

⸱

22 בספטמבר 2020

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Experimental Metabolism and Clinical Research Laboratory, Clinical Research Department, Division of Biomedical Research, Centro Médico Nacional 20 de Noviembre, ISSSTE, 2Vascular Surgery and Angiology Department, Centro Médico Nacional 20 de Noviembre, ISSSTE, 3Regenerative Medicine and Tissue Engineering Laboratory; Coordination of Research, Centro Médico Nacional 20 de Noviembre, ISSSTE

במאמר זה

סיכום

קטיעה בגפיים התחתונות עלולה להתרחש גם לאחר אנגיופלסטיקה של כלי דם חסומים באיסכמיה של גפיים קריטיות (CLI). תאי אב מונונוקולריים (MPCs) משקפים תיקון כלי דם. הפרוטוקול הנוכחי מתאר את הכימות של MPCs מהמחזור קרוב אנגיופלסטיקה, ואת הקשר שלה עם תפקוד אנדותל וחיזוי של קטיעה בגפיים התחתונות.

תקציר

איסכמיה קריטית של הגפיים (CLI) מייצגת שלב מתקדם של מחלת העורקים ההיקפית. אנגיופלסטיקה משפרת את זרימת הדם לגפה התחתונה; עם זאת, חלק מהחולים להתקדם באופן בלתי הפיך לקטיעה בגפיים. היקף הנזק לכלי הדם ואת המנגנונים של תיקון כלי הדם הם גורמים המשפיעים על התוצאה שלאחר אנגיופלסטיקה. תאי אב מונונוקולריים (MPCs) מגיבים לנזק כלי דם ותיקון, עם היכולת לשקף מחלות כלי דם. הפרוטוקול הנוכחי מתאר כימות של MPCs המתקבלים ממחזור הדם מכלי קרוב לאתר אנגיופלסטיקה, כמו גם את הקשר שלה עם תפקוד אנדותל ואת יכולת החיזוי שלה לקטיעה גפיים ב -30 הימים הבאים לאחר אנגיופלסטיקה בחולים עם CLI.

מבוא

מחלת עורקים היקפית (PAD) מאופיינת בחסימה כלי דם כרונית ומתקדמת עם הגבלת אספקת הדם1. בקנה מידה עולמי, PAD של הגפיים התחתונות משפיע על כ -10% מהאוכלוסייה המבוגרת, בעוד עד 7% מהמקרים האלה מוגשים לקטיעה גפיים2,3.

איסכמיה גפיים קריטיות (CLI) מייצגת את המצגת החמורה ביותר של PAD1. חולים בדרך כלל חווים כאב במנוחה, כיבים, או נמק המיוחס לעורקים occluded; בעוד פרוגנוזה קלינית היא שלילית מסומן על ידי סיכון של 30% של קטיעה ותמותה במהלך 1 שנה3,4,5.

אנגיופלסטיקה היא הליך אנדווסקולרי זעיר פולשני שיכול להחזיר את זרימת הדם לגפה התחתונה בחולים עם CLI; עם זאת, חלק מהחולים בהכרח דורשים קטיעה גדולה של הגפיים, גם לאחר טיפול אנגיופלסטיקה1,5. זיהוי מוקדם של תוצאות שליליות לאחר אנגיופלסטיקה הוא בעל ערך רב למדי, בשל האפשרות של אכיפה טיפולית.

גורמי סיכון מסורתיים עשויים לספק יכולת חיזוי מוגבלת לקטיעה משמעותית של הגפיים בחולים עם CLI העוברים אנגיופלסטיקה6. סמנים ביולוגיים מונחי פתופיזיולוגיה מייצגים שיטות חדשניות עם יישומים קליניים פוטנציאליים, אשר עשוי לגרום שימושי במיוחד במחלות הקשורות לפציעה בכלי הדם7. כיום, ההשתתפות של אוכלוסיות הסלולר בעלות תכונות תיקון אנדותל, באתר של לוח טרשת עורקים, הוכרה יותרויותר 8,9.

תאי אב מונונוקולריים (MPCs) נגזרים ממח העצם ומאפיינים מבניים ותפקודיים משלו של תאי גזע עם יכולות רגנרטיביות של כלי הדם. בשל היכולת של MPC להתרבות, לנדוד ולהראות דבקות בכלי הדם; תאים אלה הפכו מועמדים טובים כדי לשקף תיקון אנדותל בתגובה איסכמיה10,11,12. בנוסף, עניין מתמשך במנגנונים שבבסיס פגיעה בכלי הדם הניע לחקור את התפקיד הפרוגנוסטי של סמנים ביולוגיים מקומיים המתרחשים, שכן הם נחשבים לשקף נזק לכלי הדם ולתקן7,13,14.

מטרת המחקר הנוכחי היא לתאר כיצד לקבוע את כמות חברי הפרלמנט המסתובבים קרוב לחסימת כלי הדם בחולים עם CLI שעברו אנגיופלסטיקה; וכיצד להעריך את הקשר בין חברי פרלמנט עם אינדיקטורים של תפקוד לקוי של אנדותל וכריתת איברים.

בהשוואה לפרוגנוזה המבוססת על מחלות רקע ותכונות כלי דם מהותיות, כמות חברי הפרלמנט המקומיים מראה יכולת ספציפית לחזות תוצאה קלינית לגבי תפקוד לקוי של אנדותל וכריתת גפיים. באופן עקבי, מספר מחקרים תיארו את התפקיד הפרוגנוסטי של סמנים ביולוגיים דומים במהלך הערכת חולים עם PAD15,16.

בהתבסס על תוצאותקודמות 7, השיטה המתוארת כאן עשויה להיות שימושית לזיהוי מוקדם של האוכלוסייה בסיכון לתוצאות כלי דם שליליות במספר הגדרות קליניות, כגון גפיים תחתונות ואיסכמיה כלילית, שבץ מוחי, דלקת כלי דם, פקקת ורידית ואחרים הכרוכים בפגיעה בכלי הדם ותיקון.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

ועדת האתיקה של המחקר המוסדי של Centro Médico Nacional "20 de Noviembre" ISSSTE אישרה פרוטוקול פוטנציאלי זה, כל המטופלים הרשומים סיפקו הסכמה מדעת בכתב.

1. הערכת בלוק כלי הדם של הגפה התחתונה, דגימת דם ואנגיופלסטיקה בלון

הערה: מדגם המחקר המשמש לניסוי זה כלל 20 חולי סוכרת, בני 68 ו -10 מתוך 20 היו גברים. מחצית מהמדגם היו מעשנים ורוב התחלואה המשותפת השכיחה הייתה סוכרת מסוג 2, יתר לחץ דם עורקי מערכתי ו/או דיסליפידמיה. המדגם נועד להיות סטנדרטי לגיל, מין ותחלואה משותפת. לא ניתן לשלול הטיה אפשרית עקב השפעה קלינית-דמוגרפית על הקשר בין MPCs לבין CLI.

  1. להעריך את החומרה הקלינית של איסכמיה גפיים על פי סיווג רתרפורד13 (ראה טבלה משלימה 1).
  2. בצע אנגיוגרפיה של הגפיים התחתונות, דגימת דם ואנגיופלסטיקה של בלון.
    1. יש להשתמש בתרופות נוגדות קרישה ומרדים לפני הניתוח.
    2. מניחים מחט 18 G לתוך כלי הדם באתר המפשעה שנבחר.
    3. הנח מבוא וקדם חוט מדריך גמיש. לאחר מכן, המדריך הראשוני משתנה עוד יותר עבור מבוא 6 Fr.
    4. השתמש בהזרקה תקופתית של מדיית ניגודיות או CO2 תחת מדריך פלואורוסקופי לזיהוי מסלול עורקים ואתרים חסומים בכלי הדם (איור 1).
      הערה: השתמש במדיית ניגודיות 40 סמ"ק, מדולל 1:1 ב 0.9% מלוחים, או CO2 ב 10 עד 20 מ"ל לכל ירייה בלחץ של 12 psi.
    5. הצג שני חוטי מדריך ניווט 0.014 Fr ושני חוטי מדריך תמיכה 0.014 Fr לתוך כלי השיט ולקדם אותם עד לאתר החסום.
      הערה: שני חוטי מדריך Fr 0.014 (באורך 260 ס"מ) משמשים לניווט ושני חוטי מדריך Fr 0.014 (באורך 260 ס"מ) משמשים לתמיכה, במהלך הליך יחיד.
    6. הצג 5 Fr ו 3 קטטרים Fr ברצף ולאסוף 10 מ"ל של דם מהאתר הקרוב ביותר לחסימת כלי הדם. לשמור דגימות דם על קרח.
      הערה: גודל קטטרים עשוי להיות 5 Fr ו 3 Fr, והם השתנו במהלך ההליך.
    7. קדם שוב חוט מדריך. לאחר מכן, הציגו קטטר בלון אנגיופלסטיקה, המכיל בלון מתנפח הממוקם בקצה הקטטר. לקדם את קטטר בלון אנגיופלסטיקה ומניחים את הבלון ממש באתר של נגע. בצע את אנגיופלסטיקה על ידי ניפוח הבלון נגד לוח החוסם הממוקם על קיר כלי הדם. לאמת את שיקום זרימת הדם.
      הערה: סטנט עשוי להיות ממוקם באזור החסום כדי לסייע בשמירה על העורק פתוח לאחר ההליך.
    8. הציגו קטטר והתקדמו לאתר הקרוב ביותר לבלוק כלי הדם. לאסוף 10 מ"ל של דם במרווח זמן של 30 דקות לאחר אנגיופלסטיקה. לשמור דגימות דם על קרח.
      הערה: אוסף של דגימות דם לפני ואחרי אנגיופלסטיקה מומלץ להעריך עוד יותר את ההשפעה של אנגיופלסטיקה על מספר MPCs.
    9. הסר את כל החוטים תחת הדרכה פלואורוסקופית.
    10. לספק טיפול לאחר הניתוח נהלים, כולל טיפול נגד קרישה באמצעות enoxaparin ב 1 מ"ג/ק"ג תת עורית כל 12 שעות, אספירין 100 מ"ג, סטטין, משכך כאבים. לדחוס באתר של ניקור כלי דם במהלך 24 שעות.

2. כימות של תאי אב מונונוקאריים במחזור (MPCs) (איור 2)

  1. לצינור חרוט טרי של 15 מ"ל, העבירו 6 מ"ל מהדם שנאסף ודללו 1:1 (v/v) עם PBS.
    הערה: לעבד את הדם בתוך 1 שעה מן האוסף.
  2. היכונו להפרדת הדרגתית בצפיפות, על ידי הוספת 2 מ"ל של מעבר צבע צפיפות בינוני עד 3 מבחנות כל אחת. לאחר מכן, להוסיף 3 aliquots נפח שווה של הדם מדולל לתוך כל מבחנה.
    הערה: אין לחרוג משלושה רבעים מהקיבולת המקסימלית של המבחנה.
  3. צנטריפוגה ב 1,800 x גרם במשך 30 דקות ב 4 מעלות צלזיוס. אסוף את שכבת הממשק הקיימת כטבעת באמצעות פיפטה, והעבר לצינור חדש. הוסף 2 מ"ל של PBS ולסובב ב 1,800 x גרם במשך 6 דקות ב 4 מעלות צלזיוס. שמור את גלולה כמו זה יכיל MPCs.
  4. לשטוף את גלולה המכילה MPCs עם PBS על ידי צנטריפוגה כמתואר בשלב 2.3. השתמש PBS טרי עבור כל לשטוף ולהסתובב ב 1,800 x גרם במשך 2 דקות ב 4 מעלות צלזיוס. חזור על התהליך במשך 6 פעמים.
  5. לאחר הכביסה האחרונה, להשתמש 1 מ"ל של PBS כדי resuspend גלולה התא. לדלל 20 μL של השעיית התא עם 20 μL של 0.4% כחול trypan, 1:1 (v / v). השתמש 10 μL של השעיית תא זה לספירת תאים באמצעות המוציטרומטר ומיקרוסקופ אור.
  6. Aliquot 1 x 106 MPCs ב צינורות cytometry זרימה 5 מ"ל שכותרתו בעבר.
    הערה: הכינו נוגדני בקרה תואמי איסוטיפ מתאימים.
  7. צנטריפוגה הצינורות ב 1,800 x גרם במשך 6 דקות ב 4 מעלות צלזיוס. לשאוף ולהשליך את העל טבעי.
  8. לדלל נוגדן ראשוני ב 100 μL של פתרון דגירה נוגדנים [1x PBS, pH 7.4, EDTA 2 mM, BSA 0.05%] ולהוסיף לצינור. resuspend עבור 10 s ודגרת במשך 20 דקות ב 4 מעלות צלזיוס, בחושך.
    הערה: הריכוזים הסופיים של נוגדנים ראשוניים המשמשים בפרוטוקול הנוכחי היו CD45 1:50, CD34 1:20, KDR 1:50, CD184 1:20, CD133 1:50. פרוטוקול ניתן לעצור בשלב זה על ידי תיקון לימפוציטים ב 4% paraformaldehyde ב PBS ואחסון דגימות עד 24 שעות ב 4 מעלות צלזיוס.
  9. צנטריפוגה ב 1,800 x גרם במשך 2 דקות ב 4 מעלות צלזיוס ולהשליך את supernatant. הוצאה מחדש ב 500 μL של 1x PBS, pH 7.4, EDTA 2 מ"מ.
  10. בצע ניתוח ציטומטריית זרימה.
    1. הגדר את הרקע עם נוגדני בקרה תואמי isotype. לאחר מכן, על העלילה FSC / SSC לבחור התפשטות לימפוציטים, מנסה להוציא פסולת הסלולר, גרנולוציטים שיורית, וחלקיקים אחרים. התפלגות כזו נחשבת ל-100%.
      הערה: לימפוציטים מתפשטים בדרך כלל באזור השמאלי התחתון של העלילה.
    2. השתמש בשער עם אימונופנוטיפ משותף המכיל מספר גבוה של תאים CD45+ ו- CD34+. לאחר מכן, בחר עבור אימונופנוטיפים חיוביים כפולים באמצעות שער שזיהה בעבר CD45+, CD34+, והוספת KDR (VEGFR-2)+, CD133+ או CD184+. זהה תת-אוכלוסיות MPCs לפי סמני פני התא הספציפיים שלהם. דווח כאחוז האירועים המגודרים.
  11. זהה תת-אוכלוסיות ראשיות של קבצי MPC. במחקר הנוכחי האימונופנוטיפים שנותחו היו CD45+CD34+CD133+; CD45+CD34+CD184+ ; CD45+CD34+CD133+CD184+ ; CD45+CD34+KDR+ ; CD45+CD34+KDR+CD133+ ו- CD45+CD34+KDR+CD1847,17.
    הערה: סמני משטח תאים אלה שימשו למחקר: CD45 (לימפוציטים), CD34 (תאי אנדותל ו/או כלי דם), KDR (VEGFR-2) (סמן קרום של תאי אנדותל), CD133 (תאי אב אנדותל) ו- CD184 (תאי גזע hematopoietic ותאי אנדותל).

3. יחס של MPCs עם שינוי של תפקוד אנדותל ומבחן המודינמי (FMD)

  1. קבע תזוזה בתיווך זרימה (FMD), לפני ואחרי אנגיופלסטיקה.
    1. השתמש מתמר ליניארי כלי דם כדי למדוד את קוטר העורק brachial.
    2. מניחים את השרוול של sphygmomanometer מעל אתר המדידה באמה ואת האי ספיקה ב 50 מ"מ ח"ג מעל לחץ הדם הסיסטולי במשך 5 דקות לנפח.
    3. לקבוע שוב את הקוטר של עורק החזה בתוך 60 s הבא. השתמש במשוואה שלהלן כדי להעריך את FMD.
      הערה: לחשב את מידת החלוקה באמצעות המשוואה (%) = (קוטר מרבי לאחר איסכמיה חולפת - קוטר הבסיס) × 100 / קוטר הבסיס.
  2. תאם את מספר קבצי ה- MPC עם ערך FMD הבסיסי והדלתא שלאחר אנגיופלסטיקה של FMD.

4. יכולת פרוגנוסטית של חברי פרלמנט לקטיעה בגפיים

  1. קבעו תורים רפואיים תקופתיים לאחר אנגיופלסטיקה של בלון ופריקה מהמטופל, כדי להעריך את איכות זרימת הדם לגפה התחתונה.
  2. להעריך את החומרה הקלינית של איסכמיה גפיים ב 2 שבועות לאחר אנגיופלסטיקה. להעריך את פתרון כאבי מנוחה, איסכמיה נמוכה יותר, ושימור של רגל תפקודית, על פי סיווג רתרפורד13.
  3. השווה את החומרה הקלינית של איסכמיה גפיים, בבסיס לעומת מעקב. זהה מקרים אלה הדורשים קטיעה גדולה עקב תוצאה שלילית.
  4. לתאם את מספר MPCs עם שיעור החולים הדורשים קטיעה גדולה של הגפה התחתונה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

דגימות דם מעורקים חסומים, באתר שטופלו באנגיופלסטיקה, נאספו מ-20 חולי סוכרת, בני 68 ו-10 מתוך 20 היו גברים. מחצית מאוכלוסיית המדגם היו מעשנים. נגעים בכלי הדם הובקעו בעיקר בשם רתרפורד מחלקה 6; בעוד חולים הראו שכיחות גבוהה יותר של סוכרת מסוג 2 (100%), יתר לחץ דם (70%) ודיסליפידמיה (55%).

מעקב קליני של 30 יום לאחר אנגיופלסטיקה בגפיים התחתונות בוצע. אחוז אוכלוסיות המשנה של MPC בקו הבסיס או בדינמיקה לאחר אנגיופלסטיקה היה בקורלציה (ניתוח ספירמן) עם מידת תפקוד לקוי של אנדותל, כפי שהוערך על ידי FMD; וא...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

איסוף דם באתר המדויק של בלוק כלי הדם עשוי להראות קשיים טכניים; לכן, ביצענו איסוף דם בסמיכות לבלוק כלי הדם. כמו כן, כמות MPCs קרוב ללוח כלי הדם נראה דינמי מאוד ועשויים מקורם וריאציות לפני ואחרי אנגיופלסטיקה. על פי התצפיות שלנו, מומלץ להעריך שינויים בסיסיים- ו -30 דקות לאחר אנגיופלסטיקה במספר MPCs, שכן הם עשויים לשקף מספר תהליכים פתופיזיולוגיים המתרחשים בתוך נזק כלי דם ותיקון.

עיבוד דגימת דם עבור קביעת MPCs מומלץ להתבצע בתוך 3 h הראשון; לכן, תוכנית ארגונית נאותה, ואפילו תרגול סימולציה קודם, ניתן...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

המחברים מודים לתמיכת התוכנית המוסדית E015 על מזהה הפרויקט 356.2015.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
BSARoche10735086001אלבומין סרום בקר (BSA) כחומר חציצה, מייצב, סטנדרטי ולערבוב.
חרוזי כיולMiltenyi Biotec / MACS#130-093-607MACQ חרוזי כיול מסופקים בתמיסה מימית המכילה 0.05% נתרן אזיד. 3.5 מ"ל לעד 100 בדיקות
CD133/1 (AC133)-PEMilteny Biotec / MACS#130-080-801נוגדן מצומד ל-R-Phycoerythrin במאגר PBS/EDTA
CD184 (CXCR4)-PE-VIO770Miltenyi Biotec / MACS#130-103-798IgG1 אנושי חד-שבטי, רקומביננטי איזוטיפי,
מצומד CD309 (VEGFR-2/KDR)-APCMiltenyi Biotec / MACS#130-093-601נוגדן מצומד ל-R-Phycoerythrin במאגר PBS/EDTA
CD34-FITCMiltenyi Biotec / MACS#130-081-001שיבוט הנוגדן החד-שבטי AC136 מסיר אפיטופ מסוג III של CD34
CD45- VioBlueMiltenyi Biotec / MACS#130-092-880נוגדן CD45 חד-שבטי,
צינורות חרוטיים מצומדים אנושייםתרמו SCIENTIFIC#339651צינורות צנטריפוגה חרוטיים 15 מ"ל
צינורות ציטומטריהFALCON Corning Brand#3520525 מ"ל פוליסטירן צינור תחתון עגול. סגנון 12x75. עקר.
EDTABIO-RAD#161-0729מתכות כבדות, (בצורת Pb) < 10 עמודים לדקה, Fe< 0.01%, As< 1ppm, מסיסים< 0.005%
נויבאואר משופרללא מותגללא מספר קטלוגיהמוציטומטר לספירת תאים. (טווח 0.1000 מ"מ, 0.0025 מ"מ)
צינורות איסוף דם K2 EDTAשואב אבק BD #367863צינור ואקטיינר מפלסטיק לילך (K2E) 10.8 מ"ג, 6 מ"ל.
LymphoprepStemcell Technologies01-63-12-002-Aסטרילי ובדק נוכחות אנדוטוקסינים. צפיפות: 1.077 & 0.001 גרם/מ"ל
ParaformaldehydeSIGMA-ALDRICHקיבוע דגימות ביולוגיות, (אבקה, 95%)
העברת פיפטה 1,3 מ"לCRM GlobePF1016, PF1015פיפטת ההעברה היא כלי המאפשר העברת נוזלים בדיוק רב יותר.
מבחנותKIMBLE CHASE45060 13100מבחנות עמידות בחום. גודל/כובע 13 x 100 מ"מ
#SZBF0920V

מקורות

  1. Serrano-Hernando, F. J., Martín-Conejero, A. Peripheral artery disease: Pathophysiology, diagnosis and treatment. Revista Española de Cardiología. 60 (9), 969-982 (2007).
  2. Agarwal, S., et al. Burden of re-admissions among patients with critical limb ischemia. Journal of the American College of Cardiology. 69 (15), 1897-1908 (2017).
  3. Kolte, D., et al. Thirty-day re-admissions after endovascular or surgical therapy for critical limb ischemia: Analysis of the 2013 to 2014 nationwide re-admissions databases. Circulation. 136 (2), 167-176 (2017).
  4. Rowlands, T. E., Donnelly, R. Medical therapy for intermittent claudication. European Journal of Vascular and Endovascular Surgery. 34, 314-321 (2007).
  5. Cronewett, J. L. Acute limb ischemia and lower extremity chronic arterial disease: Rutherford's vascular surgery (8th ed.). , Saunders Elsevier. Philadelphia, PA. (2014).
  6. Dick, F., et al. Surgical or endovascular revascularization in patients with critical limb ischemia: influence of diabetes mellitus on clinical outcome. Journal of Vascular Surgery. 45 (4), 751-761 (2007).
  7. Suárez-Cuenca, J. A., et al. Coronary circulating mononuclear progenitor cells and soluble biomarkers in the cardiovascular prognosis after coronary angioplasty. Journal of Cellular and Molecular Medicine. 23 (7), 4844-4849 (2019).
  8. Franz, R., et al. Use of autologous bone marrow mononuclear cell implantation therapy as a limb salvage procedure in patients with severe peripheral arterial disease. Journal of Vascular Surgery. 50 (6), 1378-1390 (2009).
  9. Benoit, E., O'Donnell, T. F., Patel, A. N. Safety and efficacy of autologous cell therapy in critical limb ischemia: A systematic review. Cellular Transplantation. 22 (3), 545-562 (2013).
  10. Hill, J. M., et al. Circulating endothelial progenitor cells, vascular function, and cardiovascular risk. New England Journal of Medicine. 348 (7), 593-600 (2003).
  11. Schmidt-Lucke, C., et al. Reduced number of circulating endothelial progenitor cells predicts future cardiovascular events: proof of concept for the clinical importance of endogenous vascular repair. Circulation. 111 (22), 2981-2987 (2005).
  12. Smadja, D. M. Early endothelial progenitor cells in bone marrow are a biomarker of cell therapy success in patients with critical limb ischemia. Cytotherapy. 14 (2), 232-239 (2012).
  13. Kremastinos, D. T., et al. Intracoronary cyclic-GMP and cyclic-AMP during percutaneous transluminal coronary angioplasty. International Journal of Cardiology. 53 (3), 227-232 (1996).
  14. Truong, Q. A., Januzzi, J. L., Szymonifka, J., Thai, W. E., Wai, B., Lavender, Z. Coronary sinus biomarker sampling compared to peripheral venous blood for predicting outcomes in patients with severe heart failure undergoing cardiac resynchronization therapy: the BIOCRT study. Heart Rhythm. 11 (12), 2167-2175 (2014).
  15. Ding, N., et al. Fibrosis and inflammatory markers and long-term risk of peripheral artery disease: The ARIC study. Arteriosclerosis, Thrombosis and Vascular Biology. 40 (9), 2322-2331 (2020).
  16. Potier, L., et al. Plasma copeptin and risk of lower-extremity amputation in Type 1 and Type 2 diabetes. Diabetes Care. 40 (12), 2290-2297 (2019).
  17. Schmidt-Lucke, C., et al. Quantification of circulating endothelial progenitor cells using the modified ISHAGE protocol. PLoS One. 5 (1), 13790(2010).
  18. Marboeuf, P., et al. Inflammation triggers colony forming endothelial cell mobilization after angioplasty in chronic lower limb ischemia. Journal of Thrombosis and Haemostasis. 6 (1), 195-197 (2008).
  19. Regueiro, A., et al. Mobilization of endothelial progenitor cells in acute cardiovascular events in the PROCELL study: Time-course after acute myocardial infarction and stroke. Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 80, 146-155 (2015).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

ציטומטריה של זרימהסנטריפוגציה במדרג צפיפותתפקוד לקוי של האנדותלחיזוי קטיעת גפהסיווג רOTHERFORDמדידת התרחבות תלויה בזרימה (FMD) בעורק הזרועאיסוף דם מחסימה וסקולרית
חיזוי קטיעה באמצעות תאי אב מונונוקלאואריים במחזור מקומי בחולים שטופלו באנגיופלסטיקה עם איסכמיה קריטית של הגפיים
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.