Method Article

יצירת שתי מפרצות מעוכלות באלסטאז עם המודינמיקה שונה בארנב אחד

DOI:

10.3791/62518

⸱

April 15th, 2021

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Neurosurgery, Kantonsspital Aarau, 2Cerebrovascular Research Group, Department for BioMedical Research, University of Bern, 3Experimental Surgery Facility, Department for Biomedical Research, Faculty of Medicine, University of Bern

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פרוטוקול זה מתאר את השלבים ליצירת מודל ארנב עם שתי מפרצות מעוכלות באלסטאז עם המודינמיקה שונה (קבוצת הכוכבים גדם וביפורקציה). זה מאפשר בדיקה של התקנים אנדווסקולריים חדשניים במפרצות עם אנגיוארכיטקטורה שונה ותנאים המודינמיים בתוך חיה אחת.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מודלים פרה-קליניים של בעלי חיים עם מאפיינים המודינמיים, מורפולוגיים והיסטולוגיים הקרובים למפרצות תוך גולגולתיות אנושיות ממלאים תפקיד מפתח בהבנת התהליכים הפתופיזיולוגיים ובפיתוח ובדיקה של אסטרטגיות טיפוליות חדשות. מחקר זה נועד לתאר מודל חדש של מפרצת ארנב המאפשר יצירת שתי מפרצות סקולריות מעוכלות באלסטאז עם תנאים המודינמיים שונים בתוך אותה חיה.

חמש נקבות ארנבות לבנות מניו זילנד במשקל ממוצע של 4.0 (± 0.3) ק"ג וגיל ממוצע של 25 (±5) שבועות עברו יצירת גדם מיקרו-כירורגי ומפרצת ביפורקציה. מפרצת אחת (גדם) נוצרה על ידי חשיפה לעורק הצוואר המשותף הימני (CCA) במקורו בגזע הברכיוצפלי. קליפ זמני הוחל במקור CCA ועוד אחד, 2 ס"מ מעל. קטע זה טופל בזריקה מקומית של 100 U של אלסטאז למשך 20 דקות. מפרצת שנייה (bifurcation) נוצרה על ידי תפירת שקיק עורקי שטופל באלסטאז לתוך האנסטומוזיס מקצה לצד של CCA הימני ל-CCA השמאלי. הפטריות נשלטה על ידי אנגיוגרפיה פלואורסצנטית מיד לאחר הבריאה.

משך הניתוח הממוצע היה 221 דק׳. יצירת שתי מפרצות באותה חיה הצליחה בכל הארנבונים ללא סיבוך. כל המפרצות נרשמו כפטנט מיד לאחר הניתוח למעט מפרצת ביפורקציה אחת, שהראתה תגובה רקמתית קיצונית עקב דגירה של אלסטאז ופקקת אינטראלומינלית מיידית. לא נצפתה תמותה במהלך הניתוח ומעקב של עד חודש. התחלואה הוגבלה לתסמונת שיווי משקל חולפת (ארנב אחד), שהתאוששה באופן ספונטני תוך יום אחד.

הודגם כאן לראשונה היתכנות של יצירת מודל ארנב שתי מפרצת עם מאפיינים המודינמיים של גדם וביפורקציה ותנאי קיר מנוונים מאוד. מודל זה מאפשר לחקור את הקורס הטבעי ואסטרטגיות טיפול פוטנציאליות על בסיס ביולוגיה של מפרצת בתנאי זרימה שונים.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מפרצת תוך גולגולתית היא מצב חמור עם שיעור תמותה לאחר קרע המגיע ל -50% ונכות ארוכת טווח אצל 10-20% מהחולים1. בעשור האחרון חלה התפתחות מהירה של אפשרויות טיפול אנדווסקולריות, אך יחד עם זאת, גם קצב הולך וגדל של הישנות עם עד 33% של recanalization מפרצת לאחר סליל 2,3. כדי להבין טוב יותר את הפתופיזיולוגיה העומדת בבסיס חסימה של מפרצת ו recanalization, כמו גם לפיתוח ובדיקה של התקנים אנדווסקולריים חדשים, יש כיום צורך במודלים פרה-קליניים אמינים אשר המאפיינים ההמודינמיים, המורפולוגיים וההיסטולוגיים שלהם מחקים את אלה של מפרצות תוך גולגולתיות אנושיות 4,5,6

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הערה: הניסוי אושר על ידי הוועדה המקומית לטיפול בבעלי חיים בקנטון ברן, שוויץ (מספר יישום BE108/16), וכל הטיפול והנהלים בבעלי חיים בוצעו בהתאם להנחיות המוסדיות ולעקרונות 3R15,16. הנתונים מדווחים על פי הנחיות ARRIVE. הניהול הפרי-אופרטיבי נעשה על ידי רופא מרדים וטרינרי מוסמך. לצורך המחקר, נקבות ארנבות לבנות מניו זילנד, עם משקל ממוצע של 4.0 (± 0.3) ק"ג וגיל ממוצע של 25 (±5) שבועות, שוכנו בטמפרטורת חדר של 22-24 מעלות צלזיוס עם מחזור אור/חושך של 12 שעות עם גישה חופשית למים, כדוריות וחציר.

1. שלב טרום ניתוחי והרדמה

  1. בצע בדיקה קלינית על פי המלצת איגוד המרדימים הווטרינריים והמכללה הא....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

יצירת גדם ומפרצת ביפורקציה הצליחה בכל 5 הארנבים הלבנים של ניו זילנד ללא סיבוכים תוך ניתוחיים. לא נצפתה תמותה במהלך הניתוח או במהלך תקופת המעקב של 24 ± יומיים. ארנב אחד חווה סיבוכים לאחר הניתוח עם תסמונת שיווי משקל ועיוורון של צד ימין. החיה התאוששה לחלוטין ובאופן ספונטני לאחר 24 שעות. סיבוך זה לא הפריע לפעילותו הרגילה (תנועות חופשיות, צריכת מים ומזון, אינטראקציות עם בעלי חיים אחרים) ולא דרש טיפול ספציפי. לא היה קרע מפרצת ספונטני.

משך הניתוח הממוצע היה 221 דקות (נע בין 190 ל -255 דקות). כל המפרצ.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הטכניקה הנפוצה ביותר ליצירת מפרצת כוללת יצירת מפרצת גדם במקור של CCA הימני, או באמצעות שיטה פתוחה או אנדווסקולרית. המודל אומת כמפרצת יציבה שאינה צומחת ונשארת פתוחה עם הזמן20,21. הטכניקה השנייה האפשרית כוללת יצירה מיקרו-כירורגית של מפרצת ביפורקציה עורקית על ידי אנסטומוס של CCA הימני משמאל ותפירת שקית מפרצת על הביפורקציה 14,22,23. למרות ששתי השיטות הראו התאמה לבדיקת התקנים.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מצהירים על היעדר ניגוד עניינים.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מודים לפרופ' הנס רודולף וידמר, לד"ר לוקה רמונדה ולפרופ' חוויאר פנדינו על תמיכתם המדעית ותרומתם הטכנית לעבודה זו. תודה מיוחדת לאולג'יקה בסלק על עצתה במהלך ההליכים ולקיי נטלבק על עזרתו. יתר על כן, אנו מודים לדניאלה קזוני DVM, PhD ו- med. וטרינר. לואיסנה גרסיה, PD ד"ר אלסנדרה ברגדאנו וד"ר קרלוטה דטוטו על תמיכתם הווטרינרית המסורה.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
4-0 תפר נספגEthicon Inc., ארה"בVCP292ZH
4-0 תפר נספגEthicon Inc., ארה"בVCP304H
6-0 תפר שאינו נספגB. Braun, GermanyC0766070
9-0 תפר שאינו נספגB. Braun, גרמניהG1111140
AdrenalineAmino AG1445419כל גנרי
AmiodaroneHelvepharm AG5078567כל
מכונת הרדמהDrä כל
אספיריןאחר Sanofi-Aventis (Suisse) SA622693כל
אטרופיןLabatec Pharma SA6577083פס פס גנרי
כחולThorlabsFD1Bכל
מסנן פס פס אחר ירוקThorlabsFGV9כל
קליפ כלי אחר של Biemer (2x)B. Braun Medical AG, Aesculap, שוויץFD560Rכל
מלקחייםכל
אינדקס ביספקטרלי אחר (יילודים)כל
שרוול לחץ דם אחר (יילודים)כל
זרקורכל
קלמוקסילGlaxoSmithKline AG758808כל גנרי
DexmedetomidineEver Pharma136740-1כל
אלקטרודות אלקטרוקרדיוגרמה
EphedrineAmino AG1435734
EsmololOrPha Swiss GmbH3284044
פנטניל (טרנסדרמלי)Mepha Pharma AG4008286
FluoresceineCuratis AG5030376
FragminPfizer PFE Switzerland GmbH1906725
כרית חימום או מערכת
תמיסת נתרן כלוריד איזוטונית (0.9%)Fresenius KABI336769
קטמיןPfizer PFE Switzerland GmbH342261
מפסקApproach
LidocaineStreuli Pharma AG747466
Longuettes
MetacamBoehringer IngelheimP7626406 Medicine
MethadoneStreuli Pharma AG1084546Sedaton
מיקרו-מלקחיים  מעוקלאולריך שוויצרי, שוויץU52-015-15
מיקרו מלקחיים  ישר 2xאולריך שוויצרי, שוויץU52-010-15
מיקרומספרייםאולריך שוויצרי, שוויץU52-327-15
MidazolamAccord Healthcare AG7752484
מחט 23 גרם
מחזיק מחט
O2-Face Mask
מבצע מיקרוסקופWild Heerbrugg
PapaverinBichselיישום מקומי
Povidone יודMundipharma Medical Companyכל
קרם Prilocaine-lidocaineגנרי Emla
פרופופולב. בראון מדיקל AG, שוויץהרדמה כללית
אוקסימטר
בדיקת טמפרטורת פי הטבעת (יילודים)
רינגר לקטטביורן סינטטיקה SAעירוי
RopivacainAspen Pharma Schweiz GmbH1882249הרדמה מקומית
אזמלסוואן-מורטון210
מכונת גילוח
מלקחיים
מפזר
קערות
מיקרו ספוגיות סטריליות
כירורגיים
מזרקים 1 מ"ל, 2 מ"ל ו-5 מ"ל
Tris-BufferSigma Aldrich93302תמיסת אלסטאז
מוליך קליפ כלי דםB. בראון, גרמניהFT495T
וצנתר עורקי 22 G
גישה לולאת
מצלמת וידאו או סמארטפון
VitarubinStreuli Pharma AG6847559
Yasargil טיטאן קליפ סטנדרטי (2x)B. Braun Medical AG, Aesculap, שוויץFT242T
גנרית גר גנרי כל מסנן דו קוטביים אחרים אחר של Bycilces אחר גנריות Elastase Sigma Aldrich E7885 Electrocardiogram פנטניל (שימוש תוך ורידי)Janssen-Cilag AG 98683 חימום אוויר מאולץ מכסה עורקיםדופקלבעלי חיים קטניםרקמות רכותרקמות רכותספוג נירוסטה וילון ניתוח סטטוסקופ מספריים ורידים כלי דם

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Grasso, G., Alafaci, C., Macdonald, R. L. Management of aneurysmal subarachnoid hemorrhage: State of the art and future perspectives. Surgical Neurology International. 8, 11(2017).
  2. Raymond, J., et al.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Rabbit Aneurysm ModelElastase Digested AneurysmSaccular Aneurysm CreationBifurcation HemodynamicsStump AneurysmMicrosurgical TechniqueCommon Carotid ArteryEndovascular Device TestingMagnetic Resonance AngiographyHistologic Analysis

Related Articles