מודלים שונים של אומת עורק המוח האמצעי (MCAo) משמשים במחקר שבץ ניסיוני. כאן, מודל שבץ ניסיוני של MCAo חולף דרך העורק הראשי החיצוני (ECA) מתואר, שמטרתו לחקות שבץ אנושי, שבו פקקת המוח מוסרת עקב תמוגה קריש ספונטני או טיפול.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
שבץ דוגמנות בעכברים: אומת עורק מוחי אמצעי חולף דרך העורק הראשי החיצוני
במאמר זה
סיכום
תקציר
שבץ מוחי הוא הגורם השלישי בשכיחותו לתמותה והגורם המוביל לנכות בוגרת שנרכשה במדינות המפותחות. עד כה, אפשרויות טיפוליות מוגבלות לחלק קטן של חולי שבץ בשעות הראשונות לאחר השבץ. אסטרטגיות טיפוליות חדשניות נחקרות בהרחבה, במיוחד כדי להאריך את חלון הזמן הטיפולי. חקירות נוכחיות אלה כוללות את המחקר של מסלולים פתופיציולוגיים חשובים לאחר שבץ, כגון דלקת לאחר שבץ, אנגיוגנזה, פלסטיות עצבית, והתחדשות. בעשור האחרון גובר החשש מפני שכפול לקוי של תוצאות ניסוי וממצאים מדעיים בקרב קבוצות מחקר עצמאיות. כדי להתגבר על מה שמכונה "משבר השכפול", יש צורך דחוף במודלים סטנדרטיים מפורטים לכל ההליכים. כמאמץ בתוך קונסורציום המחקר "ImmunoStroke" (https://immunostroke.de/), מוצע מודל עכבר סטנדרטי של נעילת עורק המוח האמצעי החולף (MCAo). מודל זה מאפשר שחזור מלא של זרימת הדם עם הסרת חוט, המדמה את תמוגת קריש הדם הטיפולית או הספונטנית המתרחשת בחלק גדול של שבץ אנושי. ההליך הכירורגי של מודל שבץ "חוט" זה וכלים לניתוח הפונקציונלי שלו מוצגים בסרטון המצורף.
מבוא
שבץ מוחי הוא אחד הגורמים השכיחים ביותר למוות ונכות ברחבי העולם. למרות שיש בעיקר שתי צורות שונות של שבץ, איסכמי ודימומי, 80-85% מכלל מקרי השבץ הם איסכמיים1. נכון לעכשיו, רק שני טיפולים זמינים עבור חולים עם שבץ איסכמי: טיפול תרופתי עם מפעיל פלסמינוגן רקמה רקומביננטי (rtPA) או פקקת מכנית. עם זאת, בשל חלון הזמן הטיפולי הצר וקריטריוני אי הכללה מרובים, רק מספר נבחר של חולים יכולים ליהנות מאפשרויות טיפול ספציפיות אלה. במהלך שני העשורים האחרונים, מחקר שבץ פרה-אקליני ותרגום התמקד בחקר גישות נוירו-הגנתיות. עם זאת, כל התרכובות שהגיעו לניסויים קליניים לא הראו עד כה שיפורים עבור המטופל2.
מכיוון שמודלים
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
הניסויים שדווחו בסרטון זה נערכו בעקבות ההנחיות הלאומיות לשימוש בבעלי חיים ניסיוניים, והפרוטוקולים אושרו על ידי הוועדות הממשלתיות הגרמניות (Regierung von Oberbayern, מינכן, גרמניה). עכברי C57Bl/6J זכרים בני עשרה שבועות שימשו ושוכנו בטמפרטורה מבוקרת (22 ± 2 מעלות צלזיוס), עם תקופת מחזור של 12 שעות בהירות-כהה וגישה למזון גלולה ומים עד ליביטום.
1. הכנת החומר והמכשירים
- חבר את שמיכת החום כדי לשמור על הטמפרטורה של אזור הניתוח ואת טמפרטורת גוף העכבר במהלך הרדמה ב 37 °C (50 °F).
- אוטומטית מספריים ומלקחיים, להכין 70% פתרון אתנול ולשמור על משחת עיניים dexpanthenol זמין, כמה חתיכות כותנה, 5-0 מצופה פוליאסטר תפר מוכן לשימוש. ....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
המודל המתואר כאן הוא שינוי של מודל שבץ "חוט" נפוץ, אשר מורכב החדרת חוט מצופה סיליקון דרך ECA כדי לחסום באופן חולף את מקורו של MCA (איור 1). לאחר הסרת חוט, רק זרימת הדם ב- ECA נפסקת לצמיתות, ומאפשרת recanalization מלא של CCA ו- ICA. זה מאפשר reperfusion נאות של המוח (איור 2), בדומה למצב שנצפו לאחר תרומבוליזה פרמקולוגית מוצלחת או פקקת מכנית בחולים אנושיים. יתר על כן, עבודה זו מתארת גם שיטה למדידת זרימת הדם במוח במהלך הליכי החסיקה וההסרה על ידי תיקון צינורית המחובר.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
הפרוטוקול הנוכחי מתאר מודל שבץ ניסיוני המבוסס על הסכם הקונצנזוס של קונסורציום מחקר רב מרכזי גרמני ("ImmunoStroke") כדי להקים מודל MCAo ארעי סטנדרטי. מודל MCAo החולף שהוקם על ידי החדרת חוט מצופה סיליקון דרך ECA למקור ה- MCA הוא אחד מדגמי השבץ הנפוצים ביותר להשגת רפרופוזיה עורקית לאחר תקופת חסימה מופרדת. לכן, הליך זה יכול להיחשב מודל קו רלוונטי תרגום.
ל"מודל הסיבים" המוצג בסרטון יש כמה יתרונות בהשוואה לדגמי שבץ אחרים שתוארו בעבר, כגון אי-צורך בגולגולת והשגת רפרפוזיה מלאה של כלי השיט הנידח. עם זא.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
למחברים אין אינטרסים מתחרים לחשוף.
תודות
אנו מודים לכל שותפינו לשיתוף הפעולה של קונסורציום ImmunoStroke (עבור 2879, מתאי מערכת החיסון ועד לשחזור שבץ) על הצעות ודיונים. עבודה זו מומנה על ידי דויטשה Forschungsgemeinschaft (DFG, קרן המחקר הגרמנית) במסגרת אשכול מינכן לנוירולוגיה של מערכות (EXC 2145 SyNergy - ID 390857198) ותחת המענקים LI-2534/6-1, LI-2534/7-1 ו- LL-112/1-1.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 45° רמפה | H& S Kunststofftechnik | גובה: 18 ס"מ | |
| 5/0 איום | Pearsalls | 10C103000 | |
| 5 מ"ל מזרק | בראון | ||
| חומצה אצטית | סיגמא מדעי החיים | 695092 | |
| מערכת הרדמה לאיזופלורן | Drager | ||
| Bepanthen פומייד | באייר | ||
| C57Bl/6J עכברים | צ'ארלס מהדק 000664 | ||
| FST | 12500-12 | ||
| קליפ | FST | 18055-04 | |
| מחזיק קליפ | FST | 18057-14 | |
| קוטון | NOBA Verbondmitel Danz | 974116 | |
| Cresyl violet | Sigma Life Science | C5042-10G | |
| Cryostat | Thermo Scientific CryoStarNX70 | ||
| אתנול 70% | CLN Chemikalien Laborbedorf | 521005 | |
| אתנול 96% | CLN Chemikalien Laborbedorf | 522078 | |
| אתנול 99% | CLN Chemikalien Laborbedorf | ETO-5000-99-1 | |
| חוטים | Doccol | 602112PK5Re | |
| עדין 45 מלקחיים זוויתיים | FST | 11251-35 | |
| מלקחיים עדינים | FST | 11252-23 | |
| מספריים עדינים | FST | 14094-11 | |
| דבק | Orechseln | BSI-112 | |
| דבק מקשיח | Drechseln & Mehr | BSI-151 | |
| שמיכת חימום | FHC DC בקר | ||
| Isoflurane | Abbot | B506 | |
| Isopentane | Fluka | 59070 | |
| קטמין | Inresa Arzneimittel GmbH | ||
| לייזר דופלר | Perimed | PF 5010 LDPM, מערכת פריפלוקס 5000 | |
| בדיקת דופלר לייזר | Perimed | 91-00123 | |
| פוספט חוצץ מלח pH: 7.4 | Apotheke Innestadt Uni Munchen | P32799 | |
| תא התאוששות | Mediheat | ||
| Roti-Histokit הרכבה בינונית Roth | 6638.1 | ||
| תמיסת מלח | בראון | 131321 | |
| נוצת | אזמל | 02.001.30.011 | |
| חוטים מצופים סיליקון | Doccol | 602112PK5Re | |
| סטריאומיקרופסקופ | Leica | M80 | |
| Superfrost Plus שקופיות | Thermo Scientific | J1800AMNZ | |
| Vannas מספריים קפיציים | FST | 15000-00 | |
| Xylacine | Albrecht |
מקורות
- Donnan, G. A., Fisher, M., Macleod, M., Davis, S. M. Stroke. Lancet. 371 (9624), 1612-1623 (2008).
- O'Collins, V. E., et al. 1,026 experimental treatments in acute stroke. Annals of Neurology. 59 (3), 467-477 (2006).
- Tureyen, K., Vemuganti, R., Sailor, K. A., Dempsey, R. J.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
