הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

הערכה של הטיית שיפוט עכברים באמצעות משימת חפירת חוש הריח

2.5K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/63426

⸱

4 במרץ 2022

 ,  ,  , 
1Department of Integrative Biology, University of Guelph, 2Institute of Cell Biology and Neurosciences, National Scientific and Technical Research Council-University of Buenos Aires, 3Laboratory of Experimental Animals, Faculty of Veterinary Sciences, National University of La Plata, 4Department of Animal Biosciences, University of Guelph

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

מאמר זה מספק תיאור מפורט של פרוטוקול הטיית שיפוט עכברים חדשני. כמו כן, מוכחות עדויות לרגישותה של משימת חפירת חוש הריח למצב רגשי, ותועלתה נדונה בתחומי מחקר מגוונים.

תקציר

הטיות שיפוט (JB) הן הבדלים באופן שבו אנשים במצבים רגשיים/רגשיים חיוביים ושליליים מפרשים מידע מעורפל. תופעה זו נצפתה זה מכבר בבני אדם, כאשר אנשים במצבים חיוביים מגיבים לעמימות 'באופן אופטימי' ואלה במצבים שליליים מראים במקום זאת 'פסימיות'. חוקרים שמטרתם להעריך השפעה על בעלי חיים ניצלו את התגובות הדיפרנציאליות הללו, ופיתחו משימות להערכת הטיית שיפוט כאינדיקטור למצב רגשי. משימות אלה הופכות פופולריות יותר ויותר במינים ובתחומי מחקר מגוונים. עם זאת, עבור עכברי מעבדה, בעלי החוליות הנפוצים ביותר במחקר ומין שהסתמך עליו במידה רבה כדי ליצור מודלים של הפרעות רגשיות, רק משימת JB אחת אומתה בהצלחה כרגישה לשינויים במצב הרגשי. כאן, אנו מספקים תיאור מפורט של משימת מורין JB חדשנית זו, וראיות לרגישותה להשפעה על העכבר. למרות שחידודים עדיין נחוצים, הערכה של עכבר JB פותחת את הדלת לענות הן על שאלות מעשיות הנוגעות לרווחת העכברים, והן על שאלות יסוד על ההשפעה של מצב רגשי במחקר התרגום.

מבוא

מדידת הטיית שיפוט מווסתת רגשית (להלן JB) הוכיחה את עצמה ככלי שימושי לחקר המצבים הרגשיים של בעלי חיים. גישה חדשנית זו שאולה מהפסיכולוגיה האנושית מכיוון שבני אדם חווים מצבים רגשיים חיוביים או שליליים (רגשות ומצבי רוח ארוכי טווח) מדגימים באופן אמין הבדלים באופן שבו הם מעבדים מידע 1,2,3. לדוגמה, בני אדם החווים חרדה או דיכאון עשויים לפרש הבעות פנים ניטרליות כשליליות, או משפטים ניטרליים כמאיימיםעל 4,5. סביר להניח שלהטיות אלה יש ערך אדפטיבי ולכן הן נשמרות על פני מינים 6,7. חוקרים שמטרתם להעריך השפעה על בעלי חיים ניצלו בחוכמה את התופעה הזו, תוך שהם מפעילים את האופטימיות כציפייה מוגברת לתגמול בתגובה לרמזים ניטרליים או מעורפלים, ואת הפסימיות כציפייה מוגברת להיעדר עונש או תגמול 8,9. לפיכך, בסביבה ניסיונית, תגובות אופטימיות ופסימיות לגירויים מעורפלים יכולות להתפרש כאינדיקטורים להשפעה חיובית ושלילית, בהתאמה10,11.

בהשוואה לאינדיקטורים אחרים של השפעה על בעלי חיים, למשימות JB יש פוטנציאל להיות כלים בעלי ערך רב במיוחד מכיוון שהם מסוגלים לזהות הן את הערכיות והן את העוצמה של מצבים רגשיים10,11. היכולת של משימות JB לזהות מצבים חיוביים (למשל, Rygula et al.12) שימושית במיוחד מכיוון שרוב האינדיקטורים להשפעה על בעלי חיים מוגבלים לזיהוי מצבים שליליים13. במהלך משימות JB, בעלי חיים מאומנים בדרך כלל להגיב לרמז פלה חיובי המנבא תגמול (למשל, צליל בתדר גבוה) ולרמז מפלה שלילי המנבא ענישה (למשל, צליל בתדר נמוך), לפני שהם מוצגים עם רמז מעורפל (למשל, צליל ביניים)8. אם בתגובה לרמזים מעורפלים בעל חיים מבצע 'באופן אופטימי' את התגובה המאומנת לרמז החיובי (כאילו מצפה לתגמול), הדבר מצביע על הטיית שיפוט חיובית. לחלופין, אם בעלי חיים מפגינים את התגובה המאומנת השלילית כדי להימנע מעונש, הדבר מעיד על 'פסימיות' או על הטיית שיפוט שלילית.

מאז פיתוח משימת JB המוצלחת הראשונה לבעלי חיים על ידי הרדינג ועמיתיו8, פותחו מספר משימות JB עבור מגוון רחב של מינים בתחומי מחקר מגוונים7. אבל למרות הפופולריות הגוברת שלהם, משימות JB של בעלי חיים הן לעתים קרובות עתירות עבודה. יתר על כן, אולי משום שהם שונים מבחינה מתודולוגית מהמשימות האנושיות שנתנו להם השראה, הם מניבים לעתים תוצאות ריקות או מנוגדותלאינטואיציה 14 ובדרך כלל מניבים רק גודל אפקט טיפול קטן15. כתוצאה מכך, משימות JB יכולות להיות מאתגרות לפיתוח וליישום. למעשה, עבור עכברי מעבדה, בעלי החולייתנים הנפוצים ביותר במחקר16,17 ומין שהסתמך עליו במידה רבה כדי לדגום הפרעות רגשיות18, רק משימת JB אחת אומתה בהצלחה כרגישה לשינויים במצב הרגשי19 למרות ניסיונות רבים בעשור האחרון (ראו חומר משלים של Resasco et al.19  לסיכום). מאמר זה מתאר את מטלת murine JB שאומתה לאחרונה, מפרט את התכנון הרלוונטי מבחינה ביולוגית שלה, ומדגיש את הדרכים שבהן ניתן ליישם משימה הומאנית זו כדי לבחון השערות חשובות הרלוונטיות להשפעה על העכבר. בסך הכל, ניתן ליישם את הפרוטוקול כדי לחקור את ההשפעות הרגשיות של כל משתנה עניין על JB בעכברים. זה יכלול משתני טיפול קטגוריאליים כמתואר כאן (השפעות תרופות או מחלות, תנאים סביבתיים, רקע גנטי וכו '), או קשרים עם משתנים מתמשכים (שינויים פיזיולוגיים, התנהגויות כלוב ביתיות וכו ').

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

הניסויים אושרו על ידי הוועדה לטיפול בבעלי חיים של אוניברסיטת גואלף (AUP #3700), נערכו בהתאם להנחיות המועצה הקנדית לטיפול בבעלי חיים, ודווחו בהתאם לדרישות ARRIVE (מחקר בבעלי חיים: דיווח על ניסויים In Vivo )20 .

1. הכנה לניסוי

  1. תכנון ניסיוני (ראו טבלה 1).
    הערה: מבחן התנהגותי זה הוא מטלת חפירה מבוססת ריח של Go/Go, שבה עכברים צריכים לחפור כדי להשיג תגמולים בעלי ערך גבוה או נמוך. הוא משתמש בזירה מלבנית (איור 1) עם שתי זרועות, שבהן זרוע אחת מתביישת ואילו השנייה אינה ניתנת לבישום. כפי שמתואר להלן, עכברים מאומנים להבחין בין רמזי ריח חיוביים ושליליים לפני שהם מוצגים עם תערובת ריחות מעורפלת.
    1. Pseudorandomly להקצות כלובים מנטה או וניל חיובי גירוי דיסקרימינטי (DS+) קבוצות כדלקמן.
      הערה: פרוטוקול זה אומת רק עבור עכברים שהוקצו לתערובת ריח וניל DS+ (ראה תוצאות מייצגות ו- Resasco et al.19 לפרטים). עם זאת, מבחני פיילוט מומלצים בחום כדי לאשר שהתערובות DS+, DS ו-DS-, ותערובות מעורפלות עומדות בדרישות להערכת JB תקפה (שלבים 4.7.3 ו-5.3). לפיכך, השיטות המתוארות כאן כוללות בדיקה הן של וניל והן של מנטה DS+, כדי לספק דוגמה לקבוצה שעונה בהצלחה על הדרישות להערכת JB (עכברי הווניל DS+ וקבוצה שאינה מצליחה לעשות זאת (עכברי מנטה DS+). בדיקות פיילוט קודמות יזהו סוג זה של בעיה מראש.
    2. עכברי מנטה DS+ : עבור עכברים אלה, במהלך הכנת הזירה לאימון (ראו שלב 1.4 להלן), מסמנים מכשירי ריח וסירים המכילים תגמול בעל ערך גבוה עם רמז ריח המנטה, ואלה שאינם מכילים תגמול עם רמז ריח הווניל.
    3. עכברי וניל DS+ : עבור עכברים אלה, במהלך הכנת הזירה לאימון (ראו שלב 1.4 להלן), מסמנים מכשירי ריח וסירים המכילים פרס בעל ערך גבוה עם רמז ריח הווניל, וכאלה שאינם מכילים תגמול עם רמז ריח המנטה.
      הערה: משימה זו מורכבת מניסויי אימון מחוזקים וניסויי מבחן לא נכפים. במהלך ניסויי בדיקה לא מאולצים, אין תגמולים נגישים לעכברים (ראו שלב 1.4.3 להלן) ורמז הריח הדו-משמעי הן עבור עכברי נענע והן עבור עכברי וניל DS+ הוא אותה תערובת נענע/וניל ביחס של 1:1.
    4. Pseudorandomly להקצות כלובים לקבוצות זרועות בניחוח שמאל או ימין (איזון נגדי בין קבוצות ריח DS+ ) כדלקמן.
    5. שמאלה: עבור עכברים אלה, במהלך הגדרת הזירה לצורך אימון ובדיקה (ראה שלב 1.4 להלן), סמן את זרוע שמאל עם רמז הריח המתאים של DS+ או DS- וודא שזרוע ימין תמיד ללא בישום (מסומנת רק במים מזוקקים).
    6. מימין: עבור עכברים אלה, במהלך הגדרת הזירה לצורך אימון ובדיקה (ראה שלב 1.4 להלן), סמנו את זרוע ימין עם רמז הריח המתאים של DS+ או DS- וודאו שזרוע שמאל תמיד ללא בישום (מסומנת רק במים מזוקקים).
    7. הקצה באופן אקראי לכל חיה "קוד עיוור" כדלקמן.
      הערה: עיוורון מאפשר לחוקר המטפל בעכברים ולניקוד התנהגותם להישאר לא מודע לתעודת הזהות או לטיפול בבעלי החיים, תוך הימנעות מהטיה סובייקטיבית בלתי רצויה. זהו צעד חובה כדי לציית להנחיות ARRIVE (מחקר בבעלי חיים: דיווח על ניסויים In Vivo ) ומסמכי ייחוס אחרים20.
    8. הוסף עמודה עבור קוד עיוור בגיליון אלקטרוני המכילה כל מזהה בעל חיים ואת הטיפול המתאים לו הוקצה.
    9. הקצה באופן אקראי לכל בעל חיים קוד ייחודי (למשל, צירוף אותיות ומספרים "A2") שאינו קשור למספר הכלוב או לטיפול בו.
      הערה: כל האקראיות צריכה להתבצע באמצעות מחולל מספרים אקראיים (לדוגמה, Random.org). במהלך שלב אקראיות זה, איזון נגדי בין טיפול, זן וכו ', במידת הצורך. האם זה נעשה על ידי עוזר מחקר שיישאר "לא מוכן" לטיפול לאורך כל הניסויים. אסור לאדם זה לאסוף נתונים במהלך הבדיקה, כדי למנוע הערכות מוטות.
    10. במהלך כל איסוף הנתונים, ספקו לחוקר ה"עיוור" שהוא חביון חי וניקוד וידאו לחפירה וחפירה של משך הזמן רק עם הקוד העיוור של החיה כדי לשמור על החוקר עיוור לטיפול.
      הערה: גיליונות אלקטרוניים המשמשים במהלך איסוף הנתונים יכללו רק את הקוד העיוור של החיה ואת ההשהיה המתאימה לחפירה וחפירה של משך כל ניסוי. בסוף הניסויים ניתן להוסיף לגיליון האלקטרוני את מזהה בעלי החיים המתאים ואת המידע הטיפולי, ובכך "לפענח" את החוקרים לניתוח נתונים.
  2. הכנת חומרים.
    1. תגמולי מזון בעלי ערך גבוה: שוברים את שבבי הבננה הממותקים המיובשים לכ-0.5 ס"מ על 0.5 ס"מ חתיכות ביד.
    2. תגמולי מזון בעלי ערך נמוך: באמצעות קרש חיתוך וסכין, חתכו את צ'או מכרסמים (מהתזונה הרגילה של בעלי החיים) לכ-0.125 ס"מ3 חתיכות.
      הערה: יש לבצע בדיקות פיילוט לזיהוי תגמולים בעלי ערך גבוה ונמוך לפני תחילת המשימה.
    3. תמציות מנטה ווניל: בעזרת מזרק 1 מ"ל או מיקרופיפט, מוסיפים תמצית מנטה ווניל לצינורות צנטריפוגה מסומנים. דילול מחלץ 1:4 עם מים מזוקקים ומערבב על ידי היפוך מספר פעמים. הכינו אותם מדי יום והפכו את ההיפוך שוב ושוב לפני השימוש כדי להבטיח שהתערובות יהיו טריות ועקביות.
    4. תערובת ריחות מעורפלת: לאחר שתמציות המנטה והווניל דוללו, הוסיפו נפחים שווים לצינור צנטריפוגה (יצירת תערובת של 1:1 של התמציות המדוללות). הכינו אותם ביום הבדיקה של תגובות לתערובת ריחות מעורפלת, והפכו שוב ושוב לפני השימוש כדי להבטיח שהתערובת טרייה ועקבית.
      הערה: בדיקות פיילוט לזיהוי דילולים מתאימים ותערובות ריח ביניים מעודדות מאוד כדי להבטיח את התועלת של בדיקות מעורפלות, שכן העוצמה עשויה להשתנות בין יצרנים, אצוות וכו '. אם מוצעים מספר רמזים מעורפלים, הקצה באופן אקראי עכברים לרמזי הבדיקה הכמעט חיוביים, נקודת האמצע, הקרובים לשליליים. ראה דיון לפרטים נוספים.
    5. רפידות כותנה: חותכים כל כרית כותנה עגולה לשש חתיכות שוות (מה שמאפשר להם להתאים לקלטות הרקמות המשמשות כמחלקי ריח).
      הערה: מספר תגמולי המזון בעלי הערך הגבוה והנמוך, רפידות הכותנה ונפחי תערובות הריחות יהיו תלויים במספר הנבדקים הנבדקים. עיין בטבלה 1 עבור מספר הניסויים לכל נושא בכל שלב ובטבלה 2 עבור החומרים הנדרשים בכל סוג ניסוי.
    6. זהה את אזור הניסוי: בצע אימונים ובדיקות על ספסל בחדר המושבה או במקום אחר. ערכו את כל הניסויים תחת אור אדום במהלך השלב החשוך כאשר העכברים פעילים.
  3. אימון מקדים (שבוע לפני הניסויים) לחפירה בכלוב הביתי.
    1. עבור כלוב שנבדק, יוצקים כמות קטנה של מצעי תירס לשני סירים חופרים (מספיק כדי לכסות את תחתית הסיר) כדי לעזור לפינוקים להישאר במרכז הסיר בעת קבורתם.
    2. בסיר אחד, הניחו חתיכות של תגמול בעל ערך גבוה על גבי שכבת קוביית התירס, כך שכל עכבר בכלוב יכול להכיל חתיכה אחת (למשל, שלוש חתיכות של שבבי בננה לכלוב של שלושה עכברים). בסיר השני, הניחו חתיכות של תגמול בעל ערך נמוך על גבי שכבת קוביית התירס, כך שלכל עכבר בכלוב תהיה חתיכה אחת (למשל, שלוש חתיכות צ'או לכלוב של שלושה עכברים).
    3. יוצקים באיטיות מצעי קוביות תירס על הפינוקים בכל סיר, מכסים אותם וממלאים את הסירים לגובה של 3 ס"מ.
    4. יש להניח בו-זמנית סיר אחד בעל ערך גבוה וסיר אחד בעל ערך נמוך בכל כלוב למשך 10 דקות. לאחר 10 דקות, מוציאים את הסירים מכל הכלובים.
    5. השליכו את כל קוביית התירס והפינוקים שנותרו בסיר. נגבו את כל הסירים ביסודיות עם 70% אתנול כדי למנוע מריחות של בעלי חיים וכלובים להשפיע על ניסויים עתידיים.
    6. חזור על שלבים 1.3.1-1.3.5 פעם ביום במשך 5 ימים רצופים.
      הערה: המטרה של שלב זה היא לאפשר לכל חברי הכלוב את ההזדמנות לחפור ולאכול חטיף לפני תחילת האימון הפורמלי. זה גם מקל על ההרגלה לתגמולי מזון.
  4. ארנה שהוקמה לאימונים ובדיקות.
    1. הניחו את הזירה על שולחן עבודה תחת אור אדום. נגבו היטב את כל מרכיבי הזירה, את סירי החפירה ואת מכשירי הריח עם 70% אתנול כדי להסיר אבק וריחות כלשהם מניסויים קודמים.
    2. מכינים את הסירים החופרים כדלקמן.
    3. הכניסו את תגמולי המזון המתאימים ל"תא הבלתי נגיש" (ראו איור 1).
      הערה: התגמולים הכלולים בתא זה תלויים בשאלה אילו פינוקים (אם בכלל) קבורים בניסוי נתון (ראו טבלה 2). לכן, כל סיר יכיל תמיד חתיכה אחת של צ'יפס בננה וחתיכת צ'או אחת על פני שני התאים.
      1. סירי ריח DS+: במהלך ניסויים מחוזקים, מניחים חתיכת צ'או אחת בתא הלא נגיש וקוברים חתיכה אחת של שבב בננה באזור הנגיש של הסיר.
      2. סירי ריח DS: במהלך ניסויים מחוזקים, הניחו חתיכת צ'או אחת וחתיכה אחת של צ'יפס בננה בתא הבלתי נגיש. לא יהיו תגמולי מזון זמינים באזור הנגיש של הסיר.
      3. סירים ללא בישום: במהלך ניסויים מחוזקים, מניחים חתיכה אחת של צ'יפס בננה בתא הלא נגיש וקוברים חתיכת צ'או אחת באזור הנגיש של הסיר.
      4. במהלך כל ניסויי הבדיקה הלא מאולצים (חיוביים, שליליים ומעורפלים), הניחו חתיכה אחת של צ'או וחתיכה אחת של שבב בננה בתא הבלתי נגיש. לא יהיו תגמולי מזון זמינים באזור הנגיש של הסיר.
        הערה: צעד זה נועד למנוע מריח הפינוקים הקבורים לחשוף איזה סיר מתוגמל. ככזה, המחסום בין שני התאים מחורר כדי להקל על העברת ריחות.
    4. יוצקים כמות קטנה של מצעי קוביית תירס לכל סיר כדי לשמור על תגמולי מזון מרוכזים בעת קבורתם. מניחים חתיכה אחת מתגמול המזון המתאים (ראו טבלה 2) על גבי שכבת קוביית התירס ושופכים באיטיות מצעי קוביות תירס על הפינוקים, מכסים אותם וממלאים את הסירים עד לגובה של 3 ס"מ.
    5. באמצעות מזרק 1 מ"ל או מיקרופיפט, יש לשאוב 0.1 מ"ל מתערובת הריחות המתאימה (כלומר, תערובות מנטה, וניל או תערובות מעורפלות) או מים מזוקקים (ראו טבלה 2) ולהזריק אותם ישירות על גבי קוביית התירס בתנועה מעגלית.
    6. מכינים מכשירי ריח.
      1. מניחים חתיכת כרית כותנה אחת בבסיס קלטת הרקמות. באמצעות מזרק 1 מ"ל או מיקרופיפט, יש להכין 0.1 מ"ל מתערובת הריחות המתאימה (כלומר, מנטה, וניל או תערובות מעורפלות) או מים מזוקקים (ראו טבלה 2) ולהזריק אותם על פיסת הכותנה. מכסים את קלטת הרקמות במכסה שלה כדי להקיף את הכותנה הריחנית ויוצרים מתקן ריחות.
    7. מניחים את סירי החפירה בקצות הזרועות ומפעילי הריח בתחילת כל זרוע. הכנס את ה"דלת" הנשלפת מיד לפני חריצי הקלטת כדי לחסום את הכניסה לזרועות הזירה וליצור את תא הזינוק (ראו איור 1).
      הערה: סירי חפירה, מתקני ריח ומזרקים חייבים להיות מסומנים בבירור ולהשתמש בהם רק לריח אחד במהלך הניסויים כדי למנוע ערבוב לא מכוון של רמזי ריח (כלומר, להשתמש במערך שונה של חומרים עבור תערובות נענע, וניל, ללא בישום ומעורפל לאורך כל הדרך).

2. אימון חפירה: 5 ימים, שני ניסויים חיוביים ביום (טבלה 2)

  1. עכברים מהירים במשך שעה אחת לפני האימון בכלוב הביתי שלהם על ידי הוצאת מזון מההופר.
  2. הגדר את הזירה לניסוי חיובי מחוזק על ידי ביצוע הוראות הגדרת הזירה לעיל (שלב 1.4).
  3. ביום הראשון של אימוני החפירה, הניחו את תגמולי המזון על גבי מצעי התירס בקוטר 3 ס"מ במקום לקבור אותם.
  4. קבורים בהדרגה את התגמולים עמוק יותר מתחת לקורת התירס במשך 4 הימים הבאים, עד שהם ממוקמים בתחתית מצעי 3 ס"מ עד יום 5 (כלומר, יום 1: על גבי קלח תירס, יום 2: קבורים על ידי שכבה דקה מאוד של קלח תירס, יום 3: קבורים באמצע הדרך לתחתית הסיר, יום 4: נקברו שלושה רבעים מהדרך לתחתית הסיר, ויום 5: קבור בתחתית הסיר).
  5. העבירו עכברים מהכלוב הביתי שלהם לכלוב תחבורה ריק. הניחו כרטיס רמז עם הקוד העיוור של החיה על גבי כלוב ההובלה, כך שהחוקר שערך את הניסויים יישאר עיוור לתעודת הזהות והטיפול בבעלי החיים. נשאו עכברים לאזור הניסוי.
    הערה: שלבים 2.1 ו-2.5 צריכים להסתיים על ידי עוזר מחקר המכיר את העכברים. הצעדים הבאים במהלך הניסויים ייערכו על ידי חוקר עיוור לתעודת זהות של בעלי חיים (וטיפול, אם רלוונטי). טפלו תמיד בעכברים באמצעות טיפול בכוסות (יד פתוחה) או טיפול במנהרה (עם נייר או מנהרת פלסטיק) כדי למנוע את ההשפעות ההרתעות של טיפול מסורתי בזנב21.
  6. העבירו עכברים מכלוב ההובלה לתא הזינוק של הזירה. הסר את "דלת" ההתחלה, הנמיך מיד את מכסה הפרספקס מעל הזירה, והתחל את טיימר הניסיון בן 5 הדקות.
    הערה: אם נבדקים מספר עכברים מאותו כלוב, יש לעשות זאת בו-זמנית. עם זאת, מספר בעלי החיים הנבדקים בו זמנית יהיה תלוי במספר המשקיפים העיוורים הזמינים; באופן אידיאלי, חוקר יתבונן ויטפל בבעל חיים אחד בכל פעם, אך אדם אחד יכול לצפות ולטפל בשתי חיות בו זמנית, במידת הצורך.
  7. חביון ניקוד חי לחפירה והשהיה כדי לאכול את הפרס בשתי הידיים.
    1. רישום השהיה לחפירה כזמן שבו נצפתה ההתרחשות הראשונה של חפירה. חפירה מתוארת כעכבר שדוחף או מתמרן באופן פעיל מצעי קורן עם הפנסים הקדמיים ו/או הלוע.
    2. רשמו חביון אכילה כזמן שבו נצפתה ההתרחשות הראשונה של אכילה. אכילה מתוארת כעכבר הצורך פרס תוך שהוא אוחז בו במחיצת ויושב על חרטום.
  8. כאשר המשפט מסתיים, הרימו את מכסה הפרספקס והזיזו את העכבר בחזרה לכלוב ההובלה שלו.
  9. השליכו את כל מצעי קוביות התירס והפינוקים שנותרו בסירים. פתח קלטות רקמות והשלך חתיכות כותנה. נגבו את כל מרכיבי הזירה וסירי החפירה והריחו את הדיספנסרים ביסודיות עם 70% אתנול.
  10. הגדירו את הזירה לניסוי חיובי שני (שלב 1.4). חזור על שלבים 2.6-2.9 לניסוי חיובי מחוזק.
  11. החזירו את כלוב ההובלה לעוזרת המחקר כדי שניתן יהיה להחזיר את העכברים לכלוב הביתי שלהם.
  12. חזור על שלבים 2.1-2.11 במשך 5 ימים רצופים.

3. אימוני אפליה : 10 ימים, ארבעה ניסויים ביום

  1. הגדרת הזירה לניסוי חיובי או שלילי (ראה טבלה 2) בהתאם להוראות בשלב 1.4.
  2. ערכו שני ניסויים חיוביים ושני ניסויים שליליים ביום לאחר הסדר המתואר בטבלה 2 (כלומר, ניסויים חיוביים ושליליים לסירוגין בימים 1-5 וסדר פסאודו-דוראנדום בימים 6-10).
  3. בצע את ההוראות בשלב 2.1 בתחילת כל יום אימון, ולאחר מכן בצע את השלבים 2.5-2.10. חזרו על הפעולה עד שהעכברים עברו ארבעה ניסויים בסך הכל.
  4. החזירו את כלוב ההובלה לעוזרת המחקר כדי שניתן יהיה להחזיר את העכברים לכלוב הביתי שלהם.
  5. חזור על שלבים 3.1-3.4 פעם ביום במשך 10 ימים בסך הכל (כלומר, שני שבועות עבודה רצופים של 5 ימים, המופרדים על ידי סוף שבוע של יומיים).

4. בדיקה

הערה: משך הבדיקה הוא 3-5 ימים (בהתאם לזמן שלוקח לכל עכבר לעמוד בקריטריוני הלמידה), חמישה ניסויים ביום עבור המפגשים שבהם נערכים ניסויי בדיקה חיוביים ושליליים, ושלושה ניסויים ביום כאשר נערכת הבדיקה הדו-משמעית.

  1. עכברים מהירים במשך שעה אחת לפני אימון /בדיקה בכלוב הביתי שלהם על ידי הוצאת מזון מההופר.
  2. בצע ניסוי חיובי אחד וניסוי שלילי אחד בסדר אקראי (ראה טבלה 1) על ידי ביצוע הוראות הגדרת זירה בשלב 1.4 וחיזוק הוראות הניסוי בשלבים 2.5-2.10.
  3. בצע ניסוי בדיקה אחד שהוקלט בווידאו ללא אכיפה.
    הערה: הניסויים שלא נאכפו זהים לניסויים מחוזקים, למעט המיקום שבו ממוקמים התגמולים. לכן, בניסוי הלא מאולץ, חתיכה אחת מכל תגמול בעל ערך גבוה ונמוך מונחת בתא הבלתי נגיש הן עבור הסירים הריחניים והן עבור הסירים הלא מתביישים.
    1. ערוך ניסוי בדיקה חיובי או שלילי אחד עבור כל עכבר מדי יום עד לעמידה בקריטריוני הלמידה (מקסימום 4 ימים; קריטריוני הלמידה מתוארים בשלב 4.7.3). ודא שניסויי בדיקה חיוביים ושליליים נערכים בסדר משתנה על פני ימים (למשל, יום 1: בדיקה חיובית, יום 2: בדיקה שלילית, יום 3: בדיקה חיובית וכו ').
    2. עקוב אחר הוראות הגדרת הזירה בשלב 1.4.
    3. העבירו עכברים מכלוב ההובלה לתא הזינוק של הזירה. הגדר מצלמת וידאו על חצובה כך ששני הסירים בקצות הזרועות יהיו גלויים, והתחל להקליט. ודא שכרטיס הרמז עם הקוד העיוור של החיה וסוג הניסוי (בדיקה חיובית או בדיקה שלילית) מוקלט בסרטון (לעיון במהלך ניקוד הווידאו).
    4. הסר את "דלת" ההתחלה, הורד מיד את מכסה הפרספקס מעל הזירה, והתחל את טיימר הניסיון בן 2 הדקות.
    5. כאשר המשפט מסתיים, הפסק את ההקלטה, הזז את המצלמה הצידה, הרם את מכסה הפרספקס, הזיז את העכבר בחזרה לכלוב ההובלה שלו.
    6. השליכו את כל מצעי קוביות התירס והפינוקים שנותרו בסירים. פתח קלטות רקמות והשלך חתיכות כותנה. נגבו היטב את כל מרכיבי הזירה, את סירי החפירה ואת מכשירי הריח עם 70% אתנול.
  4. בצע ניסוי חיובי אחד וניסוי שלילי אחד בסדר אקראי (ראה טבלה 1) על ידי ביצוע הוראות הגדרת זירה בשלב 1.4 וחיזוק הוראות הניסוי בשלבים 2.5-2.10.
  5. החזירו את כלוב ההובלה לעוזרת המחקר כדי שניתן יהיה להחזיר את העכברים לכלוב הביתי שלהם.
  6. לאחר שכל העכברים סיימו את חמשת הניסויים היומיים שלהם, העבירו סרטונים מכרטיס זיכרון מצלמה למחשב לניקוד וידאו.
  7. ציון סרטוני ניסוי חיוביים ושליליים ביום הבדיקה כדי להעריך אם עכברים עמדו בקריטריונים ללמידה. הקפידו על ניקוד וידאו באותו יום מכיוון שבעלי חיים שעומדים בקריטריונים ללמידה יעברו בדיקות מעורפלות למחרת.
    1. באמצעות תוכנת הקלטת אירועים או שעון עצר, בקשו מהחוקר העיוור לטיפול לתעד את ההשהיה של כל עכבר כדי לחפור ולחפור את משך הזמן בכל סיר במהלך הדקה הראשונה של ניסויי הבדיקה החיובית והשלילית.
    2. רישום השהיה לחפירה כזמן שבו נצפתה ההתרחשות הראשונה של חפירה. חפירה מתוארת כעכבר שדוחף או מתמרן באופן פעיל מצעי קורן עם הפנסים הקדמיים ו/או הלוע. רשום את משך החפירה כזמן הכולל שעכבר מבלה בחפירה.
    3. השווה את משך החפירה בזרוע הריחנית בין ניסויים חיוביים (DS+) ושליליים (DS-) עבור כל עכבר כדי לקבוע אם בעלי חיים יכולים להבחין במשימה. קחו בחשבון את קריטריון הלמידה שיש לעמוד בו אם משך החפירה בזרוע המבושמת DS+ הוא לפחות כפול מזה של הזרוע בניחוח DS במהלך הדקה הראשונה של הבדיקה (עם משך חפירה מינימלי של DS+ של 3 שניות).
  8. חזור על שלבים 4.1-4.7 מדי יום עד שהעכברים עמדו בקריטריון הלמידה.
    1. להוציא אנשים שלא עמדו בקריטריון עד יום 4 ממשפטים מעורפלים (ולכן, הערכת הטיית שיפוט).
  9. עבור עכברים שעמדו בקריטריונים של למידה, בדקו את התגובות לתערובת הריחות הדו-משמעית.
    1. עכברים מהירים במשך שעה אחת לפני אימון /בדיקה בכלוב הביתי שלהם על ידי הוצאת מזון מההופר.
    2. בצע ניסוי אחד חיובי ואחד שלילי מחוזק בסדר אקראי על ידי ביצוע הוראות הגדרת זירה בשלבים 1.4 והוראות ניסוי מחוזקות בשלבים 2.5-2.10.
    3. בצע ניסוי בדיקה אחד לא מאולץ שהוקלט בווידאו כמתואר בשלב 4.3 באמצעות תערובת הריחות הדו-משמעית (ראה טבלה 2).
  10. ציון סרטוני משפט מעורפלים להערכת הטיית שיפוט.
    1. באמצעות תוכנת הקלטת אירועים או שעון עצר, בקשו מחוקר העיוור לזהות בעלי חיים ולתעד את ההשהיה של כל עכבר לחפור (ראו שלב 4.7.2) בכל סיר במהלך הדקה והשנייה הראשונה של ניסויי הבדיקה.

5. ניתוח נתונים

הערה: הניתוחים המדויקים הנדרשים יהיו תלויים בפרטי התכנון הניסיוני. סקירה כללית מתוארת כאן, אך מומלץ מאוד לחוקרים להתייחס ל- Gygax22 בעת תכנון ניתוחים עבור ניסויי JB בבעלי חיים, ולגאסקיל וגארנר23 בעת בחירת גודל המדגם (מכיוון שהניתוחים הנדרשים הם לעתים קרובות מורכבים מדי עבור ניתוחי כוח א-פריוריים ).

  1. "שחרר" את החוקר על ידי הוספת תעודת הזהות והטיפול המתאימים של בעלי החיים ומידע הטיפול (למשל, דיור מועשר או קונבנציונלי; תרופה או פלצבו וכו ') עבור כל קוד עיוור לגיליון האלקטרוני. ודא שהגיליון האלקטרוני שנוצר כולל שלוש שורות עבור כל בעל חיים שעמד בקריטריוני הלמידה (כלומר, עבור ניסויי הבדיקה החיוביים, השליליים והמעורפלים) המצביעים על עיכובים לחפור בזרוע הריחנית.
  2. הפעל מודל מעורב ליניארי כללי של מדידות חוזרות ונשנות, תוך שימוש בתוכנה סטטיסטית מועדפת. כאן, משתנה התוצאה יהיה השהיה לחפירה. ודא שהמודל כולל טיפול (או משתנה מתמשך של עניין), סוג ניסוי ואינטראקציה מסוג ניסוי של טיפול x כהשפעות קבועות. כלול את מזהה העכבר (מקונן בתוך הטיפול) כאפקט אקראי. תנאים נוספים הכלולים במודל יהיו תלויים בתכנון הניסויי המיושם.
    הערה: אם עכברים שוכנים בקבוצות (כפי שמתאים למין חברתי זה24) ובני זוג בכלוב נבדקים, אזי כלוב המקונן במסגרת הטיפול (אם קיים) חייב להיכלל במודל כאפקט אקראי (וזיהוי העכבר חייב להיות מקונן לאחר מכן בתוך הכלוב).
  3. שרטט את אמצעי ההשהיה הפחות מרובעים בכל סוג ניסוי כדי לאשר שהרמז הדו-משמעי שהוצג התפרש כבינוני (כלומר, אומדן ההשהיה הפחות-ריבועי פירושו שהאומדן עבור הניסוי הדו-משמעי צריך ליפול בנקודת אמצע בין ההשהיה החיובית לשלילית). הערך את העכבר JB רק אם דרישה זו מתקיימת.
  4. הערך את ההשפעה הפשוטה של הטיפול (או המשתנה הרציף של העניין) על ההשהיה כדי לחפור בניסוי הדו-משמעי על-ידי חקירת האינטראקציה מסוג ניסוי של Treatment x כדי לקבוע אם עכברים מציגים JB בעל אפנון השפעה.

figure-protocol-1
איור 1: דיאגרמה של מנגנון ניסויי. מנגנון JB כולל זירה מלבנית עם שתי זרועות. כל זרוע מכילה מתקן ריח הממוקם בהתחלה וסיר חפירה המוצב בקצה. נדפס מחדש מתוך Resasco et al.19 באישור Elsevier. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.

שלב:תכנון ניסיוני
כלתגמול בעל ערך גבוהצ'יפס בננה
תגמול בעל ערך נמוךמכרסם צ'או
DS+מנטה או וניל (איזון נגדי)
DS-מנטה או וניל (איזון נגדי)
אימוני חפירהחפירת לוח זמנים לאימונים5 ימים: 2 ניסיונות קופה ליום
חפירת משך המשפט5 דק'
הכשרה בנושא אפליהלוח זמנים להכשרה בנושא אפליה10 ימים: 4 ניסויים ליום
צו משפט חפירהימים 1-5: 4 ניסיונות ליום
משפט 1: פוזה
משפט 2: נג
משפט 3: פוזה
משפט 4: נג
ימים 6-10: 4 ניסיונות ליום*
משך משפט האפליה5 דק'
בדיקותלוח זמנים לבדיקות3-5 ימים (תלוי בזמן כדי לעמוד בקריטריונים ללמידה)
5 ניסויים ליום
סדר שלב הבדיקהמשפטים 1 ו-2: פוזה או נג**
ניסוי 3: ניסוי מבחן
משפטים 4 ו-5: פוזה או נג**
משך הבדיקה2 דק'
* הניסויים היו פסאודו-רנדומיים כך שלעכברים תמיד היו שני ניסויי פוזה ושני ניסויי נג ביום
** הניסויים היו פסאודו-רנדומיים, כך שלעכברים תמיד היה ניסוי פוזה אחד ונג אחד לפני ואחרי ניסוי הבדיקה

טבלה 1: סיכום תכנון הניסויים ולוח הזמנים לאימונים ולבדיקות. מספר וסדר הניסויים ביום לשלבי אימוני חפירה, הדרכת אפליה ובדיקות בנוסף לפרטי תכנון הניסויים. נדפס מחדש מתוך Resasco et al.19 באישור Elsevier.

פרטי המשפט
שלבסוג ניסיוןזרוע ריחניתזרוע ללא בישום
רמז לריחפרס קבורתגמול לא נגישרמז לריחפרס קבורתגמול לא נגיש
הכשרה לחפירה ואפליהאימון קופהDS+בננהצ'אומיםצ'אובננה
אימוני נגDS-אין פרסבננה + צ'אומיםצ'אובננה
בדיקותמבחן קופהDS+אין פרסבננה + צ'אומיםאין פרסבננה + צ'או
מבחן נגDS-אין פרסבננה + צ'אומיםאין פרסבננה + צ'או
מבחן מעורפלמנטה/
תערובת וניל		אין פרסבננה + צ'אומיםאין פרסבננה + צ'או
קריטריון הלמידהעכברים חייבים לחפור פי שניים יותר זמן בסיר DS+ (מבחן Pos) מאשר בסיר DS - pot (מבחן Neg), ולחפור במשך 3 שניות לפחות

טבלה 2. סיכום פרטי המשפט. רמזי ריח ותגמולים המוצגים בכל סוג ניסוי במהלך אימוני חפירה, אימון אפליה ובדיקות שלבים. DS(+): גירוי מפלה חיובי, DS(-): גירוי מפלה שלילי, Pos: חיובי, Neg: שלילי. נדפס מחדש מתוך Resasco et al.19 באישור Elsevier. ראה טבלה משלימה S2 במאמר המקורי עבור הטבלה המורחבת.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

התוצאות שהוצגו כאן משקפות ממצאים רלוונטיים מניסוי 1 של Resasco et al.19. הנבדקים בניסוי זה היו 18 נקבות C57BL/6NCrl ('C57') ו-18 עכברי Balb/cAnNCrl ('Balb') ('Balb').. בעלי חיים הגיעו למתקן בגיל 3-4 שבועות והוקצו באופן אקראי לטיפולי דיור מועשרים לסביבה או קונבנציונליים (EH או CH, בהתאמה) ברביעיות זן מעורב25. כל כלוב הכיל C57 אחד ו-Balb אחד, בנוסף לשני עכברי DBA/2NCrl ששימשו בניסוי אחר. כאן, השימוש בעכברים נקבות איפשר דיור קבוצתי של מין חברתי זה עם העשרה סביבתית, תוך הימנעות...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

פרוטוקול החפירה מבוסס הריח והתוצאות המתוארות כאן מדגימים את יכולתה של משימת JB חדשנית זו לזהות שינויים במצב הרגשי של העכבר. לפיכך, המשימה מהווה כלי רב ערך לתחומי מחקר מגוונים. בדומה לכל משימת JB, כדי להעריך את ההשפעה על בעלי חיים חשוב שבעלי חיים ילמדו תחילה להבחין בין רמזים (שלב 4.7.3) ושהגירוי הדו-משמעי יתפרש כבינוני (שלב 5.3). למרות שהם פשוטים, עמידה בדרישות אלה יכולה להיות מאתגרת, במיוחד בעכברי מעבדה שעבורם יותר מ-15 ניסיונות קודמים לפתח וליישם משימת JB של עכבר נכשלו19. כאן, רכיבים מרובים מילאו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין ניגודי עניינים לחשוף.

תודות

המחברים מודים למיגל איילה, לינדזי קיצ'נהאם, ד"ר מישל אדוארדס, סילביה לאם וסטפני דג'ארדין על תרומתם לעבודת האימות Reseasco et al.19 שעליה מבוסס פרוטוקול זה. אנו רוצים להודות גם לעכברים ולטכנאי הטיפול הנפלאים שלנו בבעלי חיים, מיכאלה רנדל ומישל צ'יפלאק.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
אתנול מוחלטאלכוהול מסחריP016EAANלדלל ל-70% במים מזוקקים, לניקוי
צינורות צנטריפוגהפישר55395צינורות 15 מ"ל המשמשים לדילול תמציות כאן. עם זאת, ניתן לבחור את הגודל על סמך הנפח הכולל הנדרש לגודל המדגם
Cheerios (מקורי)CheeriosN/Aזמין מסחרית. משמש כפרס לאילוף בעלי חיים להיכנס לכלוב נספח לטיפול
במצעי קלחי תירסEnvigo7092Teklad 1/8 מצעי קלחי תירס המשמשים לחפירת סירים וכלובי בעלי חיים
רפידות כותנהEquateN/Aזמין מסחרית. שונה במעבדה כך שיתאים לקלטות רקמה להפצת ריח
סירי חפירהRubbermaidN/Aזמין מסחרית. המיכלים שונו כך שיתאימו למנגנון במעבדה
שבבי בננה מיובשים וממותקים מלאיוחביתN/Aזמינים מסחרית. תגמול בעל ערך גבוה במשימת
JB מנגנוןN/Aהמכשיר נוצר במעבדה
תוכנת הקלטת אירועים JWatcherמעבדת התנהגות בעלי חיים, MacquarieUniversity גרסה 1.0זמינה להורדה בחינם באינטרנט. משמש לניקוד התנהגות חפירה במהלך משימת JB
תמצית מנטהFleiborN/Aבאופן מסחרי "מנטה (Solució n)". ריח גירוי מפלה
דיאטת מכרסמיםEnvigo2914Teklad גלובלי 14% חלבון דיאטות תחזוקת מכרסמים. תגמול בעל ערך נמוך במשימת JB ותזונה קבועה בכלוב ביתי
תוכנה סטטיסטית SASSAS גרסה 9.4תוכנות דומות אחרות (למשל R) מתאימות גם
תמצית ונילפליבורזמינה מסחרית "Vainilla (Solució n)". ריח גירוי מפלה
מצלמת וידאוSonyDCR-SX22מצלמת יד של סוני.
JB

מקורות

  1. Mathews, A., MacLeod, C. Cognitive vulnerability to emotional disorders. Annual Review of Clinical Psychology. 1, 167-195 (2005).
  2. Mathews, A., MacLeod, C. Cognitive approaches to emotions. Anual Review of Psychology. 45 (1), 25-50 (1994).
  3. Blanchette, I., Richards, A. The influence of affect on higher level cognition: A review of research on interpretation, judgement, decision making and reasoning. Cognition and Emotion. 24 (4), 561-595 (2010).
  4. MacLeod, C., Cohen, I. L. Anxiety and the interpretation of ambiguity: A text comprehension study. Journal of Abnormal Psychology. 102 (2), 238-247 (1993).
  5. Everaert, J., Podina, I. R., Koster, E. H. W. A comprehensive meta-analysis of interpretation biases in depression. Clinical Psychology Review. 58, 33-48 (2017).
  6. Haselton, M. G., Nettle, D. The paranoid optimist: An integrative evolutionary model of cognitive biases. Personality and Social Psychology Review. 10 (1), 47-66 (2006).
  7. Mendl, M., Paul, E. Getting to the heart of animal welfare. The study of animal emotion. Stichting Animales. , Netherlands. (2017).
  8. Harding, E. J., Paul, E. S., Mendl, M. Cognitive bias and affective state. Nature. 427 (6972), 312(2004).
  9. Douglas, C., Bateson, M., Walsh, C., Bédué, A., Edwards, S. A. Environmental enrichment induces optimistic cognitive biases in pigs. Applied Animal Behaviour Science. 139 (1-2), 65-73 (2012).
  10. Paul, E. S., Harding, E. J., Mendl, M. Measuring emotional processes in animals: The utility of a cognitive approach. Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 29 (3), 469-491 (2005).
  11. Mendl, M., Burman, O. H. P., Parker, R. M. A., Paul, E. S. Cognitive bias as an indicator of animal emotion and welfare: Emerging evidence and underlying mechanisms. Applied Animal Behaviour Science. 118 (3-4), 161-181 (2009).
  12. Rygula, R., Pluta, H., Popik, P. Laughing rats are optimistic. PLoS ONE. 7 (12), 51959(2012).
  13. Boissy, A., et al. Assessment of positive emotions in animals to improve their welfare. Physiology and Behavior. 92 (3), 375-397 (2007).
  14. Ross, M., Garland, A., Harlander-Matauschek, A., Kitchenham, L., Mason, G. Welfare-improving enrichments greatly reduce hens' startle responses, despite little change in judgment bias. Scientific Reports. 9 (1), 1-14 (2019).
  15. Lagisz, M., et al. Optimism, pessimism and judgement bias in animals: A systematic review and meta-analysis. Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 118, 3-17 (2020).
  16. Canadian Council on Animal Care CCAC Animal Data Report 2019. , Available from: https://ccac.ca/Documents/AUD/2019-Animal-Data-Report.pdf (2019).
  17. Report From the Commission to the European Parlaiment and the Council. European Commission. , Available from: https://eur-lex.europa.eu/legal-content/EN/TXT/HTML/?uri=CELEX:52020DC0016&from=EN (2020).
  18. Cryan, J. F., Holmes, A. Model organisms: The ascent of mouse: Advances in modelling human depression and anxiety. Nature Reviews Drug Discovery. 4 (9), 775-790 (2005).
  19. Resasco, A., et al. Cancer blues? A promising judgment bias task indicates pessimism in nude mice with tumors. Physiology and Behavior. 238, 113465(2021).
  20. Percie du Sert, N., et al. The ARRIVE guidelines 2.0: Updated guidelines for reporting animal research. Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 40 (9), 1769-1777 (2020).
  21. Gouveia, K., Hurst, J. L. Optimising reliability of mouse performance in behavioural testing: The major role of non-aversive handling. Scientific Reports. 7, 44999(2017).
  22. Gygax, L. The A to Z of statistics for testing cognitive judgement bias. Animal Behaviour. 95, 59-69 (2014).
  23. Gaskill, B. N., Garner, J. P. Power to the people: Power, negative results and sample size. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science: JAALAS. 59 (1), 9-16 (2020).
  24. MacLellan, A., Adcock, A., Mason, G. Behavioral biology of mice. Behavioral Biology of Lab Animals. , 89-111 (2021).
  25. Walker, M., et al. Mixed-strain housing for female C57BL/6, DBA/2, and BALB/c mice: Validating a split-plot design that promotes refinement and reduction. BMC Medical Research Methodology. 16 (11), (2016).
  26. Weber, E. M., Dallaire, J. A., Gaskill, B. N., Pritchett-Corning, K. R., Garner, J. P. Aggression in group-housed laboratory mice: Why can't we solve the problem. Lab Animal. 46 (4), 157-161 (2017).
  27. Nip, E., et al. Why are enriched mice nice Investigating how environmental enrichment reduces agonism in female C57BL / 6, DBA / 2, and BALB / c mice. Applied Animal Behaviour Science. 217, 73-82 (2019).
  28. Tilly, S. C., Dallaire, J., Mason, G. J. Middle-aged mice with enrichment-resistant stereotypic behaviour show reduced motivation for enrichment. Animal Behaviour. 80 (3), 363-373 (2010).
  29. Fureix, C., et al. Stereotypic behaviour in standard non-enriched cages is an alternative to depression-like responses in C57BL/6 mice. Behavioural Brain Research. 305, 186-190 (2016).
  30. Nip, E. The long-term effects of environmental enrichment on agonism in female C57BL/6, BALB/c, and DBA/2 mice. Thesis Dissertation. , University of Guelph. (2018).
  31. Wei, J., Carroll, R. J., Harden, K. K., Wu, G. Comparisons of treatment means when factors do not interact in two-factorial studies. Amino Acids. 42 (5), 2031-2035 (2012).
  32. Ruxton, G. D., Neuhäuser, M. When should we use one-tailed hypothesis testing. Methods in Ecology and Evolution. 1 (2), 114-117 (2010).
  33. Young, J. W., et al. The odour span task: A novel paradigm for assessing working memory in mice. Neuropharmacology. 52 (2), 634-645 (2007).
  34. Latham, N., Mason, G. From house mouse to mouse house: The behavioural biology of free-living Mus musculus and its implications in the laboratory. Applied Animal Behaviour Science. 86 (3-4), 261-289 (2004).
  35. Jones, S., et al. Assessing animal affect: an automated and self-initiated judgement bias task based on natural investigative behaviour. Scientific Reports. 8 (1), 12400(2018).
  36. Novak, J., et al. Effects of stereotypic behaviour and chronic mild stress on judgement bias in laboratory mice. Applied Animal Behaviour Science. 174, 162-172 (2016).
  37. Krakenberg, V., von Kortzfleisch, V. T., Kaiser, S., Sachser, N., Richter, S. H. Differential effects of serotonin transporter genotype on anxiety-like behavior and cognitive judgment bias in mice. Frontiers in Behavioral Neuroscience. 13, 263(2019).
  38. Krakenberg, V., et al. Technology or ecology? New tools to assess cognitive judgement bias in mice. Behavioural Brain Research. 362, 279-287 (2019).
  39. Krakenberg, V., et al. Effects of different social experiences on emotional state in mice. Scientific Reports. 10, 15255(2020).
  40. Bračić, M., Bohn, L., Krakenberg, V., Schielzeth, H., Kaiser, S. Once an optimist, always an optimist? Studying cognitive judgment bias in mice. EcoEvoRxiv. , (2021).
  41. Jones, S., Paul, E. S., Dayan, P., Robinson, E. S. J., Mendl, M. Pavlovian influences on learning differ between rats and mice in a counter-balanced Go/NoGo judgement bias task. Behavioural Brain Research. 331, 214-224 (2017).
  42. Roelofs, S., Boleij, H., Nordquist, R. E., vander Staay, F. J. Making decisions under ambiguity: Judgment bias tasks for assessing emotional state in animals. Frontiers in Behavioral Neuroscience. 10 (119), 1-16 (2016).
  43. Sherwin, C. M., Haug, E., Terkelsen, N., Vadgama, M. Studies on the motivation for burrowing by laboratory mice. Applied Animal Behaviour Science. 88 (3-4), 343-358 (2004).
  44. Deacon, R. M. J. Burrowing: A sensitive behavioural assay, tested in five species of laboratory rodents. Behavioural Brain Research. 200 (1), 128-133 (2009).
  45. MacDougall-Shackleton, S. A., Bonier, F., Romero, L. M., Moore, I. T. Glucocorticoids and "stress" are not synonymous. Integrative Organismal Biology. 1 (1), 1-8 (2019).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

הערכה של הטיית שיפוט עכברים באמצעות משימת חפירת חוש הריח
צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.