| <חזק>ציוד ואספקה: | | | |
|---|
| קופסאות גידול | Aquaneering | ZHCT100 | |
|---|
| Dow Corning גריז ואקום גבוה | Sigma או ספק שווה ערך | Z273554 | |
|---|
| צלוחיות Erlenmeyer (125 מ"ל) | | | להכנת צלצולים מותאמים של מארק (MMR) עם אנטיביוטיקה לדגירה לאחר הניתוח. |
|---|
| מלקחיים עדינים - Dumont #5 | Fine Science Tools (FST) | 11252-20 | |
|---|
| פיפטות פסטר מזכוכית | DWK Lifescience | 63A53 & 63A53WT | לפיפטינג עוברים וזחלים. |
|---|
| שקופיות זכוכית למיקרוסקופיה | VWR או ספק שווה ערך | 48311-703 | ניתן להזמין שקופיות מיקרוסקופ זכוכית סטנדרטיות מספקי מעבדה רבים ושונים. |
|---|
| כלי זכוכית כולל בקבוקים מדורגים וצילינדרים מדורגים | | | לייצור ואחסון תמיסות. |
|---|
| חומרת ACE שרף אפוקסי 2 חלקים | או ספק שווה ערך אחר של Gorilla Glue או מזרק שווה ערך | של | 0.85 אונקיות |
|---|
| https://www.acehardware.com/departments/paint-and-supplies/tape-glues-and-adhesives/glues-and-epoxy/1590793 צינור מיקרוצנטריפוגה (1.7 מ"ל) | VWR או ספק שווה ערך | 22234-046 | |
|---|
| מחזיק סיכה מצופה ניקל (אורך 17 ס"מ) | כלי מדע עדינים (FST) | 26018-17 | להחזיק חוט טונגסטן בזמן השחזה וביצוע ניתוחים/דיסקציות. |
|---|
| מסננת תה רשת ניילון או שווה ערך | עלי אקספרס או שווה ערך | | לקטיף ביצי דג זברה לאחר ההטלה; |
|---|
| https://www.aliexpress.com/item/1005002219569756.html מהדק | | | למכשיר להשחזת מחט טונגסטן. |
|---|
| צלחות פטרי 100 מ"מ | פישר ספק מדעי או שווה ערך | 50-190-0267 | |
|---|
| צלחות פטרי 35 מ"מ | ספק מדעי או שווה ערך | 08-757-100A | |
|---|
| משאבת פיפטה | SP Bel-Art או שווה ערך | F37898-0000 | |
|---|
| אשלגן הידרוקסיד (KOH) | סיגמא | 909122 | עבור מכשיר להשחזת מחט טונגסטן. הכינו תמיסה של 10% w/v של KOH במכסה המנוע על ידי הוספת כדורים למים נטולי יונים. |
|---|
| ספק כוח (מתח משתנה) | | | עבור מכשיר להשחזת מחט טונגסטן. כל ספק כוח עם מתח משתנה יעבוד (אפילו כזה המשמש לאלקטרופורזה בג'ל). |
|---|
| ערכת אלסטומר Sylgard 184 | Dow Corning | 3097358 | |
|---|
| (קוטר 0.125 מ"מ)World | Precision Instruments (WPI)TGW0515 | | חידוד להסרת העין וניתוח זחלים. |
|---|
| בלוק חום בטמפרטורה משתנה | מחסן המעבדה או ספק שווה ערך | BSH1001 או BSH1002 | מוגדר ל-40-42 מעלות; C לפני ניסויים. |
|---|
| צנצנת זכוכית עם פה רחב עם מכסה (למשל, ריבה נקייה או צנצנת סלסה) | | | למכשיר להשחזת מחט טונגסטן. |
|---|
| חוטים עם מובילי | | | למכשיר השחזת מחט טונגסטן. |
|---|
| <מיקרוסקופים חזקים>: מיקרוסקופ | | | |
|---|
| מנתח | כל סוג יעבוד אך עדיף אור משודר מתכוונן על בסיס מראה. | | |
|---|
| | קונפוקלי לסריקת לייזר | High NA, 20-25x טבילה במים עדשה אובייקטיבית מומלצת. תוכנת בקרת מיקרוסקופ ולכידת תמונות (NIS-Elements by Nikon) משמשת כאן אך כל מיקרוסקופ קונפוקלי יעבוד. |
| <חזק>ריאגנטים לניתוחים ודיסקציות: | | | |
|---|
| סידן כלוריד דיהידראט | סיגמא | C7902 | עבור הצלצולים המותאמים של מארק (MMR) ומדיום העובר (E3). |
|---|
| HEPES | Sigma | H7006 | עבור הצלצולים המותאמים (MMR) של מארק. |
|---|
| נקודת התכה נמוכה agarose | Invitrogen | 16520-050 | מייצרים 1% במדיום עוברי (E3) או בצלצולים המותאמים של מארק (MMR). |
|---|
| מגנזיום כלוריד הקסהידראט | סיגמא | 1374248 | למדיום עוברי (E3). |
|---|
| מגנזיום גופרתי | Sigma | M7506 | עבור הצלצולים המותאמים של מארק (MMR). |
|---|
| Paraformaldehyde | Electron Microscopy Sciences | 19210 | לדלל 8% (w/v) מלאי עם 2x PBS מרוכז (מדולל ממלאי PBS פי 10). |
|---|
| פניצילין/סטרפטומיצין | סיגמא | P4333-20ML | מדלל 1:100 בצלצולים המותאמים של מארק. |
|---|
| טבליות מלח חוצץ פוספט (PBS) | Diagnostic BioSystems | DMR E404-01 | הכינו מלאי פי 10 במים נטולי יונים, חיטוי ואחסנו בטמפרטורת החדר. יש לדלל לריכוז עבודה פי 1. |
|---|
| אשלגן כלורי | Sigma | P3911 | עבור הצלצולים המותאמים של מארק (MMR) ומדיום העובר (E3). |
|---|
| נתרן כלורי | סיגמא | S9888 | עבור הצלצולים המותאמים של מארק (MMR) ומדיום העובר (E3). |
|---|
| נתרן הידרוקסיד | Sigma | S5881 | הכינו 10 M והשתמשו בו כדי להתאים את ה-pH של MMR ל-7.4. |
|---|
| סוכרוז | סיגמא | S9378 | |
|---|
| Tricaine-S | Pentair | 100G #TRS1 | מתכון: https://zfin.atlassian.net/wiki/spaces/prot/pages/362220023/TRICAINE |
|---|
| <חזק>ריאגנטים לאימונוהיסטוכימיה: | | | |
|---|
| Alexafluor 568 מתויג נוגדן משני לזיהוי ארנב IgG | Invitrogen | A-11011 | השתמש בדילול של 1:500 להרכבה שלמה אימונוהיסטוכימיה. |
|---|
| DAPI או ToPro3 | Invitrogen | 1306 או T3605 | מהווים תמיסות של 1 מ"ג/מ"ל ב-DMSO; דילול של 1:5,000 לצביעה נגדית. |
|---|
| דימתיל סולפוקסיד (DMSO) | Sigma | D8418 | מרכיב של מאגר אימונובלוק. |
|---|
| מתנול (MeOH) | Sigma | 34860 | ערבוב MeOH עם תמיסות מימיות כמו PBST הוא אקסותרמי. הכינו את פתרונות MeOH/PBST לפחות מספר שעות לפני הזמן או קררו אותם על קרח לפני השימוש. |
|---|
| סרום עיזים רגיל | ThermoFisher Scientific | 50-062Z | מרכיב של מאגר אימונובלוק. ניתן לצטט בנפחים של 1-10 מ"ל ולאחסן בטמפרטורה של -20 מעלות צלזיוס. |
|---|
| נוגדן ראשוני לזיהוי פוספוהיסטון H3 | Millipore | 06-570 | השתמש בדילול של 1:300 לאימונוהיסטוכימיה שלמה. |
|---|
| נוגדן ראשוני לזיהוי חלבון פלואורסצנטי אדום (RFP; מזהה נגזרות dsRed) | MBL International | PM005 | השתמש בדילול של 1:500 לאימונוהיסטוכימיה שלמה. |
|---|
| פרוטאינאז K (PK) | Sigma | P2308-10MG | להרכיב תמיסות מלאי של 10 מ"ג/מ"ל ב-PBS ולהשתמש ב-10 ומיקרו; גרם/מ"ל. |
|---|
| Triton X-100 | Sigma | T8787 | שימושי לייצור פתרון מלאי של 20% (v/v) ב-PBS. |
|---|
| <תוכנה חזקה>לניתוח נתונים | | | |
|---|
| ImageJ (פיג'י) | | | תוכנה חינמית לניתוח תמונה; https://imagej.net/software/fiji/ |
|---|
| תוכנה | | | חינמית לניתוח סטטיסטי והדמיית נתונים; https://www.rstudio.com/products/rstudio/download/ |
|---|
| Adobe Photoshop או GIMP | | | תוכנות עיבוד תמונה קנייניות (Adobe Photoshop ו-Illustrator) משמשות לעתים קרובות לחיבור דמויות). חלופה חינמית היא Gnu Image Manipulation Program (GIMP; https://www.gimp.org/) |
|---|
| Zebrafish זנים. מחקר זה השתמש בזני AB, TU, Tg[atoh7:RFP]. | | | זמין מ מרכזי משאבים בינלאומיים של דג הזברה בארה"ב (https://zebrafish.org/home/guide.php) או באירופה (https://www.ezrc.kit.edu/). ניתן לבקש זנים טרנסגניים מיוחדים שעדיין לא הופקדו באף אחד ממרכזי המשאבים ממעבדות בודדות לאחר הפרסום. |
|---|