מאמר שיטה

Genotyping מהיר של רקמות באמצעות עכבר חלץ-N-Amp רקמות סיגמא של ערכת ה-PCR

DOI:

10.3791/636

⸱

22 בינואר 2008

 , 
1Department of Developmental and Cell Biology, University of California, Irvine (UCI)

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Genotyping המלא של מדגם זנב עכבר, כולל עיכול רקמות readout PCR, נעשה באחת וחצי שעות באמצעות SYBR Sigma גרין חלץ-N-Amp רקמות PCR הערכה.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

גילוי הגנום של דנ"א באמצעות הגברה PCR וזיהוי על ג'ל electrophoretic היא הדרך הסטנדרטית כי גנוטיפ של דגימת רקמה נקבע. הכנה קונבנציונלי של רקמות עבור ה-DNA PCR מוכנים לעתים קרובות להימשך מספר שעות עד ימים, בהתאם המדגם רקמות. גנוטיפ של המדגם ובכך עשויה להתעכב מספר ימים, אשר אינו אופציה עבור סוגים שונים של ניסויים. כאן אנו מדגימים את genotyping להשלים מדגם זנב עכבר, כולל עיכול רקמות readout PCR, באחת וחצי שעות באמצעות SYBR Sigma גרין חלץ-N-Amp רקמות PCR קיט. ראשית, אנו מדגימים את החילוץ של רבע שעה של ה-DNA מן המדגם רקמות. ואז, אנחנו מדגימים את הזמן האמיתי לקריאה מתוך הגברה PCR של המדגם, המאפשר זיהוי של מדגם חיובית זה להיות מוגבר. יחד, readout מהיר החילוץ בזמן אמת לאפשר זיהוי מהיר של גנוטיפ של מגוון סוגים שונים של רקמות באמצעות שיטת ה-PCR של אמין.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אנא לחץ כאן כדי לראות את הפרוטוקול.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למחברים אין ניגודי עניינים להצהיר עליהם.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
<קישור ל-"http://www.sigmaaldrich.com/catalog/ProductDetail.do?lang=he&N4=XNATG%7CSIGMA&N5=חיפוש_שרשור_מספר_קטלוג%7Cמפתח_מותג&F=SPEC&cm_sp=affiliate-_-Jove-_-12346">ערכה ל-PCR של רקמות SYBR Green Extract-N-Ampערכת ריאגנטיםSigma-Aldrich<קישור ל-"http://www.sigmaaldrich.com/catalog/ProductDetail.do?lang=he&N4=XNATG%7CSIGMA&N5=SEARCH_CONCAT_PNO%7CBRAND_KEY&F=SPEC&cm_sp=affiliate-_-Jove-_-12346">XNATGכולל: תמיסת מיצוי, תמיסת ניטרול B, תמיסה להכנת רקמה, Extract-N-Amp SYBR Green PCR ReadyMix

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Extract N AmpDNAPCRQPCRSigmaPCR

מאמרים קשורים