הפרוטוקול הנוכחי מתאר אפיון אקוקרדיוגרפי של מורפולוגיה ותפקוד של החדר הימני במודל חולדה של יתר לחץ דם עורקי ריאתי.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
הערכה אקוקרדיוגרפית מקיפה של תפקוד החדר הימני במודל חולדה של יתר לחץ דם עורקי ריאתי
* These authors contributed equally
במאמר זה
סיכום
תקציר
יתר לחץ דם עורקי ריאתי (PAH) היא מחלה פרוגרסיבית הנגרמת על ידי היצרות כלי דם ועיצוב מחדש של העורקים הקטנים בריאות. עיצוב מחדש זה מוביל לעמידות מוגברת של כלי הדם הריאתיים, להחמרה בתפקוד החדר הימני ולמוות בטרם עת. הטיפולים המאושרים כיום עבור PAH מתמקדים בעיקר במסלולים מרחיבי כלי דם ריאתיים; עם זאת, שיטות הטיפול המתפתחות לאחרונה מתמקדות במסלולים חדשים אחרים המעורבים בפתוגנזה של המחלה, כולל שיפוץ החדר הימני (RV). טכניקות הדמיה המאפשרות הערכה אורכית של טיפולים חדשניים שימושיות מאוד לקביעת יעילותן של תרופות חדשות במחקרים פרה-קליניים. אקוקרדיוגרפיה טרנס-חזה לא פולשנית נותרה הגישה הסטנדרטית להערכת תפקוד הלב והיא נמצאת בשימוש נרחב במודלים של מכרסמים. עם זאת, הערכה אקוקרדיוגרפית של RV יכול להיות מאתגר בשל המיקום האנטומי שלה ואת המבנה. בנוסף, חסרות הנחיות סטנדרטיות לאקוקרדיוגרפיה במודלים פרה-קליניים של מכרסמים, דבר המקשה על ביצוע הערכה אחידה של תפקוד RV במחקרים במעבדות שונות. במחקרים פרה-קליניים, מודל הפגיעה במונוקרוטאלין (MCT) בחולדות נמצא בשימוש נרחב כדי להעריך את יעילות התרופות לטיפול ב-PAH. פרוטוקול זה מתאר הערכה אקוקרדיוגרפית של RV בחולדות PAH נאיביות וחולדות MCT.
מבוא
PAH היא מחלה פרוגרסיבית המוגדרת כלחץ עורקי ריאתי ממוצע במנוחה של יותר מ -20 מ"מ כספית1. שינויים פתולוגיים ב- PAH כוללים עיצוב מחדש של עורק הריאה (PA), היצרות כלי דם, דלקת והפעלה והתפשטות של פיברובלסטים. שינויים פתולוגיים אלה מובילים להתנגדות מוגברת של כלי הדם הריאתיים וכתוצאה מכך לעיצוב מחדש של החדר הימני, היפרטרופיה וכשל2. PAH היא מחלה מורכבת הכוללת הצלבה בין מספר מסלולי איתות. התרופות המאושרות כיום לטיפול ב-PAH מכוונות בעיקר למסלולים מרחיבי כלי דם, כולל מסלול חד-פוספט גואנוזין מחזורי של תחמוצת החנקן, מסלול פרוסטציקלין ומסלול אנדותלין. טיפולים המכוונים למסלולים אלה שימשו הן כמונותרפיה והן בטיפולים משולבים
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
כל הניסויים בפרוטוקול זה בוצעו בהתאם להנחיות הטיפול בבעלי חיים של אוניברסיטת אילינוי בשיקגו, הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים בשיקגו. חולדות Sprague Dawley (SD) זכרים שקלו בין 0.200-0.240 ק"ג בזמן הזרקת MCT; עם זאת, ניתן להשתמש בפרוטוקול המתואר במאמר זה עם טווח משקל גוף רחב יותר. בעלי החיים התקבלו ממקור מסחרי (ראו טבלת חומרים).
1. עיצוב הלימודים
- חיות
- השג חולדות SD זכרים ואפשר להם להתאקלם במשך 4-7 ימים. קבצו את החולדות על ידי קבוצת הניסוי בכלובים נקיים והחזיקו אותן בחדר מתוחזק בטמפרטורה של 20-26 מעלות צלזיוס (68-79 מעלות פרנהייט) ומואר באורות פלורסנט המתוזמנים לתת מחזור אור של 14 שעות....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
במחקר זה, חולדות שטופלו ב-MCT שימשו כמודל של PAH. ניתוח אקו לב בוצע ביום המחקר 23 לאחר מתן MCT, וכל המדידות והחישובים ייצגו ממוצעים משלושה מחזורים רצופים. פרמטרים אקוקרדיוגרפיים שהתקבלו מחולדות ביקורת (רכב: מים שעברו דה-יוניזציה) וחולדות שטופלו ב-MCT (60 מ"ג/ק"ג) מוצגים בטבלה 1.
תמונות מייצגות של תצוגת PLAX בחולדות ביקורת וחולדות שטופלו ב-MCT מוצגות באיור 1A. תמונות אלה משמשות כהערכה ראשונית של מיקום הלב ומורפולוגיה LV. הערכות כמותיות של ה-RV מתקב.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
הערכה אקוקרדיוגרפית של הקרוואן היא כלי גילוי רב ערך לבדיקת יעילותם של טיפולים חדשניים במודלים של PAH בבעלי חיים. אפיון מעמיק של מבנה הקרוואנים ותפקודם נחוץ כמטרות חדשניות בטיפול בשיפוץ קרוואנים 4,14. מחקר זה מתאר פרוטוקול מפורט המאפשר אפיון מוצלח של מבנה ותפקוד הקרוואנים.
הגיאומטריה המבנית המורכבת והמיקום מאחורי עצם החזה מקשים על אפיון אקוקרדיוגרפי של הקרון; לפיכך, תצוגות אקוקרדיוגרפיות שהשתנו משמשות כדי להקל על הדמיה של RV ולסייע בזיה.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
למחברים אין מה לחשוף.
תודות
עבודה זו נתמכה על ידי NHLBI K01 HL155241 ו- AHA CDA849387 שהוענקו למחבר P.C.R.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 0.9% הזרקת נתרן קלוריד USP | בקסטר | 2B1324 | |
| גלילי כותנה קלועים | 4MD פתרונות רפואיים | RIHD201205 | |
| חומר אפילציה | Wallgreens | מסיר שיער נאיר | |
| ג'ל אלקטרודות | מעבדות פרקר | 15-60 | |
| מערכת תמונת אולטרסאונד בתדר גבוה ותחנת הדמיה | FUJIFILM VisualSonics, Inc. | Vevo 2100 | |
| Isoflurane | MedVet | RXISO-250 | |
| זכר ספראג חולדות דולי מעבדות | צ'ארלס ריבר | CD 001 | CD IGS חולדות (Crl:CD(SD)) |
| מונוקרוטלין (MCT) | Sigma-Aldrich | C2401 | |
| בדיקת טמפרטורת פי הטבעת | פיזיטמפ | RET-3 | |
| Scivena Scientific | RES644 | גודל 3 ליטר | |
| מתמר אולטרסאונד מערך מצב מוצק | FUJIFILM VisualSonics, Inc. | מתמר Vevo MicroScan MS250S | |
| קליפרים דיגיטליים מנירוסטה קליפרים | דיגיטליים VWR | 62379-531 | |
| ג'ל אולטרסאונד | מעבדות פרקר | 11-08 | |
| תוכנת מעבדת Vevo | FUJIFILM VisualSonics, Inc. | וריסון 5.5.1 |
מקורות
- Galie, N., McLaughlin, V. V., Rubin, L. J., Simonneau, G. An overview of the 6th World Symposium on Pulmonary Hypertension. European Respiratory Journal. 53 (1), 1802148(2019).
- Tyagi, S., Batra, V. Novel therapeutic approaches of pulmonary arterial hyp....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
