הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

מודל עכבר של פיברוזיס ריאתי המושרה על ידי נבוליזציה של בלומיצין באף

4.6K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/64097

⸱

20 בינואר 2023

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Pulmonary and Critical Care Medicine, Center of Respiratory Medicine, China-Japan Friendship Hospital, National Clinical Research Center for Respiratory Diseases, Institute of Respiratory Medicine, Chinese Academy of Medical Sciences, 2Graduate School of Peking Union Medical College, Chinese Academy of Medical Science and Peking Union Medical College, 3Capital Medical University, 4Beijing University of Chinese Medicine, 5Tianjin Chest Hospital, 6Institute of Clinical Medical Sciences, China-Japan Friendship Hospital, 7Beijing Key Laboratory for Immune-Mediated Inflammatory Diseases, Institute of Clinical Medical Sciences, China-Japan Friendship Hospital

במאמר זה

סיכום

מודלים שונים של בעלי חיים של פיברוזיס ריאתי הוקמו באמצעות בלומיצין כדי להבהיר את הפתוגנזה של פיברוזיס ריאתי ולמצוא מטרות תרופות חדשות. עם זאת, רוב המודלים פיברוזיס ריאתי המכוונים לרקמת הריאה יש מתן תרופות לא אחיד. כאן, אנו מציעים מודל של פיברוזיס ריאתי אחיד המושרה על ידי nebulization בלומיצין האף.

תקציר

פיברוזיס ריאתי אופייני למספר מחלות ריאה אנושיות הנובעות מסיבות שונות. בהתחשב בכך שאפשרויות הטיפול מוגבלות למדי, מודלים של עכברים ממשיכים להיות כלי חשוב לפיתוח אסטרטגיות אנטי-פיברוטיות חדשות. במחקר זה, מתן תוך ריאתי של בלומיצין (BLM) מתבצע על ידי ערפיליזציה של האף כדי ליצור מודל עכברי של פיברוזיס ריאתי המחקה באופן הדוק מאפייני מחלה קליניים. עכברי C57BL/6 קיבלו BLM (7 U/mL, 30 דקות ליום) על ידי ערפיליזציה באף במשך 3 ימים רצופים והוקרבו ביום 9, 16 או 23 כדי לצפות בשינויים דלקתיים ופיברוטיים ברקמת הריאה. BLM אירוסולי באף התמקד ישירות בריאות, וכתוצאה מכך דלקת ריאות נרחבת ואחידה ופיברוזיס. לפיכך, יצרנו בהצלחה מודל עכברי ניסיוני של פיברוזיס ריאתי אנושי טיפוסי. שיטה זו יכולה לשמש בקלות כדי ללמוד את ההשפעות של מתן אירוסולים שונים באף על פתופיזיולוגיה של הריאות ולאמת טיפולים אנטי דלקתיים ואנטי פיברוטיים חדשים.

מבוא

פיברוזיס ריאתי הוא תהליך מחלה פרוגרסיבי שבו שקיעת יתר של רכיבי מטריצה חוץ-תאיים, בעיקר קולגן מסוג I, באינטרסטיציום של הריאות מובילה לתפקוד ריאות לקוי1. הפתופיזיולוגיה של פיברוזיס ריאתי מורכבת, ואפשרויות הטיפול כיום מוגבלות למדי. מודלים עכבריים נותרו כלי חשוב לחקר המנגנונים הפתוגניים התורמים להופעתה והתקדמותה של המחלה, כמו גם אסטרטגיות חדשות לפיתוח תרופות.

מגוון מודלים של פיברוזיס ריאתי בבעלי חיים מסתמכים על החדרה תוך-טרכאלית של BLM 2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12. עם זאת, התפלגות השינויים הפיברוטיים שגורם BLM בריאות אינה אחידה, ובעלי החיים נמצאים בסכנת חנק בתהליך ההחדרה. למרות שהזרקה תוך צפקית של BLM גורמת לשינויים פיברוטיים אחידים יחסית בריאה, היא דורשת מינונים מרובים בגלל מיקוד תרופתי לא מספיק. מתן תרסיס תוך טרכאלי באמצעות לרינגוסקופ אינו דורש טרכאוטומיה או ניקוב, וחלוקת התרופות המתקבלת בתוך הריאה היא אופטימלית. עם זאת, החלקיקים האירוסוליים גדולים (5-40 מיקרומטר), ולכן אינם יכולים להגיע לאזור התת-פלאורלי של רקמת הריאה.

במחקר זה, ניהול תוך ריאתי של BLM מתבצע על ידי nebulization האף. במהלך הערפיליזציה, העכברים נשמו באופן ספונטני ושאפו את חלקיקי התרופה. גודלם של החלקיקים האירוסוליים היה 2.5-4 מיקרומטר, מה שאפשר להם לא רק להתפזר באופן שווה ברחבי הריאה אלא גם להגיע לאזור התת-פלאורלי. תחת הגדלה נמוכה, המאפיינים ההיסטופתולוגיים המשמעותיים ביותר של הריאות של חולים עם פיברוזיס ריאתי אידיופתי (IPF) הם חומרת הנגעים המשתנה, התפלגות לא עקבית, התפלגות לסירוגין של נגעים בפאזה שונה, ונוכחות של דלקת אינטרסטיציאלית, נגעים פיברוטיים ושינויים בריאה חלת דבש, לסירוגין עם רקמת ריאה רגילה. שינויים פתולוגיים אלה כוללים בעיקר את parenchyma subpleural היקפי או מחיצת לובולרית סביב הסמפונות. לפיכך, בהתחשב בכך שגישה זו מאפשרת לחלקיקי BLM להגיע לאזור התת-פלאורלי של הריאות, מודל זה מדמה באופן הדוק את המאפיינים הקליניים של המחלה בבני אדם.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

הוועדה ללימודי בעלי חיים של בית החולים לידידות סין-יפן (בייג'ינג, סין) אישרה את כל ההליכים המערבים עכברים שבוצעו במסגרת מחקר זה (NO.190108). עכברים הוחזקו בחדר החיות הסטרילי של מכון המחקר הרפואי הקליני ידידות סין-יפן, עם טמפרטורת חדר של 20-25 מעלות צלזיוס, לחות יחסית של 40%-70%, עוצמת אור בעלי חיים של 15-20 LX, ואור וחושך לסירוגין במשך 12 שעות / 12 שעות. לבעלי החיים הייתה גישה חופשית למזון ולמים.

1. עכברים

  1. ודא כי כל בעלי החיים מאוקלמים במתקן הדיור במשך 7 ימים לפני nebulization.
  2. השתמש בעכברי C57BL/6 זכרים, בגילאי 8-10 שבועות, לערפיליזציה.

2. ערפיליזציה של בלומיצין באף

  1. הכנת בלומיצין
    זהירות: BLM הוא רעל כימי, אשר הורג גידולים אך עלול גם לפגוע בתאים נורמליים וברקמות נורמליות.
    1. הכינו פתרון BLM על ספסל נקי.
      1. כדי להשיג את ריכוז העבודה (7 U / mL), להשהות מחדש 15 U של הידרוכלוריד BLM ב 2.14 מ"ל של מלוחים רגילים. ערבבו בזהירות את BLM המושעה עד שהוא מומס לחלוטין.
    2. אחסנו את פתרון העבודה בטמפרטורה של 4°C או על קרח והשתמשו תוך יום אחד. לפני הערפיליזציה, הביאו את תמיסת BLM לטמפרטורת החדר.
  2. הרדמה
    1. היכונו להרדמה על ידי המסת 0.1 גרם של נתרן pentobarbital ב 10 מ"ל של מלוחים רגילים. יש לאחסן את תמיסת ההרדמה העובדת במקום חשוך בטמפרטורה של 4°C ולהשתמש תוך 3 ימים.
    2. מרדימים את העכברים על ידי הזרקת נתרן pentobarbital לתוך הבטן, באמצעות מזרק 1 מ"ל עם מחט 26 גרם, במינון סופי של 75 מ"ג / ק"ג משקל הגוף.
      הערה: במחקר זה, העכברים לא הגיבו למינון זה במשך 30 דקות לפחות. במידת הצורך, התאימו את המינון בהתייעצות עם הווטרינר בהתאם לתגובת העכבר.
    3. לאחר מספר דקות, לחץ על אצבעות רגלי העכבר המורדם עם האצבע המורה והאגודל כדי לוודא שרפלקס נסיגת הגפיים נעלם.
  3. הכנת מערכת הערפיליזציה
    1. לאחר כיול המכשיר, אבטחו את העכבר המורדם באמצעות כיסוי רשת רך (איור 1A), הוסיפו את תמיסת BLM העובדת לראש האטומיזציה העליון של מגדל החשיפה באמצעות פיפטה (איור 1B), והפעילו את הנבולייזר במשך 30 דקות כדי להשיג אטומיזציה יציבה.
      הערה: זרימת העבודה מוצגת באיור 1C,D. לקבלת שלבי פעולה מפורטים של התוכנה, עיין באיור המשלים S1 ובאיור המשלים S2, הממחישים שלבים 2.3.1.1-2.3.1.9.
      1. לחצו פעמיים על האייקון flexiWare 8 (איור משלים S1A), לחצו על ניסוי (איור משלים S1B) ולחצו על כפתור מחקר חדש (איור משלים S1C).
      2. ערוך את שם הניסוי (איור משלים S1D) וערוך את הכותרת והבעלים (איור משלים S1E).
      3. בחר את תבנית IX-4DIO (איור משלים S1F), הזן את האופרטור (איור משלים S1G), לחץ על הלחצן אישור (איור משלים S1H) | הלחצן הבא (איור משלים S1I).
      4. בחר את המשאבה ולחץ על הבא (איור משלים S1J) | הלחצן הבא (איור משלים S2A) | הלחצן הבא (איור משלים S2B) | לחצן סיום (איור משלים S2C).
      5. לחץ על הגדרות עבור רציף-1Lmin (שלוש נקודות, איור משלים S2D) | DIO1, הגדר את מחזור העבודה (%) ל- 25% ולאחר מכן לחץ על אישור (איור משלים S2E).
      6. לחץ על DIO2, הגדר את מחזור העבודה (%) ל- 25% ולאחר מכן לחץ על אישור (איור משלים S2F).
      7. לחץ על DIO3, הגדר את מחזור העבודה (%) ל- 25% ולאחר מכן לחץ על אישור (איור משלים S2G).
      8. לחץ על DIO4, הגדר את מחזור העבודה (%) ל- 25% ולאחר מכן לחץ על אישור (איור משלים S2H).
      9. לחץ על הלחצן הירוק העליון (משמאל) כדי להתחיל לפעול, ולחץ על הלחצן האדום (מימין) כדי להפסיק את העבודה. לחץ על ה- x בפינה השמאלית העליונה כדי לצאת (איור משלים S2I).
    2. בקבוצת BLM, אאטום 12 עכברים בכל פעם, במשך ארבע פעמים בסך הכל, עד לסך של 48 עכברים. אטומיזציה של שישה עכברים בכל פעם בקבוצת הביקורת הרגילה עם מי מלח רגילים.
  4. שיקום בעלי חיים
    1. לאחר טיפול בנבולייזר במשך 30 דקות, להעביר את העכבר לכלוב התאוששות מצויד כרית חימום.
    2. התבוננו בעכברים עד שהם בהכרה מלאה.
    3. ברגע שהעכבר מאושר במצב טוב, מה שאומר שהוא יכול לנוע בחופשיות, החזירו אותו לכלוב המקורי שלו. אין להניח אותו עם בעלי חיים אחרים עד שהוא התאושש לחלוטין.
    4. בדוק מדדים פיזיולוגיים, כולל קצב נשימה, הישרדות וכל תסמינים, פעמיים במהלך 24 השעות שלאחר הטיפול ב- BLM.

3. עיבוד רקמת ריאה

  1. בגיל 9, 16 ו-23 ימים לאחר מתן BLM, יש להקריב שישה עכברים על ידי הזרקתם לבטן עם נתרן פנטוברביטל (מינון סופי של 100 מ"ג/ק"ג משקל גוף).
  2. הסר את קנה הנשימה ואת הריאות ומיד לשטוף עם מלוחים פוספט קר.
  3. יש לקבע את הריאה השמאלית במאגר פורמלין נייטרלי 10% למשך 24 שעות לפני הטמעת פרפין.
  4. צביעת Hematoxylin-eosin (צביעת H&E)
    1. לייבש את רקמת הריאה הקבועה במייבש.
    2. הניחו את גוש רקמת הריאה המיובשת בקופסה להמסת שעווה בטמפרטורה של 56°C למשך שעה אחת.
    3. להטבעה, יוצקים את הפרפין המומס לקופסת התבנית, ואז מניחים במהירות את גוש הרקמה ספוג הפרפין בתחתית קופסת התבנית, מצננים ומתמצקים.
    4. מקבעים את גוש השעווה המוטבע על המיקרוטום, מתאימים את שולחן החיתוך למעלה ולמטה למיקום מתאים, דוחפים את הלהב, מכוונים את קנה המידה וחותכים פרוסה בעובי של 4 מיקרומטר. השתמשו בפינצטה כדי להניח את הפרוסה בקופסת תצוגה מלאה במים כדי לפתוח את התלתלים (החלק הקדמי למעלה).
    5. מדביקים ואופים את הפרוסות. לאחר שפרוסת השעווה התכרבלה לחלוטין, הניחו את מגלשת הזכוכית על פרוסת השעווה בזווית של 135°, השתמשו בפינצטה כדי להעביר את פרוסת השעווה אל מגלשת הזכוכית, הרימו את מגלשת הזכוכית והתאימו את מיקום פרוסת השעווה לפי הצורך. הניחו את המגלשות עם פרוסות שעווה רכובות על שולחן בטמפרטורה קבועה בטמפרטורה של 47°C למשך דקה אחת כדי לאפשר שוב לפרוסות להתכרבל; לאחר שהפרוסות שטוחות לחלוטין, הניחו את המגלשות באינקובטור של 62 מעלות צלזיוס למשך שעה אחת.
    6. להסרת שעווה, מניחים את המגלשות האפויות בקסילן למשך 20 דקות פעמיים.
    7. להחזרת נוזלים, הניחו את המגלשות בסדרת אלכוהול מדורגת כדי להחזיר לחות לפרוסות רקמת הריאה: 100% אלכוהול למשך 2 דקות, 95% אלכוהול למשך דקה, 90% אלכוהול למשך דקה, 85% אלכוהול למשך דקה, 75% אלכוהול למשך דקה אחת ומים מזוקקים למשך 3 דקות.
    8. מכתימים את החלקים בהמטוקסילין למשך 5 דקות. יש לשטוף במשך דקה אחת פעמיים, ולאחר מכן להכניס לתמיסת התמיינות אלכוהול של 0.5% חומצה הידרוכלורית למשך 5 שניות, לשטוף במים למשך דקה אחת פעמיים, להכניס לתמיסת צביעה כחולה למשך 8-10 שניות, לשטוף פעמיים במי ברז ולהכתים באאוזין למשך 30 שניות.
    9. להתייבשות ועיכוב, יש להניח את החלקים המוכתמים ב-75% אלכוהול למשך דקה, 85% אלכוהול למשך דקה, 90% אלכוהול למשך דקה, 95% אלכוהול למשך דקה, 100% אלכוהול למשך דקה, ולאחר מכן קסילן למשך דקה אחת פעמיים, ולהסיר את כל הנוזלים הנותרים עם נייר סופג.
    10. להרכבה, יש להניח טיפה של תמיסת איטום מסטיק ניטרלית במרכז הפרוסה ולהרכיב כיסוי.
  5. תקן דירוג מורפולוגי של רקמת ריאה עכברית
    1. באמצעות השיטה שתוארה על ידי Ashcroft et al., יש חוקר עיוור לקבוצת הניסוי לבחור באופן אקראי שלושה שדות מיקרוסקופיים מכל דגימה, ולבחון את מידת פיברוזיס ריאתי בהגדלה 100x: כיתה 0, ריאה נורמלית; כיתה 1, alveoli נפוח מעט, פיברוזיס קל מקומי; כיתה 2, פיברוזיס מסומן (עובי של קיר alveolar גדול משלוש פעמים נורמלי), עם מוקדים סיביים; כיתה 3, אזורים רציפים של פיברוזיס (עובי של קיר alveolar שלוש פעמים גדול מהרגיל); כיתה 4, איחוי של מוקדים סיביים, כאשר האזור הפיברוטי מהווה פחות מ -10% מרקמת הריאה; כיתה 5, המוקדים הסיביים מאוחים, אזור הפיברוזיס הוא 10% עד 50%, והמבנה הנאדי נפגע באופן משמעותי; כיתה 6, מוקדים סיביים רציפים גדולים (יותר מ -50% מרקמת הריאה); כיתה 7, החלל alveolar מלא רקמה סיבית, bullae ריאתי נוכחים; כיתה 8, פיברוזיס מלא.
    2. הקצו ציון המתאים לציון לכל שדה ראייה (למשל, ציון 4 שווה לארבע נקודות), והניחו ציון לכל קבוצה של שש דוגמאות בנפרד.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

פגיעה ריאתית נגרמה על ידי BLM ערפילי, וחיות הביקורת עברו ערפיליזציה עם אותו נפח של מי מלח רגילים. העכברים עברו ערפיליזציה פעם ביום במשך 3 ימים, 30 דקות ביום, תוך שימוש בריכוז BLM של 7 U/mL. עכברים הוקרבו בימים 9, 16 ו-23 לאחר מתן BLM עבור צביעת H&E (איור 2B). נגעים פנאומוניים מפוזרים עם אובדן הארכיטקטורה הנאדית הרגילה, עיבוי מחיצה, נאדיות מוגדלות וחדירה מוגברת של תאים דלקתיים לאזורים הבין-תאיים והפריברונכיולריים נצפו בריאות של עכברים שקיבלו BLM בהשוואה לעכברים בקבוצת הביקורת. חומרת השינויים הפיברוטיי...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

הזרקה תוך טרכאלית של בלומיצין גורמת לתגובה דלקתית ופיברוטית חריפה בשתי הריאות ויכולה להיחשב כגישה יעילה לביסוס מודל עכברי ניסיוני של מחלת ריאות אינטרסטיציאלית אנושית. מתן תוך קנה הנשימה הוא המסלול הנפוץ ביותר של מתן 2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין ניגודי עניינים לחשוף.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מס '92068108).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
  bleomycinBioway / Nippon Kayaku Co Ltd  DP721תרופות מודל פיברוזיס
0.9% מי מלח להזרקהבקסטר הלת'קר (טיאנג'ין) ושות', בע"מהכנת בלאומיצין
1 מ"ל מזרקBD300481הרדמה של בעלי חיים
10% מאגר פורמלין ניטרליTechaLab Biotech Companyתיקון רקמת ריאה
15 מ"ל צינור צנטריפוגהקורנינג430790הכנה להרדמה
20 מעלות; מקרר Cקבוצת זבוב חדשBCD-213Kאחסן תרופות
4 & deg; C מקררNew-fly קבוצהBCD-213Kחנות תרופות
Adobe illustrator cc2020AdobeProcess images
כחול גב נוזליבייג'ינג כימי עבודותרקמות מכתים
ספסל נקיSuzhou Sujie טיהור ציוד ושות', בע"מהתמיינות להכנת בלאומיצין
בייג'ינג עבודותכימיות צביעת רקמות
איזון אלקטרונימטלר טולדוAA-160התכוננו להרדמה
כתם אאוזיןבייג'ינג יילי פיין כימיקלים ושות', בע"ממכתים רקמות
כרית חימוםHIDOMעכברים דגירה כתם
המטוקסיליןבייג'ינג Yili Fine Chemicals Co, Ltd.מאגר מכתים רקמות
פוספט חוצץ מלח (PBS)HycloneSH30256.01רקמת ריאה נקייה
תוכנת ציור פוטושופAdobeProcess images
SCIREQ INEXPOSEEMKA Biotech Beijing Co., Ltd.מכשיר אטומיזציה
מיקרוסקופ פלואורסצנטי זקוףאולימפוסBX53התבונן בפרוסה
נוזל

מקורות

  1. Raghu, G., et al. Diagnosis of idiopathic pulmonary fibrosis. An official ATS/ERS/JRS/ALAT clinical practice guideline. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 198 (5), e44-e68 (2018).
  2. Moore, B. B., Hogaboam, C. M. Murine models of pulmonary fibrosis. American Journal of Physiology. Lung Cellular and Molecular Physiology. 294 (2), L152-L160 (2008).
  3. Degryse, A. L., et al. Repetitive intratracheal bleomycin models several features of idiopathic pulmonary fibrosis. American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 299 (4), L442-L452 (2010).
  4. Sueblinvong, V., et al. Predisposition for disrepair in the aged lung. The American Journal of the Medical Sciences. 344 (1), 41-51 (2012).
  5. Peng, R., et al. Bleomycin induces molecular changes directly relevant to idiopathic pulmonary fibrosis: a model for "active" disease. PLoS One. 8 (4), e59348(2013).
  6. Izbicki, G., et al. Time course of bleomycin-induced lung fibrosis. International Journal of Experimental Pathology. 83 (3), 111-119 (2002).
  7. Aguilar, S., et al. Bone marrow stem cells expressing keratinocyte growth factor via an inducible lentivirus protects against bleomycin-induced pulmonary fibrosis. PLoS One. 4 (11), e8013(2009).
  8. Ortiz, L. A., et al. Mesenchymal stem cell engraftment in lung is enhanced in response to bleomycin exposure and ameliorates its fibrotic effects. Proceedings of the National Academy of Sciences. 100 (14), 8407-8411 (2003).
  9. Rojas, M., et al. Bone marrow-derived mesenchymal stem cells in repair of the injured lung. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 33 (2), 145-152 (2005).
  10. Ortiz, L. A., et al. Interleukin 1 receptor antagonist mediates the antiinflammatory and antifibrotic effect of mesenchymal stem cells during lung injury. Proceedings of the National Academy of Sciences. 104 (26), 11002-11007 (2007).
  11. Foskett, A. M., et al. Phase-directed therapy: TSG-6 targeted to early inflammation improves bleomycin-injured lungs. American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 306 (2), L120-L131 (2014).
  12. Hecker, L., et al. Reversal of persistent fibrosis in aging by targeting Nox4-Nrf2 redox imbalance. Science Translational Medicine. 6 (231), 231ra47(2014).
  13. Taooka, Y., et al. Effects of neutrophil elastase inhibitor on bleomycin-induced pulmonary fibrosis in mice. American Journal of Respiratory & Critical Care Medicine. 156 (1), 260-265 (1997).
  14. Gharaee-Kermani, M., Ullenbruch, M., Phan, S. H. Animal models of pulmonary fibrosis. Methods in Molecular Medicine. , 251-259 (2005).
  15. Orlando, F., et al. Induction of mouse lung injury by endotracheal injection of bleomycin. Journal of Visualized Experiments. (146), e58902(2019).
  16. Moore, B. B., et al. Animal models of fibrotic lung disease. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 49 (2), 167-179 (2013).
  17. Gauldie, J., Kolb, M. Animal models of pulmonary fibrosis: how far from effective reality. American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 294 (2), L151(2008).
  18. Jenkins, R. G., et al. An official American thoracic society workshop report: use of animal models for the preclinical assessment of potential therapies for pulmonary fibrosis. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 56 (5), 667-679 (2017).
  19. Moeller, A., et al. The bleomycin animal model: A useful tool to investigate treatment options for idiopathic pulmonary fibrosis. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology. 40 (3), 362-382 (2008).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

C57BL 6
מודל עכבר של פיברוזיס ריאתי המושרה על ידי נבוליזציה של בלומיצין באף
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.