הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

תסיסה משותפת של Marsdenia tenacissima עם Ganoderma lucidum והשפעה אנטי-סרטנית של מוצרי התסיסה

1.3K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/64687

⸱

16 בדצמבר 2022

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1School of Pharmacy, Minzu University of China, 2Ministry of Education, Key Laboratory of Ethnomedicine (Minzu University of China)

במאמר זה

סיכום

כאן, אנו מתארים פרוטוקול להקמת מערכת תסיסה משותפת שיטתית ומקיפה לייצור מוצרי טרנספורמציה ביולוגית עשירים בספונינים חריפים באמצעות Marsdenia tenacissima (Roxb.) וייט וארן. (MT) כמדיום תסיסה עבור Ganoderma lucidum. זה ישמש כהתייחסות מתודולוגית לפיתוח תרופות אתניות אחרות.

תקציר

Marsdenia tenacissima (Roxb.) וייט וארן. (MT), כתרופת צמחי מרפא סינית ודאי מסורתית, יש לה תכונות אנטי דלקתיות, אנטיבקטריאליות ואנטי גידוליות. עם זאת, רוב החומרים הפעילים העיקריים שלו הם אגליקונים, כגון טנציגנין A וטנסיגנין B. מכיוון שהזמינות הביולוגית של MT נמוכה ומרכיביו הפעילים הרפואיים מאתגרים לסינתזה, הוא נחקר בעיקר על ידי טרנספורמציה ביולוגית. מחקר זה נועד לייצר מוצרי טרנספורמציה ביולוגית עשירים בספונינים חריפים על ידי שימוש ב-MT כמדיום תסיסה עבור Ganoderma lucidum (G. lucidum).

באמצעות סינון ראשוני של שלוש פטריות מרפא, נמצא כי G. lucidum ו-Ophiocordyceps sinensis (O. sinensis) יכולים בדרך כלל לגדול במדיום עבור MT; לפיכך, יעילות התסיסה של שני סוגי הפטריות נבדקה באמצעות מודל עכברי של סרטן ריאות. לבסוף, התסיסה המשותפת של G. lucidum ו-MT נבחרה למחקר נוסף. ניתוח מטבולומי שאינו מטרה בוצע על תוצרי MT עם תסיסה משותפת של G. lucidum . זיהינו 12 ספונינים ספציפיים של MT מתוצרי התסיסה, וקיבלנו תרכובת מונומרית, tenacigenin A, ממוצרי התסיסה.

רוב הטנציגנין הראה מגמת עלייה משמעותית, דרך רמות טנציגנין A וטנסיגנין B. התוצאות הראו כי היעילות של MT השתפרה לאחר התסיסה על ידי G. lucidum. יתר על כן, הטרנספורמציה הביולוגית של גליקוזידים סטרואידים C21 ב-MT הייתה התגובה המרכזית בתהליך תסיסה זה. לסיכום, מחקר זה ביסס מערכת תסיסה משותפת שיטתית ומקיפה ושיטת הערכה פרמקודינמית ל-MT, שלא רק שיפרה את הניצול המלא של חומרים פעילים יעילים ב-MT אלא גם סיפקה התייחסות מתודולוגית לפיתוח תרופות אתניות אחרות.

מבוא

סרטן ריאות שייך לקטגוריה של "קרבונקל ריאות" ברפואה הסינית המסורתית. הפתוגנזה של קרבונקל ריאות היא חולשה של ה"צ'י" הבריא של החולים, חוסר איזון של יין ויאנג, רעלים וקיפאון בריאות, מה שמוביל לתפקוד לקוי של הריאות, חסימת דם ואיבוד נוזלים בריאה. לפיכך, קיפאון דם לטווח ארוך ורעלני כיח בריאות יוצרים מסת ריאות1. לכן, חיזוק הצ'י וסילוק גורמים פתוגניים הוא העיקרון הבסיסי לטיפול בסרטן הריאות. השיטות להזנת יין לאיזון יין ויאנג, ניקוי חום, ניקוי רעלים ופיזור קיפאון, השלמת צ'י והזנת יין וניקוי ליחה משמשות לטיפול ומניעה של היווצרות קרבונקלים ריאתיים2.

מרסדניה (שם מדעי: Marsdenia tenacissima ) הוא צמח מרפא ממשפחת ה-Asclepiadaceae (Marsdenia ssp.), הידוע גם בשם ווגוטנג. יש לו השפעות של פינוי חום וניקוי רעלים, הקלה על שיעול ואסטמה, ויש לו תכונות אנטי-גידוליות3. הזרקת Xiaoaiping, תכשיר העשוי מעשב יחיד של MT, נמצא בשימוש נרחב במרפאות ומראה השפעה אנטי-סרטנית טיפולית טובה4. עם זאת, עם גידול האוכלוסייה, הביקוש ל-MT גדל בחדות. בהתאם, אספקת משאבי MT פראיים אינה מספקת, ואיכות החומרים הרפואיים המעובדים אינה אחידה. ישנן בעיות כמו איכות ירודה של חומרי צמחים, תכולה לא יציבה של מרכיבים וזמינות ביולוגית נמוכה, המאיימות ברצינות על התפתחות MT. בין התרכובות הביו-אקטיביות הללו, ספונינים מ-MT נחקרו מאוד. זוהו יותר מ-100 ספונינים מ-MT; ניתן לחלק אותם לשני סוגים עיקריים: (1) C21 גליקוזידים סטרואידים ב-MT, כולל tenacissoside A-P, marsdenoside A-M, tenacigenoside A-L ו-tenacigenin A-D. (2) טריטרפנים פנטציקליים, כגון חומצה אולאנולית וחומצה אורסולית. מחקרים רבים הצביעו על כך שהפעילות האנטי-סרטנית של תמציות אתר נפט גבוהה יותר מהמולקולות הקוטביות ביותר מ-MT. לפיכך, כדאי להמיר את הפוליסכריד העיקרי של ספונינים מ-MT לאגלקון מינורי אחר של MT עם זמינות ביולוגית ופעילות ביולוגית גבוהה יותר5.

ביוטרנספורמציה, הידועה גם בשם ביוקטליזה, מתייחסת לתגובות הפיזיולוגיות והביוכימיות של טרנספורמציה או שינוי מבני של מצעים אקסוגניים על ידי שימוש באנזימים קשורים במערכות ביולוגיות6. הוא חסכוני יותר, בטוח יותר, סלקטיבי מבחינה אזורית וסטריאוסלקטיבי יותר מסינתזה כימית מסורתית ויכול לייצר כמה תרכובות ביו-אקטיביות שקשה להכין על ידי כימיה סינתטית קונבנציונלית 7,8. לכן, פיתוח הרפואה הסינית המסורתית והתרופות הטבעיות חיוני לקידום המודרניזציה והבינלאומיות של הרפואה הסינית המסורתית.

מערכת התסיסה המשותפת של MT הוקמה באמצעות טרנספורמציה ביולוגית. החומרים הרפואיים המקוריים עברו טרנספורמציה על ידי מערכות אנזימים מיקרוביאליות. מצד אחד, תמצית MT שימשה כמצע לייצור תרבית התסיסה של פטריות במצב זה. במקביל, תסיסה פטרייתית קיצרה את מחזור הרבייה של חיידקים, הפחיתה את עלויות הייצור ושיפרה את יעילות הייצור9. מצד שני, המשקעים המוגברים של רכיבים פעילים על ידי תסיסה פטרייתית מועילים, מייצרים רכיבים כימיים ויעילות משופרת10. השימוש בטכנולוגיית תסיסה דו-כיוונית נוזלית מועיל להגנה על החומרים הפעילים של חומרים רפואיים, שיפור היעילות, חיסכון במקורות תרופות ועשוי לייצר יעילות טובה יותר על ידי מתן טכניקות לשינוי מבני של חומרים פעילים של חומרי צמחים. יש חשיבות רבה לשיפור רמת המודרניזציה של הרפואה הסינית המסורתית.

במחקר זה, G. lucidum, O. sinensis ו-Inonotus obliquus (I. obliquus) נבחרו כמיקרואורגניזמים לתסיסה בשלב מוקדם לאחר סקירת הספרות, והזנים נבדקו מראש. לאחר מכן, זני התסיסה הסופיים נקבעו על ידי בחינת היעילות של הזנים המוקרנים באמצעות מודל עכבר הגידול. לבסוף, המטבוליטים הראשוניים והמטבוליטים המשניים של תוצרי התסיסה נותחו והוערכו באופן שיטתי על ידי LC-MS, וקיבלנו תרכובת מונומרית, tenacigenin A, מתוצרי תסיסה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

מחקר זה נערך בעקבות המלצות המרכז לחיות ניסוי של אוניברסיטת מינזו (No. ECMUC2019008AA). הפרוטוקול אושר על ידי הוועדה האתית של חיות ניסוי של אוניברסיטת מינזו. MT נאסף מקונמינג, מחוז יונאן.

1. הכנה ללימוד

  1. חלץ MT עם מים חמים (100 מעלות צלזיוס; MT/water = 1/10, w/v) למשך 30 דקות ולאסוף את שאריות מיצוי MT כחומר הבדיקה.
  2. שמור על קו תאי סרטן הריאות של עכבר LLC במדיום הנשר המותאם (DMEM) של Dulbecco בתוספת 10% סרום בקר עוברי, 100 U/mL פניצילין ו-100 מיקרוגרם/מ"ל סטרפטומיצין באווירה לחה ב-37 מעלות צלזיוס מתחת ל-5% CO2.
  3. שמור את עכברי C57BL/6J, בני 6-8 שבועות ובמשקל 19 ± 2 גרם, בחדר מבוקר סביבתי עם מחזור אור/חושך של 12 שעות/12 שעות ועם גישה בלתי מוגבלת למזון ומים. לחטא אותם באופן קבוע.

2. סינון ראשוני של זנים

  1. לחסן שלושה זני פטריות למדיום מוצק דקסטרוז אגר תפוחי אדמה (PDA) באמצעות טכניקות סטריליות ולגדל אותם בחושך בטמפרטורה של 28 מעלות צלזיוס. לאחר שהכלים מכוסים במלואם בפטריות, יש לאחסן אותם בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס.
  2. יש לחסן את הזנים שנשמרו במדיום המוצק PDA בתמיסת הזרעים של בקבוק השייק בשלב הראשון ולתרבית אותם בטמפרטורה של 28 מעלות צלזיוס, עם ניעור ב-120 סל"ד למשך 4-5 ימים. חסנו את נוזל הפטריות בשלב הראשון לתוך בקבוק השייק המכיל את נוזל הפטריות המשני ביחס נפח של 1:20 בשייקר טמפרטורה קבועה למשך 4-5 ימים.
  3. מדללים את ה-MT במים ל-100 מ"ג/ליטר (MT/מים) ומוסיפים את התמיסה לאגר ליצירת מדיום מוצק. יש לחסן 1 מ"ל מהנוזל הפטרייתי המשני של כל אחד משלושת הזנים לתוך התרבית המוצקה המכילה MT בלבד, ולאחר מכן לחלק למערכות תרבית G. lucidum-MT, I. obliquus-MT ו-O. sinensis-MT. מקם את מערכות התרבות הללו בטמפרטורה של 28 מעלות צלזיוס מבלי לרעוד בחושך.
  4. לאחר זמן מה, התבונן בצמיחת הזנים בשלוש מערכות התרבית הנ"ל, ובחר את הזנים שיכולים לגדול רק עם MT לבדיקה נוספת.

3. סינון מחדש של בחירת זנים

הערה: לאחר הקרנה ראשונית, רק G. lucidum ו-O. sinensis יכלו לגדול באופן נורמלי על מדיום מוצק המכיל MT. כדי לבחור עוד יותר את המערכת עם אפקט אנטי-גידולי טוב, נבדקה היעילות האנטי-גידולית במודל עכבר גידול מושתל.

  1. יש לחסן את G. lucidum ו-O. sinensis למדיום נוזלי המכיל רק MT-MT עם תסיסה משותפת של G. lucidum (MGF) ו-MT עם תסיסה משותפת של O. sinensis (MOF), ולתסוס במשך 10 ימים ב-28 מעלות צלזיוס עם ניעור ב-180 סל"ד.
  2. לאחר התסיסה יש לסנן את התפטיר דרך גזה ולייבש אותו. תמצית עם 80% אתנול 3 x 12 שעות.
  3. בדוק את הפעילות האנטי-גידולית של ה-MT המותסס והלא מותסס בעכברי C57BL/6J נושאי תאי גידול LLC.
    1. הזרקה תת עורית של תאי LLC (1.0 × 106 תאים ב-0.2 מ"ל של מי מלח עם חוצץ פוספט (PBS) לכל עכבר) לאגף הימני של עכברי C57BL/6J זכרים (למעט בקבוצת הביקורת).
    2. כדי לאשר הקמה מוצלחת של המודל, גע בגושי הגידול וודא שהם בגודל ~5 מ"מ. קבץ באופן אקראי את העכברים נושאי הגידול (n = 10 לקבוצה) לקבוצת המודל, קבוצת MGF, קבוצת OF, קבוצת MT וקבוצת ציספלטין (ביקורת חיובית). מתן מי מלח לקבוצת הביקורת (ללא תאי גידול) ולקבוצת המודל. הקריבו את העכברים לאחר 14 יום של טיפול ואספו את רקמת הגידול.

4. ניתוח הרכב כימי של מוצרי תסיסה

הערה: לאחר אימות יעילות התסיסה, G. lucidum נבחר כזן התסיסה במחקר זה. ביצענו ניתוח מטבולומי של MGF על ידי כרומטוגרפיה נוזלית-ספקטרומטריית מסה (LC-MS)11.

  1. יש לחלץ 10 מ"ג של MT, G. lucidum ו-MT עם תסיסה משותפת של G. lucidum (MGF) עם 500 מיקרוליטר של מתנול:H2O (7:3), לנער ב-4 מעלות צלזיוס למשך דקה אחת, סוניקט למשך 30 דקות וצנטריפוגה למשך 20 דקות ב-1,200 × גרם. אסוף את הסופרנטנטים, סנן אותם דרך קרום פלואוריד פוליווינילידן של 0.22 מיקרומטר, והזריק לתוך מערך ספקטרומטריית המסה של כרומטוגרפיה נוזלית-טנדם (LC-MS/MS).
    הערה: מטבוליטים מופרדים של כרומטוגרפיה נוזלית אולטרה ביצועים (UPLC) וספריית דגימות בקרת איכות (QC) נבנו על ידי ספקטרומטריית מסה ברזולוציה גבוהה (ראה טבלת חומרים).
  2. השתמש בתנאי ה-UPLC הבאים: עמודת C18 (100 מ"מ x 2.1 מ"מ; 8 מיקרומטר), חומצה פורמית ניידת A-0.1% (v/v) במים טהורים במיוחד, שלב נייד B-אצטוניטריל. הגדר את פרופיל שפיכת מעבר הצבע ל- 0 דקות 5% B; 2 דקות 5% B; 14 דקות 98% B; 17 דקות 98% B; 17.1 דקות 5% B; 20 דקות 5% בקצב זרימה של 0.3 מ"ל לדקה.
  3. זיהוי וזיהוי המטבוליטים על ידי ספקטרומטריית מסה ברזולוציה גבוהה. הגדר את טמפרטורת העמודה ל-40 מעלות צלזיוס, את טמפרטורת המזרק האוטומטי ל-4 מעלות צלזיוס ואת נפח ההזרקה ל-2 מיקרוליטר. שמור על תנאי MS הבאים: כרךtage של מקור היונים האלקטרו-ספריי: +5,500/-4,500 וולט; הלחץ של גז הווילון, מקור היונים 1 ומקור היונים 2: 35, 60 ו-60 psi, בהתאמה; טמפרטורת מקור היונים: 600 מעלות צלזיוס; פוטנציאל הדה-פולימריזציה: ± 100 וולט.
  4. הכן את דגימות בקרת האיכות (QCs) על ידי ערבוב נפחים שווים של תמציות MT, GL ו-MGF, וקרא לשלושת השכפולים QC 1-3, בהתאמה. לעבד ולזהות דגימות בקרת איכות וניתוח על ידי ביצוע אותם שלבים. הכנס דגימת QC עבור כל שלוש דגימות כדי לחקור את יכולת החזרה של זיהוי וניתוח.

5. מיצוי ובידוד של מוצרי תסיסה

  1. ממיסים את תמצית התסיסה המתקבלת ממרק התסיסה במים מזוקקים ומערבבים היטב.
    הערה: כאן, 2 ק"ג תמצית תסיסה התקבלו מ -40 ליטר מרק תסיסה.
  2. מקטע 4, הסר 10%, 30%, 50%, 70% ו-95% שברי אתנול באמצעות עמודת שרף ספיחה מקרו-נקבובית ואסוף את השברים.
    הערה: כאן התקבלו 10.72 גרם מחלק האתנול 95%, 34.72 גרם מחלק האתנול 70%, 61.57 גרם מחלק האתנול 50% ו-79.7 גרם מחלק האתנול 30%.
  3. בהתבסס על הקוטביות של השברים, יש להוציא את שבר האתנול של 70% באמצעות כרומטוגרפיה של עמודת סיליקה ג'ל עם אתיל אצטט: פליטת מתנול ולאסוף את השברים.
    הערה: כאן, נאספו Fr. 1-Fr. 7.
  4. בצע כרומטוגרפיה של עמודת Sephadex LH-20 כדי לטהר עוד יותר את השברים (כאן, Fr. 3 ו-Fr. 4) ואחריו הפרדת פאזה נוזלית חצי מכינה לאחר הטיהור באמצעות 1.0 גרם מכל שבר.
    הערה: על ידי שימוש בכרומטוגרפיה נוזלית הכנה למחצה וכרומטוגרפיה של עמודת סיליקה ג'ל, בודדנו וטיהרנו את חלק האתנול של 95%.
  5. בצע מיקרוספקטרוסקופיה וספקטרוסקופיה של תהודה מגנטית גרעינית והשווה את מבנה התרכובת עם מבנים ממאגרי נתונים עבור 600M ו-700M וקבע את המבנה המישורי של התרכובת/ים.
    הערה: כאן, נעשה שימוש בספקטרומטר מסה היברידי כדי לקבוע את המשקל המולקולרי של התערובת. זיהינו את המבנה של תרכובת אחת (ראו איור משלים S1).

6. ניתוחים סטטיסטיים

  1. חזור על כל ניסויי התסיסה שש פעמים. הערכת מובהקות סטטיסטית באמצעות מבחן t של סטודנט. בטא את כל הנתונים כממוצע ± SD, חזור על כל הניסויים במשולש והגדר p < 0.05 למובהקות סטטיסטית (*0.01 ≤ p ≤ 0.05, **0.001 ≤ p ≤ 0.01, ***p ≤ 0.001).
  2. השתמש בתוכנת SCIEX OS כדי לזהות מטבוליטים בעיקר על סמך שגיאת מסה, זמן שמירה, התאמת איזוטופים, ציון טוהר ספריית MS/MS ונוסחה מולקולרית חישובית. השתמש בפרמטרים הבאים של הגדרת ספריה: שגיאת מסה < 5 עמודים לדקה, הפרש יחס איזוטופים < 20 וציון ספרייה > 50.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

תוצאות סינון ראשוניות של זנים
כדי לחקור פטריות המסוגלות לתסוס במשותף עם MT, בחרנו שלוש פטריות: G. lucidum, I. obliquus ו- O. sinensis. ראשית, הזנים הופעלו: G. lucidum, I. obliquus ו-O. sinensis חוסנו בתווך PDA כפי שמוצג באיור 1A-C; איור 1D-F מציג את התוצאות לאחר החיסון למדיום PDA הנוזלי. השלב השני היה לחסן את הפט...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

לאחר ניסויי סינון זנים, מצאנו שלא כל פטריות המרפא יכולות לשרוד באופן נורמלי על חומרי עשב. ללא כל מדיום נוסף, הישרדותן של פטריות מרפא תלויה בפירוק הרכיבים בחומרים רפואיים באמצעות אנזימים משלהם לסינתזה של מקורות הפחמן והחנקן הנדרשים. ניתן להסיק כי I. obliquus עשוי שלא להכיל אנזימים המסוגלים לפרק ספונינים של MT. עבור G. lucidum ו- O. sinensis הניתנים לתסיסה משותפת עם MT, שתי פטריות המרפא יכולות לגדול כרגיל על המדיום עם MT כמצע. ההשפעה האנטי-גידולית של המוצר המותסס...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים כי לא ידוע על אינטרסים פיננסיים מתחרים או קשרים אישיים שיכולים היו להשפיע על העבודה המדווחת במאמר זה.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מהקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (81973977). דגימות ה-MT זוהו על ידי פרופסור טונגשיאנג-ליו ונשמרו בבית הספר לרוקחות, אוניברסיטת מינזו בסין.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
AcetonitrileTonguang Fine Chemicals Company, בייג'ינג, סין20200923
AgarSinopharm Chemical Reagent Co., Ltd., ארה"בNO.20080107
AutoclaveBinJiang Medical Co., Ltd., Jiangyin, סיןLS-50LD
חממת טלטול מתמדתZhicheng Inc. כל הזכויות שמורות., שנגחאי, סיןZWY-100D
Ganoderma lucidumBeNa Culture Collection, בייג'ינג, סין31732
Inonotus obliquusBeNa Culture Collection, בייג'ינג, סין117822
LLC תא סרטן ריאות עכברתשתית לאומית של משאב קו תאים, בייג'ינג, סיןPUMC000673
זכר C57BL / 6J עכבריםVital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd., Beiijng, סיןNo.110011210107024684
מתנולTonguang Fine Chemicals Company, בייג'ינג, סין20210723
Ophiocordyceps sinensisBeNa Culture Collection, בייג'ינג, סין118371
פולי טטרה פלואורואתילןJinteng ציוד ניסוי ושות', בע"מ, טיאנג'ינג, סיןNo.997
QTRAP 5500 LC/MSAB Sciex Pte. בע"מ, ארה"בCV20231711
מאייד סיבוביBUCHI Co., Ltd., שנחאי, סיןR-300
מזרקZhiyu Medical Instrument Co., Ltd., Jinagsu, סיןV500111
ספסל נקי במיוחדBOXUN Medica Bioological Instrument Co., Ltd., שנחאי, סיןSW-CJ-LFD

מקורות

  1. Jansen, B. J., Liang, H., Ye, J. International Conference on Cognitive Based Information Processing and Applications (CIPA 2021). 85, Springer Nature. (2021).
  2. WANG, J., et al. Literature-based research on common syndromes of cough variant asthma). Chinese General Practice. , (2022).
  3. Meng, H., et al. Influence of different substrate and plant growth regulators on rooting of cutting of Marsdenia tenacissima. Journal of Yunnan Agricultural University. 29 (4), 540-543 (2014).
  4. Xing, W., Chen, B., Mi, H., Wu, Y. Textual research of Wuguteng. Zhong yao cai=Zhongyaocai=. Journal of Chinese Medicinal Materials. 26 (7), 524-526 (2003).
  5. Yin, C. Investigation of Polyoxypregnane Compounds Isolated from Marsdenia Tenacissima for the Anti-Cancer Activity and Circumvention of Multidrug Resistance. The Chinese University of Hong Kong. , Hong Kong. Doctoral Dissertation (2019).
  6. Singer, A. C., Crowley, D. E., Thompson, I. P. Secondary plant metabolites in phytoremediation and biotransformation). Trends in Biotechnology. 21 (3), 123-130 (2003).
  7. Bianchini, L. F., et al. Microbial biotransformation to obtain new antifungals. Frontiers in Microbiology. 6, 1433(2015).
  8. Pimentel, M. R., Molina, G., Dionísio, A. P., Maróstica Junior, M. R., Pastore, G. M. The use of endophytes to obtain bioactive compounds and their application in biotransformation process. Biotechnology Research International. 2011, 576286(2011).
  9. Hsu, B. Y., Lu, T. J., Chen, C. H., Wang, S. J., Hwang, L. S. Biotransformation of ginsenoside Rd in the ginseng extraction residue by fermentation with lingzhi (Ganoderma lucidum). Food Chemistry. 141 (4), 4186-4193 (2013).
  10. Wang, D., et al. Biotransformation of gentiopicroside by asexual mycelia of Cordyceps sinensis. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. 17 (11), 3195-3197 (2007).
  11. Li, R., et al. Nontargeted metabolomics study and pharmacodynamic evaluation of bidirectional fermentation for Ganoderma lucidum with Marsdenia tenacissima. Frontiers in Pharmacology. , 4590(2022).
  12. Zhang, H., et al. Five new C21 steroidal glycosides from the stems of Marsdenia tenacissima. Steroids. 75 (2), 176-183 (2010).
  13. Deng, J., Liao, Z., Chen, D. Marsdenosides A-H, polyoxypregnane glycosides from Marsdenia tenacissima. Phytochemistry. 66 (9), 1040-1051 (2005).
  14. Xia, Z. -H., et al. Pregnane glycosides from the stems of Marsdenia tenacissima. Journal of Asian Natural Products Research. 6 (2), 79-85 (2004).
  15. Deng, J., Liao, Z., Chen, D. Three new polyoxypregnane glycosides from Marsdenia tenacissima. Helvetica Chimica Acta. 88 (10), 2675-2682 (2006).
  16. Hu, Y., et al. Mechanism of Marsdenia tenacissima extract promoting apoptosis of lung cancer by regulating Ca2+/CaM/CaMK signaling. Journal of Ethnopharmacology. 251, 112535(2020).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

Tenacigenin A

מאמר זה פורסם

הסרטון יגיע בקרוב

צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.