פרוטוקול זה מדגים שלב אחר שלב פרטים כיצד לחלץ את הטוחנת הראשונה המנדיבולרית בעכבר. הוא מספק שיטה חלופית לחוקרים המתמקדים בריפוי והתחדשות עצם הלסת.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
הקמת מודל ריפוי שקע מיצוי מולארי מנדיבולרי מורין
במאמר זה
סיכום
תקציר
מחקר זה מציג את הפיתוח של מודל מיצוי מולארי בלסת התחתונה כדי לספק מודל מעשי לחקר התחדשות עצם מכתשית ו ossification intramembranous. עכברי C57/J6 שימשו כדי לחלץ את הטוחנת המנדיבולרית הראשונה כדי לבסס מודל זה. הם הומתו והלסת הדו-צדדית נקטפה, שבוע וארבעה שבועות לאחר הניתוח, בהתאמה. לאחר מכן בוצעו קציר סטריאוסקופי סדרתי, הערכה היסטולוגית וצביעה אימונופלואורסצנטית כדי להדגים ניתוח מוצלח. מיד לאחר הניתוח, התמונות הסטריאוסקופיות הציגו שקע חילוץ ריק. המטוקסילין והאוזין (H&E) בשבוע אחד וצביעת מאסון בשבוע 4 לאחר הניתוח הראו כי אזור השורש המקורי היה מלא באופן חלקי ומלא בטרבקולה של העצם, בהתאמה. צביעת האימונופלואורסנציה הראתה כי בהשוואה לצד ההומאוסטזיס, ביטוי Sp7 גדל שבוע לאחר הניתוח, מה שמרמז על אוסטאוגנזה נמרצת בפוסה הנאדית. כל התוצאות הללו הדגימו מודל מעשי לריפוי ארובת שן מורין. מחקרים עתידיים שיחשפו את המנגנונים של ריפוי פגמים בעצם הלסת או ריפוי ארובות עשויים לאמץ שיטה זו.
מבוא
ריפוי מכתשית לאחר עקירת שן הוא תרחיש קליני נפוץ, אשר יכול לגרום לסיבוכים בלתי הפיכים כגון דימום במכתשית, מכתשית יבשה, או אפילו אוסטאומיאליטיס בלסת תחת ריפוי לא רצוי 1,2,3. תחלואה נלווית זו עלולה לפגוע באיכות החיים של החולים, ואף גרוע מכך, לאתגר באופן חיוני את שיקום התותבות עקב אובדן עצם מסיבי4. למרות ששלבי ריפוי המכתשית הובהרו, הם אינם מספיקים כדי לכוון טיפול קליני לאחר ניתוח עקירת שן כאשר נתקלים באתגרי פרוגנוזה שונים4.
מחקרים רבים המבוססים על מודלים של בעלי חיים נערכו כדי להשיג הבנה טובה יותר של המנג....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
כל ההליכים בבעלי חיים במחקר זה נבדקו ואושרו על ידי הוועדה האתית של בית הספר לסטומטולוגיה של מערב סין, אוניברסיטת סצ'ואן (WCHSIRB-D-2017-041). עכברי C57BL/6 בוגרים, שהתקבלו ממקור מסחרי (ראו טבלת חומרים), שימשו במחקר הנוכחי.
1. הכנה טרום ניתוחית
- הכנת מכשירים
- הכינו מחטים שונות של מזרקים חד פעמיים (26G, 25G, 23G; ראו טבלת חומרים) שישמשו כמעליות. החזירו את ראש המחט בערך 20°-40°, כפי שמוצג באיור 1.
- הכינו פינצטה אופתלמית עם שיניים כמלקחיים. ודא שהוא מתאים לגודל הטוחנות של העכברים ויכול לתפוס את הטוחנות בחוזקה. גודל הפינצטה האידיאלי מוצג
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
כדי להבהיר את השימוש המעשי בשיטה זו, הוצאו הטוחנת הראשונה המנדיבולרית הימנית של שני עכברים בריאים C57BL/6 (בני 3 חודשים, שניהם נקבות) ואחריהם במשך שבוע וארבעה שבועות, בהתאמה. הלסת השמאלית שלא ניזוקה שימשה כבקרות בריאות. איור 1A מראה את המאפיינים הספציפיים של מכשיר הניתוח, כולל מחטים של 26-23 G וטוויטר עיניים עם שיניים. מחט 26 גרם מוסרת נקודתית וכפופה. מחט 25 גרם כפופה בזווית של כ-25 מעלות בנקודה המדויקת. מחטי 23 G הן עמוד התווך של הניתוח, והן כפופות בזווית של כ-25° ו-35°, בהתאמה, בנקודה המדו.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
מודל ריפוי ארובת המורין הוא שיטה חשובה לפענוח המנגנונים הבסיסיים בריפוי והתחדשות עצם, ובסופו של דבר לפתרון אתגרים קליניים. מחקרים קיימים הוכיחו את האפשרות של מודל מיצוי החותכת ומודל המיצוי המולרי המקסילרי, בעוד שמחקרים לא השתמשו במודל הטוחנת הראשונה של המנדיבולרית13,17,18. עם זאת, חותכות חיוניות לחיי מכרסמים, והפגיעה בהן עלולה להיות קטלנית. יתר על כן, מכיוון שהעצם במקסילה מבטלת יותר מהלסת התחתונה, ייתכנו הבדלים מסוימים במנגנונים.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
כל הנתונים והתמונות המקוריים כלולים במאמר זה. המחברים מצהירים כי אין ניגוד עניינים.
תודות
עבודה זו נתמכת על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין 81825005 (L.Y.), 82201045 (F.Y.) ו- 82100982 (F.L.), ועל ידי תוכנית המדע והטכנולוגיה של מחוז סצ'ואן 2021JDRC0144 (F.L.), 2022JDRC0130 (F.Y).
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 23/25/26 G מחט | צ'נגדו Xinjin Shifeng מכשירים רפואיים & אינסטרומנטס בע"מ | SB1-074(IV) | |
| C57/B6J | חברת Gempharmatech Experimental Animals, צ'נגדו, סין | C57/B6J | |
| פתרון צביעה DAPI | ביוטיים | Cat#C1005 | |
| הטמעת קלטות | CITOTEST Scientific | 80106-1100-16 | |
| ערכת כתמי המטוקסילין ואאוזין | Biosharp | BL700B | |
| Isoflurane | RWD Life Science Co., Ltd | R510-22-10 | |
| Masson' s ערכת כתמים טריכרום | Solarbio | G1340 | |
| Microtome | Leica | RM2235 | |
| פנטוברביטל נתרן | Huaxia מגיב כימי ושות', בע"מ | 2018042001 | |
| ארנב פוליקלונל | אנטי-Sp7 | Abcam Cat# ab22552 | |
| פינצטה | צ'נגדו שינג'ין שיפנג מכשירים רפואיים & אינסטרומנטס בע"מ | SB2-115 |
מקורות
- Mamoun, J. Dry socket etiology, diagnosis, and clinical treatment techniques. Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons. 44 (2), 52-58 (2018).
- Laraki, M., Chbicheb, S., El Wady, W. A....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
