יש צורך במודל מתאים של בעלי חיים כדי להבין את המנגנונים הפתולוגיים העומדים בבסיס היצרות מסתם אבי העורקים (AVS) ולהעריך את יעילותן של התערבויות טיפוליות. הפרוטוקול הנוכחי מתאר הליך חדש לפיתוח מודל ארנב AVS באמצעות פגיעה ישירה בבלון in vivo.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
מודל היצרות של מסתם אבי העורקים של ארנב הנגרם על ידי פגיעה ישירה בבלון
* These authors contributed equally
במאמר זה
סיכום
תקציר
מודלים של בעלי חיים מתגלים ככלי חשוב להבנת המנגנונים הפתולוגיים העומדים בבסיס היצרות מסתם אבי העורקים (AVS) בגלל היעדר גישה למקורות אמינים של מסתמי אבי העורקים האנושי החולים. בין המודלים השונים של בעלי חיים, דגמי ארנבים AVS הם אחד הנפוצים ביותר במחקרים בבעלי חיים גדולים. עם זאת, מודלים מסורתיים של ארנבי AVS דורשים תקופה ארוכת טווח של תוספי תזונה ומניפולציה גנטית כדי לגרום להיצרות משמעותית במסתם אבי העורקים, מה שמגביל את השימוש בהם במחקרים ניסיוניים. כדי להתמודד עם מגבלות אלה, מוצע מודל חדש של ארנב AVS, שבו היצרות נגרמת על ידי פגיעה ישירה בבלון למסתם אבי העורקים. הפרוטוקול הנוכחי מתאר טכניקה מוצלחת להשראת AVS בארנבים לבנים בניו זילנד (NZW), עם הליכים שלב אחר שלב להכנה, להליך הכירורגי ולטיפול שלאחר הניתוח. מודל פשוט וניתן לשחזור זה מציע גישה מבטיחה לחקר ההתחלה וההתקדמות של AVS ומספק כלי רב ערך לחקר המנגנונים הפתולוגיים הבסיסיים של המחלה.
מבוא
יותר ויותר ידוע כי השימוש במודלים מתאימים של בעלי חיים יכול לתרום להבנה טובה יותר של המנגנונים הפתולוגיים העומדים בבסיס היצרות מסתם אבי העורקים (AVS) בשל היעדר גישה למקורות אמינים של מסתמי אבי העורקים האנושיים החולים הקשורים להתקדמות היצרות אבי העורקים (AS). בין המודלים השונים של בעלי חיים לחקר AVS, ארנבים הם אחד המודלים הנפוצים ביותר של AVS בעלי חיים גדולים, ומודל ארנב AVS מושרה באמצעות תוספת כולסטרול / ויטמין D2 או מניפולציה גנטית 1,2,3,4.
למרות שמודלים של AVS מספקים תובנה משמעותית לגבי הפיתוח וההתקדמות של AVS, ....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
כל הליכי המחקר בבעלי חיים אושרו ובוצעו בהתאם לחוק רווחת חיות המעבדה, המדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה, וההנחיות והמדיניות לניסויים בבעלי חיים שסופקו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים (IACUC) במכללה לרפואה של האוניברסיטה הקתולית של קוריאה (מספר אישור: CUMC-2021-0176-05). במחקר הנוכחי נעשה שימוש בארנבים לבנים מניו זילנד (NZW) בני 3 חודשים במשקל 3.5-4.0 ק"ג, שהוחזקו בתנאים סטנדרטיים בכלובים בודדים. הארנבים קיבלו תזונה רגילה או תזונה מועשרת בכולסטרול ב-0.5% בתוספת 50,000 U של ויטמין D2 (ראו טבלת חומרים). שיטות התכנון והניתוח הניסיוניות להשראת מודל הארנב AVS מתוארות באיור 1.
1. ה....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
מודל AVS ארנב המושרה על ידי פגיעה במסתם אבי העורקים
כדי לגרום למודל AVS ארנב, ארנבי NZW זכרים במשקל 3.5-4.0 ק"ג שימשו למחקר זה. על פי הפרוצדורות הכירורגיות המתוארות בשלב 2 (איור 2), מודל AVS נקבע על ידי פגיעה במסתם אבי העורקים, שהביאה לניוון מכני של מסתם אבי העורקים ולהסתיידות. קבוצת הביקורת כללה ארנבים שניזונו מתזונה מועשרת ב-0.5% כולסטרול (כולסטרול גבוה, HC) ו-50,000 U של ויטמין D2 (VitD2), הידוע כמודל AVS המושרה על ידי דיאטה.
הערכת ש.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
מודלים של AVS בבעלי חיים משמשים בדרך כלל לחקר ההיבטים הפתולוגיים של AVS, כולל אתחול והתקדמות של AVS. פרוטוקול זה מציג מודל AVS חדש של ארנב המושרה על ידי פגיעה ישירה בבלון לשסתום אבי העורקים. במחקר זה, מודל הפגיעה במסתם אבי העורקים הראה עיבוי והסתיידות עלונים משמעותיים. בהשוואה למודל AVS המתון המושרה על ידי תוספי תזונה, המסתם האאורטלי במודל הפציעה הישירה בבלון נפגע באופן סלקטיבי, מה שהוביל לעיבוי ותנועה מוגבלת, כמו גם עלונים מעובים ומסוידים. תוצאות אלה תואמות את המאפיינים הכלליים של AVS10,11
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
למחברים אין ניגודי עניינים להצהיר עליהם בעבודה זו.
תודות
עבודה זו נתמכה על ידי מענק קרן המחקר הלאומית של קוריאה (NRF) במימון ממשלת קוריאה (MSIT) (מס '2020R1A4A3079570), משרד החינוך (מס '2021R1I1A1A01051425), והתוכנית לפיתוח טכנולוגיה אסטרטגית תעשייתית (מס '20014873) במימון משרד המסחר, התעשייה והאנרגיה, הרפובליקה של קוריאה.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 3-0 תפר משי | AILEE | SK312 | |
| 4% פרפורמלדהיד (PFA) | אינטרון | IBS-BP031-2 | |
| תמיסה אדומה אליזרין | Millpore | TMS-008-C | |
| ASAHI SION BLUE | ASAHI | מדריך חוט | |
| כיסוי שולחן אחורי | יוהאן קימברלי | 80101-30 | |
| בלון במכשיר דפלציה | Demax רפואי | DID30s | |
| ביונט מוניטור וטרינרי | BIONET | BM3 VET | |
| C-Arm | SIEMENS Healthcare GmbH | Cios אלפא | |
| מוסמך ארנב דיאטה | פורינה | 5322 | 4.7% שמן קוקוס מוקשה, 0.5% כולסטרול & 1% Molasse |
| Curadle חממה חכמה | Autoelex | CS-CV206 | יחידה לטיפול נמרץ (ICU) |
| Ergocalciferol | Sigma-aldrich | E5750 | ויטמין D2 |
| Fechtner מלקחיים לחמית טיטניום | מכשיר WORLD PRECISSION | WP1820 | |
| מלקחיים | HEBU | HB203 | |
| גנטמיצין | שין פונג | ||
| גליקופירולאט | SamChunDang | ||
| Greenflex NS | DAI HAN PHARM | תמיסת מלח רגילה 500 מ"ל | |
| תמיסת המטוקסילין | סיגמא-אולדריץ' | HT1079-1 SET | |
| Heparin | JW פרמצבטי | 25,000 | |
| U סט עירוי לשימוש חד פעמי | SWOON MEDICAL | ||
| יוד | ירוק תרופות | ||
| יודיקסנול | GE Healthcare | Visipaque | תמיסת ניפוח (חומר ניגוד) |
| צנתר IV 22 גרם | BD | ||
| 382423 צנתר IV 24 גרם | BD | 382412 | |
| קטופרופן | SamChunDang | ||
| Luer-Lok מזרק 10 מ"ל | בקטון דיקינסון רפואי | ||
| מזרק Luer-Lok 3 מ"ל | מיקרוסקופ רפואי בקטון דיקינסון | ||
| OLYMPUS | SZ61 | ||
| מיקרוטום | ThermoFisher Scientific | HM 325 | |
| Sigma-aldrich | HT15-1kt | ||
| Solco | 009-1304 | ||
| מחזיק מחט עם מנעול ותפר | JEUNGDO BIO & צמח | H-1222-18 | |
| פרפין | LK LABKOREA | H06-660-107 | |
| PBS | Gibco | 10010-023 | |
| אשלגן כלורי 40 | Daihan Pharm | KCl | |
| Prelude נדן הידרופילי אידיאלי | MERIT MEDICAL | PID4F11018SS | נדן 4F |
| PTA צנתר הרחבת בלון PTA | בוסטון סיינטיפיק | H749-3903280208-0 | קטטר בלון 8.0 מ"מ |
| Rompun | Elanco | Xylaxine | |
| סטרילי גזה | DAE HAN רפואי | 10 ס"מ x 20 ס"מ | |
| כפפות כירורגיות | Ansell | Ansell | |
| שמלה כירורגית | Yuhan kimberly | 90002-02 | |
| מספריים כירורגיות | Nopa, גרמניה | AC020/16 | |
| סרט כירורגי | 3M micopore | 1530-1 | |
| מזרק 1 מ"ל | מזרק רפואי | ||
| 10 מ"ל | שין צ'אנג רפואי | ||
| קלטת טישו | Scilav korea | Cas3003 | |
| מתמר ג'ל | SUNGHEUNG | SH102 | |
| Tridol | Yuhan Corp. | מערכת אולטרסאונד Tramadol HCl | |
| Philps | Affiniti 50 | ||
| Von Kossa ערכת כתמים | Abcam | ab105689 | |
| Zoletil 50 | Virbac korea | Tiletamine & zolazepam |
מקורות
- Aliev, G., Burnstock, G. Watanabe rabbits with heritable hypercholesterolaemia: A model of atherosclerosis. Histology and Histopathology. 13 (3), 797-817 (1998).
- Cimini, M., Boughner, D. R., Ronald, J. A., Aldington, L., Rogers, K. A.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
